凝胶电泳
- 骆驼乳及其制品中非热变性乳铁蛋白含量的快速电泳迁移检测
。聚丙烯酰胺凝胶电泳作为一种常见的蛋白分离检测方法，可用于CLF 的分析，成本低但操作复杂、耗时[10,13-14]。高效液相色谱与质谱法联用其特异性、灵敏度、重复性等均能够满足CLF 的定量要求，但前处理复杂，对操作人员技术要求较高，测定结果包含了热变性CLF[12]。采用薄层色谱法可直接在骆驼乳中分离定量出乳铁蛋白，样品前处理简单，仅能用于CLF 半定量检测[11]。因此，依然需要发展操作简便、快速、准确的非热变性CLF 检测方法，用于骆驼乳及乳制品营
中国乳品工业 2023年10期2023-11-15
- 细述基因表达载体的构建过程
——由一道江苏高考题引发的思考
技术与琼脂糖凝胶电泳是教学难点,在习题中也常出现错误,本文将通过琼脂糖凝胶电泳在双酶切产物分离中的作用对其进行分析。1.背景知识,追根溯源在使用单酶切的载体或者平端载体时,载体本身的两个DNA末端可以匹配,产生自身连接的产物。如果载体浓度和插入DNA片段浓度均较低,则载体DNA两个末端之间碰撞的机会大于和目的DNA末端碰撞的机会,就会导致载体DNA分子的自身连接,形成环化的载体分子。在将目的基因片段插入到载体中的时候,由于酶切位点序列的回文特征,若使用单个
教学考试(高考生物) 2023年1期2023-04-14
- 不同来源乳中乳铁蛋白含量的高通量毛细管凝胶电泳检测
用聚丙烯酰胺凝胶电泳法电泳分离，也可以半定量不同来源乳中LF含量[20]，但该方法每次检测的样品数量有限，操作繁琐且耗时长。因此，目前仍缺少快速、简便、高通量、无需复杂样品前处理的，具有普适性的不同来源乳中的LF含量检测方法。本研究在前期建立的全自动高通量毛细管凝胶电泳检测牛源乳铁蛋白（bovine lactoferrin，BLF）的基础上[21-22]，通过筛选分别能够与人源乳铁蛋白（human lactoferrin，HLF）、羊源乳铁蛋白（goat
中国乳品工业 2023年2期2023-03-04
- 高效安全的核酸染料在琼脂糖凝胶电泳中的应用
引言琼脂糖凝胶电泳是DNA片段分离、检测最常用的技术之一［1］，也是高校生物类专业实践教学的重要环节。核酸染料与琼脂糖凝胶中DNA片段结合后，在特定光谱照射下发出荧光条带，从而指示DNA片段大小和质量。溴化乙锭（EB）是琼脂糖凝胶电泳最早使用也是最常用的核酸染料，其含有一个插入DNA堆积碱基之间的三环平面基团，经艾姆斯实验证实具有高度致癌性和致突变能力，对长期使用EB的实验人员和环境存在危害性［2］。随着对核酸染料研究的深入以及化学合成技术的发展，近几年
实验室研究与探索 2022年7期2022-10-26
- 不同检测方法对甜菜SCoT和DAMD扩增产物多态性的影响
或聚丙烯酰胺凝胶电泳分离。早有研究表明不同的凝胶电泳对PCR扩增产物的多态性存在一定的影响。李新海等[21]首先利用3% 琼脂糖凝胶和12%的聚丙烯凝胶酰胺电泳对SSR 扩增产物进行分离，结果表明琼脂糖凝胶电泳更适于遗传作图和基因定位的研究，聚丙烯酰胺凝胶电泳则可用于遗传多样性和构建指纹图谱的研究；而孙燕红等[22]利用26条DAMD 引物和12个甜菜品种，对比2%的琼脂糖凝胶和6%聚丙烯酰胺凝胶电泳对扩增产物多态性的影响时，则发现琼脂糖凝胶电泳与聚丙烯酰
中国甜菜糖业 2022年3期2022-10-20
- Omicron 株新型冠状病毒灭活疫苗（Vero 细胞）原液特异性鉴别试验RT-PCR 法的建立及验证
。1%琼脂糖凝胶电泳鉴定，凝胶成像系统进行条带分析。1.6 引物筛选 根据Omicron 株S 基因序列中相比于其他突变株所特有的插入及缺失基因序列设计4对引物：OSTF1 ／ OS1R、OSTF3 ／ S2R、S1F ／ OSTR1和OSTF1 ／ S2R，分别利用这4 对引物对原型株及Omicron 株原液进行RT-PCR 检测，观察条带特异性，筛选合适引物。1.7 方法验证1.7.1 专属性 取202201Y001 批Omicron 株原液、S202
中国生物制品学杂志 2022年6期2022-06-23
- 创客教育在生物工程技术中的应用
——以自制低成本DNA凝胶电泳装置为例＊
备，如DNA凝胶电泳系统、PCR（DNA体外扩增）设备、限制性内切酶系统等。目前，生物的学科教育已经进入到中学的校本课当中。但是，并非所有的中学或职校的生物实验室能够负担高端且昂贵的分子生物实验设备和材料。绝大多数的生物课程还是以理论讲授为主，偶尔以虚拟软件为辅。在缺少动手实践的情况下，学生缺乏对微观层面知识的深入理解。由于生物工程技术也是近年来广受关注的创客教育（或STEM教育）的一个热点方向，不少中学引入外界资源帮助学校建立生物技术类的创客课程体系，旨
科技与创新 2022年2期2022-02-11
- 乳及乳制品中乳铁蛋白的全自动高通量毛细管凝胶电泳检测方法研究
全自动毛细管凝胶电泳分析后游离适配体的峰面积的减少以及减少程度实现乳铁蛋白的定性定量检测。避免了前期研究通过聚丙烯酰胺[26]和琼脂糖凝胶电泳[27-28]检测乳铁蛋白的制胶、点样、灰度读取等耗时、繁复的流程，相比Zhu chao[29]等建立的乳铁蛋白的毛细管区带电泳-适配体传感器检测方法，具有分析时间更短、自动化程度高的优点，为乳制品企业检测LF提供新思路。1 材料与方法1.1 主要试剂和仪器DNA序列（5’-(FAM)-AGG CAG GAC ACC
中国乳品工业 2021年9期2021-10-28
- SSR 分子标记两种电泳方法快速区分玉米种子杂交种
性聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶为支持物，在一定电压作用下，将不同大小的核苷酸片段分离开，经过染色、显影、定影后，分析指纹图谱； 荧光毛细管电泳是通过毛细管将长短不一的核苷酸片段在高压电场中分离，通过软件分析数据，比较峰值图差异，可以实现多样品、多位点同时检测，工作效率大大提高[3]。 2020 年，笔者用SSR 分子标记方法区分10 个玉米杂交种， 从40 对SSR 引物中筛选出3 对多态性高的引物进行扩增， 用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和荧光毛细管电
农业科技通讯 2021年5期2021-06-22
- 分次灌胶制备二维凝胶电泳大胶①
要内容,二维凝胶电泳(2-DE)技术在蛋白质组学研究中得到了广泛的应用,它能够根据蛋白质的等电点和分子量,将蛋白质混合物中的不同蛋白分子分开,形成各自单独的蛋白质分子点,从而能够对蛋白质表达模式进行大规模分析,解读他们在不同生物下的变化,二维凝胶电泳是分离蛋白的一种强大工具,常应用于蛋白质组学研究。尽管过去了几十年,出现了更复杂和高性能的质谱分析方法,但只有结合二维凝胶电泳才使得它在蛋白研究领域发挥更大作用[1]。最近出现的热细胞转移技术(cellular
华夏医学 2021年2期2021-06-05
- 利用分子标记快速鉴定甜菜育性的研究
用1%琼脂糖凝胶电泳，但是聚丙烯酰胺凝胶电泳是否同样适合作为甜菜育性鉴定的电泳方式却不知。试验采用裂解液法作为一种新型DNA提取方式与CTAB法进行对比，以便找出更加适合甜菜DNA提取的方法；另外，通过采用双重PCR的方法对细胞质类型和细胞核育性进行鉴定，以探究双重PCR是否能扩增成功；最后，对比1%琼脂糖凝胶电泳和6%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，以找出最佳电泳方式。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 试验材料 试验材料为随机抽取的10份糖甜菜嫩叶和5份多
中国农学通报 2021年3期2021-03-24
- 番茄叶片及果实总RNA 提取方法的比较
用1%琼脂糖凝胶电泳检测RNA 的完整性：取5 μL RNA 样品，点样于1%琼脂糖凝胶（每100 mL凝胶含有 10 μL GelRed）点样孔中，140 V 恒压电泳15 min，在凝胶成像仪下观察并照相记录。琼脂糖凝胶电泳主要用来检测RNA 的完整性，总RNA 样品的主要成分是28S rRNA、18S rRNA、5S rRNA；从电泳结果的28S rRNA 和18S rRNA 的完整性来判断RNA 样品有无降解以及降解程度［7］。完整性好的RNA 经
湖北农业科学 2021年3期2021-03-09
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒检测方法的研究
cel毛细管凝胶电泳系统是一种包括多个激光二极管和微光采集器，片段在凝胶中移动的过程中毛细管旁路激发并检测信号，信号通过光电倍增管传至可进行数据分析的专用软件,进行结果分析的方法。目前，检测猪繁殖与呼吸综合征病毒等动物疫病中，RT-PCR检测是其中一个重要的方法，在多个检测标准和规范中均有应用。本研究利用40份经 RT-PCR检测为病毒核酸阳性或疑似阳性的猪繁殖与呼吸综合征核酸样品，进行 RT-PCR 扩增，产物分别用两种方法进行电泳，分析两种电泳方法的优
浙江畜牧兽医 2020年6期2020-12-29
- PCR 快速检测食品中牛源性成分
用1%琼脂糖凝胶电泳法鉴定； 样品的纯度用超微量核酸蛋白测定仪在OD260/OD280 处的吸光度值来确定，数值在1.7～1.9 的可用于PCR 反应。2.2.2 引物的设计从国家生物技术信息中心 （national center for biotechnology information，NCBI) 网站下载牛和其他动物物种的线粒体DNA 序列。 物种线粒体基因组Genbank 号如下：Bos taurus (GU947021，AY126697，FJ99
今日畜牧兽医 2020年10期2020-12-08
- 琼脂糖凝胶电泳法测定小麦中长穗偃麦草的基因
扩增、琼脂糖凝胶电泳法等方法，对长穗偃麦草杂交的几个组合小麦进行了检测，检测其抗白粉病基因，并验证了方法的准确度和重现性，以期后续相关研究提供参考依据。1 材料与方法1.1 试验材料本试验所采用的实验材料均由中国科学院遗传与发育生物学研究所提供，具体组合为新春37∕XC（长穗偃麦草杂交后代）10、新春37∕XC31、新春37∕XC351.2 试验步骤1.2.1 播种 组合新春37∕XC10取63粒种子、新春37∕XC31取15粒、新春37∕XC35取22粒
安徽农学通报 2020年21期2020-11-19
- 3D打印便携式凝胶电泳装置用于蛋白质的快速检测
使用。目前,凝胶电泳(GE)技术是蛋白质研究中实现其有效分离的重要技术手段[14-16]。凝胶电泳技术以其分辨率高、重复性好和易操作等优点,被广泛地应用于分子生物学、生物化学、病理学和微生物学等学科的研究中[17-19]。例如之前研究[20]中设计的连续流动凝胶电泳与电感耦合等离子体质谱联用(GE-ICP-MS)的金属蛋白质在线分析系统,其在金属蛋白质的在线分离和检测方面表现出良好的性能。同时,凝胶电泳技术对于临床检测中蛋白质的分离检测具有重要意义。在资源
色谱 2020年11期2020-09-23
- SDS-PAGE法分析蜂蜜中蛋白质组分的条件优化
蜜;蛋白质;凝胶电泳中图分类号：O658.9;S896.1 文献标识码：A 文章编号：1003-5168（2020）14-0129-03Study on the Condition Optimization of SDS-PAGE Analysis of Protein Components in HoneyWANG Qin（College of Pharmaceutical Engineering， Chongqing Chemical Industry
河南科技 2020年14期2020-07-07
- “DNA的粗提取与鉴定”实验的改进*
常用的琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA，但考虑到电泳仪及配套显影装置价格昂贵，笔者在国内、外相关文献［3-5］的启发下，用生活中常见的材料自制了一套凝胶电泳装置和凝胶显影装置。1.3.1 利用生活中常见的材料，自制凝胶电泳装置 笔者自制的凝胶电泳装置（图1）由大小不同的塑料盒、铝箔、梳子、鳄鱼夹导线及串联电池组成：大塑料饭盒相当于电泳槽，两端贴上铝箔制成电极；小塑料盒相当于制胶板，硬纸板裁剪后制成梳子；7 个9 伏锂电池串联后制成电源。图1 自制凝胶电泳仪1.3.
生物学通报 2020年4期2020-03-06
- 现代分子生物学技术在食品和药品微生物检测中的应用
效方法。先用凝胶电泳的方法将微生物中的蛋白质分离、纯化到凝胶膜上，然后再将凝胶膜上的条带原位转移至硝酸纤维素膜上，最后将膜表面的蛋白质再用抗原抗体反应进行特异性检验。最后是流式细胞术，该方法能快速精确地测量通过检测区液流中细胞、大分子、乳胶滴等其他粒子，可定量分析细胞表面和细胞内抗原，以及对细胞分子水平的核酸含量的测定，预示细胞的生理状态。将流式细胞术用于检测食品和药品微生物检测中，可以在短期内进行大体积液体的检测，时间短、成本低、准确度高。三、凝胶电泳技
中国食品 2019年4期2019-09-10
- 利用SSR技术对小麦田间混杂株的初步鉴别
.5%琼脂糖凝胶电泳进行初步筛选，选择扩增带型稳定、多态性丰富、重复性好的引物作为SSR 引物用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳试验。1.2.4 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 利用上述SSR筛选引物对济麦22、混杂株S1、S2进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳试验，试验所涉及的药品试剂及具体方法参见参考文献[8]。2 结果与分析2.1 小麦基因组DNA的提取和检测本试验采用CTAB法提取小麦基因组DNA，结果表明DNA条带清晰，完整性较好（图1）。虽然没有使用RNase对基因组
天津农林科技 2019年4期2019-08-26
- 规模猪场哺乳仔猪混合感染PEDV和PDCoV暴发腹泻的综合防控
FV核酸检测凝胶电泳图图3 PRRSV核酸检测凝胶电泳图图4 PRRSV NADC30株核酸检测凝胶电泳图5 PRV核酸检测凝胶电泳图图6 PCV2核酸检测凝胶电泳图图7 PCV3核酸检测凝胶电泳图图8 PEDV核酸检测凝胶电泳图图9 PDCoV核酸检测凝胶电泳图采取综合防措施如下：⑴全群母猪普免中牧股份猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗（HB08株＋ZJ08株） （商品名“腹康”）2头份，15 d后未生产母猪加强免疫2头份，产房初生仔猪紧急免疫，肌注
中国猪业 2019年5期2019-07-17
- 牛羊乳粉中掺入大豆蛋白的特征性蛋白组分分析
E聚丙烯酰胺凝胶电泳检测牛奶中掺入的豆奶蛋白[5]，而研究从牛、羊乳蛋白和大豆蛋白化学特性的异同上，通过SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳来区分乳蛋白和大豆蛋白的特征性蛋白质组分，进而能定量鉴定大豆蛋白的掺假检测。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 原料牛、羊乳粉和大豆蛋白粉，购于西安银桥乳业集团公司。1.1.2 试剂三羟甲基氨基甲烷（Tris）、十二烷基硫酸钠（SDS）、过硫酸铵（APS）、N,N,N',N'-四甲基乙二胺（TEMED）、丙烯酰胺、甘氨
农产品加工 2019年7期2019-05-07
- 猪伪狂犬病病毒PCR-LFD检测方法的建立及应用
物进行琼脂糖凝胶电泳，在凝胶成像仪上观察并记录结果。1.2.2.3 引物浓度的优化 经上述筛选出最佳退火温度后，固定反应体系其他试剂的添加量，对引物浓度用量设定为0.5 μL、1 μL、1.5 μL、2 μL，并设立空白水对照。反应结束，用琼脂糖凝胶电泳检测结果。1.2.2.4 探针杂交反应条件优化 PCR反应结束后，开盖加入1 μL Prv-T-bio(10 μmol/L)，增加一步杂交反应，94℃ 30 s，54℃至60℃ 30 s，4℃ 5 min。
动物医学进展 2018年11期2018-12-05
- 团数的DNA折纸术计算模型
成发夹结构，凝胶电泳检测发夹结构的变化来建立初始数据池、删除非解、读解.该模型简单、读解方便、可行性高.文中提出的计算模型一方面证明了DNA折纸术可以用来求解组合优化问题，另一方面也证明了订书钉链与脚手架链的杂交，结合链置换，凝胶电泳从算法的角度是完备的.它不仅拓宽了DNA折纸术的应用领域，也为解决组合优化问题提供了一种新的思路和方法.1 团数问题图1 简单无向图及其补图2 团数问题的DNA折纸术计算模型2.1 脚手架链和订书钉链的设计2.2 团的表示图2
安徽工程大学学报 2018年4期2018-12-03
- 农作物种子检测中常用电泳方法的比较分析
方法：琼脂糖凝胶电泳、小板聚丙烯酰胺凝胶电泳、大板聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳。不同的电泳方法适合不同的检测项目，各方法对实验仪器、检测技术水平、实验室条件和操作人员的要求也不同。1 四种不同的电泳方法1.1 琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是分子检测中常用的检测方法，不同浓度的琼脂糖凝胶（0.3%～1.5%）可以将200bp～50kb的DNA片段分离。当用溴化乙啶（EB，荧光嵌入染料）染色，通过凝胶成像系统，能观察到发出荧光的DNA条带，确定DNA片段在凝
中国种业 2018年11期2018-11-16
- 猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒GP5蛋白的原核表达
行1%琼脂糖凝胶电泳。1.3 重组BL21的构建及鉴定取2 μL 重组质粒pCold-GP5加入到100 μL的BL21，冰浴20 min，42℃热激90 s;冰浴3 min，加入500 μL LB培养基，37℃孵育30 min后，取100 μL涂布到含有Amp的LB平板，37℃，过夜培养。随机挑取6个单克隆，进行PCR鉴定。反应结束后，对PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳。1.4 重组GP5蛋白的诱导表达及鉴定诱导的菌液4 000 rpm离心10 min，
畜禽业 2018年10期2018-11-02
- 全错位排列问题的DNA计算模型
DNA计算；凝胶电泳中图分类号： TP301.6 文献标识码： A 文章编号： 2095-2457（2018）19-0101-002DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2018.19.045DNA Computational Model for Error Permutation ProblemHU Juan（The Foundation department of Huainan Vocational Technical
科技视界 2018年19期2018-10-09
- 一种镍金属配合物的合成、结构及DNA性质研究
亲和力.通过凝胶电泳法发现配合物可以切割超螺旋质粒DNA pBR322,表明配合物具有有效的DNA切割能力.1 实验部分1.1 实验试剂实验所需试剂2,2-联吡啶-5,5-二羧酸、硝酸镍等均为化学纯,未经进一步处理直接使用.去离子水与DMF在实验中作为溶剂.1.2 实验仪器Bruker Smart 1000 CCD面探X-射线衍射仪,Perkin-Elmer LS55 荧光光谱仪,JS-Poewr 600 电泳仪,D-MS-1磁力搅拌器.1.3 配合物单晶
沈阳化工大学学报 2018年2期2018-07-25
- PCR荧光探针法在Y染色体微缺失检测中的应用
）结合琼脂糖凝胶电泳检测法，比较2种检测方法的检测率和吻合度，探讨PCR荧光探针法检测Y染色体微缺失在临床上的应用价值。1 材料和方法1.1 临床资料2016年6月至2017年6月到我院就诊的208例不育男性患者，年龄23～46岁，平均年龄32.8岁。根据世界卫生组织（World Health Organiza⁃tion，WHO）2010年第5版精液分析操作指南将208例患者分为正常精子症组、无精子症组和少精子症组。用multiplex PCR结合琼脂糖凝
分子诊断与治疗杂志 2018年4期2018-07-21
- 大肠杆菌质粒DNA提取方法的研究
.2 琼脂糖凝胶电泳检测上述的溶液与EB混合染色进行1%琼脂糖凝胶电泳，电泳后在紫外分析仪下观察，并且进行拍照检测。2.2 碱裂解法提取大肠杆菌质粒DNA2.2.1 DNA提取方法（1）在适当的含抗生素的25mL LB培养基中接种单一的大肠杆菌菌落，振荡培养至对数生长晚期以250r/min培养12-16 h；（2）取4.5mL大肠杆菌菌液以12000r/min离心 9min，弃去上清夜，尽量弃去干净，可以用小的枪头移去；（3）再加入100 μl冰预冷溶液Ⅰ
资源节约与环保 2018年6期2018-07-09
- Krüppel样因子6对于TGF-β1诱导的晶状体上皮细胞纤维化的调控作用研究
产物经琼脂糖凝胶电泳分离，于紫外透射仪下观察结果。表1 RT-PCR引物表2 RT-PCR反应条件q-PCR：引物选择见表3。将2μl模板cDNA，2 μl上下游引物的等比混合物，4μl SYBR荧光染料，最终体积8μl，依次加入384孔板（避光冰上操作），每组3个复孔，实验重复3次，放入Real-time PCR仪内反应，调整扩增参数为：50℃2 min孵育，95℃10 min变性，重复40次循环：95℃15 s变性、55℃30 s退火、72℃30 s延
中国中医眼科杂志 2018年1期2018-06-13
- 甜菜SRAP扩增产物不同检测方法的比对研究
用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测[9，13]，一般使用的缓冲液是0．5倍的TBE；另外就是通过琼脂糖凝胶电泳检测[15-16]，使用的缓冲液是1倍的TAE。吴则东等人比较了变性聚丙烯酰胺凝胶和非变性聚丙烯酰胺凝胶的区别，发现两者之间差异不大，但非变性聚丙烯酰胺凝胶无论是制胶还是检测都要比变性聚丙烯酰胺凝胶更加简单，故推荐非变性聚丙烯酰胺凝胶替代变性聚丙烯酰胺凝胶[22]；目前SRAP分子标记在甜菜上一般都是使用非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳进行检测[6，18，20-2
中国糖料 2018年3期2018-01-17
- 大白菜基因组DNA快速提取方法的研究
测1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA的提取质量(电泳缓冲液为1×TAE)，GelRed染色，在凝胶成像仪上成像、观察。1.4 PCR反应取不同方法获得的DNA样本2 μL进行PCR扩增。1.4.1 引物 分别为Bra019317、Bra019348、Bra019235-2和Bra019345-2。SSR标记为本项目开发的与本抗源抗根肿病基因连锁的分子标记，引物由华大基因公司合成。1.4.2 PCR反应体系 20 μL，包括模板DNA 2 μL，Forward p
华北农学报 2017年6期2018-01-12
- 苯乳酸与单增李斯特菌和大肠杆菌胞内外基因组的抑菌作用机制
752)采用凝胶电泳阻滞实验法和紫外-可见光谱法研究苯乳酸与胞内、胞外基因组DNA的作用机制。实验结果表明苯乳酸与单增李斯特菌和大肠杆菌的胞内DNA迁移率和条带亮度均未发生变化,无相互作用;苯乳酸对单增李斯特菌和大肠杆菌的胞外DNA发生结合作用。单增李斯特菌体外DNA在苯乳酸16～32 mmol/L浓度下,与苯乳酸发生结合作用，结合常数为9.16×105M-1；大肠杆菌体外DNA在苯乳酸2～16 mmol/L的浓度下,与苯乳酸发生结合作用,结合常数为7.3
食品工业科技 2017年23期2017-12-18
- 2012至2016年广西血红蛋白组分室间质量评价结果的回顾性分析*
力优于琼脂糖凝胶电泳法。结论 通过室间质量评价考核实验室检测HbA2和HbF能力，量化HbA2和HbF指标，为地中海贫血筛查和防治工作提供质量保证与数据支持。地中海贫血；血红蛋白A2；血红蛋白F；室间质量评价地中海贫血(以下简称“地贫”)表型分析指标除红细胞平均容积(MCV)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)外，另一组重要指标是血红蛋白A2(haemoglobin A2，HbA2)和血红蛋白F(haemoglobin F，HbF)[1]。本研究通过对2012
临床检验杂志 2017年2期2017-03-29
- 毛细管电泳基因扫描和凝胶电泳异源双链分析在免疫球蛋白/T细胞受体基因重排检测中的应用研究*
泳基因扫描和凝胶电泳异源双链分析在免疫球蛋白/T细胞受体基因重排检测中的应用研究*陈杰 郑可 张文燕 孙林雍 唐源 严嘉琦 赵莎 刘卫平(四川大学华西医院病理科， 四川 成都 610041)目的 探讨免疫球蛋白轻链IgK及T细胞抗原受体(TCRγ)基因重排更有效的检测方法。 方法 收集四川大学华西医院病理科2013～2014年淋巴组织增生性病变石蜡样本共139例，采用BIOMED-2系统扩增，分别使用毛细管电泳基因扫描和凝胶电泳异源双链分析两种方法进行Ig
西部医学 2016年11期2016-12-06
- 阳离子寡肽序列的合成及生物学研究
——推荐一个针对化学生物学专业学生的研究型实验
步通过琼脂糖凝胶电泳和细胞内吞实验考察寡肽序列在生物学研究方面的应用。本实验可以加深学生对有机化学、高分子化学及生物化学的理解与运用，培养学生分析问题和解决问题的综合能力。关键词：氨基酸；寡肽；多肽；凝胶电泳www.dxhx.pku.edu.cn寡肽是由十种以下具有不同物理和化学性质的天然氨基酸通过肽键组成，由十种以上一百种以下氨基酸组成的称为多肽[1]。寡(多)肽由于其特有的生物活性、生物可降解性和良好的生物相容性而引起生物医学应用研究的广泛关注，尤其在
大学化学 2016年3期2016-07-05
- 不同环境丰富度设置下猪血清蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析研究
-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析研究席赫岐1，史秀丽2（1.郑州市第一中学，河南 郑州 450052；2.郑州市电子信息工程学校）为考察不同环境丰富度设置对猪血清蛋白质图谱的影响，以不同环境丰富度设置下的猪血清为材料，分别针对猪血清1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8、1∶9、1∶10的稀释倍数和12%、10%、8%的分离胶浓度进行猪血清蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳参数优化，并对猪血清蛋白质图谱进行分析。结果表明：猪血清的适宜稀释倍数为1∶9；
河南畜牧兽医 2016年23期2016-02-14
- 质粒抽提策略对双酶切鉴定的影响
切联合琼脂糖凝胶电泳是鉴定DNA重组成功与否的重要方法［1］，琼脂糖凝胶电泳图像质量直接影响鉴定结果的判读、论文发表。条带弥散是图像质量不佳的主要表现之一，研究者多将其归咎于不合理的酶切和不规范的电泳操作［2］，而很少报道质粒抽提策略对弥散的影响。笔者在双酶切鉴定葡萄糖6-磷酸脱氢酶(glucose 6-phosphate dehydrogenase，G6PD)重组质粒pET-28a-G6PD时，发现质粒抽提策略对双酶切后琼脂糖凝胶电泳弥散有显著影响，现报
山西医科大学学报 2015年6期2015-12-16
- 基于DNA计算的最大权团问题设计
；最大权团；凝胶电泳中图分类号：TP301.6文献标志码：A文章编号：1672-1098（2015）01-0075-03对于给定的无向图G=（V，E）。如果UV，且对任意u，v∈U有（u，v）∈E，则称U是G的完全子图。G的完全子图U是G的团当且仅当U不包含在G的更大的完全子图中。G的最大团是指G中所含顶点数最多的团。而最大权团，就是指权值最大的最大团。1994年，文献[1]提出了用DNA分子解决7节点的Hamilton路径问题，这是有关DNA计算的开山之
安徽理工大学学报·自然科学版 2015年1期2015-07-21
- DNA变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验教学改进
性聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验教学改进鲍思元(湖北科技学院 基础医学院, 湖北 咸宁 437100)DNA变性聚丙烯酰胺凝胶电泳在现代生物技术中的地位十分重要，但在实验中，聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作难度比较大，影响因素比较多，耗时比较长。为了使DNA变性聚丙烯酰胺凝胶电泳适合于实验教学，对聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术相关操作流程进行了研究和探索，对实验进行了改进和优化。改进和优化后的实验操作简易、详细，试剂配方更合理，成功率得到提高，学生能在4学时内完成，为进行
实验科学与技术 2015年2期2015-05-08
- DNA分子标记检测方法及在茶树中的研究进展
同分为琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、毛细管电泳、高分辨率熔解曲线分析、微流控芯片电泳等。茶树[Camellia sinensis (L.) O.Kuntze]是一种山茶科山茶属茶组（Sect. Thea (L.) Dyer in Hook.）的多年生经济作物。目前应用于茶树研究的分子标记有RFLP、RAPD、AFLP、ISSR、SSR、SRAP、SNP等，主要是进行茶树种质资源和遗传育种中的遗传多样性、亲缘关系分析、起源与演化、种质鉴定、遗传图谱构建
茶叶学报 2015年2期2015-02-21
- 改良溴化乙锭染色法快速检测基因组DNA
长度。琼脂糖凝胶电泳法；基因组DNA；溴化乙锭基因组DNA提取被广泛应用于医学、生命科学的许多领域［1］。2003年人类基因组计划的完成，为人类利用基因组DNA遗传密码破解疾病机制奠定了基础［2］。成百上千例样本的病例-对照研究越来越多的被用于筛选疾病相关候选基因及其变异位点和在基因水平阐明疾病的发病机制。这些研究中需要先期进行大规模的样本基因组DNA提取和检测工作。长期以来，基因组DNA提取后的检测是通过琼脂糖凝胶电泳/溴化乙锭染色法进行观察［3～5］。
中国医科大学学报 2015年11期2015-02-13
- Evaluation of the Development of Circular Agriculture in Sichuan Province Based on the Coefficient of Variation
维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术发现了10种κ-酪蛋白的异构体。Ciavardelli等[14] 利用电感耦合等离子体质谱法检测出牛乳中α-酪蛋白和β-酪蛋白磷酸化位点，使酪蛋白的磷酸化逐渐成为研究酪蛋白蛋白质组学的研究重点[15]。Table 2 Calculation results of evaluation indicators for circular agriculture in Sichuan Province3 Analysis of result
Asian Agricultural Research 2015年3期2015-02-02
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳用于淋球菌多位点串联重复序列分型的评估
·聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳用于淋球菌多位点串联重复序列分型的评估于瑞星 尹跃平 陈绍椿 戴秀芹 韩燕 张国毅 陈祥生淋球菌是引起淋病的致病菌,淋球菌感染不仅可引起新生儿失明等严重的并发症,还能够加速其他病原体及HIV感染[1]。近年来淋球菌分型方法报道较多,目前最常用的是淋球菌多抗原序列分型(NG-MAST)和多位点序列分型(MLST)分型,但这两种分型方法费用较高,不适合资源匮乏地区应用。多位点串联重复序列分型(multiple-locus var
中华皮肤科杂志 2014年12期2014-12-09
- 全自动毛细管电泳技术在筛查地中海贫血中的临床诊断价值
究应用琼脂糖凝胶电泳技术和全自动毛细管电泳技术对我院收治的380例病例进行地中海贫血筛查分析，旨在探讨两种不同技术在地中海贫血筛查中的诊断价值，现报告如下。1 资料与方法1.1 临床资料选取2008年9月—2012年4月我院筛查的380例病例作为研究对象，采用PCR基因诊断技术对全部病例进行确诊。1.2 方法采集6 ml静脉血作为标本，分装3个试管，其中1号试管注入已加EDTA-K2的血常规管中，使血细胞分析仪(希斯美康XE5000)检测血常规。另外2个试
中国实验诊断学 2014年4期2014-08-25
- 限制性内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切条件的优化
DNA琼脂糖凝胶电泳仪(Biorad公司)；凝胶成像系统(德国alpha FluorChem HD2)。1.2 重组质粒的转化、提取和测序将重组质粒转化入大肠杆菌感受态DH5α中，在含卡那抗性的固体培养基中培养过夜，次日挑取单个阳性克隆于5 mL卡那抗性的液体LB中，放于37 ℃ 180 r/min的摇床中过夜后，质粒提取试剂盒提取质粒，Nanodrop 2000分光光度计测其浓度和纯度，并于上海生工测序。1.3 KpnⅠ和EcoRⅠ分别单酶切pEGFP-
吉林医药学院学报 2014年4期2014-08-17
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测大豆SRAP标记
。聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术是一种检测灵敏度和分辨率都很高的电泳技术，从聚丙烯酰胺凝胶中得到的DNA 纯度很高，特别适合于像SRAP这样的小DNA 片段的分析(5～500bp)，是分子生物学、生物工程及基因工程研究方面不可缺少的实验技术。因其具有设备相对简单，操作比较方便，时间短，样品量少等特点[6]，近年来被广泛应用于DNA的分析实验中。本文以大豆为实验材料，进行了大豆的SRAP-PCR扩增，并对产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染，建立了一种简便快
中州大学学报 2014年6期2014-08-07
- 在高浓度尿素的存在下采用制备型电泳体系进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离腐植酸成分
行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离腐植酸成分S.Karim1,2M.Aoyama1著刘毓芳3吴云彬4赵瑞华3张彩凤4*译（1 日本弘前大学农业和生命科学学院 弘前 036-85612 日本岩手大学农业科学联合研究院 盛冈 020-85503 晋中学院化学化工学院 晋中 03060024 太原师范学院化学系 太原 030006)采用制备型电泳体系在高浓度的尿素存在下进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离水溶性腐植酸中的不同成分。在聚丙烯酰胺凝胶电泳中，根据水溶性腐植酸中深色成分分
腐植酸 2014年6期2014-02-21
- 两种电泳方法血红蛋白分析一致性的比较
LC琼脂糖凝胶电泳系统(简称琼脂糖凝胶电泳)替代醋酸纤维素薄膜电泳对地中海贫血进行筛查。为比较2种电泳方法的一致性，我们进行了相关实验。材料和方法一、一般资料4126例临床标本来自2009年5月至2011年5月期间横县人民医院门诊和住院患者及其他体检人员。男1862例，女2264例，年龄5个月～75岁。二、仪器与试剂1.琼脂糖凝胶电泳 法国Sebia公司生产的Sebia Hydrasys LC全自动琼脂糖凝胶电泳系统及其配套的HYRYS扫描系统，Hb琼脂
检验医学 2013年3期2013-09-11
- 琼脂糖电泳中核酸染料Goldview最佳使用方案的建立
的确定琼脂糖凝胶电泳中使用核酸染料Goldview的最佳浓度和方法，尽可能减少实验中Goldview用量，控制其对实验室环境的污染。方法配置含不同浓度Goldview的上样缓冲液，混合不同浓度 DNA溶液的琼脂糖凝胶电泳，然后对比预染样品法、前染法及后染法的染色效果。结果实验结果显示上样缓冲液中含0.4% Goldview的预染样品法电泳检测核酸的效果最佳且能检测的核酸样品浓度在16.5ng或以上为最佳。结论核酸染料Goldview在核酸的琼脂糖凝胶电泳中
遵义医科大学学报 2012年4期2012-11-14
- 双向凝胶电泳和二维色谱技术检测大肠癌蛋白质谱的意义
文拟采用双向凝胶电泳和二维色谱技术分析Dukes B期大肠癌肿瘤与癌旁组织蛋白质的差异性，为大肠癌的早期诊断、生物学治疗寻找新的靶点。1 材料与方法1.1 组织标本 收集吉林大学中日联谊医院手术治疗的大肠癌患者18例，年龄49～78岁，其中男13人，女5人。在手术中获得的癌组织均是新鲜标本。所获得的癌旁正常组织均距离癌边缘10 cm之外、切缘正常组织，并且所取的正常组织标本均是在癌组织上端。标本离体后立即取材，生理盐水冲洗，放入液氮冷冻，－80℃保存。病人
中国老年学杂志 2012年3期2012-08-04
- 引入易错PCR和DNA-shuffling技术构建单链抗体库
.5%琼脂糖凝胶电泳判断RNA完整性，测定浓度，用于反转录。1.2.2 人VH、VL和Cκ基因的扩增:以总RNA为模板，Oligo（dT）15为引物，在反转录酶作用下反转录合成cDNA第1条链。以cDNA第1链为模板，以不同亚型的重链及轻链的引物分别扩增人重链和轻链可变区基因。以Cκ引物扩增人恒定区基因。VH、Vκ扩增条件为:预变性94℃ 5 min;变性94℃30 s，退火69℃ 30 s，延伸72℃ 30 s，共30个循环;延伸72℃ 10 min。V
基础医学与临床 2012年1期2012-06-05
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳法对导入后代重组个体的检测
的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，应用于验证和检测试材的DNA导入情况，通过观察导入后代与供体DNA的共同和差异谱带，来筛选含供体特异DNA谱带的导入后代。这项技术的研究是外源遗传物质导入育种技术不可缺少的一部分。1 试材锦269麦、95109麦、340玉米。2 方法实验采用无水乙酸钠—冰乙酸系统进行电泳。2.1 制样将试材种子浸泡2～4 h，按质量体积比1：2加入样品提取液研磨，然后4000 r/min离心15 min，取上清液，100℃水浴3 min，置冰箱中
种子科技 2012年4期2012-01-22
- 脉冲场凝胶电泳实验中的问题及解决方案
22）脉冲场凝胶电泳实验中的问题及解决方案陈秋芳1,焦浈1,押辉远2（1.郑州大学离子束生物工程重点实验室,河南郑州 450052；2.洛阳师范学院,河南洛阳 471022）脉冲场凝胶电泳是分离大分子DNA片段的有效方法.就脉冲场凝胶实验中遇到的问题及解决方法进行了探讨,在充分理解实验原理的基础上对脉冲场凝胶电泳的实验条件进行优化,最终达到利用脉冲场凝胶电泳得到大分子DNA片段清晰整齐电泳条带的实验效果,为后续实验奠定了基础.脉冲电泳；大分子DNA；条件优
河南科技学院学报(自然科学版) 2011年5期2011-01-15
- 转化人参二醇类皂苷为C-K的特异人参皂苷糖苷酶的纯化及性质
行聚丙烯酰胺凝胶电泳、切割单带的方法。向预处理过的DEAE-Cellulose离子交换柱中缓慢加入8 mL粗酶液，分别用0.02 mol/L pH 5.0 NaAc-HAc 缓冲液、0.06、0.12、0.18、0.24、0.30、0.40、0.50、0.60 mol/L KCl溶液各50 mL进行梯度洗脱，测定紫外吸光值，分离提纯酶蛋白。选取紫外吸光值(OD值)较高的试管，从中取出0.1 mL酶液，以0.1 mL 的0.5%人参皂苷PPD为底物，进行酶反
大连工业大学学报 2010年1期2010-09-26
- 一种新的微卫星PAGE的DNA显带方法
.3 琼脂糖凝胶电泳显带PCR产物在浓度为1.2%的琼脂糖凝胶上分离；核酸荧光染料为GelRed，采用前染的方法，将GelRed核酸荧光染料加到溴酚蓝上样缓冲液中。将4μL PCR产物与2μL含有gelred的溴酚蓝上样缓冲液在PCR管中混合均匀，取3μL上样，80 V电压下电泳1.5 h。电泳结束后，将凝胶直接放入上海产FR-200A型全自动紫外与可见分析装置中进行拍照和分析。1.4 改良的微卫星PAGE凝胶银染法显带PCR产物在8%（29∶1）聚丙烯酰
湖南农业科学 2010年17期2010-06-07
- 牦牛血液铜锌超氧化物歧化酶cDNA克隆测序
，通过琼脂糖凝胶电泳检测其纯度。1.2.2 PCR引物设计与合成 根据奶牛Cu/Zn-SOD cDNA序列（序列号：NM 174615），用Primer 5软件设计一对PCR引物，上游引物序列为5′-GGCGTCGTTT TCTCTACTTGGT-3′、下游引物序列为 5′-GTGCCACA GAGAATGTTTAT-3′（Ysod1、Ysod2），由四川英骏生物公司合成。扩增片段大小为483bp。1.2.3 cDNA第一条链合成和PCR扩增 以提取的总R
四川畜牧兽医 2010年6期2010-05-10