胎牛
- 基于细胞体外培养筛选最适胎牛血清
纪50年代以来,胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)作为最常用、最有效的添加物,在世界范围内被广泛应用于体外细胞培养[5]．胎牛血清富含血浆蛋白、多肽、激素、生长因子等活性成分,能改变培养基的黏度、渗透压、缓冲能力等理化性质[6],可促进细胞的生长与增殖[7]．细胞生长的好坏与胎牛血清密切相关,在细胞体外培养过程中,若血清选择不当,不仅会导致实验结果不可用,还造成人力、物力等资源的浪费．胎牛血清是一种成分复杂的混合物,虽然其组份大部分已
西南大学学报（自然科学版） 2023年11期2023-11-16
- miR-223-3p在老年结肠癌组织和癌旁组织中的表达水平及其生物学功能作用机制
0细胞置于10%胎牛血清RPMI1640培养基(广州沛瑜生物制品有限公司，货号AAPR123)中，37℃、5%CO2条件下培养；显微镜观察细胞生长情况，当细胞汇合度达到80%及以上时加入0.25%胰酶消化细胞制成单细胞悬液；吸取单细胞悬液移至离心管中，置于离心仪上800 r/min离心5 min；弃去上清液，加入10%胎牛血清RPMI1640培养基重悬细胞移至培养瓶中培养；待细胞生长状态良好时用于后续试验。1.4实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR) 按
中国老年学杂志 2023年3期2023-02-11
- 首次产犊月龄对中国荷斯坦牛生产性能的影响
影响，尤其对1 胎牛影响最大。1 胎牛AFC 从20 月龄增至23月龄时，泌乳曲线变化明显且逐渐优化，23 月龄以后，泌乳曲线变化不明显。经产牛AFC 为23 月龄时，泌乳曲线最优。图2 各胎次AFC 为20～27 月龄时泌乳曲线2.3.2 高峰奶产量 对AFC 为20～27 月龄牛各胎次高峰奶产量作图，如图3 所示。1 胎牛高峰奶产量低于经产牛，1 胎时高峰奶产量随AFC 的增加而增加，AFC 为23 月龄牛与AFC 为24～27 月龄牛高峰奶产量差异较
中国畜牧杂志 2022年4期2022-04-15
- 人造肉新锐生产不含胎牛血清的细胞培养基，细胞生长速度更快，生产成本更低
物细胞培养基是用胎牛血清（FBS）配置的，胎牛血清中含有生长因子等蛋白质，且抗体含量少，但胎牛血清的组成复杂多变，研究人员一般将其视作成分不明的混合物，可能增加实验结果的不确定性。基于此原因，韩国人造肉公司CellMEAT推出了不含胎牛血清 (FBS) 的细胞培养基CSF-A1，该产品有助于降低生产成本并消除养殖肉类行业的问题（胎牛血清是一种取自牛胚胎的血清，因此胎牛血清的制取存在一定的争议）。CellMEAT首席执行官Giljun Park表示，“CSF
海外星云 2022年1期2022-02-21
- 人造肉新锐生产不合胎牛血清的细胞培养基，细胞生长速度 更快，生产成本更低
物细胞培养基是用胎牛血清（FBS）配置的，胎牛血清中含有生长因子等蛋白质，且抗体含量少，但胎牛血清的组成复杂多变，研究人员一般将其视作成分不明的混合物，可能增加实验结果的不确定性。基于此原因，韩国人造肉公司CellMEAT推出了不含胎牛血清（FBS）的细胞培养基CSF-A1，该产品有助于降低生产成本并消除养殖肉类行业的问题（胎牛血清是一种取自牛胚胎的血清，因此胎牛血清的制取存在一定的争议）。CellMEAT首席执行官Giljun Park表示，“CSF-A
海外星云 2022年1期2022-02-14
- C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养、分化及两种不同品牌血清对其增殖的影响
下含两种不同品牌胎牛血清(Yeasen血清，Gbico血清)的培养基对BMSCs细胞数量、形态以及生长周期的影响，从而为BMSCs体外分离培养的血清选择提供更加优化的方案，以服务于临床和科研。1 材料与方法1.1 实验动物4～6周SPF级C57BL/6雄性小鼠，体重15～20 g，由武汉大学实验动物中心提供，实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。1.2 主要试剂0.25%胰蛋白酶，磷酸盐缓冲液(PBS)、胎牛血清(Fetal Bovine Serum，
中国计划生育和妇产科 2022年12期2022-02-08
- 牛剖腹产手术的操控要点
分胎犊强行拉出，胎牛也难以存活，不仅如此更是严重伤害到了母体的产道，更为严重的是导致产道重度撕裂，造成母牛截瘫或大出血而死亡，给肉牛养殖经营者带来较大经济损失。针对我县肉牛养殖业中的此种难题，为了提高本地肉牛的品质，并避免因为母牛难产而导致的财产损失，提高母牛剖腹产手术的成功率，下面把剖腹产的操控要点介绍给大家以供借鉴学习。1.剖腹产前的准备工作1.1 确定手术操作的方案在母牛剖腹产手术之前，兽医首先要结合难产母牛的具体情况确定手术操作的方案。兽医在进行手
农村科学实验 2021年2期2021-12-24
- 不同血清对驴卵泡颗粒细胞体外培养的影响
重要成分。目前，胎牛血清(FBS)已普遍用于各种动物体外组织的培养，但考虑到其生物安全性、动物福利及效率，国内外许多学者对培养材料的自体血清培养效果进行了探究，证实了自体血清的优越性[4-5]。但驴自体血清对驴卵泡颗粒细胞培养的效果未见报道。MTT法是一种利用酶标仪快捷检测细胞增值的方法，所测得的光吸收值与活细胞数成正比。划痕实验在一定程度上模拟了体内细胞迁移侵袭的过程，可以直观的判定细胞的迁移能力。Annexin V-FITC/PI具有特殊的理化特性，可
石河子大学学报（自然科学版） 2021年4期2021-12-06
- 1例奶牛子宫捻转的治疗与护理
子宫颈，可触摸到胎牛的一侧前肢。直肠检查时，手臂进入耻骨前缘时能够感觉到一粗的交叉的束状物分别向腹腔倾斜。经过详细检查后，确诊为子宫向右侧捻转。2 病 因只要能使母牛围绕躯体发生急剧转动的动作，都可能成为子宫捻转的直接诱因。2.1 子宫的生理解剖结构怀孕末期孕角迅速增大，子宫大弯显著地向前扩展，但子宫小弯扩张不明显；而子宫阔韧带只附着在子宫颈、子宫体和子宫角基部的子宫小弯部位，子宫阔韧带主要固定住孕角的后部，孕角的前部没有固定（处于游离状态）[2]。2.2
养殖与饲料 2021年12期2021-12-03
- 细胞贴壁效应是评价胎牛血清质量的重要因素
活性成分[4]。胎牛血清(FBS)从母体内胎儿中获取，含有多种生长因子和细胞因子，可模拟细胞增殖和维持[5]，含有大量的蛋白成分，最主要的蛋白成分有白蛋白、A1抗胰蛋白酶、转铁蛋白、Ig类抗体，还有含量不等的如A2巨球蛋白、A1和B1脂蛋白、胆固醇、纤维结合蛋白、胆红素和类胡萝卜素等成分[6]，是许多重组蛋白及药物生产和研发用细胞培养基中的关键成分，对细胞生长的需要仍难以大规模的用其它物质所代替。另外，胎牛血清中胎球蛋白A(fetuin-A)等成分的差异在
农业与技术 2021年22期2021-11-30
- 胎牛子宫类器官及内膜上皮细胞的分离培养
～6月龄南阳黄牛胎牛，购于河南省郑州市肉牛屠宰场。1.1.2 主要试剂DMEM/F 12培养基(Hyclone)；血清(杭州四季青)；胰蛋白酶(Aladdin)；非必需氨基酸(Gibco公司)；两性霉素B、庆大霉素(Coolaber)；PBS粉末、转铁蛋白、青链霉素混合液、丙酮酸钠(Solarbio)；Wnt 3a[Mouse](Abcam)；表皮生长因子(EGF)[Human](Bio-Techne)；R-spondin-1[Human]、Noggin[
畜牧与兽医 2021年11期2021-11-11
- GATA5抑制Ep CAM表达对肾癌HEK-293细胞系的影响
培养在含有10%胎牛血清和5%青霉素/链霉素DMEM培养基中培养。细胞在37℃并含5%二氧化碳的培养箱中培养［11］。1.2 实验方法1.2.1 表达载体的构建 通过NCBI：NM_080473.4获取GATA5的cDNA（从63号碱基到1256碱基）。我们在N端添加了KozaK序列GCCACC。限制性位点HindIII（5'-A^AGCTT-3'）和NotI（5'-GC^GGCCGC3'）。通过PCR仪扩增合成cDNA-GATA5。用HindIII和No
山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报 2021年8期2021-10-12
- 聪明的高考学习时间表
5500BT)、胎牛血清(Gibco，货号10099-141)、0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液(Gibco，货号25200-056)、CCK-8溶液(碧云天，C0038)、葡萄糖测试盒(南京建成，F006)。E.It can be hard to pick and choose what is most important to review.F.Meanwhile,mark the days that already have something e
疯狂英语·新策略 2021年7期2021-08-26
- 大蒜素对不同浓度LPS作用下人牙周膜成纤维细胞炎症因子表达的影响
DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶均购自Gibco公司，抗波形丝蛋白单克隆抗体、角蛋白单克隆抗体、Human total MMP-1 ELISA试剂盒、TNF-α ELISA试剂盒、IL-1β ELISA试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司。1.2 组织来源 收集于本院口腔科就诊患者因正畸而拔除的无龋坏牙、无牙周疾病的前磨牙和阻生牙，刮取根中1/3牙周膜用于细胞培养。供牙者年龄12～20岁，无结缔组织疾病，未全身应用皮质类固醇等药物，均知情同意。1.3
浙江临床医学 2021年6期2021-07-21
- 三叶青总黄酮影响心肌细胞的活性及DJ-1表达
养基（碧云天）；胎牛血清（四季青）。1.3 主要仪器SW-CJ-1F超净工作台（安泰技术有限公司）；荧光定量PCR仪（Applied Biosystems）；IX71倒置荧光显微镜（奥林巴斯）。2 方法2.1 细胞的培养细胞用含10%胎牛血清的高糖DMEM培养液中于37℃，5%CO2下培养，当细胞融合度达85%左右时传代，每3天传代1次，取对数生长期细胞接种，以便进行后续实验。2.2 三叶青总黄酮对H9C2细胞的活性实验将高糖的DMEM（含10%胎牛血清）
科技视界 2021年13期2021-06-20
- 胎牛肺间充质干细胞对脂多糖介导小鼠急性肺损伤治疗的研究
疗方法。本研究对胎牛肺间充质干细胞（lung-derived mesenchymal stem cells，LMSCs）进行分离培养及鉴定，并通过腹腔注射LPS造小鼠急性肺损伤模型，然后将LMSCs移植到急性肺损伤的小鼠体内，观察LMSCs对急性肺损伤治疗作用，为异源干细胞进行临床治疗提供实验理论依据。1 材料与方法1.1 材料来源 本实验对象3个月龄胎牛购自中国农科院家畜实验基地，6周龄雄性小鼠购自北京华阜康生物有限公司。LPS购自北京索莱宝科技有限公司
医学信息 2021年10期2021-06-02
- 亚临床酮病对荷斯坦奶牛产后疾病、繁殖性能及产奶量的影响
1.63%。1 胎牛共计396 头，其中亚临床酮病134 头，发病率33.84%。2 胎牛共计182 头，其中亚临床酮病104 头，发病率54.17%。3 胎牛共计229 头，其中亚临床酮病98 头，发病率42.79%。图1 亚临床酮病组与正常组β 羟丁酸含量对比2.3 亚临床酮病与其他疾病的相关性分析 对奶牛产后疾病与亚临床酮病之间关系进行相关性分析（表2），结果显示，亚临床酮病与真胃变位相关性极显著（P=0.01），与胎衣不下、死淘、产后瘫痪、乳房炎及
中国畜牧杂志 2021年4期2021-04-21
- 富血小板血浆对人慢性难愈创面肉芽组织成纤维细胞体外增殖和迁移的影响▲
MEM)培养基、胎牛血清购自Gibco公司(试剂盒批号分别为：A4192101、12664025)。1.1.3 PRP及水凝胶的制备：采用PRP制备用套装制备PRP，采集全血，室温下4 000 r/min离心20 min后弃去最下层红细胞，再进行第2次离心(室温下4 000 r/min离心30 min)，中间棕黄色层即为PRP，见图1。水凝胶参考文献[4]制备。图1 PRP的制备过程1.2 实验方法和观察指标1.2.1 成纤维细胞的分离和鉴定：收集患者慢性
广西医学 2021年2期2021-04-07
- 健脾消癌方对结肠癌HCT116细胞迁移、侵袭的影响研究*
.3 试剂与仪器胎牛血清（以色列Biological industries公司，批号:1616316）；DMEM培养基（美国Hyclone公司，批号:NZD1131）；BCA蛋白浓度测定试剂盒（上海碧云天生物技术有限公司，批号:P0012）；RIPA裂解液（上海碧云天生物技术有限公司，批号:P0013b）；结晶紫（上海碧云天生物技术有限公司，批号:C0121）；MMP-2（美国Abcam公司，货号:ab92536）；MMP-9（美国Abcam公司，货号:a
中医学报 2021年1期2021-01-21
- 中英文对照名词词汇（六）
ein（MOG）胎牛血清 fetal bovine serum（FBS）体重指数 body mass index（BMI）8条目痴呆筛查问卷 8-Item Ascertain Dementia（AD8）通透性转换孔 permeability transition pore（PTP）同型半胱氨酸 homocysteine（Hcy）Zeste同源蛋白2增强子enhancer of Zeste homolog 2（EZH2）铜转运体1 copper transp
中国现代神经疾病杂志 2021年11期2021-01-02
- 牛流行性流产的临床诊断及防治
也与牛感染时间、胎牛年龄以及牛的抵抗力相关，成年牛对病原体具有较高的抵抗力，初胎或者体格较弱的妊娠期母牛易感，胎牛在成型初期易感染皮革钝缘蜱疏螺旋体。1.3 临床症状妊娠期在7～9个月之间的母牛最易发生流产现象，大部分胎牛在自行排出或者是正常出生前后，就已经处于死胎状态，胎牛在子宫内自溶现象较为罕见。对感染病原体的胎牛进行实验检测，可发现胎牛体内出现局部性器质坏死病灶和血管炎，通过免疫荧光检测，可发现血管内皮细胞有IgG与IgM反应，血管外膜也存在着颗粒性
兽医导刊 2020年3期2020-12-30
- 不同垫料类型对奶牛乳房炎感染影响的比较分析
床模式牧场中，3胎牛与1，2胎牛的体细胞数评分具有显著差异；在牛粪再生垫料卧床模式牧场中，1，2，3胎牛的体细胞数评分差异不显著；在风积沙垫料散卧模式牧场中，3胎牛体细胞数评分显著高于1，2胎牛。而各类型垫料模式牧场的各胎次牛对比发现，同胎次牛在不同类型垫料的牧场中体细胞数评分差异极显著，其中风积沙垫料散卧模式牧场的各胎次体细胞数评分均最高，稻壳垫料卧床模式牧场的各胎次体细胞数评分均最低。对于体细胞0～5分占牛群比例的结果显示，在稻壳垫料卧床模式牧场组中，
中国乳业 2020年10期2020-12-15
- 不同来源血清对体外培养驴巨噬细胞的影响
：为比较驴血清和胎牛血清对体外培养驴巨噬细胞的影响，采用含10%驴血清或胎牛血清的培养液进行驴巨噬细胞培养的对比试验，分别在培养的1、4、7、10 d时观察细胞的生长状况，并用MTT法通过细胞吸光度检测细胞活力;培养后4 d采用流式细胞仪检测巨噬细胞的纯度。结果表明，含10%驴血清培养液培养的驴巨噬细胞的分化能力优于胎牛血清;培养后1、4 d时，2种血清对巨噬细胞活力的影响没有显著差异，但培养后7、10 d，驴血清组的细胞活力显著（P关键词：驴;MTT法;
江苏农业科学 2020年13期2020-08-28
- 不同的样品制备方法对壳聚糖创伤敷料细胞毒性实验结果的影响
仪器有限公司]；胎牛血清（Biological Industries Israel Beit Haemek Ltd）；DMSO（SIGMA-ALDRICH）；异丙醇（天津市百世化工有限公司）；高密度聚乙烯膜（Hatano Research Institute，FDSC）；0.9%氯化钠注射液（石家庄四药有限公司）；MTT（Sigma公司），溶于不含酚红的MEM中，浓度为1 mg/ml，溶液采用过滤器（孔径≤0.22 μm）经无菌过滤法除菌，过滤后当天使用。
医疗装备 2020年13期2020-08-24
- 不同类型牛血清对MDCK细胞培养效果研究
。本研究通过国产胎牛血清、进口胎牛血清、国产新生牛血清对MDCK细胞复苏和传代培养的对比试验，在短时间内找到培养MDCK细胞的最佳血清，以期为疫苗研发节约成本、节省时间。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 细胞 贴壁培养型MDCK细胞从ATCC引进，引进后由甘肃省动物细胞技术创新中心按《中国药典》2010版的要求建立主细胞库(MDCK-M-60，P60)和工作细胞库(MDCK-W-63，P63)。1.1.2 培养基 DEME(high-glucous)购
生物学杂志 2020年4期2020-08-19
- MTT细胞毒性试验参数验证
，MEM培养基，胎牛血清，小牛血清，酶标仪，高密度聚乙烯（HDPE）。图1. L-929细胞（高密度）1.2 细胞代数参数L-929小鼠成纤维细胞为细胞毒性试验常用细胞系，为贴壁细胞，每传代一次需进行消化一次。本试验通过相差11代的细胞对同一供试品进行检测，并将数据进行对比，以验证随着细胞代数的增加，该细胞系的检测敏感度有所变化。细胞系：L-929，美国模式培养物集存库（ATCC）；细胞冻存：将细胞消化成单细胞悬液，将细胞密度调整为约1×106cells/
中国医疗器械信息 2020年7期2020-05-16
- 不同培养体系对金华猪卵母细胞体外成熟的影响
发情金华猪血清/胎牛血清)；四种培养体系分别进行卵母细胞体外成熟培养，观察卵母细胞体外成熟情况，以探讨不同培养体系对金华猪卵母细胞体外成熟的影响，试验重复3次。1.5卵母细胞体外成熟的判断 卵母细胞成熟培养44 h后，将卵母细胞(COCs)放入含0.1%的透明质酸酶的成熟液中3 min，用仅仅比卵母细胞大几个微米的吸管将卵母细胞反复吸入吹出，以去除卵丘细胞。在实体显微镜下观察第一极体是否存在，以第一极体排出作为卵母细胞成熟的标准。1.6数据分析 用Grap
浙江畜牧兽医 2020年2期2020-05-01
- 动物血清的成分及在细胞培养中的作用
等。新生牛血清或胎牛血清是细胞培养中常用的生长补充剂，主要是因为它具有高水平的生长刺激因子和低水平的生长因子。使用牛血清作为培养基添加剂在建立原代细胞培养、维持器官/组织外植体和干细胞繁殖的情况下仍然是必要的，因为血清具有促进分化的功能，还具有运输携带激素（如转运蛋白）、矿物质和微量元素（如转铁蛋白）和脂质的蛋白质的功能，且含有贴附和扩散因子，在维持pH值或直接抑制蛋白酶作用方面也有一定效果，使用血清就不需要为每个细胞系和菌种优化培养基，这可节省大量人力物
甘肃畜牧兽医 2020年10期2020-03-03
- 猫杯状病毒抗体间接ELISA 检测方法的建立
、1%明胶、5%胎牛血清、5%脱脂奶粉作封闭液,37 ℃封闭2 h,FCV 阳性血清作为一抗,同时设置阴性对照,加入HRP 标记兔抗猫IgG,进行常规ELISA 检测,酶标仪读取各孔OD450nm值,计算P/N 值,确定最佳封闭液。1.3.2 最佳血清稀释液的确定将样本血清分别以1%BSA、PBST、5%兔血请、5%胎牛血清按1∶100 稀释,100 μL/孔加入96 孔酶标板反应,进行常规ELISA 检测,酶标仪读取各孔OD450nm值,计算P/N值,确
中国兽医杂志 2019年5期2019-09-18
- 酮病对荷斯坦牛泌乳性能的影响
低于高风险组，2胎牛只酮病高风险组乳脂率显著低于低风险组。各胎次牛只乳蛋白率均呈现酮病高风险组显著高于低风险组和中风险组情况。1胎和2胎牛只酮病高风险组牛只的体细胞评分（SCS）显著或极显著高于其他2组。2.3 胎次对奶牛酮病发生的影响由表3可以看出，酮病中风险组和高风险组的头数在各胎次样本中占比随着胎次的增加而升高，其中3胎及以上的头数占比高达30.11%，分别比1胎和2胎牛只高出10.65个百分点（P＜0.05）和6.98个百分点（P＞0.05）。表3
中国奶牛 2019年8期2019-09-12
- MDCK单克隆细胞的制备方法研究
1.2 主要试剂胎牛血清和新生牛血清均购自兰州民海生物工程有限公司；DMEM培养基和0.25%胰酶均购自兰州百灵生物技术有限公司；配制PBS(无Ca2+、Mg2+)缓冲液。1.3 主要仪器设备CO2细胞恒温培养箱(上海博讯公司)，生物倒置显微镜(日本奥林巴斯光学科技有限公司)，Countstar自动细胞计数仪(上海睿钰生物科技有限公司)等。1.4 细胞培养将储存于液氮罐中的MDCK工作库细胞取出，37 ℃水快速融化后置于50 cm2培养瓶中，补加培养基后再
浙江农业科学 2019年2期2019-02-28
- 奶牛牧场的产犊管理
张，到羊膜和部分胎牛进入产道为止，该产程可能持续1~24 h，1~4 h为正常。胎牛娩出期，其特征是由于阴道腔内的胎牛造成腹部收缩，止于胎牛通过外阴娩出。头胎青年母牛的分娩时间预计为1~4 h。如果胎位正常，经产母牛的分娩时间一般不超过3 h；如果在1 h内未见有娩出迹象，可能需要助产。胎衣娩出和子宫复旧。胎衣娩出通常在分娩后12 h内完成。在临产母牛出现难产、需要采用助产措施的可能性很大时，可以在临近中午时（11:00~12:00）饲喂母牛，21:30~
饲料博览 2019年7期2019-02-12
- β-雌二醇经ERβ-ERK1/2雌激素胞膜信号传导途径促进肺癌A549细胞迁移和侵袭*
1640培养液和胎牛血清购自Gibco；活性炭吸附胎牛血清和TRIzol购自Invitrogen；ERK1/2抑制剂PD98059和β-雌二醇购自Sigma；BCA 蛋白浓度测定试剂盒、预染蛋白Marker和ECL 发光液购自Thermo；兔抗人ERα、p-ERK1/2和ERK1/2抗体购自CST；兔抗人ERβ和GAPDH抗体购自Santa Cruz； cDNA逆转录试剂盒购自TaKaRa；其它生化试剂购自上海生工生物工程公司。Real-time PCR引
中国病理生理杂志 2018年10期2018-10-29
- IRX3基因在秦川牛不同组织中的表达分析
料包括3头秦川牛胎牛(妊娠3个月的胎儿)的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大肠、小肠、肌肉(背最长肌)，3头6月龄秦川牛的心脏、肝脏、肺脏、大肠、小肠、肌肉(背最长肌)，3头24月龄秦川牛的心脏、肝脏、肺脏、大肠、肌肉(背最长肌)，以及6月龄、18月龄、24月龄、60月龄秦川牛的脂肪组织，所有组织器官均由西北农林科技大学国家肉牛改良中心种质资源库于-80 ℃保存。1.1.2 主要试剂及仪器 Trizol试剂和总RNA提取试剂盒，TIANGEN®公司产品；天净
西北农林科技大学学报（自然科学版） 2018年6期2018-07-24
- 纳米银抗菌产品体外细胞毒性测定
lone 公司；胎牛血清，GIBCO；MTT，北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司。1.2 仪器 超净工作台，苏净安泰；二氧化碳培养箱，Thermo；酶标仪，BIO-RAD。2 实验方法2.1 细胞株及培养基 L929 细胞，采用含10%胎牛血清的DMEM 完全培养基培养。2.2 样品配制 采用1 号、2 号、3 号、4 号、6 号样品，其中1 号、4 号、6 号样品为液体，2 号、3 号样品为浸膏。1 号、4 号、6 号样品的配制：取1 号、4 号、6 号样
灾害医学与救援(电子版) 2018年2期2018-03-03
- 奶牛养殖繁育配套技术
保养，以切实保证胎牛的稳定生长和顺利产出，避免早产和千兆流产情况的出现。如果奶牛体现出千兆流产的症状，通常归因于胎牛在胞宫中的生命体征；母牛生殖系统出现异常而导致持续收缩；母牛内分泌发生异常，削弱维护胎牛生命体征的能力等，在奶牛孕期的前2个月内，胎牛在胞宫中处于游离状态，此时胎牛的营养是由母体胞宫发出经由胎盘进行传输，此时期母体的饮食条件若不符合相关标准，其胞宫分泌的营养量则较少，这在一定程度上妨碍胎牛的稳定成长，甚至还会使胎牛失去生命体征。待母牛处于怀孕
畜牧兽医科学 2018年13期2018-02-15
- 两种肿瘤干细胞球培养方法的比较
脂糖表面含10%胎牛血清的完全培养基培养法。本实验着重探讨两种肿瘤干细胞球培养方法的优劣，为完善肿瘤干细胞球培养技术提供思路。1 材料与方法1.1材料黑色素瘤B16/F10，购自北京协和组织细胞库。RPMI1640培养基购自北京钮因泰克公司；干细胞诱导因子B27购自Invitrogen公司，表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFG
临床与实验病理学杂志 2017年11期2018-01-15
- 干扰Mi 6基因表达对非小细胞肺癌EGFR信号通路的影响
胞株在含有10%胎牛血清、100 IU·ml-1青霉素、100 μg·ml-1链霉素的RPMI 1640培养基中在37 ℃、5%CO2条件下培养，每隔2 d更换1次培养液，0.25%胰蛋白酶进行传代。1.3.4 细胞侵袭能力检测 选择24孔Transwell小室，在上室中均匀铺满20 μl Matrigel。将转染的细胞用不含血清的培养基重悬，调整密度为5×106个·ml-1。上室加入100 μl细胞悬液，下室加入500 μl含有10%胎牛血清的培养基，于
东南大学学报（医学版） 2017年3期2017-07-07
- 苜蓿皂苷对胆固醇逆向转运基因三磷酸腺苷结合盒转运体A1、清道夫受体BⅠ mRNA表达的影响
，灌胃4周。采用胎牛血清作用于BRL细胞48 h，构建脂变模型，将BRL细胞分为正常对照组(正常细胞)、苜蓿皂苷组(正常细胞)、脂变模型组(脂变细胞)和脂变皂苷组(脂变细胞)，苜蓿皂苷组、脂变皂苷组培养液中添加苜蓿皂苷(终浓度300 μg/mL)，培养24 h。采用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)作用于ANA-1细胞48 h，构建荷脂模型，将ANA-1细胞分为正常对照组(正常细胞)、苜蓿皂苷组(正常细胞)、荷脂模型组(荷脂细胞)和荷脂皂苷组(荷脂细胞)，苜
动物营养学报 2017年4期2017-04-24
- 奶牛新孢子虫病的巢式PCR诊断及ELISA检测
奶牛场流产奶牛的胎牛组织进行新孢子虫Nc5基因巢式PCR检测诊断，并用ELISA方法对该奶牛场不同年龄阶段奶牛血清样品进行新孢子虫抗体检测。结果显示，在4例流产胎牛样本中有3例检出新孢子虫DNA；新孢子虫血清抗体阳性率达44.80%(112/250)，其中，经产奶牛阳性率为55.40%(77/139)，未经产奶牛或犊牛阳性率为31.53%(35/111)；经产奶牛中有流产史的阳性率为73.17%(30/41)，其余未发生过流产的阳性率为47.96%(47/
河南农业科学 2017年2期2017-03-01
- Estimation of boundary-layer flow of a nanofluid past a stretching sheet: A revised model*
DMEM+10%胎牛血清于5%CO2，37℃的培养箱培养。购买时为第3代，培养3代后用于后续实验研究。［4］ KHAN W. A.， POP I. Boundary-layer flow of a nanofluid past a stretching sheet［J］. International Journal of Heat and Mass Transfer， 2010， 53（11）: 2477-2483.［5］ KUZNETSOV A. V.，
水动力学研究与进展 B辑 2016年4期2016-10-18
- β-榄香烯对人肝癌细胞HepG2增殖的影响及机制探讨
分别置于含10%胎牛血清RPMI 1640培养基、5 μg/mL β-榄香烯+10%胎牛血清RPMI 1640培养基、10 μg/mL β-榄香烯+10%胎牛血清RPMI 1640培养基、20 μg/mL β-榄香烯+10%胎牛血清RPMI 1640培养基中培养。采用MTT法检测培养0、24、48、72 h时细胞增殖抑制率，采用RT-PCR法检测各组培养24 h时细胞轴蛋白(Axin)、结肠腺瘤息肉易感基因(APC)蛋白和β-连环蛋白(β-catenin)
山东医药 2016年18期2016-09-05
- 胎牛血清对人内皮细胞HMEC-1体外成血管实验影响的观察△
350122）胎牛血清对人内皮细胞HMEC-1体外成血管实验影响的观察△胡雅琼林渺满林凡（福建中医药大学中西医结合学院福州350122）目的：观察胎牛血清对人内皮细胞HMEC-1体外成血管实验的影响。方法：人内皮细胞HMEC-1采用相同的培养条件处理后，随机分为无胎牛血清组和胎牛血清组，分别采用无胎牛血清培养基和含胎牛血清培养基（含5%胎牛血清）接种于成血管基质胶，培养6h后用倒置相差显微镜观察不同处理组内皮细胞血管管腔形成情况。结果：无胎牛血清组的血管
北方药学 2016年8期2016-08-09
- A549细胞冻存与复苏方法的改进
IBCO公司），胎牛血清（四季青），DMSO（北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司），胰蛋白酶（北京鼎国生物技术有限公司），CO2培养箱，倒置显微镜，超净工作台。实验方法A549细胞的培养及传代在温度为37℃±1、CO2浓度为5%培养箱内，用胎牛血清为10%的RPMI-1640培养基进行培养，待细胞生长至80%～90%即可传代培养：弃去培养液后加入适量胰酶，37℃消化1～2 min，见有细小白沙状物顺瓶底滑脱，显微镜下观察到大部分细胞呈现圆形，细胞间隙增大后，
中国科技信息 2016年13期2016-08-01
- 河南洛阳地区流产奶牛感染性病原的分子检测
共42头新鲜流产胎牛，及其母体的血液、阴道分泌物和鼻腔分泌物，计为42例样本，采用PCR或RT-PCR方法对所采集样本进行新孢子虫、弓形虫、胎儿三毛滴虫、布鲁菌、牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）和牛病毒性腹泻病毒（BVDV）6种常见流产病原的核酸检测。结果显示，被检样本总感染率为42.9%（18/42），其中新孢子虫感染率最高，为40.5%（17/42）；IBRV次之，为11.9%（5/42）；胎儿三毛滴虫、布鲁菌、弓形虫和BVDV感染率分别为2.4%、2
中国兽医杂志 2015年11期2015-12-08
- Xist基因抑制对牛SCNT早期胚胎发育的影响
ER）载体转染到胎牛成纤维细胞对Xist基因的抑制作用，并以抑制Xist基因表达的细胞作为核供体制作克隆胚胎，研究Xist基因抑制对牛克隆胚早期发育的影响。结果显示，与对照组细胞相比，TALER载体将Xist相对表达量下调了93.85%，说明本试验设计的载体转染系统能够有效抑制Xist基因的表达。选取Xist抑制表达阳性的转染细胞用于体细胞核移植试验，克隆胚胎发育结果显示，试验组和对照组的卵裂率、8细胞发育率、桑葚胚发育率和囊胚发育率分别为78.8% vs
生物技术通报 2015年1期2015-10-25
- 褪黑素对PANC-1细胞增殖的影响及机制探讨
)，95%乙醇，胎牛血清，γ内分泌酶抑制剂(DAPT)，DMSO，兔抗人NICD1，抗 β-actin 抗体，鼠抗兔 IgG，TRIzol，发光液。1.2 PANC-1细胞分组及褪黑素干预 取PANC-1细胞，加入含10%胎牛血清的DMEM培养基，置于37℃、5%CO2饱和湿度的细胞培养箱中培养。将细胞分为以下几组:①对照1组:取对数生长期的PANC-1细胞，用不含胎牛血清的DMEM培养基饥饿24 h后，吸弃培养液，用含10%胎牛血清的完全培养基培养24
山东医药 2015年11期2015-04-04
- Jagged1活化Notch通路促进RAW 264.7向破骨分化但抑制增殖①
TCC，美国)，胎牛血清(Gibco，美国)，DMEM培养基、0.25%胰酶和青链霉素双抗(HyClone，美国)，鼠重组RANKL(R＆D，美国)，Jagged1重组蛋白(义翘神州，北京)，γ-分泌酶抑制剂{3，5-二氟笨乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸 t-丁酯 N-［N-(3，5-difluorophenacetyl)-L-alanyl］-S-phenylglycine t-butyl ester，DAPT}和 TRAP 染色试剂盒(Sigma，美国
中国免疫学杂志 2014年7期2014-11-27
- 前列消癥汤对前列腺癌PC-3细胞PI3K/Akt信号通路表达的影响❋
M 1：培养基、胎牛血清(FBS)，美国Hyclone公司；胰蛋白酶，吉诺生物制品公司； RNA柱式抽提试剂盒，上海生工生物工程公司；RT-PCR试剂盒，上海东洋纺生物科技有限公司。1.2 主要仪器CO2细胞培养箱，美国Shell Lab公司；超净工作台，苏州净化设备厂；F039300A型Sunrise酶标仪，瑞士TECAN公司；高压蒸汽灭菌器，日本HIRAYAMA 公司；台式干燥箱，上海森信实验仪器有限公司；RT-PCR仪，美国应用生物系统公司；凝胶成像
中国中医基础医学杂志 2014年4期2014-02-09
- 肝星状细胞通过SDF-1/CXCR4轴诱导肝癌细胞上皮间质转分化并促进其侵袭
消化，用含10%胎牛血清无抗生素的PRIM-1640培养基调整细胞数为4×105/mL，以0.5 mL/孔于24孔培养板培养过夜，约75%细胞汇合后进行转染。瞬时转染48 h后细胞按1∶6接种于 6孔板，并加600 μg/mL G418进行稳定转染筛选。14 d后出现多个G418抗性的集落，由于质粒带有绿色荧光蛋白GFP，在荧光显微镜下可见绿色荧光的阳性集落。显微镜下，用移液器枪头吸取少量胰蛋白酶后挑取带绿色荧光的单个集落。挑取的集落移入24孔培养板，G4
基础医学与临床 2013年8期2013-09-15
- 不同胎牛血清、培养瓶体外培养大鼠骨髓间充质干细胞效果比较
较了普通、高纯度胎牛血清培养基及塑料瓶、玻璃瓶体外培养全骨髓贴壁法分离的骨髓间充质干细胞的效果，旨在建立一种简便、有效、稳定的BMSCs分离培养体系。现报告如下。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 实验动物 健康4周龄SD大鼠6只，雌雄不限，由南昌大学动物科学部提供，实验过程中对动物的处置符合2006年科技部《关于善待实验动物的指导性意见》的规定。1.1.2 主要试剂和仪器设备 DMEM、0.25%胰蛋白酶－EDTA消化液、标准胎牛血清、PBS粉、DMS
山东医药 2012年38期2012-04-13
- 最后的疯狂——美法英轰炸利比亚有感
，接种于含10%胎牛血清的RPMI‐1640培养基中，37℃、含5%二氧化碳的培养箱中培养，实验中使用对数生长期的细胞。亚非拉殖民卖黑奴，侵略割地索赔款，殖民利益要“均沾”……一切为了自家私利，一切为了掠夺资源。即使面临沉沦，也要作垂死冒险。就像夏夜的飞蛾，总要扑向火焰。这是最后的疯狂，还能横行多少年？受辱的人们在图强，中国潜龙要升天。今天的世界瞬息万变，谁见过千年不败的强权？让那些西化“精英”鹦鹉学舌去吧，四百年的罪恶，人民将彻底清算！
中华魂 2011年6期2011-12-23
- 新生牛血清对大鼠脂肪来源细胞生长的影响
的培养基，尤其是胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)。我们采用新生牛血清替代传统的胎牛血清培养分离的大鼠脂肪来源细胞，观察新生牛血清对大鼠脂肪来源细胞生长的影响，以期用价格较便宜的新生牛血清替代传统价格较贵的胎牛血清进行脂肪来源细胞培养。1 材料和方法1.1 主要实验材料 出生后3~5d的SD大鼠（我校实验动物中心）；Ⅰ型胶原酶（Sigma,美国）；DMEM/F12(1:1)培养基（Gibco,美国）；新生牛血清（杭州四季青）；超净工作
遵义医科大学学报 2011年4期2011-12-03
- 一种简便的大鼠肝脏星状细胞分离培养方法及鉴定
京索莱宝公司)，胎牛血清(无支原体级)(杭州四季青)，Desmin抗体(bioword)，SABC免疫组化试剂盒(武汉博士德)。1.2 方法1.2.1 液体配制 (1)灌注酶:链酶蛋白酶100 mg，Ⅳ型胶原酶 50 mg，D-Hanks 100 mL。(2)消化酶:Ⅳ型胶原酶50 mg，链酶蛋白酶20 mg，DNA酶10 mg，D-Hanks 100 mL。(3)密度梯度离心液:9份Percoll加 1 份 1.5M PBS，配置成 100% 的 Per
中国肿瘤外科杂志 2011年2期2011-05-24
- 一些常用词汇可直接用缩写
胎牛血清(FBS) 天冬氨酸转氨酶(AST) 磷酸盐缓冲液(PBS)人类免疫缺陷病毒(HIV) 变异系数(CV) 磁共振成像(MRI)血红蛋白(Hb) 核因子-κB(NF-κB) 重症监护病房(ICU)酶联免疫吸附测定(ELISA) 逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR) 严重急性呼吸综合征(SARS)动脉血氧分压(PaO2) 肿瘤坏死因子(TNF) 动脉血二氧化碳分压(PaCO2)干扰素(IFN) 凝血酶时间(TT) 白细胞介素(IL)活化部分凝血活酶时间
山东医药 2011年13期2011-04-13
- 酸性肽对体外培养大鼠星形胶质细胞增殖的影响*
ibco公司),胎牛血清(郑州真科生物有限公司)。1.2 大鼠星形胶质细胞的培养与鉴定[4-5]取出生后2 d内的SD大鼠(郑州大学实验动物中心),无菌条件下断头取出大脑皮质部分,投入PBS中,仔细剔除中脑、嗅球、海马、脑膜及毛细血管等结构,进行星形胶质细胞的原代培养。取第 2代的星形胶质细胞,用2.5 g/L的胰蛋白酶消化细胞,接种于预先经多聚赖氨酸处理的盖玻片上,3 d后,先用 0.01 mol/L PBS漂洗,再用PBS配制的40 g/L多聚甲醛固定
郑州大学学报（医学版） 2010年3期2010-03-19
- 青海高原地区母牛胎衣不下及其影响因素调查
4可看出,1～2胎牛胎衣不下的发病率2.00%～3.60%,3～4胎牛胎衣不下的发病率3.94%～3.77%,5～6胎牛胎衣不下的发病率3.06%～5.08%,7～10胎牛胎衣不下的发病率9.20%～20.00%。从胎衣不下的发病率看,胎次越大胎衣不下的发病率越高。表4 胎衣不下与胎次的关系2.5 胎衣不下与分娩月份的关系 从表5可看出,6、7、8月份牛胎衣不下的发病率最高,分别为10.00%、9.80 %、11.83%;1月份、11月份、12月份胎衣不下
中国草食动物科学 2010年2期2010-01-30
- 犊牛护理中需注重的一些问题
协力的猛拉，新生胎牛在一二三的喊声中突然离开母体，脐带嘎然断开，鲜血四射，造成胎牛窒息，长时间的缓不过气来，场面好不惊险。正确的做法，胎蹄露出阴门外，不要惊慌，不要急于接产，应顺其自然，给母牛一个适应环境的过程，也给胎牛一个自然产出的缓冲条件，这样通过一段时间的自身适应和骨盆开张，大多数牛在20～40min可以自然产出，如果胎牛过大或努责有限，可在关键时刻人为助产，借助母牛的努责节律加劲拽拉。另外在人工接产时要注意，不可与阴道水平方向拉拽，而应顺着阴门斜下
现代农业研究 2009年4期2009-05-04