寡聚体
- 氨溴索对α-突触核蛋白寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5损伤的预防作用观察
yn），防止其寡聚体形成、释放以及在神经系统扩散［2］。研究［3-5］显示，α-syn寡聚体水平升高会损伤神经元轴突的完整性，导致神经元变性，抑制α-syn寡聚体可以改善脂多糖引起的老年小鼠线粒体损伤和神经元的凋亡情况。自噬-溶酶体途径是降解长寿命蛋白质α-syn和亨廷顿蛋白的主要途径，也是清除受损细胞器的唯一途径［6］。编码溶酶体酶β-葡萄糖脑苷脂酶（Glucocerebrosidase，GCase）的GBA1基因突变是PD的最常见危险因素［7］。氨溴索
山东医药 2023年21期2023-08-16
- “十”字形自驱单元形成寡聚体的动力学行为*
许多构型各异的寡聚体,一部分寡聚体十分稳定,在没有外力的干扰下,至实验结束,它们都维持着自身的运动并且其结构都没有产生变化.研究它们寡聚体(二聚体、三聚体、四聚体)的动力学,是理解此类形状大量粒子组装的第一步.“十”字形粒子与圆形、椭圆、方块粒子相比,由于其有四个臂,其空间位阻效应具有很好的各向异性,同时旋转时对周围的粒子也能产生较稳定的扭矩.相对于微观尺度需要吸引作用,本文强调空间位阻和自驱动力协同效应导致的聚集行为.发现这些构型的行为模式按照几何中心轨
物理学报 2022年15期2022-08-12
- β-淀粉样蛋白的聚集及其调控
产生大量异质的寡聚体。Aβ 寡聚体和纤维对神经细胞产生严重的毒性，导致突触功能受损，从而引发功能性障碍。因此，调控Aβ 的聚集已成为治愈AD的关键。近年来，在Aβ 聚集及其调控方面已进行了广泛的研究[6]，但由于Aβ 聚集过程呈现复杂的多尺度性，目前对寡聚体结构的认识尚不充分，因此制约着Aβ 聚集抑制剂的开发。为此本文综述了以Aβ 聚集及其调控为核心的相关介尺度过程。首先，简要介绍Aβ 的产生和聚集过程以及与介尺度科学的关系。随后，按照不同的分类标准系统总
化工学报 2022年6期2022-07-06
- Aβ寡聚体与阿尔茨海默病*
集，形成Aβ 寡聚体（AβO，Aβ oligomer）。Aβ寡聚体会破坏突触功能并导致神经元的死亡，最终影响AD 患者的记忆和认知功能。此外，Aβ 寡聚体的生成和神经元损伤的病理过程可能早在临床症状出现的几十年前就已经发生［4］。虽然针对Aβ 寡聚体的靶向治疗策略是一种非常有前景的方法，但目前尚无有效的靶向药物。因此深入研究Aβ 寡聚体的性质及其作用机制，特别是结构与毒性关系，对于AD 的诊断以及开发新型的治疗方法至关重要。1 APP的结构与功能人类淀粉样
中山大学学报(自然科学版)(中英文) 2022年3期2022-06-08
- 灯盏乙素对β淀粉样蛋白诱导的神经母细胞瘤细胞中NMDAR1表达的影响*
用Aβ1-42寡聚体作用于具有人神经元形态和特征的人源性神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞，诱导AD神经元损伤的细胞模型，并通过检测NMDARs功能性亚基NMDAR1蛋白及mRNA表达情况，进一步探究Scu在Aβ寡聚体毒性背景下对NMDAR1的调控作用。1 材料与方法1.1 实验材料实验用Scu(南京泽朗医药科技有限公司，纯度98%，批号为ZL20161012037)，Aβ1-42寡聚体(强耀生物科技有限公司，纯度95.27%，货号为04010011526
贵州医科大学学报 2022年3期2022-04-21
- β淀粉样蛋白寡聚体参与阿尔茨海默病发病机制的研究进展
研究发现，Aβ寡聚体(amyloid β-protein oligomers，AβOs)具有较强的神经毒性，可以通过多种机制介导突触功能和数量异常，引起神经元死亡，其产生和积累可能是导致AD神经退变的主要原因。1 淀粉样蛋白学说AD最显著的临床症状是进展迅速、以记忆丧失为主的认知功能障碍，相关的神经病理学改变主要涉及由细胞凋亡、坏死、氧化应激和神经炎症等过程介导的突触末端进行性丢失和神经元死亡[4]。1906年Alzheimer[5]报告了首例AD患者，并
中华老年多器官疾病杂志 2021年8期2021-11-29
- 基于全链条的回收PET材料中非挥发性可迁移物的非靶向筛查及特征风险标志物的确定
均筛查出PET寡聚体、润滑剂等物质。在瓶坯样品中检出的PET寡聚体种类最多，其次是瓶子和碎片样品，在粒料样品中检测的PET寡聚体种类最少，可能是粒料被加工为瓶坯的过程中产生了新的PET寡聚体（见表1）。通过了解厂商整个rPET的回收加工过程，从粒料到瓶坯需经过300℃左右的高温注塑，因此，推测在此过程中高温导致PET发生降解，从而使瓶胚中的寡聚体种类增加。润滑剂在聚合物加工中可提高加工速度，降低聚合物与加工机械表面摩擦，减少能耗，提高产品质量。在4种生产阶
分析测试学报 2021年11期2021-11-28
- 基于Aβ寡聚体的阿尔茨海默病治疗药物研究进展
包括Aβ单体、寡聚体和纤维在AD发生发展中发挥了关键作用［3］，所以这类蛋白一直是AD新药研究中最受关注的靶点之一。基因研究证实，增加Aβ的产生或者降低Aβ的清除是AD发病的重要因素［3］。淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein，APP）、早老素1（presenilin 1，PS1）或早老素2（presenilin，PS2）基因突变促进Aβ的产生，携带人群易于发展为AD［3，6］。载脂蛋白4（apolipoprotein E4，
中国药科大学学报 2021年4期2021-09-14
- 不同亚型的帕金森病及多系统萎缩患者血浆α-突触核蛋白寡聚体浓度分析
测α-Syn的寡聚体含量[16-17]用浓度为1 mg/L的3D5单克隆抗体包被96孔酶标板，100 μL/孔，37 ℃孵育2 h，4 ℃过夜，PBST洗板。10%(质量分数) BSA封闭，200 μL/孔，37 ℃孵育2 h，PBST洗板。加入倍比稀释的重组人α-Syn寡聚体标准品(0.5、0.25、0.125、0.062 5、0.031 25、0 μmol/L) 和待测样品，100 μL/孔，37 ℃孵育2 h，PBST 洗板。然后加入浓度为1 mg/
首都医科大学学报 2020年2期2020-06-21
- 抗阿尔茨海默症单链抗体的制备与体外活性研究①
1.2.2Aβ寡聚体与Aβ纤维的制备 将Aβ42多肽溶解于六氟异丙醇中，避光溶解至溶液澄清。在室温条件下将六氟异丙醇挥发完全。用DMSO将Aβ42多肽完全溶解后，加入F12培养基，涡旋形成多肽悬液。将多肽悬液在4℃ 孵育24 h 后，获得Aβ寡聚体；将多肽悬液在37℃ 孵育24 h后，获得Aβ纤维，样品置于-80℃ 冰箱备用。1.2.3ELISA法检测scFv对不同聚集形式Aβ的结合活性 在ELISA板中包被Aβ42多肽单体、Aβ寡聚体以及Aβ纤维，每孔1
中国免疫学杂志 2020年1期2020-02-20
- Aβ1-42寡聚体对α-syn过表达SHSY5YA53T细胞自噬功能的影响☆
中Aβ1-42寡聚体毒性最强。研究表明，Aβ1-42参与PD的病理发病过程，与PD患者认知损害和步态障碍相关[4-5]。Aβ1-42寡聚体可促进α-syn的聚集和神经元的死亡。自噬是神经元内重要的蛋白途径，αsyn的自噬性降解障碍被认为是PD的重要病理过程。Aβ1-42对PD自噬功能的影响鲜有文献报道。本研究将建立α-synA53T过表达的帕金森病体外模型，检测Aβ1-42寡聚体处理前后细胞自噬相关蛋白 p62、LC3、Beclin-1的变化，以探究 Aβ
中国神经精神疾病杂志 2019年7期2019-08-22
- 帕金森病患者血浆增强α-突触核蛋白细胞毒性及其机制研究
-Syn单体和寡聚体从神经元释放并存在于细胞外液，包括脑脊液和血浆中。体内和体外实验[6]均表明这些分子通过内吞作用被神经元内化。笔者假设，α-Syn的聚集和毒性很可能是由于PD患者内环境发生变化，而血液是构成机体内环境的重要组成部分。为了验证这个假设，本研究采用正常受试者(normal subject，NS)或PD患者的血浆培养大鼠原代神经元，评估α-Syn的磷酸化和其聚集与细胞活力的关系及机制。1 对象与方法1.1 研究对象选择PD患者和正常对照各28
首都医科大学学报 2019年2期2019-04-22
- α-突触核蛋白寡聚体经氧化应激途径致帕金森病小鼠模型多巴胺能神经元损伤
折叠结构，形成寡聚体和多聚体[4,5]。目前认为α-Syn寡聚体毒性是导致DN变性、缺失的重要原因，但具体生物学机制仍不清楚。本研究拟经鱼藤酮持续灌胃构建PD小鼠模型，初步探讨α-Syn寡聚体导致DN变性缺失的可能生物学机制。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 实验动物 12月龄清洁级健康雄性C57BL/6小鼠，体质量约28 g，由武汉大学动物实验中心提供，许可证号SCXK（鄂）2008-0004。1.1.2 主要试剂与材料 鱼藤酮购自美国Sigma公司
神经损伤与功能重建 2019年2期2019-03-04
- 唾液细胞外囊泡中α-突触核蛋白寡聚体诊断多系统萎缩-帕金森型的价值
有关[17]。寡聚体形式的α-突触核蛋白具有神经毒性[18]，更能反映疾病的病理状态。本研究对MSA-P患者唾液中是否存在外泌体，以及唾液细胞外囊泡α-突触核蛋白寡聚体在MSA-P诊断中的作用进行探讨。1 对象和方法1.1研究对象收集2016-11-01—2017-12-31就诊于首都医科大学附属北京天坛医院神经变性病科的MSA-P患者16例，其中男9例，女7例，年龄48～76岁，平均(57.3±7.8)岁。另招募就诊患者的亲属为健康对照组，共60名，其中
中国神经免疫学和神经病学杂志 2019年1期2019-02-27
- Aβ寡聚体损伤PC12细胞毒性研究
不如可溶性Aβ寡聚体，可溶性Aβ寡聚体是产生神经毒性作用的重要来源。但体内获得可溶性Aβ很难，使其在体内聚集环境很难实现。所以，本研究通过Aβ寡聚体构建体外AD模型，探讨Aβ寡聚体对于细胞活力、凋亡、Aβ42及PS1表达、自噬等方面的影响。1 材料与方法1.1 试剂及仪器 未分化的半悬浮PC12细胞购自北京中国科学院细胞库；Aβ42单体、Aβ40单体购自Anaspec；CCK-8试剂盒购自东仁化学科技有限公司；BCA蛋白浓度测定试剂盒购自Bioteke；c
中风与神经疾病杂志 2019年1期2019-02-15
- β样淀粉蛋白和早老素增强子-2与环磷酸腺苷应答原件结合蛋白的关系
脑萎缩，而Aβ寡聚体很可能是淀粉样斑块的前体〔2〕。Aβ寡聚体可能通过降低CREB靶基因和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达而损害AD中的神经元功能。恰恰相反的是新的研究发现Aβ42单体可通过激活磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路诱导分化型人神精母细胞瘤和元代大鼠皮层神经中CREB的激活,而Aβ42寡聚体没有这个影响,反而在大鼠模型和AD患者中CREB的表达受损〔3〕。这说明单体和寡聚体之间的转变是毒性作用产生的原因。Aβ40与A
中国老年学杂志 2019年22期2019-01-11
- Aβ1⁃42寡聚体对小鼠神经胶质细胞D1a IL⁃1β表达水平的影响研究
Aβ1～42 寡聚体（Aβ1-42）与 IL-1β的相关性，旨在确定Aβ对神经细胞的毒性作用机制。1 材料与方法1.1 仪器与试剂1.1.1 仪器 Allegra X-30R型低温离心机（Beckman Coulter公司，美国），Mini-ProteinⅡ型电泳仪、iMark型酶标仪、Gel Doc 2000型凝胶图像分析系统（Bio-Rad公司，美国），CO2培养箱（ThermoFisher公司，美国），TCSSP8型荧光共聚焦显微镜（Leica公司，
现代医药卫生 2018年24期2018-12-29
- α-突触核蛋白转运与帕金森病关系的研究进展
运与α-Syn寡聚体形成在帕金森病发展中所起的作用做一综述。1 α-Syn及其与帕金森病关系的概述α-Syn最先于1997年在帕金森病患者脑组织的路易小体中被SPILLANTINI等［1］观察到。同年，POLYMEROPOULOS等［2］证实了编码α-Syn的基因SNCA发生点突变以及基因重复与帕金森病的发展密切相关。α-Syn是一个由140个氨基酸残基组成的神经元蛋白，可以导致神经元的损伤，而且还参与中枢神经系统神经变性的过程［3］。它可以诱导一系列渐进
实用医学杂志 2018年23期2018-03-18
- 急性缺血性卒中患者血清胱抑素表达水平及结构形式的临床研究
高，升高是否以寡聚体升高为主，是否与急性脑缺血的严重程度有关，为下一步在细胞层面研究不同结构形式 Cys C(单体和寡聚体)对缺氧状态下神经细胞的增殖及凋亡的影响及其机制提供一定的理论依据，也为进一步研究急性脑缺血后血清Cys C寡聚体表达水平升高与血管性痴呆的发生、发展的关系提供一定的理论依据。1 资料与方法1.1 一般资料：选择2016年5-8月在我院脑卒中单元及神经内科住院治疗的急性脑缺血患者32例(急性脑缺血组)，所有病例均符合纳入及排除标准。选择
宁夏医学杂志 2017年12期2018-01-17
- 新型Aβ42寡聚体模拟表位疫苗的制备
）新型Aβ42寡聚体模拟表位疫苗的制备刘向蒙1于雅东2王少伟3于晓琳3王瑞明1（1. 齐鲁工业大学生物工程学院，济南 250353；2. 昆明市环境监测中心，昆明 650100；3. 中国科学院过程工程研究所，北京 100190）旨在获得一株特异靶向致病性Aβ42寡聚体的模拟表位疫苗。在前期工作中，应用亲和层析的方法从人静脉用免疫球蛋白（Intravenous immune globulin，IVIG）中纯化获得特异性识别Aβ42寡聚体的抗体组分IVIG-
生物技术通报 2017年12期2018-01-08
- 帕金森病患者血浆和红细胞α-突触核蛋白寡聚体水平及临床意义①
α-突触核蛋白寡聚体水平及临床意义①梁杨，顾英，李晓红目的 探讨帕金森病患者外周血浆及红细胞中α-突触核蛋白(α-syn)寡聚体含量对帕金森病诊断以及与病程、疾病严重程度的相关性。方法 2013年3月至2014年12月，采集30例帕金森病患者(患者组)及30例健康体检者(对照组)血液，采用酶联免疫吸附测定法检测血浆及红细胞中α-syn寡聚体含量。结果 对照组血浆及红细胞中α-syn寡聚体含量低于患者组(t＞2.346,P＜0.05)；两组红细胞中α-syn
中国康复理论与实践 2017年9期2017-09-29
- 抗Aβ42单链抗体对阿尔茨海默病小鼠脑中淀粉样沉积的改善作用
Aβ42单体、寡聚体、纤维和鼠脑中Aβ沉积的结合能力。并通过甲氮甲唑蓝(MTT)法检测scFv23对Aβ42寡聚体引起细胞毒性的影响，同时采用硫黄素-T荧光法(ThT-F)测定scFv23对Aβ42聚集形成纤维的影响。最后，通过体内实验检测了scFv23对AD鼠模型脑中Aβ42沉积的影响。结果 通过对人源天然scFv噬菌体抗体库进行筛选得到一株与Aβ42具有高亲和力的克隆scFv23。实验发现scFv23可以特异性识别Aβ42寡聚体，纤维聚集体和鼠脑中Aβ
中国老年学杂志 2017年13期2017-07-18
- 抗Aβ抗体清除Aβ寡聚体后BV2细胞对SH-SY5Y细胞损伤的影响及机制
β抗体清除Aβ寡聚体后BV2细胞对SH-SY5Y细胞损伤的影响及机制李 芳 曹云鹏(中国医科大学附属第一医院神经内科，辽宁 沈阳 110001)目的 研究抗 Aβ1～42抗体清除Aβ1～42寡聚体后的BV2细胞对SH-SY5Y细胞损伤的影响及机制。方法 2 μmol/L Aβ1～42寡聚体处理BV2细胞为激活组，2 μmol/L Aβ1～42寡聚体处理BV2细胞6 h后加入12 μl抗Aβ1～42抗体清除Aβ1～42为抗体组，对照组加入等量的生理盐水，各组
中国老年学杂志 2017年11期2017-06-23
- 自主跑轮运动对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力和海马内炎性细胞因子表达的影响
和Aβ1-42寡聚体注射组（n=30），分别于侧脑室注射DMSO和Aβ1-42寡聚体，Aβ1-42寡聚体注射1周后两组小鼠进行Morris水迷宫实验，通过比较两组小鼠的逃避潜伏期和穿越平台次数，检测Aβ1-42寡聚体注射组与DMSO对照组小鼠的学习记忆能力，证实侧脑室注射Aβ1-42寡聚体能够有效模拟AD模型。之后将Aβ1-42寡聚体注射组小鼠随机分成AD运动组（n=15）和AD安静组（n=15），AD运动组进行为期6周的自主跑轮运动，AD安静组和DMSO
中国运动医学杂志 2017年4期2017-05-03
- 脑脊液中α-synuclein与帕金森病相关性的Meta分析
uclein；寡聚体；帕金森病；脑脊液目前帕金森病(PD)诊断主要依靠临床标准(患者的临床特征以及医生的临床经验等)，此标准仍存在缺陷，通常患者确诊时黑质多巴胺能神经元已经丢失70%以上〔1～3〕。因此，探寻一种特异性的早期诊断标记对PD的治疗尤为重要。目前临床上尚缺少稳定、可靠的诊断标记。近年发现α-synuclein(α-syn)的异常聚集与PD密切相关，PD的特异性病理标记路易小体中检测到了α-syn的多种成分，如α-syn单体、寡聚体等，推测其可能
中国老年学杂志 2017年1期2017-02-13
- 家族型帕金森病α-突触核蛋白突变体寡聚化对神经元毒性的影响
-突触核蛋白；寡聚体；原代神经元；神经毒性目前研究认为，老化、遗传和环境因素的相互作用是帕金森病(PD)发病的主要原因，而α-突触核蛋白(α-Syn)作为广泛存在的PD特征性病理变化——路易体(LB)的主要成分，被认为是引起PD发病的关键性蛋白。α-Syn在神经组织中表达丰富，正常情况下主要存在于神经元的突触前神经末梢，参与多巴胺代谢及突触可塑性调控等多种功能。通过对罕见的PD家系的研究，发现一种编码α-Syn基因的SNCA错义点突变(A53T、A30P、
中国老年学杂志 2016年23期2016-12-23
- STAT3在Aβ寡聚体诱导的小胶质细胞炎症反应中的作用
TAT3在Aβ寡聚体诱导的小胶质细胞炎症反应中的作用郭秀美1， 张启芳2， 官志忠1，2目的 研究β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导小胶质细胞产生炎症反应中信号转导和转录激活子3(STAT3)的表达水平及作用。方法 用蛋白印迹法检测STAT3在Aβ寡聚体诱导的BV2小胶质细胞炎症反应中的表达水平；用siRNA沉默STAT3的表达后，实验分为正常对照组、siRNA STAT3组、Aβ处理组、Control siRNA+ Aβ 组以及siRNA STAT3+ Aβ组，
中风与神经疾病杂志 2016年11期2016-12-22
- Alpha-突触核蛋白寡聚体致帕金森病小鼠模型的行为学变化
a-突触核蛋白寡聚体致帕金森病小鼠模型的行为学变化王 鹏 历 春1王海鹏 盖晓东1(北华大学基础医学院人体解剖学教研室，吉林 吉林 132013)目的 观察家族型帕金森病(PD)alpha-突触核蛋白(α-Syn)突变体A53T和A30P寡聚体导致小鼠PD模型的行为学变化，探讨α-Syn寡聚体在体内的神经毒性作用。方法 制备野生型α-Syn、家族型突变体A53T和A30P的聚集体，对C57BL/6小鼠进行纹状体注射。培养至第30、60天，进行爬杆实验、悬吊
中国老年学杂志 2016年21期2016-12-06
- Aβ寡聚体对海马神经细胞突触形态及突触蛋白Ng表达的影响①
002)Aβ寡聚体对海马神经细胞突触形态及突触蛋白Ng表达的影响①尉荣翠，房迎华，赵秀琴，张道春，黄昕艳(佳木斯大学第二附属医院，黑龙江 佳木斯 154002)目的：研究Aβ25-35寡聚体对原代培养海马神经细胞突触形态及突触蛋白Ng表达的影响。方法：5、10、20umol/L Aβ25一35寡聚体作用于原代培养的海马神经元1h，以免疫细胞化学法检测Ng的表达。结果:与对照组相比:10、20μmol/L Aβ25-35寡聚体致Ng表达减少,差异有显著性(
黑龙江医药科学 2016年5期2016-11-18
- 与Aβ42结合的噬菌体展示多肽的淘选△
实验以Aβ42寡聚体为靶蛋白，对随机环形噬菌体七肽库进行筛选，对于筛选的结果用酶联免疫吸附试验进行验证。结果：得到200株噬菌体克隆，全部为阳性并且部分与Aβ42的结合力极强。结论：通过对随机环形噬菌体七肽库筛选可得到与靶蛋白（Aβ42）结合的噬菌体阳性克隆，理论上这些阳性噬菌体所展示的多肽可以作为配体与Aβ42（受体）结合，而这种结合则有可能影响Aβ42寡聚体的聚集和沉淀，从而为阿兹海默症的治疗提供某些支持。阿兹海默症 β-淀粉样蛋白 生物淘选阿兹海默症
北方药学 2016年10期2016-11-04
- 一种改进的Aβ1-42寡聚体的制备与鉴定方法*
的Aβ1-42寡聚体的制备与鉴定方法*禹文峰1， 孔欣2， 官志忠1，2**(1.贵州医科大学 分子生物学重点实验室， 贵州 贵阳550004; 2.贵州医科大学 病理学教研室， 贵州 贵阳550004)目的： 改进Aβ1-42寡聚体的制备与鉴定方式。方法： 以化学合成多肽Aβ1-42为原料在体外制备Aβ1-42寡聚体，用Western blotting进行鉴定;加入不同浓度Aβ1-42寡聚体后，用CCK-8法测定体外原代培养大鼠大脑皮质星形胶质细胞(AS
贵州医科大学学报 2016年8期2016-10-12
- 促进Aβ 42形成不溶性聚集物的一种真菌化合物
集形成的可溶性寡聚体具有神经细胞毒性，是引起阿尔茨海默症的主要原因之一．通过浊度法、聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis，SDS-PAGE)和原子力显微镜(atomic force microscopy, AFM)技术，分析在真菌化合物demethoxyviridin存在情况下，Aβ 42聚集过程中荧光强度、浊度、寡聚体和聚集物的比例及颗粒表观形态等动态变化之间
深圳大学学报（理工版） 2016年1期2016-02-23
- 不同Hoehn-Yahr分级帕金森病患者血浆a-共核蛋白的研究
clein蛋白寡聚体有细胞毒性作用[4]。由此可见血浆中a-synuclein蛋白全长和寡聚体水平与帕金森病有直接相关性，本实验通过检测十堰地区帕金森病患者与对照组血浆a-synuclein蛋白全长及寡聚体水平差异，同时对不同疾病分期的PD患者进行比较，进一步确定a-synuclein蛋白与帕金森病的关系，从而为帕金森病的诊断寻求一个生物标志物，协助帕金森病的疾病分期、诊断、治疗。1材料与方法1.1实验材料和病例资料1.1.1主要试剂及仪器人血浆a-syn
卒中与神经疾病 2015年6期2016-01-20
- α-突触核蛋白与Cu 2+相互作用的研究进展
聚化形式，这类寡聚体相互作用，最终转化为更加稳定的纤维化多聚体[7]。异常聚集的α-synuclein是路易小体的主要组成成分，研究含有路易小体的神经元发现，胞质中α-synuclein的聚集体并不是对所有细胞都是有毒性,寡聚化的初原纤维 (protofibrils)才是致病的主要原因，这类寡聚体富含β片层结构。Goldberg等[8]在2000年发表文章也认为，单体的α-synuclein对神经细胞是安全的，多聚化纤维形式的α-synculein毒性也较
中国药理学通报 2015年1期2016-01-11
- 急性缺血性脑卒中患者外周血红细胞α−突触核蛋白寡聚体浓度的研究
α–突触核蛋白寡聚体浓度增高。然而，其产生机制和病理意义尚有待进一步研究。此外，外周血红蛋白α−突触核蛋白寡聚体浓度与AIS的关系尚无研究报道。于是，我们招募正常对照、PD患者和AIS患者并留取血样标本，采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）定量观察血红细胞α−突触核蛋白浓度，并进行组间比较，同时观察年龄和性别对其含量的影响。1 对象与方法1.1 研究对象招募55名正常对照组、55
中华老年多器官疾病杂志 2015年9期2015-04-28
- 原儿茶酸对Aβ1-42寡聚体诱导AD海马神经元的保护作用
对Aβ1-42寡聚体诱导AD海马神经元的保护作用李智勇1，罗 汉1，张海英2（1.海口市人民医院神经外科，海南 海口 570208；2.海南医学院人体解剖学教研室，海南 海口 571101）目的 应用Aβ1-42寡聚体诱导SD胎鼠海马神经元制备细胞损伤模型，观察海南益智仁提取物-原儿茶酸(PCA)对模型细胞的保护作用。方法采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞活力，流式细胞技术检测细胞凋亡，蛋白质印迹法(Western blot)检测ERK
海南医学 2015年14期2015-04-13
- 虫草素在Aβ1-42寡聚体诱导AD模型大鼠神经元损伤中的作用①
在Aβ1-42寡聚体诱导AD模型大鼠神经元损伤中的作用①郑衍芳，吕文昌，孙田静，郑丽萍，张文权，宋志语，周 袁(遵义医学院珠海校区生理学教研室，广东 珠海 519041)虫草素为天然中药材冬虫夏草和人工培养蛹虫草的有效成分。近年来研究表明，虫草素具有抗肿瘤，抗衰老，抗白血等药理作用。阿尔茨海默病是一种神经系统退行性疾病。可溶性Aβ1-42寡聚体具有神经细胞毒性且是阿尔茨海默病发病的关键因素。本文我们探讨了虫草素在Aβ1-42 寡聚体诱导 AD 模型大鼠神经
黑龙江医药科学 2015年3期2015-03-19
- α-突触核蛋白寡聚体抑制大鼠原代培养神经元突起早期生长
-6］，聚集成寡聚体的 α-Syn对神经元具有毒性作用［7-8］。α-Syn 主要分布于突触前膜和核膜［9-11］，与细胞的信号转导有关，参与突触形成、维持和神经元的分化。近来研究［12］表明α-Syn与微管蛋白互为分子伴侣，通过促进微管蛋白的聚合，α-Syn能够加速微管的形成。本课题组进一步发现α-Syn可以促进原代培养的大鼠原代神经元和MES23.5细胞的突起生长［13］，该功能片段位于蛋白的NAC段和C端，其家族型突变体A53T、A30P没有突起促生
首都医科大学学报 2014年5期2014-12-02
- 寡聚化α-突触核蛋白在不同年龄段食蟹猴消化道中的表达
3)α-Syn寡聚体的免疫印迹分析:分别取20 μg各组蛋白样品用10%SDS-PAGE分离后，半干法转移至PVDF膜。将PVDF膜与3D5单抗(1∶5 000)室温孵育2 h，然后与辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG多克隆抗体(1∶5 000)室温孵育1 h。ECL法检测辣根过氧化物酶活性。1.3 统计学方法应用SPSS 18.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较使用单因素方差分析法和均数两两比较LSD方法。以P＜0.0
首都医科大学学报 2014年5期2014-12-02
- LRRK2活化Rho GTPases信号通路在小胶质细胞吞噬α-突触核蛋白中的作用机制
构建α-Syn寡聚体诱导BV-2细胞活化模型，免疫荧光检测BV-2细胞内α-Syn阳性包涵体的数量。Western blot检测BV-2细胞LRRK2蛋白的表达。Pull down检测BV-2细胞Rac1、Cdc42、RhoA的活性。结果 与对照组相比，α-Syn寡聚体诱导BV-2细胞内α-Syn阳性包涵体数量增加，LRRK2蛋白表达增加及Rac1、Cdc42、RhoA活性增加。结论 小胶质细胞对α-突触核蛋白的吞噬与LRRK2活化Rho GTPases信
中国实用神经疾病杂志 2014年23期2014-08-21
- α-突触核蛋白诱导的人神经母细胞瘤细胞凋亡与Rho GTPases信号通路的活化相关
构建α-Syn寡聚体诱导SH-SY5Y细胞凋亡模型，流式细胞技术检测SH-SY5Y细胞凋亡；免疫荧光检测SH-SY5Y细胞内α-Syn阳性包涵体；Pull down检测SH-SY5Y细胞Rac1、Cdc42、RhoA活性。结果 与对照组相比，α-Syn寡聚体诱导SH-SY5Y细胞凋亡率显著增加，细胞内α-Syn阳性包涵体数量增加，Rac1、Cdc42、RhoA活性增高。结论 α-突触核蛋白诱导的人神经母细胞瘤细胞凋亡与Rho GTPases信号通路的活化相
中国实用神经疾病杂志 2014年23期2014-08-21
- Aβ1-42寡聚体对AD大鼠大脑皮质Bcl-2、Caspase-3表达的影响
Aβ1-42寡聚体和 Aβ1-42纤维的制备 ①Aβ1-42寡聚体制备:将1 mg Aβ1-42单体溶于六氟异丙醇至浓度为4.5 mg/ml，室温孵育60 min，真空冷冻蒸发六氟异丙醇后，加入二甲基亚砜至浓度为22.5 mg/ml，超声浴处理10 min，加入含有0.2%SDS的PBS，稀释浓度至2.5 mg/ml，4℃孵育24 h后，用PBS稀释至终浓度1 mg/ml，4℃孵育2周。② Aβ1-42纤维的制备:Aβ1-42溶于PBS中，浓度为1 mg
安徽医科大学学报 2014年3期2014-07-25
- β淀粉样肽与阿尔茨海默病的研究进展
Aβ纤维丝还是寡聚体存在着争论。本综述以淀粉样蛋白级联假说为线索，阐述不同状态的Aβ的神经毒性以及它们之间的联系，对以Aβ为靶点的AD治疗有重要意义。阿尔茨海默病；β淀粉样肽；Aβ纤维丝；Aβ寡聚体rong_wang72@aliyun.com阿尔茨海默病（A lzheimer's disease，AD）是发生于老年期的最常见痴呆类型之一，属于中枢神经系统退行性疾病，典型症状是进行性认知功能障碍，包括记忆、定位、判断和推理，最终丧失说话和活动能力[1]。AD
神经损伤与功能重建 2014年5期2014-04-04
- β淀粉样蛋白在神经退行性疾病中作用研究进展
kD β淀粉样寡聚体诱发了神经细胞功能障碍。2 Aβ寡聚体的早期研究可溶性Aβ寡聚体结构包含多种聚集形态，从小的二聚体至大的由数十个Aβ单体组成的原纤维体(protofibrillar)。Aβ寡聚体成为痴呆发生及进展的可能原因，而且在富含大分子量和小分子量的Aβ寡聚体准备液中，十二聚体和二聚体的Aβ种类已成为Aβ寡聚体毒性研究的主要方面。当Aβ寡聚体包含大约12单体时,发现它和人脑提取物结构一致，并且在原代神经细胞中该Aβ寡聚体可与细胞紧密结合[8]，而大
河南大学学报（医学版） 2014年1期2014-03-30
- 一种检测帕金森患者血浆促进α-突触核蛋白寡聚体形成能力的方法
］表明，聚集成寡聚体的 α－Syn对神经元具有毒性作用。虽然直接检测PD患者脑脊液和血浆中的α－Syn寡聚体水平被误认为有助于诊断PD患者的病理变化［9－10］，然而检测PD患者体内促成α－Syn聚集的内在环境变化将从不同角度了解患者的发病机制。LB病理的广泛存在提示机体内环境的改变可能是促使α－Syn易于形成寡聚体的原因。因此检测血液促进α－Syn寡聚体形成的能力对了解PD患者的病理状况具有重要意义。以下介绍一种检测PD患者血浆促进α－Syn寡聚体形成的
首都医科大学学报 2013年6期2013-10-25
- 抑制葡糖脑苷脂酶对多巴胺神经细胞内α-突触核蛋白寡聚体形成及细胞自噬功能的影响
中形成的可溶性寡聚体中间体被认为在帕金森病(Parkinson’s disease，PD)的发病中起着重要作用［1］。然而，导致 α－Syn寡聚体在神经元内积聚的机制仍不十分清楚。近年来的研究表明，α－Syn寡聚体的形成及其在神经元内的积聚与其降解通路发生障碍有关。α－Syn的降解主要通过伴侣分子介导的自噬(chaperone mediated autophagy，CMA)进行［2］，而 CMA 对 α－Syn 的降解需要葡糖脑苷脂酶(glucocereb
首都医科大学学报 2013年6期2013-10-25
- Aβ1～42寡聚体与纤维体的制备及鉴定
至凋亡。Aβ以寡聚体或纤维体两种状态存在，这两种状态的Aβ对神经细胞功能损伤的强度不同〔6〕。一般认为，Aβ寡聚体的毒性较纤维体更强，因此，近年来关于AD发病机制的研究一般以寡聚体刺激造模为主。但由于寡聚体的稳定性较差，易向纤维体转化〔7〕，体外研究操作时间窗相对较短，所以使用寡聚体进行实验之前，对其进行鉴定就显得尤为重要，但目前关于Aβ聚集状态的鉴定方法报道较少。为此，本实验先制备不同聚集状态的 Aβ1～42，然后鉴定两种 Aβ1～42形态，进一步证实A
中国老年学杂志 2013年9期2013-09-22
- Aβ25-35寡聚体对大鼠海马神经细胞的活性影响及形态学观察
Aβ25-35寡聚体诱导海马神经元细胞损伤来探讨其活性及形态学指标的变化，筛选Aβ25-35寡聚体致伤条件下适宜的AD细胞模型。1 材料与方法1.1 材料 (1)动物:新生 Wistar大鼠(1～3d)，由佳木斯大学实验动物中心提供。(2)主要试剂:DMEM/F12干粉培养基、B27、Neurobasal-A培养基、胎牛血清、胰蛋白酶(购于美国Gibco公司);Aβ25-35、二甲基亚砜(DMSO)、四甲基偶氮唑盐(MTT)、HFIP(六氟丙醇)购于武汉博
中风与神经疾病杂志 2013年3期2013-09-20
- 海风藤对β淀粉样蛋白寡聚体激活小胶质细胞的影响
本研究采用Aβ寡聚体或（和）海风藤提取物对小胶质细胞进行干预，并测量小胶质细胞培养上清液中IL-1β和IL-6的水平，旨在探讨海风藤提取物对Aβ寡聚体激活小胶质细胞的影响。1 材料和方法1.1 主要材料和仪器 SPF级新生1～2d的Wistar大鼠（山东大学实验动物中心提供），Aβ25-35（首都医科大学宣武医院老年病研究所赠送），六氟异丙醇（HFIP），二甲基亚砜（DMSO，购自Sigma公司），PBS缓冲液、大鼠IL-1β和IL-6ELISA试剂盒（购
中国神经免疫学和神经病学杂志 2013年2期2013-09-17
- 抑制组蛋白去乙酰化酶6对帕金森病细胞模型中α-突触核蛋白寡聚体的影响☆
异常聚集形成的寡聚体在帕金森病(Parkinson's disease，PD)的发病过程中起重要作用，它使胞浆内游离的多巴胺增多，也可以诱导线粒体功能紊乱，最终导致多巴胺能神经元死亡[1]。已有研究显示，在PD果蝇模型中，组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylase 6，HDAC6)基因的敲除能加重神经元的退行性变，这可能与α-突触核蛋白寡聚体水平的升高有关[2]。因此，本实验拟制作异常蛋白质聚集的PD模型，观察抑制HDAC6对α-突触核蛋白
中国神经精神疾病杂志 2013年5期2013-09-14
- β-淀粉样多肽自聚集抑制剂的电化学筛选方法研究
有β折叠结构的寡聚体（oligomer）；接着，这些寡聚体和单体又相互聚集，快速形成纤维前体（protofibril）；然后，Aβ单体和寡聚体在已经生成的纤维前体表面和两端继续聚集，形成光滑、成熟的纤维（fibril）[4]。这些不同阶段的聚集物都具有一定的神经细胞毒性，会引起一系列的发病级联，从而造成神经元的损伤、甚至死亡，导致AD病发[5]。因此抑制Aβ自聚集，从而抑制Aβ毒性聚集物的出现，是治疗AD病的重要途径[6～7]。能够抑制Aβ自聚集的化合物被
化学传感器 2013年4期2013-03-23
- 单体、寡聚体及纤维状Aβ毒性作用的比较研究
解产生，Aβ的寡聚体和纤维化是AD患者脑内重要的病理改变，在凝聚形成Aβ纤维的过程中，具有过氧化损伤，引起炎症反应，损伤突触功能等多种神经毒性，对AD的病理进程起关键作用［2］。本实验采用单体、寡聚体及纤维化Aβ损伤大鼠海马CA1区来制备AD大鼠模型，并采用流式细胞术检测AD大鼠不同脑区细胞凋亡情况。1 材料与方法1．1 实验动物 选取雄性Wistar大鼠64只，鼠龄3－4个月，体重200－250g，大鼠随机分为Aβ组、生理盐水组及假手术对照组，每组16只
中国实验诊断学 2012年9期2012-10-09
- CD40L在阿尔茨海默病中的免疫调节作用☆
为Aβ1-42寡聚体对神经元的毒性作用最强，在介导炎症反应方面是否也是最强尚不清楚，本文通过体外建立AD的炎性反应模型，探讨CD40-CD40L信号在AD炎症反应中的作用，寻找治疗AD的可能的靶点，为后续试验提供依据。1 材料与方法1.1 细胞培养1.1.1 原代小胶质细胞培养 新生乳鼠（3 d内）购自中山大学实验动物中心 （许可证号：SCXK（粤）2009－0011）无菌条件下取出大脑皮质，放入预冷、D-Hanks液清洗2次，小心剥离脑膜和血管，0.12
中国神经精神疾病杂志 2012年5期2012-09-17
- 可溶性β淀粉样蛋白寡聚体对神经突触可塑性及学习记忆的影响＊
文主要围绕Aβ寡聚体对神经突触可塑性及对学习记忆的损害作一综述。1 Aβ寡聚体的形成1.1 Aβ的产生 淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein，APP)经由两条途径分解，正常人体内APP主要经过α/γ分泌酶代谢途径，在Aβ结构内裂解APP，产生可溶性α－APPs，具有维持突触可塑性和神经细胞存活的作用。少量APP经淀粉样蛋白形成途径裂解，通过β/γ分泌酶相继分解产生完整的Aβ片段［3］。机体内具有Aβ清除体系，主要通过脑实质内的
遵义医科大学学报 2012年6期2012-01-22
- Aβ寡聚体预处理的BV2细胞对PC12细胞损伤的影响及其机制
进而探讨由Aβ寡聚体预处理的BV2细胞对PC12细胞凋亡的影响及IL-1β在此过程中的作用，来研究小胶质细胞对神经元损伤的作用及机制。1 材料与方法1.1 材料 PC12细胞购于中国科学院北京细胞生物研究所，BV2细胞购于上海复祥生物科技有限公司。细胞转移筛网购于美国BD Falcon公司;RPMI1640培养基、DMEM培养基、胎牛血清购于 Gibco公司;Aβ1-42，六氟丙醇(HFIP)，抗 tau，tau(pS396)一抗、二抗购于Sigma公司;
中国老年学杂志 2011年11期2011-06-28
- Cry1Ah蛋白活性片段在溶液中的单体和寡聚体杀虫活性分析*
结合的亲和力,寡聚体与次级受体结合后插入细胞膜,然后在中肠细胞膜上形成孔洞,引起渗透压失衡,导致中肠细胞破裂,最终导致昆虫死亡[2,5-6]。Cry蛋白在昆虫体内形成正确的寡聚体是能够插入细胞膜的前提条件,但离体情况下,自发形成的寡聚体可能影响Cry毒素与初级受体和次级受体的结合,从而影响成孔能力,最终影响活性。cry1Ah1 基因(专利号：ZL200410009918.9)是从天然Bt菌株BT8中分离克隆的新型杀虫晶体蛋白基因,该基因全长 3 549 b
植物保护 2011年3期2011-06-12
- PGN激活BV2内吞Aβ寡聚体后对PC12的影响
Aβ)1～42寡聚体处理BV2细胞后通过筛网与PC12细胞(代替神经元)共育，筛网允许二者分泌的活性物质自由通过，使细胞间彼此影响，但细胞不能通过，应用此模型，探讨PGN激活BV2内吞Aβ1～42寡聚体后对PC12的影响。1 材料和方法1.1 材料1)BV2与PC12细胞株:购自中国科学院细胞生物研究所，细胞株来源于德国DSMZ(German collection of microorganisms and cell cultures)，分别采集于小鼠脑小
首都医科大学学报 2011年4期2011-04-28
- A β25～35寡聚体对原代培养海马神经元突触的损伤作用
可溶性 A β寡聚体的神经毒性作用日益被重视,突触功能障碍及缺失是与认知功能下降关系最为密切的病理变化。突触可塑性被认为是学习和记忆的生理基础,与生长相关蛋白43(growth-associated protein43,GAP-43)的表达相关,国际上将 GAP-43列为研究神经生长发育和损伤修复等神经可塑性的首选分子探针。本研究用 A β25～35寡聚体作用于原代培养的海马神经元 ,观察寡聚体 A β25～35对 GAP-43表达的影响 ,以期对 AD早
黑龙江医药科学 2010年3期2010-04-18