氧糖
- miRNA-589-5p调控氧糖剥夺人脑微血管内皮细胞损伤的机制
-589-5p对氧糖剥夺诱导的HBMEC损伤的调控机制及其与组蛋白脱乙酰酶(HDAC)3、核因子E2相关因子(Nrf)2/血红素加氧酶(HO)-1信号通路之间的关系。1 材料与方法1.1材料 HBMEC购自中国上海科学研究院细胞库;改良Eagle培养基(DMEM)培养液购自美国Invitrogen;胎牛血清购自浙江天杭生物科技股份有限公司;Lipofectamin3000转染试剂购自赛默飞世尔科技(中国)公司;真核表达载体pcDNA3.1均购自Promeg
中国老年学杂志 2024年6期2024-03-22
- 水凝胶负载bFGF对氧糖剥夺条件下树突状细胞的影响①
DC2.4 细胞氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)模型,初步探究负载bFGF的缓释水凝胶贴片对OGD 条件下DC2.4细胞的影响。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 细胞系 细胞采用DC2.4 小鼠树突状细胞购自武汉普诺赛生命科技有限公司(货号:CL-0545)。1.1.2 主要试剂 明胶(国药集团化学试剂有限公司);戊二醛(福晨化学试剂有限公司);CCK-8(上海Bimake生物科技有限公司);高糖DMEM 培养基
中国免疫学杂志 2023年11期2023-11-30
- lncRNA CRNDE靶向miR-212-5p调控氧糖剥夺诱导的大鼠皮质神经元损伤
皮质神经元,建立氧糖剥夺(OGD)诱导的神经元损伤模型,旨在观察CRNDE能否靶向miR-212-5p影响OGD诱导的神经元损伤,以期为缺血缺氧性脑损伤的治疗提供新的作用靶点。1 材料与方法1.1 实验动物及试剂 雄性SD大鼠,清洁级,7日龄,体质量10.30 ~13.16 g,河南省实验动物中心,许可证号:SYXK(豫)2019-0003;胎牛血清(FBS),浙江天杭生物科技股份有限公司;DMEM培养基和细胞计数试剂盒-8(CCK-8),北京索莱宝科技有
蚌埠医学院学报 2023年6期2023-08-02
- 氧糖剥夺影响人脐静脉内皮细胞紧密连接相关蛋白的机制研究
。本研究旨在探究氧糖剥夺影响人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)紧密连接相关蛋白的机制,以期为缺血性脑血管病的临床防治提供新的思路。1 材料与方法1.1 主要实验试剂与仪器 实验试剂:DMEM购于Corning公司(货号:R10-017-CV),Gibco®胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)购于Invitrogen(货号:16000-044),青霉素-链霉素溶液(
实用心脑肺血管病杂志 2023年2期2023-02-22
- NLRP3炎症小体在bEnd.3细胞氧糖剥夺及复氧复糖后的表达观察
对象,观察在不同氧糖剥夺及复氧复糖时间点NLRP3炎症小体及其下游因子的表达变化。1 材料和方法1.1 实验细胞bEnd.3细胞系购于ATCC1.2 主要试剂、材料和仪器DMEM无糖培养基(Gibico),DMEM培养基(Gibico),胎牛血清(Gibico),胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)(Solarbio),抗NLRP3抗体(ABMART),抗β-actin抗体(Affinity),鼠二抗(Cell Signaling Technology)
中国实验诊断学 2023年2期2023-02-21
- 八味沉香散含药血清对H9c2细胞氧糖剥夺损伤的保护机制研究 Δ
法,进一步研究在氧糖剥夺损伤细胞模型中,八味沉香散含药血清改善心肌缺血损伤的可能机制,以期为八味沉香散的临床应用提供实验依据,促进其现代化研究。1 材料1.1 细胞与动物本研究所用细胞为大鼠H9c2细胞(货号CL-0089),购自武汉普诺塞生命科技有限公司。SPF级雄性SD大鼠50只,体质量200~220 g,购自西安交通大学[实验动物使用许可证号:SYXK(青)2020-0001],饲养于青海大学医学院药学系实验中心(正常光照、自由饮食)。本实验所有操作
中国药房 2023年1期2023-01-14
- 刺五加提取物对人神经细胞SH-SY5Y氧糖剥夺再灌注损伤的保护作用研究*
SY5Y 细胞的氧糖剥夺再灌注(Oxygen and Glucose Deprivation/Reperfusion,OGD/R)模型来模拟脑缺血/再灌注过程,发现一种刺五加提取物可以减轻SH-SY5Y细胞氧糖剥夺再灌注后的损伤,并通过MTT 法检测细胞活力、流式细胞术检测凋亡率、荧光显微镜检测活性氧水平、检测胞内抗氧化酶活力及脂质氧化产物、检测胞内ATP 水平等手段,证实了其通过抑制氧化应激、细胞凋亡和保护线粒体功能来实现对SH-SY5Y细胞的保护作用。
世界科学技术-中医药现代化 2022年5期2022-09-29
- 右美托咪定对氧糖剥夺再复氧下Huvecs的保护机制*
Huvecs)在氧糖剥夺再复氧条件下的损伤[4],但具体的细胞内分子机制还有待于进一步深究。为此本研究拟在前期研究的基础上探究DEX预处理对Huvecs的保护机制。1 材料与方法1.1 细胞培养人脐静脉内皮细胞株Huvecs(由陆军军医大学高原军事医学系赠)复苏后培养于含10%胎牛血清的高糖培养基内,置于37 ℃、5% CO2培养箱中贴壁培养。当细胞约80%融合时,用0.05%胰蛋白酶消化传代培养。1.2 试剂药物DEX:江苏恒瑞制药有限公司;高糖培养基
重庆医学 2022年3期2022-03-23
- 左归丸含药血清对大鼠海马神经元和胶质细胞氧糖剥夺损伤的保护作用及机制研究
混合细胞以及细胞氧糖剥夺处理[6],在细胞水平研究左归丸含药血清对细胞氧糖剥夺损伤的作用及机制。1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 实验动物:健康SPF级SD雄性大鼠,出生后1~3 d,体重200 g左右,购自西安交通大学动物实验中心。动物生产许可证号:SYXK(陕)2020-005。1.1.2 主要试剂:左归丸(Z11020735),购自北京同仁堂股份有限公司;0.3 g/L戊巴比妥钠(H31020240),购自上海新亚药业有限公司;相关一抗购自美
陕西医学杂志 2022年1期2022-01-21
- 榅桲总黄酮对氧糖剥夺诱导的人脑微血管内皮细胞损伤的影响及机制研究
著·榅桲总黄酮对氧糖剥夺诱导的人脑微血管内皮细胞损伤的影响及机制研究刘禹岐,郗欧,刘怡彤110000 沈阳,辽宁中医药大学附属第二医院脑病一科(刘禹岐、郗欧),康复科(刘怡彤)探究榅桲总黄酮(TFCOM)对氧糖剥夺(OGD)诱导的人脑微血管内皮细胞(HBMEC)损伤的影响及可能机制。体外培养 HBMEC,建立 OGD 模型。用 10、20、40 μg/ml TFCOM 干预 OGD 诱导的 HBMEC,CCK8 法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,
中国医药生物技术 2021年6期2021-12-21
- 外源性H2S对氧糖剥夺再灌注后SH-SY5Y细胞损伤的保护作用
。因此,本研究以氧糖剥夺再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)后的SH-SY5Y细胞作为神经细胞的体外缺血再灌注损伤模型,探讨H2S对神经细胞缺血再灌注损伤的保护作用机制。1 材料与方法1.1 试剂与仪器NaHS购自Sigma公司(美国),牛血清、DMEM培养基、2.5 mL/L胰蛋白酶液及10×PBS均购自HyClone公司,二甲亚砜(DMSO)购自Gibco公司。Tris碱、甘氨酸PMSF、S
西安交通大学学报(医学版) 2021年5期2021-10-14
- 脑心通通过抑制TRPM7抗神经元氧糖剥夺/复氧损伤
为研究对象,建立氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤模型,由于中药复方用于离体实验存在诸多问题,本研究采用脑脊液药理学的给药方法,观察脑心通的神经保护作用以及对TRPM7的影响,以期为脑心通治疗缺血性脑卒中提供实验依据。1 材料1.1 动物Wistar 大鼠,体质量(180±20)g [天津中医药大学实验动物中心,SCXK(津)2009-0004];大耳白家兔,体质量(2±0.2
中南药学 2021年8期2021-09-04
- 活性多肽GRGDS 对氧糖剥夺诱导PC12 细胞损伤的保护作用及其机制研究
肽GRGDS 对氧糖剥夺损伤后的PC12 细胞是否具有保护作用。1 材料1.1 细胞株PC12 细胞购自ATCC 细胞库,培养在含有10%胎牛血清的完全培养液中,每12 h 观察一次细胞的生长状态,每24 h 更换一次细胞培养液,待细胞长到80%进行传代。1.2 药物与试剂活性多肽GRGDS(上海淘普生物科技有限公司);高糖DMEM 培养液、DMEM 无糖培养液(Gibco 公司);凋亡试剂盒、蛋白质提取试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司);抗体:β-肌动
药学实践杂志 2021年4期2021-07-28
- PKA-PINK1/Parkin信号通路在氧糖剥夺/复氧复糖后大鼠皮质星形胶质细胞凋亡和焦亡中的作用
原代星形胶质细胞氧糖剥夺-复糖复氧模型,以揭示PKA-PINK1/Parkin信号通路在神经系统缺血再灌注损伤中发挥的作用。1 材料与方法1.1实验动物及分组 24 h内的SD新生大鼠,共168只,北京维通利华实验动物技术有限公司负责提供(SYXK(京)2012-0036)。分离脑组织后,行原代大鼠皮质星形胶质细胞培养,并将所分离培养的原代大鼠星形胶质细胞分为4组,每组42只,分别为对照组(C组)、氧糖剥夺组(oxygen-glucose deprivat
河北医科大学学报 2021年2期2021-04-13
- 沉默Apaf-1基因对氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞线粒体凋亡通路的影响①
PC12细胞建立氧糖剥夺/复氧复糖细胞模型,模拟神经细胞体外缺血再灌注损伤环境,靶向抑制Apaf-1蛋白表达,在细胞水平探讨Apaf-1对氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞线粒体凋亡通路的影响,为脑缺血再灌注损伤的靶向治疗提供新的思路和实验依据。1 材料与方法1.1材料1.1.1细胞 PC12细胞(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)购自BOSTER公司,经NGF诱导后具有神经元特性。1.1.2主要试剂与仪器 opti-MEMⅠ培养基、胎牛血清(美国Gibco公司);脂
中国免疫学杂志 2021年1期2021-01-26
- 黄芪甲苷通过抑制细胞凋亡减轻氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞损伤的研究
究对象,通过建立氧糖剥夺/复氧复糖细胞模型模拟CIRI对神经细胞的损伤过程,研究黄芪甲苷对脑缺血再灌注所致神经元损伤的保护作用及机制。1 材料与方法1.1 细胞PC12细胞(经NGF 诱导高分化),由河北医科大学第一医院中心实验室主任许顺江教授惠赠。1.2 主要试剂黄芪甲苷(HY-N0099,MCE);胎牛血清,购自浙江天杭生物科技股份有限公司;DMEM basic(1×)、胰蛋白酶、1×PBS缓冲液,均购于美国Gibco公司;Earle's平衡盐溶液(1
中医药学报 2020年11期2020-12-03
- 氧糖剥夺再灌注对小鼠小胶质细胞炎症反应的影响
质细胞细胞系制作氧糖剥夺再灌注(OGD/R)模型模拟体内脑卒中损伤,观察不同时长OGD/R 后小胶质细胞的形态学改变,探讨OGD/ R 对小胶质细胞炎症反应的影响。1 材料及方法1.1 细胞、试剂、仪器(1)细胞BV2 永生化的鼠小胶质细胞由中国医学科学院(中国)细胞培养中心提供。(2)试剂DMEM/F12 培养基(美国Gibco 公司),胎牛血清(美国Gibco 公司),EBSS 平衡盐溶液(中国solarbio 公司);白细胞介素-1β(IL-1β)E
岭南急诊医学杂志 2020年5期2020-11-09
- 高聚原花青素新型降解产物生物活性研究
2和PC12细胞氧糖剥夺模型来研究新型降解产物对两种细胞损伤的保护作用,并从构效关系角度探究降解产物活性的变化规律,对新型降解产物的潜在生物活性及构效关系进行初步探索。1 材料和仪器1.1 材料与试剂葡萄籽原花青素提取物购自天津尖峰有限公司。硫普罗宁购自玛雅生物科技有限公司;L-抗坏血酸购自瑞士Fluka公司;过硫酸钾、醋酸钠、三氯化铁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠均购自博迪化工有限公司;醋酸购自科密欧化工有限公司;浓盐酸、甲醇(分析级)、乙酸乙酯(分析级)购自
中外葡萄与葡萄酒 2020年6期2020-10-29
- 二氮嗪对氧糖剥夺后BV-2细胞凋亡及caspase-3表达的影响
和三气培养箱创造氧糖剥夺条件对BV-2细胞进行处理,可模拟缺血缺氧状态下的细胞微环境。本研究拟通过氧糖剥夺诱导的BV-2细胞探讨二氮嗪对缺血缺氧状态下小胶质细胞的影响。1 材料与方法1.1 主要仪器及试剂HERA Cell 150 三气培养箱(美国 Billups-Rothenberg 公司),FACScalibur流式细胞检测分析仪(美国 BD 公司),Eclipse NI正置荧光显微镜+图像采集系统(日本尼康公司 ),RPMI1640培养基、新生胎牛血
中国医科大学学报 2020年1期2020-01-09
- HT22海马神经元细胞氧糖剥夺再灌注模型的建立
引起再灌注损伤。氧糖剥夺再灌注(OGD/R)模型通过剥夺细胞的营养及氧气供给模拟人体缺血再灌注损伤过程,是目前较为理想的体外实验模型[3]。海马对缺氧的耐受力较差,因此选择海马神经元细胞建立稳定的氧糖剥夺再灌注模型,对缺血性脑中风疾病的研究具有重要意义[4]。本研究以HT22海马神经元细胞为研究对象,采用缺氧小室(见图1)对细胞进行缺氧、不同时间的复氧建立氧糖剥夺再灌注模型,通过观察细胞形态,检测细胞存活率,同时测定不同条件下细胞培养基中乳酸脱氢酶(LDH
广州中医药大学学报 2020年1期2020-01-07
- 毛蕊异黄酮抑制氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞凋亡研究
量的毛蕊异黄酮对氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞的影响,结果发现不同剂量毛蕊异黄酮均可改善PC12细胞生长状态,提高细胞存活率,但其具体作用机制尚不明确。本实验应用氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞模型,模拟体外CIR损伤环境,探讨毛蕊异黄酮拮抗氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞损伤的凋亡作用机制。1 材料1.1 细胞PC12细胞(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系,经NGF诱导后,高分化具有交感神经元特性,批号:CX0247)购于BOSTER公司。1.2 主要试剂毛蕊异黄
中国药理学通报 2019年12期2019-12-11
- 鹿红方对氧糖剥夺模型心脏干细胞自噬和抗凋亡能力的影响
红方(LHF)对氧糖剥夺模型CSCs自噬和CSCs抗凋亡能力的影响。1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 CSCs及实验药物 CSCs购自Lonza公司;鹿红方由上海中医药大学附属曙光医院制剂室提供,由鹿角片、红花、仙灵脾、补骨脂、女贞子、山萸肉、沉香按15∶9∶30∶20∶15∶30∶6 比例配制。鹿红方水提物制备方法如下:将药材置不锈钢锅中,加适量水浸泡1 h,置于电磁炉上,先用大火煮沸后,再用小火保持微沸煎煮1 h,18层纱布过滤,滤液备用;另外
中西医结合心脑血管病杂志 2019年12期2019-07-26
- 不同时间氧糖剥夺再灌注对SH-SY5Y细胞线粒体自噬及功能的影响*
线粒体被认为是在氧糖剥夺再灌注(oxygen and glucose deprivation,OGD/R)中保护细胞免受缺血应激的必要条件[5]。线粒体自噬是由自噬选择性清除线粒体的过程,线粒体自噬可以识别并去除异常线粒体,维持线粒体的内稳态,线粒体蛋白中Beclin1、P62的表达水平能很好地反应胞内线粒体自噬的活性[6]。本研究对人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞体外构建不同时间的OGD/R模型,观察OGD/R后SH-SY5Y细胞线粒体膜电位及活性氧
贵州医科大学学报 2019年4期2019-05-08
- 聚肌胞苷酸对氧糖剥夺损伤星形胶质细胞TLR3信号通路的影响
脑缺血小鼠及体外氧糖剥夺损伤处理的星形胶质细胞TLR3-TRIF信号通路下游IFN-3的表达起到抑制炎症反应的作用。但现阶段尚未明确其具体作用机制,因此本研究采用Western blot检测氧糖剥夺损伤星形胶质细胞模型TLR3信号通路中的相关蛋白质表达的变化,进一步探讨Poly I:C对神经细胞的保护作用机制。1.材料与方法1.1 实验动物及主要试剂SD乳鼠,购自于凯学生物科技(上海)有限公司。Poly I:C(购自于上海玉博生物科技有限公司),TRIF、
医药前沿 2019年36期2019-03-23
- 右美托咪定通过调控TLR4表达对神经细胞氧糖剥夺损伤保护作用的机制研究
,本研究通过构建氧糖剥夺损伤细胞模型,从炎症反应上分析右美托咪定调控TLR4表达对神经细胞氧糖剥夺损伤的保护机制。1 材料和方法1.1 实验材料PC12细胞购于中国医学科学院基础医学研究所。采用DMEM培养基(含10%胎牛血清)于37℃和5%CO2培养箱内常规培养。以0.25%胰蛋白酶消化传代,收集第3代长势良好的对数生长期细胞进行实验。1.2 主要试剂与仪器右美托咪定购于江苏恒瑞医药公司,DMEM培养基、胎牛血清和胰蛋白酶购于美国Gibco公司,Triz
中国比较医学杂志 2019年1期2019-02-13
- 米诺环素促进PC12细胞氧糖剥夺/复氧后神经突生长及机制研究*
素对PC12细胞氧糖剥夺损伤具有保护作用,可以显著提高细胞的存活率且促进神经突的生长[3],但其具体机制尚不明确。肌球蛋白轻链磷酸酶(myosin light chain phosphatase,MLCP)是Rho激酶(ROCK)的下游底物之一,活化的ROCK灭活MLCP,使其不能水解MLC的磷酸基团,从而提高细胞内MLC的磷酸化水平,导致生长锥的崩解及轴突回缩[4]。所以本研究旨在观察米诺环素对氧糖剥夺/复氧后PC12细胞神经突生长的影响,并探讨MLCP
重庆医学 2018年22期2018-08-29
- 红景天苷通过JAK2/STAT3通路抑制退变髓核细胞的炎症反应和凋亡
报道。本研究通过氧糖剥夺培养正常人髓核细胞构建退变髓核细胞模型,观察红景天苷对退变髓核细胞的影响并探讨其可能的机制,为治疗椎间盘髓核细胞退变引起的腰椎间盘突出提供理论依据。1 材料和方法1.1 材料人髓核细胞(human nucleus pulposus cells, HNPCs) 购自上海中乔新舟生物科技有限公司,进口于美国ScienCell研究实验室;红景天苷(纯度>98%)购自南京朗朗科技销售有限公司,10 mg 红景天苷溶于1 mL 无菌PBS 配
中国骨质疏松杂志 2018年5期2018-08-02
- 17-AAG在氧糖剥夺后复糖复氧诱导的神经元凋亡中的作用
70的表达来抑制氧糖剥夺复糖复氧模型(oxygenglucose deprivation and recovery,OGD/R)诱导的大鼠海马神经元凋亡。为验证此设想,本研究拟以大鼠海马神经元OGD/R为基础,探索17-AAG对神经元的保护作用以及HSP70在17-AAG发挥神经保护作用中的角色。1 材料与方法1.1 实验动物与试剂 出生1d的SD大鼠购自第三军医大学实验动物中心。DMEM培养基、无糖DMEM、胎牛血清和B27添加剂均购自美国Gibco公司
解放军医学杂志 2018年4期2018-05-10
- 血栓通胶囊对氧糖剥夺/复氧致 HUVEC 细胞紧密连接损伤的改善作用
型,考察PNS对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation and re-oxygenation,OGD/R)致细胞紧密连接损伤的改善,从体外角度考察PNS对缺血致内皮紧密连接损伤的保护作用,探讨PNS有效单体成分,为PNS口服制剂的临床应用提供理论依据。1 材料和方法1.1 药品与试剂血栓通胶囊原料三七总皂苷,哈尔滨珍宝制药有限公司提供,为类白色至淡黄色无定形粉末,味苦,微甘,批号20111201,主要单体成分为Rg1(31.1
中国比较医学杂志 2018年2期2018-03-05
- 腺苷预处理对氧糖剥夺复氧糖后星形胶质细胞中血管内皮生长因子和血管生成素-1水平的影响
分为正常对照组、氧糖剥夺组和腺苷预处理组。正常对照组细胞不进行氧糖剥夺,在氧糖剥夺期及复氧糖期均更换高糖DMEM。氧糖剥夺组细胞在氧糖剥夺期更换为无糖、无血清的DMEM;腺苷预处理组细胞在氧糖剥夺前24 h给予含100μmol·L-1腺苷的高糖DMEM培养,氧糖剥夺期将培养基更换为无糖、无血清DMEM。氧糖剥夺期,将氧糖剥夺组和腺苷预处理组细胞放入含体积分数95%氮气、体积分数5%CO2的自制缺氧仓内缺氧8 h;在复氧糖期,氧糖剥夺组及腺苷预处理组细胞培养
新乡医学院学报 2018年2期2018-02-09
- PGC-1α过表达逆转OGD/R诱导的神经元线粒体功能降低和凋亡*
α)基因过表达对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的神经元线粒体功能及细胞凋亡的影响。方法采用RT-PCR的方法从C57BL/6乳鼠大脑皮层获取PGC-1α的全基因序列,并克隆到真核表达载体pEGFP-N1上,经PCR初步鉴定后转染原代皮层神经元,Western blot鉴定PGC-1α的表达情况,成功构建PGC-1α真核表达载体pEGFP-N1-PGC-1α。分别将转染pEGFP-N1和pEGFP-N1-PGC-1α载体的皮层神经元进行OGD/R处理,分别
中国病理生理杂志 2017年11期2017-11-22
- 苦碟子注射液对氧糖剥夺损伤的C6胶质细胞凋亡与自噬调节作用❋
】苦碟子注射液对氧糖剥夺损伤的C6胶质细胞凋亡与自噬调节作用❋郑 宏1,张昕洋2,鲁雨荍1,曾子修2,梁 晓2,刘雪梅1△ (1. 北京中医药大学东方医院,北京 100078; 2. 北京中医药大学,北京 100029)目的: 研究苦碟子注射液对氧糖剥夺损伤C6胶质细胞凋亡与自噬的调节作用,明确其对氧糖剥夺损伤胶质细胞的保护作用。方法: 采用氧糖剥夺/复氧(OGD/R)的方法建立C6胶质细胞损伤模型,按随机数字表法分为空白对照组、氧糖剥夺/复氧模型组、苦碟
中国中医基础医学杂志 2017年8期2017-09-18
- 氧糖剥夺对人脐静脉内皮细胞通透性的影响*
100850)氧糖剥夺对人脐静脉内皮细胞通透性的影响*韩 雪1, 黄 欣2, 朱玲玲2△, 范 明1,2△(1. 首都医科大学神经生物学系, 北京 100069; 2. 军事医学科学院基础医学研究所认知科学研究室, 北京 100850)目的:建立体外氧糖剥夺模型模拟脑缺血缺氧损伤, 探讨氧糖剥夺对人脐静脉内皮细胞(HUVECS)屏障功能的影响。方法:细胞培养至完全融合后换成无糖培养基置于低氧手套箱(0.3% O2)分别处理0.5 h、1 h、2 h和4
中国应用生理学杂志 2017年2期2017-06-05
- 淫羊藿苷对氧糖剥夺PC12细胞单胺类递质含量的影响
41)淫羊藿苷对氧糖剥夺PC12细胞单胺类递质含量的影响莫镇涛 李文娜 翟玉荣 石京山1龚其海1(遵义医学院珠海校区药理教研室,广东 珠海 519041)目的 研究淫羊藿苷对氧糖剥夺PC12细胞单胺类递质紊乱的调节作用。方法 采用PC12细胞氧糖剥夺(2 h)损伤模型,将10-7、10-6、10-5mol/L淫羊藿苷预给药1 h加氧糖剥夺期间给药2 h后,用MTT法检测细胞活力,ELISA法检测细胞上清液的去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(
中国老年学杂志 2017年8期2017-05-10
- 缺血再灌注损伤脑微血管内皮细胞Necroptosis模型的建立
管内皮细胞,采用氧糖剥夺及复氧复糖方法,筛选出拟缺血再灌注损伤时间点。在拟缺血再灌注模型基础上,予Casepase抑制剂z-VAD-FMK 20 μmol/L干预,采用CCK-8检测细胞活性;透射电镜观察细胞超微结构;Annexin V-FITC/PI(Propidium Iodide)双染色法检测细胞死亡方式。结果:确定氧糖剥夺2 h复氧复糖8 h,作为拟缺血再灌注时间点;z-VAD-FMK作用于拟缺血再灌注损伤BMECs后,细胞活性无统计学意义;z-V
世界中医药 2017年4期2017-04-22
- 氧糖剥夺再灌注引起的SH-SY5Y细胞凋亡与NF-κBp65和COX-2蛋白表达的关系
肖 雁, 官志忠氧糖剥夺再灌注引起的SH-SY5Y细胞凋亡与NF-κBp65和COX-2蛋白表达的关系黄 赟1, 董艳军2, 肖 雁1, 官志忠1目的 探讨氧糖剥夺再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)后SH-SY5Y细胞凋亡情况及NF-κB信号通路NF-κBp65、COX-2蛋白的表达。方法 将SH-SY5Y细胞分为正常对照组、氧糖剥夺4 h/再灌注24 h组(OGD/R)组。利用流式细胞术分别
中风与神经疾病杂志 2017年2期2017-03-16
- 腺苷预处理星形胶质细胞氧糖剥夺复氧糖后CX3CL1、GLT-1表达的变化
处理星形胶质细胞氧糖剥夺复氧糖后CX3CL1、GLT-1表达的变化王 洁 韩艳艳 李 娟 毛向雷 牛草原 李艳艳 兰春伟 谭 军(新乡医学院第三附属医院,河南 新乡 453000)目的 探讨在缺氧复氧情况下腺苷预处理诱导星形胶质细胞谷氨酸转运体蛋白(GLT-1)和趋化因子(CX3CL1)的表达变化。方法 原代培养的大鼠星形胶质细胞分为正常组、模型组和腺苷预处理组。模型组:细胞接受5 h氧糖剥夺/复氧糖24 h处理;腺苷预处理组:细胞在氧糖剥夺前24 h加入
中国老年学杂志 2017年2期2017-02-14
- HT22细胞氧糖剥夺再灌注及Grasp65过表达干预后高尔基体的形态变化及其可能机制研究
胜HT22细胞氧糖剥夺再灌注及Grasp65过表达干预后高尔基体的形态变化及其可能机制研究王 佳1, 熊 炬2, 周文胜2目的 探讨HT22细胞氧糖剥夺再灌注及Grasp65过表达干预后高尔基体的形态变化及其可能机制。方法 利用小鼠海马神经元细胞系HT22为研究对象,HT22细胞经氧糖剥夺再灌注损伤及Grasp65过表达干预后,采用MTT法检测细胞存活率;Hoechest33258荧光染色法评估细胞凋亡;并应用细胞免疫荧光技术观察高尔基体的形态;应用We
中风与神经疾病杂志 2016年12期2017-01-12
- 体外培养的乳鼠皮层神经元氧糖剥夺后轴突损伤的实验观察
的乳鼠皮层神经元氧糖剥夺后轴突损伤的实验观察田青 叶文华 陶玉倩目的 建立乳鼠皮层神经元体外培养模型,观察氧糖剥夺处理对神经元轴突损伤的影响。方法 取出生24 h内的SD大鼠大脑皮层神经元,采用逐渐降低培养液中血清浓度和添加阿糖胞苷的方法培养、纯化神经元,观察其形态并鉴定。建立氧糖剥夺模型,随机分为正常对照组和氧糖剥夺处理组(2、4、6、8 h各1组)。采用噻唑蓝比色法测定神经元活性,βⅢ-tubulin 免疫荧光染色观察轴突形态学变化。结果 神经元培养3
新医学 2016年11期2016-12-06
- 糖皮质激素诱导的蛋白激酶在缺血大鼠海马神经元细胞中的保护作用
马神经元细胞根据氧糖剥夺(脑缺血)诱导时间不同分为正常海马神经元细胞组,氧糖剥夺诱导120 min组、氧糖剥夺诱导120 min后正常恢复10 min组、氧糖剥夺诱导120 min后正常恢复30 min组和氧糖剥夺诱导120 min后正常恢复60 min组。采用Annexin V-FITC/PI流式细胞术对样品进行检测,区分实验样本中正常、坏死、凋亡细胞。结果随着氧糖剥夺(脑缺血)时间的延长而神经元细胞凋亡的数量呈现不断增加的趋势;而随着氧糖剥夺(脑缺血)
中国老年学杂志 2016年6期2016-04-14
- 乙酰葛根素对氧糖剥离致神经元损伤的干预作用
01乙酰葛根素对氧糖剥离致神经元损伤的干预作用李 兰 刘东梅安徽医学高等专科学校护理学部 安徽合肥 230601本文主要通过三组实验来研究乙酰葛根素氧糖剥离对神经细胞损伤的干预作用。研究方法在氧糖剥离的基础上建立细胞模型;利用6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)法观察神经细胞的凋亡率;利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞核因子(或称为K基因结合核因子)、蛋白质(HIF-1α)以及P53基因的表达;利用蛋白印迹法或免疫印迹的实验方法测定热休克蛋白
东方食疗与保健 2016年7期2016-03-08
- 内皮祖细胞对氧糖剥夺/复氧损伤神经元的保护作用
著·内皮祖细胞对氧糖剥夺/复氧损伤神经元的保护作用李子惠1,柏盈盈1,居胜红2(1.东南大学医学院 分子与功能影像实验室,江苏 南京 210009;2.东南大学附属中大医院 放射科,江苏 南京 210009)目的:研究内皮祖细胞(EPCs)共培养对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤神经元是否有保护作用。方法:分离培养新生小鼠的海马神经元,利用缺氧培养室建立神经元OGD/R模型。分离培养小鼠骨髓源性EPCs,采用Transwell小室建立EPCs与OGD/R损
东南大学学报(医学版) 2015年3期2015-03-22
- 基于Activin A途径的大黄素神经保护机制的研究
制备神经元细胞的氧糖剥夺(OGD)模型,并在此基础上,给予大黄素干预,分别检测细胞的生存力;应用酶联免疫方法检测细胞培养基的Activin A的表达含量;应用Western blotting 对caspase-3蛋白的检测。结果pc-12细胞经牛膝多肽刺激后转化为类神经元样细胞,在OGD后的pc-12细胞呈明显的梯度变化;实验组细胞的生存力明显提高,其培养基的Activin A含量升高明显,caspase-3蛋白的表达与单纯应用氧糖剥夺组比较,表达降低(P
中国实验诊断学 2015年11期2015-03-10
- 吡拉格雷钠对氧糖剥夺/复氧后星形胶质细胞水肿及AQP4表达的影响
外星形胶质细胞行氧糖剥夺/复氧处理,建立细胞水肿模型,观察TSF对星形胶质细胞水肿模型的治疗效果及其对AQP4表达的影响。1 材料与方法1.1 实验动物及材料1.1.1 实验动物 出生3 d内的SD新生乳鼠(由江苏大学动物中心提供)。1.1.2 材料及试剂 戊巴比妥钠(美国Sigma公司);胎牛血清,0.25%胰蛋白酶(含0.025%EDTA),DMEM无糖培养基,DMEM培养基(美国Sig-ma公司);D-Hanks缓冲液;3-氧 - 甲基-[1-3H]
中国药理学通报 2015年12期2015-02-27
- Netrin-1促进氧糖剥夺后脑微血管内皮细胞存活☆
trin-1促进氧糖剥夺后脑微血管内皮细胞存活☆丁乔*廖松洁*阙嘉丽*李晨光*余剑*目的通过建立体外氧糖剥夺模型模拟缺血缺氧环境,观察轴突导向因子netrin-1对脑微血管内皮细胞氧糖剥夺损伤后的作用。方法体外培养脑微血管内皮细胞,免疫荧光法检测其netrin-1受体结直肠癌缺失基因(deleted in colorectal cancer,DCC)及uncoordinated(UNC)5H2的表达;并使用不同浓度netrin-1作用于氧糖剥夺损伤的脑微血
中国神经精神疾病杂志 2015年3期2015-02-06
- SN50对缺血再灌注损伤中TNF-α影响的实验研究
,再将细胞模型在氧糖剥夺条件下进行培养,通过体外实验来观察和了解SN50对缺血再灌注损伤中TNF-α表达的影响,为眼部缺血性疾病的临床治疗提供理论探索。1 材料与方法1.1 试剂与仪器 SN50(Biomy公司 美国),TNF-α ELISA Kit(美国Invitrogen公司),RPMI 1640培养液(美国Gibco公司),胎牛血清(美国Gibco公司),MTT(美国Invitrogen公司),细胞培养瓶与细胞培养皿(美国Corning公司),ROR
东南国防医药 2014年5期2014-12-07
- 氯化锂对人神经母细胞瘤细胞氧糖剥夺模型PARP/AIF凋亡信号通路的影响
300)氯化锂对氧糖剥夺的SH-SY5Y细胞具有较强的保护作用,1.0 mmol/L氯化锂为细胞保护的有效剂量,其作用机制之一可能是对 AIF信号通路的抑制〔1〕。本实验拟采用氧糖剥夺的SH-SY5Y细胞模型模拟脑缺血再灌注损伤进一步阐述氯化锂对PARP-1/AIF信号通路的影响,为锂剂用于缺血性脑血管病的治疗奠定理论基础。1 材料与方法1.1主要仪器设备 二氧化碳(CO2)培养箱;低温高速离心机;BB6220型三气培养箱;倒置相差显微镜;显微照相系统;超
中国老年学杂志 2014年3期2014-09-12
- 突触蛋白Synapsin在氧糖剥夺模型中的表达及意义
PC12细胞进行氧糖剥夺处理,建立缺血性脑损伤模型,采用Western blot方法检测不同时间氧糖剥夺模型细胞中的Synapsin蛋白表达,探讨Synapsin蛋白在氧糖剥夺模型中的表达及意义。1 材料与方法1.1 细胞株PC12细胞株(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)购自北京银紫晶生物技术公司。1.2 主要试剂和仪器DMEM培养基购自美国Gibco公司;胎牛血清购自北京鼎国公司;鼠神经生长因子(NGF)、胰蛋白酶均购自美国Sigma公司;抗突触素抗体购自武汉博士
中国实验诊断学 2014年3期2014-08-25
- HMGB1基因沉默对氧糖剥夺/复氧所致星形胶质细胞损伤的保护作用
星形胶质细胞进行氧糖剥夺/复氧以模拟在体脑缺血再灌注损伤,观察HMGB1表达的变化情况,探讨RNA干扰抑制HMGB1表达是否对氧糖剥夺/复氧的星形胶质细胞具有保护作用。1 材料与方法1.1 实验动物 新生24h内Sprague-Dawley大鼠40只,雌雄兼有,由重庆医科大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(渝)2012-0001。1.2 主要试剂 DMEM高糖、胎牛血清(美国Gibco),无糖DMEM培养基(中国钮因华信),慢病毒载体HMGB1siR
解放军医学杂志 2014年4期2014-03-02
- 腺苷预处理对OGD星形胶质细胞NGF和BDNF的影响
细胞用于实验,在氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)处理前实验组给予100μmol/L的腺苷预处理,研究其对内源性NGF、BDNF表达的影响。1 材料与方法1.1实验动物出生24h内的SD大鼠,雌雄不限,体质量10~12g。1.2实验方法将SD大鼠星形胶质细胞的分离、消化、培养、鉴定,通过分组处理,随机分为3组:正常对照组(normal control group)、氧糖剥夺组(OGD group)、腺苷预处理组(ADO
中国实用神经疾病杂志 2013年4期2013-10-11
- 脑必通胶囊对局灶性脑缺血大鼠脑血流量及内皮细胞iNOS表达的影响
[3]。2.4 氧糖剥夺模型的建立 先将培养HUVEC细胞的培养液换成无糖DMEM培养基,然后转移置缺氧培养气室中,同时打开有白色塑料钳夹的聚丙烯管道的进气口和出气口,将入口处的聚丙烯管道于包含有所需的混合气体的源头相连,向气室内充入95%的N2和5%的CO2气体,将气流自动控制在每分钟20 L,大约4 min气室被完全充满后,切断气体来源,关上白色的塑料钳夹以紧闭气室,最后将这个气室置于37℃温育。氧糖剥夺的时间分别是1、3、6、12、24 h。2.5
中成药 2013年2期2013-08-28
- 米非司酮对孕酮防护PC12细胞氧糖剥夺损伤的影响*
胞证明孕酮可减轻氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)对神经元的损伤。然而孕酮的防护作用是通过核受体介导的基因途径,还是通过膜受体介导的非基因途径目前尚不清楚[2]。本文在PC12细胞的OGD损伤模型,观察孕酮核受体拮抗剂米非司酮(mifepristone,MIF)阻断孕酮核受体前后细胞形态、存活率、培养液中葡萄糖含量的变化,探讨核受体介导的基因途径在孕酮抗OGD损伤中所扮演的角色。1 材料与方法1.1 材料与试剂大鼠嗜铬
中国应用生理学杂志 2013年2期2013-03-25
- 氧糖剥夺对体外培养大鼠星形胶质细胞内Cdh1蛋白表达的影响及机制*
培养星形胶质细胞氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)后Cdh1蛋白的表达变化,及其是否与细胞外液葡萄糖含量有关,为进一步明确缺血缺氧性脑损伤的发病机制提供实验依据。1 材料与方法1.1 星形胶质细胞的体外纯化培养根据McCarthy 等[3]报道的方法,取新生1~2 d SD 大鼠,75%乙醇消毒,无菌操作下取出全脑浸于4℃预冷D-hanks液中,用眼科镊快速剥除脑膜及小脑,夹取皮层置于另一玻璃皿中。仔细剪碎皮层组织后,
华中科技大学学报(医学版) 2012年3期2012-12-23
- PC12细胞转化为神经元样细胞的培养、鉴定及氧糖剥夺模型的制备
能,同时应用体外氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)来模拟体内脑缺血过程,为探讨缺血缺氧状态下对神经元的活力、凋亡、信号通路机制的研究定物质基础。1 材料和方法1.1 实验细胞大鼠PC12细胞株购自北京金紫晶生物医药技术有限公司(中国医学科学院肿瘤细胞库)。鼠神经生长因子(NGF)(Sigma公司,美国)。1.2 实验方法1.2.1 PC12细胞的培养、传代 将细胞悬液加入含有DMEM完全培养基,培养液2-3天更换一次。
中国实验诊断学 2012年5期2012-11-23
- PC12细胞转化为神经元样细胞的培养、鉴定及氧糖剥夺模型的制备
能,同时应用体外氧糖剥 夺 (oxygen-glucose deprivation,OGD)来模拟体内脑缺血过程,为今后进一步探讨缺血缺氧状态下对神经元的活力、凋亡、信号通路机制的研究奠定物质基础。1 材料和方法1.1 实验细胞大鼠PC12细胞株购自北京金紫晶生物医药技术有限公司(中国医学科学院肿瘤细胞库)。鼠神经生长因子(NGF)(Sigma公司,美国)。1.2 实验方法1.2.1 PC12细胞的培养、传代 将细胞悬液加入含有DMEM完全培养基,培养液2
中国实验诊断学 2012年12期2012-11-05
- 促红细胞生成素预处理对氧糖剥夺后星形胶质细胞水肿及AQP4表达的影响☆
hEPO预处理对氧糖剥夺后星形胶质细胞水肿及其AQP4表达的影响,并探讨其意义。1 材料与方法1.1 研究对象 新生2 d内的SD大鼠(重庆医科大学实验动物中心提供)50只,胎牛血清(美国Gibco),无糖DMEM培养基(中国 钮因华信),神经胶质原纤维酸性蛋白(美国Sigma),乳酸脱氢酶试剂盒(美国 Hyclone),RT-PCR试剂盒(美国 Ferments),AQP4 多克隆抗体(美国 Santa Cruz)。1.2 星形胶质细胞原代培养[8]取新
中国神经精神疾病杂志 2012年1期2012-09-14
- 孕酮对氧糖剥夺损伤的PC12细胞的保护作用*
为依靠葡萄糖的无氧糖酵解来获取能量。然而,无氧糖酵解产生ATP的效率下降,要满足脑细胞对能量的需求,就需要大量葡萄糖作为底物,葡萄糖进入脑细胞必须借助细胞膜上的GLUT3进行跨膜转运。因此GLUT3表达的多少就成为决定缺血时脑细胞对葡萄糖利用效率的首要因素,在脑缺氧缺血损伤的病理过程中起关键作用,是干预脑缺氧缺血损伤的重要靶点。探索缺氧缺血时增强神经元葡萄糖供给和摄取能力的调控因素具有重要意义。本实验室前期在缺氧缺血新生鼠和缺血-再灌注大鼠已经证实孕酮(p
中国病理生理杂志 2012年2期2012-09-14
- 大鼠皮层小胶质细胞氧糖剥夺模型的制备
。本实验采用体外氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)模型来模拟脑损伤过程,为研究缺血过程中小胶质细胞的脑保护作用提供了可靠、实用的方法。1 材料与方法1.1 实验动物出生1~2d Wistar大鼠。购自吉林大学中心实验室。1.2 实验方法1.2.1 大鼠皮层小胶质细胞原代培养和鉴定 采用酶消化法结合机械分离法进行培养[2]。应用倒置显微镜观察不同时期细胞形态及生长情况。在培养第8天用OX42免疫细胞化学染色进行鉴定。1.
中外医疗 2011年35期2011-06-15