标板
- 随机质控加样方法在献血者血液ELISA 法检测中的应用与评价
员通常多会采用酶标板固定孔位来做外部质控——在每块酶标板第1 竖排(A1—H1)固定孔位设置空白、阴性、阳性对照孔与外部阴性、阳性、质控孔——但其存在的加样时间差多少对检测结果造成影响[1-2]，也难以做到对酶标板每个孔位的有效监测，更难以发现影响检测结果的边缘效应[3]，可能室内质控显示在控，但实际结果已有偏差，特别是处于临界值附近的结果可能是假阳性或假阴性。 为此，近年来国家在推进医学实验室质量和能力认可时，明确要求免疫学检验的质控物的位置不能固定，而
中国输血杂志 2023年9期2023-11-30
- 酶联免疫吸附法检测猪肉中喹诺酮类药物步骤及注意事项
类药物和试剂盒酶标板上固定的抗原进行特异性竞争抗体，加入酶标记物，再加入底物，底物受到催化显色，然后根据显色的深浅莱判断样品中奎诺酮类药物的含量，显色越深含量越少，反之显色越浅含量则越多。笔者从事化验室残留检验检测多年，在实际操作中积累了一定的惭怍经验，下面将以检测猪肉中喹诺酮类药物为例简述检验检测相关步骤及其注意事项。1 样品的前处理及注意事项使用试剂盒前，仔细阅读说明书(本文使用的是北京维德维康生物技术有限公司生产的喹诺酮类酶联免疫试剂盒Ⅳ型96孔）。
新农业 2023年3期2023-04-05
- 纳米结构色油漆车身修补工艺研究
，各保留1件作为标板，其余制件采用低温修补漆进行局部返修，使用色差仪检测返修制件与标板之间的色差，并目视修补区域的色差变化，结果见表1和表2。表1 纳米结构色粉添加量对返修层色差的影响Table 1 Effect of dosage of multilayer-nanostructured pigment on color difference between repainted coating and original coating表2 纳米结构色粉添
电镀与涂饰 2023年4期2023-03-14
- 自动化液体处理工作站在脊髓灰质炎疫苗D抗原含量检测中的应用
主要试剂及仪器酶标板购自美国Costar公司(批号：01721001)，96孔稀释板购自德国Eppendorf公司(批号：J191605J)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒包被抗体和捕获抗体由赛诺菲巴斯德公司提供，过氧化物酶标记的羊抗兔IgG抗体购自荷兰Nordic MUbio公司(批号：16461)，底物ABTS购自美国Millipore公司(批号：3593731)，终止液购自索莱宝公司(批号：20211202)。酶标仪(型号：Infinite M200 P
山西医科大学学报 2022年11期2023-01-15
- 气体腐蚀测试对安防用摄像头灰阶值的影响
， 使用了透射式标板法和反射式标板法两种测试方法进行了灰阶值分析。且对两种测试结果进行了对比研究。1 测试流程确定本文主要不同光照条件下，气体腐蚀测试前后摄像系统灰阶值的变化。灰阶测试采用透射式和反射式两种标板，并评估了两种方法的结果自洽性。1.1 灰阶测试灰阶为光学成像系统对不同光谱特性或等效光谱特性灰度的分辨能力，是光学成像系统成像质量的重要指标。因其包含信息较少，相比颜色参数而言更容易分析。该参数是最早被用于成像质量分析的参数之一。灰阶测试需在暗室中
环境技术 2022年5期2022-11-25
- 基于机器视觉的零件尺寸测量及分析*
作为本次实验用的标板；以黑色不反光幕布作为拍摄背景，并通过垫片将蓝色标板放置于与被拍摄目标表面同一平面的位置；以LED白色光源对目标连接块零件与蓝色标板进行低角度照射，尽可能消除外界光线的干扰。做好以上图像采集系统的准备工作，方可采集到图像质量较好的实验图像，如图1所示。图1 采集的连接块与标板图像课题组选用美国M a t h Wo r k s公司出品的MATLAB软件作为机器视觉测量系统的图像处理及算法设计软件。该软件自研发成功至今已有近50年的历史，多
南方农机 2022年19期2022-10-03
- 基于“双抗体夹心法”全自动酶免工作站检测方法的建立
可完成1-2块酶标板，即10-20批次的实验任务，耗时较长，效率较低。本文以全自动酶免工作站为依托设计了全自动化的检测方法，实现了除解吸附步骤以外的实验全过程的自动化操作。在此基础上，通过人机比对实验确认了全自动方法的可行性，并考察了诸多影响因素，最终建立了一种准确、高效，精密度良好的全自动检测方法以替代手工操作，极大地提高了实验效率，避免了手工操作的人员差异，更好地实现了双抗体夹心法的标准化操作。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 抗原样本：灭活疫苗。
首都食品与医药 2022年14期2022-07-21
- 基于反射式成像光路的全波段蛋白检测仪的研制
，该单色光进入酶标板微孔板中的待测样本中，由于待测样本为溶液，会吸收一部分单色光，而其他的光会透过待检测溶液，经过不同浓度微孔板中的溶液后，光电检测器将不同微孔板中的不同强度的光信号进行光电转换，通过上位机进行数据处理和计算得到实验结果。酶标仪通过衍射光栅或滤光片选择不同波长的光与待测溶液的吸光度相对应的某一波长的光，使用由电机控制的光电探测元件来逐一扫描酶标板上的微孔[8-9]。传统酶标仪光学系统笨重且复杂，加上机器内部的机电转换装置，导致仪器的体积大，
光学仪器 2022年2期2022-05-08
- 小反刍兽疫免疫抗体检测与分析
小反刍兽疫抗原酶标板 2 块（96 孔/块）3.3.2 25 倍PBST 浓缩液1 瓶（60mL/瓶 ）3.3.3 小反刍兽疫阴性对照血清1 管（500uL/管）3.3.4 小反刍兽疫阳性对照血清1 管（500uL/管）3.3.5 单克隆抗体工作液1 瓶 （12mL/瓶）3.3.6 兔抗鼠酶标工作液1 瓶（12mL/瓶）3.3.7 底物溶液（TMB）1 瓶（12mL/瓶）3.3.8 终止液 1 瓶 （12mL/瓶）3.3.9 封板膜2 张3.3.10 说明
今日畜牧兽医 2022年3期2022-04-09
- 陇西县牛巴贝斯虫病的流行病学调查
6孔ELISA酶标板中，每孔加样100 μl，放置4℃条件下13～15 h。1.2.2 封闭 甩掉酶标板中的包被液，将酶标板至于ELISA专用洗板机中，用含有0.05%Tween-20的PBST洗涤液洗涤3次后，在干净吸水纸上拍干板子，用含5%脱脂乳的封闭液进行封闭，用排枪每孔加200 μl，放置在37℃条件下封闭1 h。1.2.3 加血清 取出酶标板，甩掉酶标板中的封闭液，同1.2.2的方法洗涤后，用PBST将188份血清按1∶20稀释，同时阴阳性对照血
甘肃畜牧兽医 2021年5期2021-06-03
- 双抗体夹心ELISA检测花生致敏蛋白Ara h 2的方法建立
用于ELISA酶标板的包被。将mAb用CBS稀释，加入100 μL/孔酶标板，4 ℃条件下包被过夜；洗板，即用PBST冲洗酶标板4次并拍干（下同），拍干后将封闭液加入200 μL/孔酶标板，37 ℃条件下封闭1 h；洗板并将包被好的酶标板在4 ℃条件下密封保存备用。进行检测时，将样液加入100 μL/孔酶标板，同时设置阴性孔（加入PBS 100 μL），37 ℃条件下孵育1 h后洗板；利用Ara h 2 兔源多抗（pAb）作为检测抗体，将pAb用封闭液稀释
食品工业 2021年3期2021-04-01
- 基于酶联适体竞争法检测谷物制品中真菌毒素的研究
mer被固定到酶标板1上；DNA1为标记有辣根过氧化物酶(HRP)的适体部分互补链；DNA2是与DNA1完全互补的单链，通过生物素和亲和素固定到酶标板2上。当样品中不含ZEA时，DNA1与aptamer部分互补后固定在酶标板1上，酶标板2中加入TMB后不显色；当样品中含有ZEA时，由于靶物与适体特异性结合，使得DNA1解链处于游离状态。移取含DNA1的溶液至酶标板2中，标记HRP的DNA1通过双链互补配对原则被酶标板2中的DNA2捕获，催化TMB底物显蓝色
河南工业大学学报（自然科学版） 2021年1期2021-03-20
- 浅议贴标签辅助工具对电力公司的应用
签运转过程中与离标板接触后，在离标板作用下，把标签和承标带进行了分离。这个过程中的核心组件为离标板，离标板设置的曲线、薄厚会极大影响的离标的效果和贴标签辅助工作质量。经过多次试验发现，如果离标板设置的弯曲弧度变大时，离标的效率会极大提升，不过，存在的较大问题是与粘贴受力组件配合度会出现误差，优势回到导致空贴，也就是标签已经离带，但是粘贴受力件没有更得上离标的速度，导致空贴。当减小离标板的卷曲弧度时，离标速度会变慢，贴标稳定性增加，效率有所下降，因此，获取最
科学与信息化 2021年5期2021-03-19
- 全自动酶免分析仪和酶标板快速孵育器联合进行ELISA检测操作其时间流程优化的实用性探讨
样本检测效率。酶标板快速孵育器因能缩短孵育时间，提高工作效率，在临床检验中的应用越来越多，但快速孵育法仍需要人工加样，增加了人工参与造成的误差。本实验通过利用全自动酶免分析仪联合酶标板快速孵育器检测乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg），探讨优化ELISA 操作流程在临床检验中的实用性。1 材料与方法1.1 研究对象 收集2018年1月～2019年9月经化学发光法定量检测HBsAg 阳性高值（≥250 IU/ml
现代检验医学杂志 2020年6期2020-12-24
- 铜冶炼工程转炉系统安装与难点分析
清理、测量、中心标板埋设。基础验收检查合格后，应进行安装前的清理及测量，确定中心标板的埋设位置，然后根据中心标板的埋设图埋设中心标板，中心标板埋设符合要求后进行二次测量，并在每个中心标板上刻出永久性中心线，且在中心标板上加盖护套，以保护划线不受破坏。（二）转炉的安装过程在进行转炉安装的过程中，我们要首先掌握转炉的安装顺序，即底座安装-托轮安装-驱动装置就位-简体临时就位-滚圈与简体组装-简体就位-驱动装置安装调整-辅件安装。随后，我们需要进行底座安装。由于
魅力中国 2020年5期2020-12-08
- 犬DEA1.1血型抗体间接ELISA检测方法的建立
96孔聚苯乙烯酶标板或8孔酶标板条为Breiner bio-one公司产品；脱脂奶粉、BSA、TMB，均购自北京Solarbio公司。2 方法2.1 犬DEA1.1血型鉴定 按照QuickVet®/RapidVet Canine DEA1.1 Blood Typing Test说明书对犬DEA1.1血型进行检测。检测原理是当红细胞细胞膜上含有DEA1.1抗原时，会和鉴定卡上的DEA1.1单克隆抗体相结合而产生凝集反应，被检测的血样为DEA1.1阳性，不产生
中国兽医杂志 2020年6期2020-10-23
- 花生致敏蛋白Ara h 1双抗体夹心ELISA法的建立
为捕获抗体包被酶标板，首先用CBS稀释mAb，100 μL/孔加入酶标板，在4 ℃条件下过夜包被，用PBST洗板4次后拍干，再向酶标板加入封闭液200 μL/孔，在37 ℃条件下封闭1 h，洗板(同上)后备用。检测时首先将样液100 μL/孔加入酶标板，并设置阴性孔(PBS 100 μL/孔加入)，在37 ℃条件下孵育1 h后洗板；将Ara h 1 兔源pAb作为检测抗体，用封闭液稀释pAb，100 μL/孔加入酶标板，在37 ℃条件下孵育30 min后洗
食品与机械 2020年7期2020-08-07
- 小反刍兽疫竞争、间接和阻断ELISA免疫抗体检测方法的对比和应用
；②对照，每块酶标板上均应设标准阴性血清、阳性血清、单克隆抗体及空白对照孔，其中标准阴性血清应设2孔，标准阳性血清应设2孔，每孔加入相应血清50 μL，空白对照设2孔，每孔加入100 μL血清稀释液，单克隆抗体对照设4孔，每孔加入50 μL血清稀释液；③加单抗，将单克隆抗体用血清稀释液进行1∶100倍稀释，除空白对照孔外其他各孔每孔加50 μL稀释后的单克隆抗体。小反刍兽疫竞争ELISA抗体检测样品布板情况见图1。2.1.2 孵育完成加样后，将酶标板置于微
国外畜牧学(猪与禽) 2020年5期2020-06-07
- 葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征(SSSS)快速诊断ELISA方法的初步探索*
，将抗体偶联在酶标板上，利用特异性的ETA抗体，体外检测ETA抗原，进行抗原检测的ELISA方法的初步探索。本项目参考乙肝病毒表面抗原诊断试剂盒制备的研究[3]以及布鲁氏菌VirB12蛋白纯化及其抗体ELISA方法的初步建立[4]，通过建立合理的抗体偶联固定化方法，初步建立了检测SSSS患者ETA的ELISA方法。1 材料与方法1.1材料1.1.1临床血清样品血清来源于赣南医学院第一附属医院皮肤科2017年-2018年采集的SSSS患者血清、内毒素阳性患者
赣南医学院学报 2019年10期2019-11-28
- 基于光学相机的植物表型测量系统与时序生长模型研究
于摆放植株及彩色标板；相机搭载平台用于放置光学相机和电机驱动系统，实现相机相对拟南芥植株的圆周运动，从而实现在多个角度对植株进行拍摄；图像采集系统用于实现相机运动过程的自动拍摄、图像保存等功能；光源及背景模块包括照明灯组以及覆盖平台各面的黑色绒布，用于确保拍摄环境的稳定可靠，尽可能降低噪声干扰。图1 植物点云获取平台实物图Fig.1 Diagram of platform for acquiring 3D point cloud of plant1.图像采
农业机械学报 2019年10期2019-11-04
- 口蹄疫抗体检测试验的试验设计
我们实验室每块酶标板可做80份血样，每个试剂盒则可做400份样本。1 实验材料与方法1.1 以中国农业科学院兰州兽医研究所研制的改进型口蹄病毒O型液相阻断ELISA疫抗体检测试剂盒是为例。可检测50—100份血样。以牛羊血样检测为例。按照试剂盒说明书的样品布局图，有两种布局图，可检测样品50份、100份。1.2 这种类型的试验布局是为了检测畜群的抗体效价水平能否达到保护水平。1.3 此试验每份血样的检测成本为32-16元。2 改进试验方法，重新设计试验步骤
中兽医学杂志 2019年3期2019-10-21
- FAME全自动酶免分析仪吐板后不同处理方式的结果探讨
验中断，从而使酶标板被吐出[1-3]，即发生吐板现象。最终的实验结果与不同的吐板原因没有直接关系，而实验中断后剩余步骤的处理方式会直接影响实验结果。正常情况下，操作人员会把未完成的实验按照未完成的程序，继续插入FAME系统的工作计划表，继续使用FAME完成实验，所得结果优于手工操作[3]。在实际工作中，往往会由于FAME内的酶标板比较多、洗板时间靠近等原因，使得后插入FAME系统的酶标板由于时间上错不开，仪器不允许立刻插入剩余实验程序，等待时间较长。由于孵
中国医疗设备 2019年5期2019-06-17
- 机组轴线检测方案探讨
位置钻孔埋设中心标板。所有标板埋设完以后，先用黑色记号笔在每个标板中心定点，作为临时的中心标志点。图2 机组轴线与定位点关系示意图（2）布设控制网。因为机组轴线上的点之间彼此不通视，我们采用了通过布设小型控制网，联测同一机组上的轴线点与标板上的中心点，求出点之间的相对关系，展点在CAD图上。（3）精确定位检修标板中心点。通过测量的机组轴线点坐标拟合出机组的轴线L1，然后将拟合的机组轴线向东平移一定距离，得到需要投点的中心标板点所在的直线L2，根据所测临时中
中国设备工程 2019年8期2019-05-17
- ELISA 在基层兽医实验室遇到的问题及解决方法
的效果。孵育时酶标板没有利用封板膜密封，致使在孵育过程中酶标孔内液体逐步蒸发，影响检测结果，且干燥后的抗原抗体附着于酶标孔内壁，很难清洗掉，致使底物显色后颜色过深。大批量样品检测时一般将多块酶标板叠放孵育，叠放过多造成中间的酶标板孵育温度不够，而多块酶标板叠放可使ELISA 反应出现边缘效应，造成假阳性或假阴性的检测结果。2.5 洗板方法不当洗板时加入洗涤液过多，孔与孔之间的液体溢出，造成相互交叉污染。洗板时加入洗涤液过少，洗涤不彻底，造成假阳性或假阴性结
中国畜禽种业 2019年12期2019-01-06
- 一种酶标板培养孔颜色特征提取的图像检测方法
行分析，完成对酶标板孔区域定位。根据孔中微生物生长时的颜色变化进行筛选的要求，该研究主要有两个难点。其一是酶标板位置矫正进行孔位的准确定位；其二是摄像头目标图像采集时，酶标板培养孔会发生变形。在进行孔位颜色特征提取时，要选取合适的孔区域。颜色提取算法流程如图1所示。图1 颜色提取算法流程图2 酶标板目标区域的识别根据图1，首先要采集酶标板图像。但通过摄像头采集到的原始图像区域范围比较大，无法准确计算并定位酶标板每个培养孔的孔位，因此需要识别原图片中的酶标板
自动化仪表 2018年12期2018-12-28
- ELISA两种包被方法在牛乳氯霉素测定中的比较
基化或醛基化的酶标板通过化学键联接达到包被目的[7-10]，过程较为简单，而且可以排除载体蛋白引起交叉反应的风险，目前这种包被方式在文献报导中相对较少。本研究将氯霉素半抗原采用上述两种不同方式包被酶标板，利用间接ELISA测定鲜牛乳中氯霉素质量浓度，并对两种不同包被方式的测定结果进行分析比较，从而对氯霉素半抗原包被方式在实际样品测定中的效果进行评价。1 实验1.1 材料与设备卵清蛋白OVA，氯霉素，氨基己酸，抗氯霉素氯抗体，各浓度氯霉素标准溶液，酶标记物，
中国乳品工业 2018年10期2018-11-16
- 应用ELISA法检测HPRRS抗体的几个影响因素分析
1-5），每份酶标板做12份样品，阴阳性对照做双份。酶标板1按照如下步骤操作：（1）按照试剂盒说明书将所有试剂回温至室温后混匀，配制洗液和样本稀释液。（2）对样本1-12用样本稀释液稀释后加入酶标板1的反应孔，阴阳性对照同时加入；盖膜，37℃温育60 min。（3）去膜洗板3次，拍干。（4）加酶标抗体。（5）盖膜，37℃温育 60 min。（6）去膜洗板 3 次，拍干。（7）加入底物溶液，轻摇后在20~25℃暗处作用10 min。（8）加入终止液，酶标仪（
福建畜牧兽医 2018年3期2018-06-14
- JJG861-2007《酶标分析仪》检定规程解读和探析
的功能，自动对酶标板进行清洗，清洗干净与否严重影响到检测结果。判断酶标板是否清洗干净，通常用每孔清洗液残留量来表示，而规程中对此没有做任何规定。(二)计量性能要求1.关于吸光度指标对照JJG861-1994酶标分析仪旧规程，笔者发现:新规程删去了对“线性误差、换档误差、测试速度和波长透光特性”等检定项目的要求，增加了对“波长重复性、通道差异”等检定项目的要求，此外，对吸光度单位作了重大修改：旧规程吸光度的单位用“A”表述，而新规程则采用吸光度无单位的表述。
福建质量管理 2018年18期2018-04-02
- 光动力抗微生物化学疗法对解脲脲原体体外活性的影响
96孔聚苯乙烯酶标板进行，具体操作见参考文献[6]。将菌液增菌或稀释至CCU为104～105，于-70 ℃保存以备用。1.2.2解脲脲原体与光敏剂孵育菌株的孵育于96孔聚苯乙烯酶标板(12行标记为1～12，8列标记为A～H，详见图1)中进行。首先将液体培养基加入预先准备好的96孔酶标板第1、3、5、7、10行的第1～8孔，每孔90 μL。从第2孔起，每孔加入90 μL 5 mmol/L 甲苯胺蓝工作液，充分均匀后吸取90 μL至第3孔，均匀后再从第3孔吸取
微生物与感染 2018年1期2018-02-28
- 用酶联免疫试剂盒检测猪肉中的β-激动剂类药物
多的抗体就会与酶标板微孔上的抗原结合而被固定在酶标板上，通过酶催化底物显色反应，颜色为深蓝色；样品中β-激动剂类药物含量多时，颜色为浅蓝色。1 实验材料1.1 样品前处理在我县辖区内屠宰厂随机抽取代表性样品（猪肉）40批次，每个样品抽取猪肉200g，精确秤取1±0.01g均质后的样品于50mL离心管中；加入3mL 0.5%三氯乙酸高速涡动1min，4000g以上离心5min；取1mL中间层清液于新的离心管中；加40μL 0.5M 氢氧化钠溶液，涡动10s混
畜牧兽医科技信息 2018年4期2018-02-17
- 用酶联免疫试剂盒检测鸡肉中的金刚烷胺
中的金刚烷胺与酶标板上固定的金刚烷胺特异性竞争抗体，当鸡肉中不含金刚烷胺或金刚烷胺含量很少时，更多的抗体就会与酶标板上的金刚烷胺结合，结合物被固定在酶标板上，加入酶标记物以后，底物被催化显色，根据显色的深浅来判断鸡肉中金刚烷胺的含量。显色越深，含量越少，显色越浅，含量越多。3 工作液准备3.1 样品提取液 1份浓缩样品提取液加19份去离子水。3.2 样品稀释液 1份浓缩样品稀释液加9份去离子水。3.3 洗涤工作液 1份浓缩洗涤液加19份去离子水。3.4 酶
畜牧兽医科技信息 2018年3期2018-02-14
- 骆驼天然单域重链抗体库的构建与鉴定
μL/孔包被于酶标板中，4℃过夜。次日，弃掉板中包被液，用TBST洗涤4次，加入封阻缓冲液，200 μL/孔，37℃封闭2 h。倒掉封闭液，用TBST(TBS+1 mL/L Tween-20)，快速洗涤10次。然后在干净的纸巾上甩拍，以除去洗涤液，加入噬菌体，100 μL/孔，37℃孵育1 h。弃去未结合的噬菌体，用TBST洗涤10次，再用TBS洗5次。加入缓冲洗脱液，100 μL/孔，把结合的噬菌体洗脱到洗脱液中，温和摇动8 min。把洗脱液转移到微量离
动物医学进展 2018年1期2018-02-10
- 酶联免疫试剂盒检测鸡肉呋喃唑酮代谢物
物经衍生化后与酶标板上固定的抗原特异性竞争抗体，当样品中呋喃唑酮代谢物含量少时，更多的抗体就会与酶标板上的抗原结合而被固定在酶标板上，加入酶标记物，催化底物显色，颜色为深蓝色；反之，含量多时，颜色为浅蓝色。1 实验材料准备1.1 样品前处理在建平县屠宰厂随机抽取代表性样品 （鸡肉）40批次，每个样品取鸡腿部肌肉，精确秤取1±0.01g，均质后的样品于50ml离心管中；依次加入4ml去离子水、0.5ml1M盐酸和80μl50mM邻硝基苯甲醛，充分涡动1min
中国畜禽种业 2018年4期2018-01-18
- FAME全自动酶免分析系统日常维护及常见故障与排除
标本处理不好，酶标板有极小的血凝块或经孵育后有纤维蛋白析出或洗涤液中有结晶都会引起针头堵塞，造成“吐板”现象。排除方法：拆下洗板机头和通道橡皮塞，用粗细针头分别疏通洗板针头，并用毛刷反复洗刷通道，擦干后安上橡皮塞重新装入仪器中。预防措施：每次进板前仔细检查酶标板有无纤维蛋白、血凝块、血细胞或杂物，以免堵塞针头；每周把洗板头拆下冲洗疏通针头，用60℃的热蒸馏水进行周维护；洗液也要用热的去离子水配制，提高洗液的温度，使洗液内的结晶充分溶解，防止洗液堵塞洗板针头
特别健康·下半月 2017年9期2017-09-21
- 高灵敏小鼠免疫球蛋白IgG的ELISA检测方法的构建
1)加入96孔酶标板中，每孔100 μL，4 ℃包被过夜；利用清洗液(含0.1%吐温20的PBS)清洗酶标板3次后，将封闭液(含1%BSA的PBS)加入酶标板中，37 ℃封闭2 h；倒去封闭液，加入封闭液稀释的系列浓度小鼠IgG(0.001～1 000 ng·mL-1)，37 ℃反应1 h；利用清洗液清洗酶标板3次后，加入抗体稀释液(含0.1%吐温20和1%BSA的PBS)稀释的生物素标记的山羊抗小鼠免疫球蛋白IgG的F(ab’)2段抗体(1 μg·mL-
河北北方学院学报（自然科学版） 2017年8期2017-08-07
- 用酶联免疫试剂盒检测鸡肉中的四环素类抗生素
四环素类药物与酶标板上固定的抗原特异性竞争抗体，当样品中四环素类药物含量少时，更多的抗体就会与酶标板上的抗原结合而被固定在酶标板上，加入酶标记物，催化底物显色，颜色为深蓝色；反之，含量多时，颜色为浅蓝色。一、实验材料样品前处理：随机抽取代表性样品（鸡肉）40批次，每个样品取鸡腿部肌肉，精确秤取1±0.01g，均质后的样品于50mL离心管中，充分涡动1min，4000g以上离心10min，立即取50uL上清液进行检测。试剂盒：四环素类酶联免疫试剂盒（96孔）
农家科技下旬刊 2017年1期2017-04-08
- 欧洲禽源H1N1亚型猪流感病毒抗体间接ELISA检测方法的建立
蛋白包被96孔酶标板，检测OD450值的批内变异系数为1.97%～7.85%，批间变异系数为1.94%～6.93%。总之，本研究建立的禽源H1N1亚型猪流感病毒抗体间接ELISA方法，具有敏感性较高、特异性强、重复性好的特点，为猪流感抗体检测提供了一种准确、快捷、简便、有效的技术手段，可用于禽源H1N1亚型猪流感抗体检测和流行病学调查。欧洲禽源H1N1猪流感病毒；重组蛋白；间接ELISA；特异性猪流感病毒（Swine influenza virus，SIV
中国动物传染病学报 2016年2期2016-12-01
- 酶联免疫吸附实验中全自动立式洗板法应用效果评价
自动立式洗板法酶标板微孔中液体残留量均值为0.0087±0.0002μL，＜0.01μL；全自动立式洗板机使用6个月（每周至少使用2次），96个针头未出现堵孔现象，洗板机6个月前后的直线水柱长度分别为6.53±0.27cm、6.58±0.31cm，两组数据差异无统计学意义；阳性质控品和阴性质控品交叉检测，及阳性混合血清和阴性混合血清交叉检测未出现交叉污染现象。120例临床样本利用三种洗板法的定性检测结果一致，其中30例弱阳性样本，均有1例假阴性且来源于同一
标记免疫分析与临床 2016年9期2016-11-21
- 应用快速孵育法优化酶联免疫吸附实验过程探讨——以乙型肝炎病毒表面抗原检测为例
性。结果 使用酶标板孵育器将孵育时间缩短至原来的1/2、1/3时，ELISA试剂盒说明书推荐方法、快速孵育法与化学发光法检测结果符合率100%；当孵育时间缩短至原来时间的1/4时，两种方法与化学发光法阴性、高值和中值样本检测结果符合率100%；临界值样本检测时，ELISA试剂盒说明书推荐方法与化学发光法检测结果符合率100%，快速孵育法与化学发光法结果6例不一致，检测结果符合率80%。结论 通过实验证实，酶联免疫吸附实验时，快速孵育法可满足临床检测，可将孵
标记免疫分析与临床 2016年9期2016-11-21
- 2013～2015年泰州地区猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体监测与分析
好的样品加入到酶标板45μl样品稀释液中，混匀；同时做2份阳性对照和2份阴性对照，每孔50μl添加到酶标板上；封板，37 ℃作用1 h；弃去酶标板中的溶液，酶标板每孔加300 μl洗涤液洗涤3次；用吸水纸拍干；向洗涤好的酶标板每孔加50 μl酶标记物HRPO抗猪的单克隆抗体；封板，37 ℃作用1 h；弃去酶标板中的溶液，酶标板每孔加300 μl洗涤液再洗涤3次；用吸水纸拍干；向洗涤好的酶标板每孔加50 μl底物TMB溶液，室温20℃～25℃避光作用10 m
中国畜牧兽医文摘 2016年9期2016-10-28
- 小反刍兽疫阻断ELISA抗体检测技术要点及注意事项
清的麦道管按照酶标板设计的布局摆放在板子上。如果没有板子可以按照一定的规律把血样摆在操作台上，比如每10份为1组，或者前2份为1组，剩下的每组放8份。3.2酶标板下面放置数字垫板。可以在白纸上按照酶标板各孔的位置画出96个孔的排列顺序和编号，然后将酶标板放在白纸上，使各孔与纸上的数字一一对应，这样每个孔的编号清晰可见，加样的时候哪个血样加到哪个孔一目了然。与第一条配合应用工作效率会明显提升。3.3洗板后的残留气泡巧处理。酶标板用洗液清洗过后在滤纸上拍干，然
现代农村科技 2016年17期2016-10-24
- 口蹄疫O型液相阻断ELISA免疫抗体检测方法的应用
纸；96孔平底酶标板；96孔U形底聚丙烯微量抗原抗体反应板；检测试剂盒系采用中国农科院兰州兽医研究所口蹄疫O型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒。1.3 实验步骤1.3.1 牛群免疫 应用口蹄疫O型灭活疫苗按照产品说明书规定免疫剂量及免疫方法对公司下属牧场牛群接种免疫，于2免21 d后采血进行免疫效果检测。1.3.2 试剂准备 包被缓冲液（pH9.6）、磷酸盐-吐温缓冲液（PBST）、PBST稀释液、底物溶液按试剂盒说明书进行配制。1.3.3 包被 pH9.
浙江畜牧兽医 2015年1期2015-11-05
- 全自动酶免分析仪校验方法的建立
；带板条的干净酶标板：用于盛放加样时的纯水；干净密封性容器：用于盛装纯化水；无粉手套：实验过程中需要全程戴手套，以防手上的汗渍、灰尘等对实验结果的影响。2.1.2孵育系统PT1000的温度计：测量孵育系统的温度变化，需要经过国家质检部门的校验，并提供校验报告。2.1.3洗板系统万分之一天平：用于测定洗板前酶标板的质量和洗板后酶标板的质量；带板条的干净酶标板：用于全自动酶免分析仪进行洗板过程；无粉手套：实验过程中需要全程戴手套，以防手上的汗渍、灰尘等对称量结
质量安全与检验检测 2015年4期2015-10-31
- 回转式贴标机取标工位凸轮曲线改进设计*
环节之一。在以取标板和标签无相对滑动为条件建立的滚柱运动轨迹方程基础上，选用组合摆线运动规律设计了新型凸轮曲线。结果表明该凸轮曲线能使滚柱位移误差和取标工位所占用的凸轮转角均较小；以取标板摆动过程中切点的最小纵坐标值作为标盒相对转盘回转中心的安装距离，可以使取标板与标签保持相切，从而为回转式贴标机提供了一种新型取标工位凸轮曲线。回转式贴标机；取标装置；取标工位；凸轮曲线0 引言回转式贴标机是用黏结剂将标签贴于圆柱形包装件指定位置上的一种贴标机械［1］，具有
机电工程技术 2015年12期2015-10-14
- 回转式贴标机夹标工位取标板运动分析与优化
转鼓接触，完成取标板上胶、取标，并用夹指将标签夹于夹标转鼓，随后送至贴标工位。当标签和待贴标包装件接触时标签粘到待贴标包装件指定位置上，经过理标毛刷抚平标签后通过出瓶螺杆输出，完成整个贴标工序。取标装置是回转式贴标机的关键部件，决定了贴标机的工作效率和贴标质量［1－3］。它由取标板、胶辊、标盒、夹标转鼓、转盘、扇形齿轮、圆柱齿轮、槽凸轮、滚柱等组成。在凸轮—齿轮组合机构的控制下，取标板既随转盘公转又绕滚柱自转，完成上胶、取标和夹标动作。夹标工位取标板的运动
机电信息 2015年36期2015-04-13
- 血清EPO水平测定对血液病患者诊断的临床意义
同。最后将整个酶标板所有的内孔中存在的液体进行甩干，之后在使用的酶标板的每个孔中都对其填入EPO的测定的稀释液，并且要求每个孔内的加入量设定为100微升，然后在酶标板的每个孔之内都进行加入对照液或者是标本液100微升计量和标准液100微升计量，然后需要对酶标板进行严密的封板，把密封好的酶标板放置在一个严格恒温的环境下来进行科学的孵育，要求孵育的时间准确到两小时，然后使用再次加入洗涤液来对整个酶标板的各个孔内进行第四次的洗涤并且一定要甩干，再于酶标板的每个孔
大家健康(学术版) 2015年9期2015-03-27
- 用ELISA方法检测猪瘟病毒抗体水平的操作步骤及注意事项
称以及每次使用酶标板的数量。3.2 操作前将试剂盒组分恢复室温18～26℃2h。3.3 待检血清混匀，试剂盒内组分试剂轻轻涡旋、旋转混匀。3.4 填写实验室操作规范记录表。例如：操作人：某某某，操作时间：2015-11-11，试剂盒种类：猪瘟病毒抗体检测试剂盒。批号：D191，效期：2016-5-31。3.5 EP管架上留出四孔，余下待检的血清按照顺序竖排摆放。剩余的酶标板卸下，封闭放置与干燥剂一起放入原袋子中。按照血清顺序，将猪血样标号竖排填写到记录中。
畜牧兽医科技信息 2015年12期2015-02-22
- 用酶联免疫试剂盒检测猪尿中的沙丁胺醇
事项（1）取出酶标板条固定在酶标板架上，做双孔平行，记录标准品和样品的位置。检测样品数量较少时，将剩余的板条立即用自封袋密封后放置于冰箱冷藏区。整块板条最好一次用完，剩余板条有时因各种原因准确度降低。（2）在标准品孔内依次加入标准品工作液（0、0.1、0.3、 0.9、2.7、8.1ppb）20μl，在样品孔内依次加入阳性对照品20μl，阴性对照品20μl，其他待测样品（猪尿）20μl。每次加完两个平行孔后都要更换枪头，防止交叉污染。（3）每孔加入80μl
中国畜牧兽医文摘 2015年1期2015-01-24
- 浦城县乳牛A型口蹄疫免疫效果检测分析报告
至工作浓度，在酶标板上加50μL孔，振荡，封板或置湿盒内，室温过夜。2）抗原抗体（对照血清及待检血清）反应：根据不同的需要，选择图1-图2中(试剂盒说明书)的一种布局在抗原抗体反应板上操作，图1抗体滴度测定（定量）检测10份样品布局图；图2为抗体滴度测定（定量）检测20份样品布局图。稀释血清：以图1为例操作，在96孔血清/病毒抗原反应板上，以50μL孔的量用PBST两倍连续稀释被检血清，从1∶4 至 1∶512。 同时稀释阳性对照血清， 从 1∶16～1∶
福建畜牧兽医 2014年6期2014-12-18
- 在工业生产中特殊情况下的测量方法
原有炉壳周围四个标板所组成的两条正交的直线为测量依据，根据设计图纸提供标板所在两条直线距待建基础的尺寸为已知条件来进行指导新建基础的土建施工。现状分析：如图1所示，新建基础以原有标板所在的直线为测量依据，设计图纸只标明了标板所在直线的一个方向坐标值。原有四个标板中间存在炉壳残骸及其他原有基础导致相互间均无法通视。在两个标板间无法采用自由设站、前方交会等测量方法进行常规测量。图1 新建基础与原设备基础的坐标值1 非常规测量方案1.1 布设测量控制网根据对现场
四川建筑 2014年1期2014-09-03
- 运营中焦炉极端条件下的现状测量方法
顶埋设有设备中心标板，该标板将作为设备安装和检修的依据。由于炉体高温，如何将基准移至焦炉的炉床板处是该项目的难点；(2)焦炉一经投产，就不能停止生产。炭化室推出焦炭后温度有好几百度，如何对炭化室的中心线和底部标高进行测量，是该项目的难点。针对以上两个难点，采取了以下对策：(1)在测量时我们围着炉体埋设了6个控制基准点，并对这6个基准点进行了一级闭合导线测量，然后联测炉顶的两个设备中心标板，把设备中心标板的坐标引入控制基准点中。通过控制基准点将炉顶中心基准移
四川建筑 2014年5期2014-09-03
- 间接ELISA法检测茵栀黄注射液中的过敏性杂质
司产品；96孔酶标板为Costar公司生产；酶标仪（Versa MaxTM，Molecular Devices）。茵栀黄注射液110批。1.2 实验方法1.2.1 间接ELISA法试验步骤①包被抗原：用包被液将金银花抗原或样品稀释成适当浓度的溶液，包被在96孔聚乙烯酶标板上，每孔加100 μL，同时包被阳性（直接包被兔抗金银花抗体）和阴性（包被液）对照。4 ℃冰箱冷藏18～20 h后，倒尽板孔中的液体，反复洗涤3次。②封闭：每孔加入5%牛血清白蛋白溶液（溶
中国医药指南 2014年15期2014-04-19
- 酶联免疫吸附法在沙门氏菌检测中临床应用
/L包被96孔酶标板，100μl/孔，用封板膜封板后置37℃温育1h。②小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。③取未致敏的40孔酶标板，将样品和酶标抗体室温作用90min［1］。④取包被好的酶标板，小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。⑤将作用后的样品与酶标抗体混合液移入包被板，每样加两孔，100μl/孔。留下3孔分别设阳性、阴性、空白对照。用封板膜封板后置37
大家健康(学术版) 2013年9期2013-08-15
- ELISA自动化检验影响因素探讨
全自动加样器向酶标板微孔中加入上述物质, 造成洗板头的吸液针堵塞而出现假阳性结果。2.3 不能立即检测的血液标本放在2～8℃冰箱储存, 最好使用可监控报警的专用冰箱, 以防温度过高或过低对血液标本造成影响。3 检验试剂的准备3.1 查看试剂 应检查试剂的包装是否破损, 污染、潮湿；试剂是否浑浊、变色；试剂是否在有效期。遇到这些情况均应重新更换新的试剂。3.2 试剂平衡 取出试剂盒中的酶标板和各组分, 在室温平衡30 min后, 再开启酶标板和各组分的包装,
中国实用医药 2013年31期2013-02-02
- 2011年新疆地区猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体分析
对照，均添加到酶标板上，37 ℃孵育1 h；弃去酶标板中的溶液 ，酶标板每孔加300 µL洗涤液洗涤5次，最后一次用吸水纸拍干；再向洗涤好的酶标板每孔加100 µL酶标记物，封板，20 ℃～25 ℃孵育45 min；弃去酶标板中的溶液 ，酶标板每孔加300 µL洗涤液再洗涤5次，向洗涤好的酶标板每孔加100 µL底物溶液，室温孵育15 min；最后再向温育好的酶标板每孔加终止液100 µL终止反应，用酶标仪测定OD405值。1.2.2 结果判定 阳性对照的
中国动物检疫 2012年8期2012-05-18
- 超声波均质化对仙台病毒ELISA测试中抗原稳定性的影响
及天然抗原对于酶标板的吸附性状的研究较少。本文报道了我中心采用BHK-21细胞扩增仙台病毒，使用差速离心去除了培养细胞碎片，富集了仙台病毒。对收集的仙台病毒采用超声波进行均质化处理，和未处理的病毒颗粒做比较包被酶标板，用仙台病毒的免疫血清在两种平板做测试，通过比较测试数据的变异率分析了超声波处理对于酶标板包被抗原的均质性和抗原稳定性的影响。1 材料和方法1.1 病毒、细胞、质控血清的来源仙台病毒和BHK-21细胞来自美国ATCC。SPF小鼠血清采自北京华阜
中国比较医学杂志 2012年10期2012-01-30
- 浅谈LF钢包精炼炉机械设备安装
基础验收及中心标板基准点埋设3.1.1 设备基础施工完毕，基础表面及预留孔内应清扫完毕，具备设备安装条件，并提供基础的中间交接资料。3.1.2 设备安装前对土建施工完交工的基础，要按照图纸及施工验收规范进行基础中心线标高、几何尺寸的验收。设备基础的尺寸极限偏差和水平度、铅垂度公差应符合施工验收规范的规定。3.1.3 验收预埋螺栓的高度、规格、螺纹、长度及表面的清洁度等，对预埋地脚螺栓还要检查根部中心位置、不垂直度和顶部标高。另外，预埋地脚螺栓的螺纹和螺母
中国新技术新产品 2011年24期2011-10-08
- ELISA检测中全自动加样引起拖带假阳性现象的对策分析
从标本架1起、酶标板从1到12。吸取分配不同的液体试剂或血清标本后，RSP 150按编制程序自动冲洗加样针。2 结果2.1 第1例抗-HIV阳性拖带现象检测 出现在抗-HIV同一块酶标板的H2、H3、H4……H7位置上，标本检测OD值见表1。本次实验的Cut off值为0.134，故6份标本5份阳性1份为“灰区”，根据抗-HIV检测规程，6份标本重新双孔复试，结果H2标本检测OD值分别为2.759，2.543仍为强阳性，H3标本OD值分别为0.456，0.
中国实用医药 2011年27期2011-08-13
- 全自动加样处理系统数据传导错误原因分析及排除
条码阅读器识别酶标板侧面上的条形码后，酶标板被自动传送到确定的模块中进行处理，从而实现自动化，提高了检测的精确度和特异性,且重复性好,同时大大降低了操作人员的劳动强度，提高了工作效率[2]，减少人为误差，保证加样信息准确可靠，保证检验结果的准确无误。本实验室全自动加样处理系统（Freedom evo clinical，EVO）在日常运行中出现了1次少见的数据传导故障[3]，现将对故障的排除过程，原因分析和预防措施报告如下：1 故障现象采用EVO全自动加样器
中国医疗设备 2011年7期2011-02-16
- 木香倍半萜对血管内皮细胞生长因子的抑制作用
行研究,考察了酶标板种类、一抗包被时间、紫外辐照等对酶联免疫反应的影响,优化了检测条件:可采用广州洁特公司生产的酶标板替代进口 Costar酶标板,一抗包被时间 24 h,一抗包被前紫外辐照 30 min可明显提高酶标板对包被抗体的亲和力。利用优化的检测条件测定了木香挥发油、土木香挥发油、木香主要单体成分脱氢木香内酯 (dehydrocostus lactone, 1)和木香烯内酯(costunolide,2)对人肺腺癌A549细胞分泌VEGF的抑制作用,
天然产物研究与开发 2010年4期2010-09-15