陈志雄王洪海 张 峰
(1原南京军区司令部农副业基地,江苏南京 210016;2中牧实业股份有限公司,北京 100070)
仔猪腹泻是制约养猪业经济效益的重要疾病之一。引起仔猪腹泻的病因较为复杂,多种病原,如猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)、传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(RV)、大肠杆菌、球虫,以及饲养管理不当,如饲养密度过大、猪舍通风不良、猪群应激、营养不良等因素均可导致该病的发生。防控仔猪腹泻必须查明病因,采取综合防治措施才能见效。
PEDV可引起猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED),该病对新生仔猪危害极大,临床主要表现为腹泻、呕吐、脱水,感染后死亡率高。PEDV通常与TGEV、PDCoV等共同导致猪胃肠炎和腹泻的发生。PDCoV于2012年首次在香港的猪群中被发现,于2014年在美国腹泻仔猪和母猪的粪便中首次被检测到,随后在我国四川、江西等地腹泻猪的临床样品中也分离到PDCoV毒株。
本文报道了江苏省某规模化猪场产房仔猪混合感染PEDV和PDCoV引发腹泻的病例,通过流行病学、病理变化以及实验室PCR/RT-PCR检测结果,最终确诊,并采取紧急免疫猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗(HB08株+ZJ08株) (商品名“腹康”),添加保肝解毒、提高机体免疫力的药物等综合防控措施,取得明显的效果。
2018年10月初,江苏省某规模化猪场产房仔猪出现较大规模的腹泻流行,仔猪出生后约2 d开始呕吐、黄色水样腹泻,发病比例约40%,使用常规抗生素治疗效果较差。该场兽医联系中牧实业股份有限公司(以下简称“中牧股份”)业务经理及技术人员,咨询腹泻疫情控制方案。
现场剖检可见,病猪肠道内充满黄色液体,肠壁变薄并呈透明状,肠系膜充血,其他组织未见异常。此外,个别仔猪出生后即出现外阴红肿现象(图1)。推断猪群可能感染病毒性腹泻疾病,同时伴有霉菌毒素中毒现象。
图1 发病仔猪临床症状及剖检结果
将发病仔猪的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及淋巴结,适量取样研磨后反复冻融3次,匀浆20 min,收集匀浆液12 000 r/min离心10 min,取上清液,用TaKaRa MiniBEST Viral DNA/RNA Extraction kit Ver.5.0试剂盒提取总DNA/RNA,分别进行CSFV、PRRSV(经典毒株/高致病性毒株)、NADC30、PRV、PCV2、PCV3、PEDV、PDCoV的PCR/RT-PCR扩增,病原核酸PCR检测方法及扩增目的基因片段大小见表1。反应结束后,吸取5 μL PCR产物于1%1×TAE琼脂糖凝胶中电泳检测。结果显示3头仔猪均为PEDV和PDCoV混合感染,见表2、图2~9。
通过与猪场兽医沟通后,了解到该场每年9—10月份免疫腹泻疫苗,而发病时还未免疫疫苗。另据了解,在病发约2个月前,猪场曾经购买使用过1批霉变玉米,可能导致猪群发生霉菌毒素中毒,与仔猪初生后即表现外阴红肿的临床表现相符。
表1 病原核酸PCR检测方法及扩增目的基因片段大小
表2 样品病原检测结果
综上所述,该场可能是由于猪群发生霉菌毒素中毒导致免疫抑制,同时免疫腹泻疫苗不及时,最终造成PEDV及新型肠道致病冠状病毒PDCoV混合感染而发病。
图2 CSFV核酸检测凝胶电泳图
图3 PRRSV核酸检测凝胶电泳图
图4 PRRSV NADC30株核酸检测凝胶电泳
图5 PRV核酸检测凝胶电泳图
图6 PCV2核酸检测凝胶电泳图
图7 PCV3核酸检测凝胶电泳图
图8 PEDV核酸检测凝胶电泳图
图9 PDCoV核酸检测凝胶电泳图
采取综合防措施如下:
⑴全群母猪普免中牧股份猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗(HB08株+ZJ08株) (商品名“腹康”)2头份,15 d后未生产母猪加强免疫2头份,产房初生仔猪紧急免疫,肌注1头份。
⑵立即停止使用劣质玉米,添加脱霉剂;
⑶在母猪饲料中添加黄芪多糖、电解多维、小苏打、葡萄糖,提高免疫力,增加饲料能量摄取;
⑷在产房使用密斯陀干粉,喷雾带猪消毒,降低湿度,同时注意保证产房环境温度;
⑸腹泻严重、脱水的仔猪处死后,进行无害化处理,减少病原传播。
采取以上防控措施2周后,回访猪场,腹泻疫情得到明显控制,产房基本恢复正常生产,新生仔猪没有再出现腹泻情况。
该案例说明当前猪群中如存在霉菌毒素中毒等免疫抑制因素,可能会间接诱导腹泻类疾病暴发,这为腹泻的防控带来难度。对于该案例中的PEDV和PDCoV的混合感染,虽然目前尚无有效的PDCoV疫苗,但在控制其他相关疾病的前提下,猪群仍可通过提高自身免疫力对PDCoV感染产生一定的抵抗能力。