荧光定量PCR
- 基于DNA条形码、多重PCR、荧光定量PCR对九香虫及其混伪品进行鉴定
CR、荧光定量PCR对市售九香虫、小皱蝽及其掺杂样品进行鉴定。方法：利用通用引物COI进行扩增并测序，构建NJ系统发育树、二级结构并计算种内种间遗传距离；基于COI序列设计九香虫、小皱蝽特异性引物并进行电泳，比较电泳条带；基于COI引物进行SBYR荧光定量PCR，观察单一样品及不同比例混合样品的熔解曲线及其Tm值。结果：利用MEGA 11.0软件分析显示九香虫、小皱蝽分别单独聚为一支，其种间遗传距离均大于0.22，种内遗传距离均小于0.02；两者的二级结构
赤峰学院学报·自然科学版 2023年2期2023-05-30
- 美洲南瓜Dof基因家族鉴定与表达模式分析
家族；荧光定量PCR；果实发育中图分类号：S642.6 文献标志码：A 文章编号：1673-2871（2023）05-016-13Identification and expression pattern analysis of Dof gene family in Cucurbita pepoSUN Shouru HU Deju CHANG Jingyi WANG Yong MA Changsheng ZHU Lei（1. Henan Cucumber
中国瓜菜 2023年5期2023-05-27
- 美国薄壳山核桃细菌性叶枯病研究进展
疫法;荧光定量PCR;细菌性叶枯病中图分类号：S436.64 文献标志码： A文章编号：1002-1302（2022）12-0018-04收稿日期：2020-11-05基金项目：江苏省农业科技自主创新资金[编号： CX（19）3121]。作者简介：曹 凡（1990—），男，江苏南通人，博士，主要从事经济林育种与栽培研究。E-mail： caofan90@126.com。通信作者：李玉娟，副研究员，主要从事观赏苗木育种与栽培技术研究。E-mail： lygl
江苏农业科学 2022年12期2022-06-24
- 鸡毒支原体MG荧光定量PCR技术评估实验室MG核酸污染方法
用MG荧光定量PCR技术进行监测;而在鸡群的MG净化监控前，需要对实验室进行MG核酸污染评估，无污染后才能进行后续的净化检测工作。本实验采用MG荧光定量PCR技术评估实验室各区域的MG核酸污染情况，如果存在核酸污染，需要采取一系列的消毒措施，直至实验室MG核酸污染监控为阴性。关键词：鸡毒支原体;荧光定量PCR;核酸污染中图分类号：S858.31 文献标识码：B 文章编号：1673-1085（2022）03-0060-03荧光定量PCR（real-ti
家禽科学 2022年3期2022-04-05
- 灰黄青霉D-756实时荧光定量PCR体系的建立及验证
霉素;荧光定量PCR;内参基因;聚酮合酶中图分类号：Q 933; Q 78 文献标志码：A 文章编号：0253-2301（2022）01-0006-06DOI： 10.13651/j.cnki.fjnykj.2022.01.002Establishment and Validation of the Real-time Fluorescence Quantitative PCR Systemfor Penicillium Griseofulvum D-
福建农业科技 2022年1期2022-03-13
- 山羊地方性鼻内肿瘤病毒（ENTV-2）SYBR-GreenI实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用
I实时荧光定量PCR检测方法，对所建立的PCR反应条件进行优化，将PCR扩增产物连接T载体构建的阳性质粒作为标准品，对SYBR-Green I实时荧光定量PCR检测方法的特异性、敏感性和重复性进行验证。【结果】建立的检测ENTV-2 qPCR方法标准曲线呈现良好的线性关系（R2=0.992）;该方法的特异性良好，对ENTV-2可以产生特异性扩增曲线，与 ENTV-2高度同源的ERVs没有交叉反应，也无法扩增羊口疮病毒（ ORFV）、绵羊肺炎支原体（ Mo）
福建农业学报 2021年7期2021-11-12
- 大麦条纹花叶病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用
毒; 荧光定量PCR; 大麦; RT-PCR; ELISA中图分类号： S 435.123文献标识码： ADOI： 10.16688/j.zwbh.2020388Establishment and application of fluorescence quantitative PCR detection method for Barley stripe mosaic virusWANG Lishan1，2， WANG Haiyang2， QIAN Yun
植物保护 2021年5期2021-10-12
- 荧光定量PCR检测HBV核酸诊断的临床价值研究
：探析荧光定量PCR检测HBV核酸诊断的临床价值。方法：选取2020年1月至12月期间本站就诊的200例体检者，均需要采集HBV血清样本，并进行荧光定量PCR核酸检测及免疫标志物检测。观察荧光定量PCR检测及免疫标志物检测相关结果结果：200例HBV血清样本中，102例HBV-DNA样本呈阴性，98例为阳性，阳性最低定量为1.87*103/mL，阳性最高定量为9.47*103/mL，HBV免疫标志物检出阳性率104例（52.00%）；其中大三阳（HBsAg
医学食疗与健康 2021年7期2021-09-17
- 广藿香FPPS基因原核表达及茉莉酸甲酯对FPPS表达量的影响
酯， 荧光定量PCR中图分类号： Q943 文献标识码： A 文章编号： 1000-3142（2021）07-1155-10Abstract： Farnesyl diphosphate synthase （FPPS）， a key enzyme for terpene biosynthesis in patchouli mevalonate pathway， catalyzes isoprene pyrophosphate （IPP） and dime
广西植物 2021年7期2021-09-12
- 幽门螺杆菌感染诊断方法的评价与诊断标准研究
别采用荧光定量PCR以及ELISA两种方式对患者的血清进行诊断，分析两组患者的各项结果。结果：在本次研究结果中发现，ELISA诊断准确率为358（89.50%），低于PCR的诊断准确度389（97.25%），组间对比差异显著（P<0.05）。结论：在进行幽门螺杆菌感染诊断时，选择PCR诊断方式，能够有助于帮助医务人员了解患者的病情，具有良好的可应用价值，值得进行进一步的推广。关键词：荧光定量PCR;幽门螺杆菌;ELISA;诊断方式幽门螺杆菌在临床上属于一种
医学前沿 2021年8期2021-09-10
- 高山松miR171a及其靶基因的鉴定与表达分析
基因;荧光定量PCR中图分类号： S718.46文献标志码： A文章编号：1002-1302（2021）07-0062-05收稿日期：2020-08-05基金项目：国家自然科学基金（编号：31500499）;河南省高校科技创新人才项目（编号：16HASTIT019）。作者简介：张雪如（1996—），女，河南洛阳人，硕士研究生，主要从事植物发育生物学方面的研究。E-mail：1365655297@qq.com。通信作者：邱宗波，博士，教授，主要从事植物分子生
江苏农业科学 2021年7期2021-05-26
- 黄瓜CsGPX基因克隆与细菌性角斑病胁迫下的表达分析
;采用荧光定量PCR的方法分析CsGPX基因在细菌性角斑病侵染0～96h下的表达情况。[结果]CsGPX基因cDNA序列全长914bp，包含一个513bp的开放阅读框，编码170个氨基酸，该基因编码蛋白的相对分子质量约为19.02kD，理论等电点是8.66，为亲水性蛋白，不具有跨膜结构，不含信号肽序列。实时荧光定量PCR分析表明，CsGPX在黄瓜叶中有表达。在黄瓜细菌性角斑病菌侵染下，该基因在黄瓜叶中表达增高，明显受黄瓜细菌性角斑病菌的诱导。[结论]CsG
安徽农业科学 2021年7期2021-04-29
- 非洲猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及4种检测试剂盒的比较
洲猪瘟荧光定量PCR检测试剂盒，参考OIE推荐的非洲猪瘟病毒（ASFV）荧光定量PCR方法合成引物和探针，建立非洲猪瘟病毒qPCR检测方法（OIE-qPCR）;并与市面4种ASFV检测试剂盒进行了比较。以人工合成的ASFV p72基因TA克隆重组质粒为阳性标准品，OIE-qPCR可以检测到10～102 copies;而4种ASFV荧光定量PCR检测试剂盒中，进口试剂盒TF-qPCR能检测到10 copies，进口试剂盒ID-qPCR和国产试剂盒QD-qPC
江苏农业科学 2021年2期2021-03-22
- 山东省盐渍化地区芦苇根际反硝化细菌群落结构研究
，采用荧光定量PCR技术及高通量测序技术，对nirS、nirK及nosZ3种基因型反硝化细菌的丰度以及nosZ基因型反硝化细菌的多样性、群落分布进行比较分析。结果表明，山东省盐渍化地区的芦苇根际中nosZ基因的拷贝数最高，昌邑和寿光地区的芦苇根际nirK基因拷贝数高于nirS，东营和滨州的芦苇根际nirS基因拷贝数高于nirK。固氮螺菌属（Azospirillum）是山东省盐渍化地区芦苇根际的优势反硝化细菌，尤其在昌邑（39.1%）和滨州地区（35.1%）
山东农业科学 2021年12期2021-03-01
- 牛流行热病毒荧光定量PCR检测方法的建立
害以及荧光定量PCR技术高效、快速、精准的优点，本研究针对牛流行热病毒（Bovine Ephemeral Fever Virus，BEFV）G基因建立荧光定量PCR检测方法。并用所建立的荧光定量PCR检测方法对临床采集的样本进行检测。结果显示：在GenBank数据库中对BEFV全基因组序列进行比对分析，找出保守序列，设计1对扩增BEFV G基因片段的引物，通过分子克隆构建重组质粒制备标准曲线，扩增效率是95.1%，用所建立的方法检测临床样本，阳性15份，阳
国外畜牧学·猪与禽 2020年11期2020-12-21
- 转基因大麦B-hordein基因荧光定量PCR方法的建立
nⅠ;荧光定量PCR;转基因大麦;B-hordein中图分类号：S512.3 文献标志码：A 文章编号：1001-1463（2020）11-0011-06doi：10.3969/j.issn.1001-1463.2020.11.003Abstract：In this study， a qRT-PCR system with SYBR Green I was established to characterise the variat
甘肃农业科技 2020年11期2020-12-06
- 铁皮石斛鲨烯单加氧酶基因的克隆与表达分析
用实时荧光定量PCR检测DoSQEl与DoSQE2基因在铁皮石斛营养生长期的8月、10月、12月茎和叶中的表达模式。[结果]DoSQEl基因cDNA序列全长1796bp（GenBank登录号MTl60182），含有1个1554bp的ORF，编码517个氨基酸;DoSQE2基因cDNA序列全长1963bp（GenBank登录号MTl60183），含有1个1578bp的ORF，编码525个氨基酸。DoSQEl具有2个跨膜区，分别在4～22aa和55～72aa;
福建农业学报 2020年5期2020-11-09
- 荧光定量PCR和ELISA法对支原体肺炎诊断的临床意义
：探讨荧光定量PCR和ELISA法对支原体肺炎诊断的临床意义，以为支原体肺炎患儿临床治疗和监测预后提供可行性借鉴。方法：采用医学研究对比法，随机筛选我院检验科2019年3月-2020年3月收治的400例患儿为受试对象，依照原体肺炎诊断环节相关方法差异，等分对照为对照组和观察组两列，分别是以ELISA法检验和荧光定量PCR检验法检测，观察每组对支原体肺炎诊断的诊断疗效。结果：观察组肺炎支原体阳性检验正确率为95%（190/200）明显高于对照组检验正确70%
健康大视野 2020年20期2020-11-09
- 猪乙型脑炎病毒SYBR-GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立
EV的荧光定量PCR方法。结果显示，该方法灵敏度达到103拷贝/μL，对猪圆环病毒2型（PCV2）、猪细小病毒（PPV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪伪狂犬病毒（PRV）均无交叉反应，具有良好的特异性和重复性;采用JEV攻毒小鼠，荧光定量PCR比普通PCR更能灵敏地检出组织带毒量。该方法可用于组织样品中乙脑病毒的定量检测以及临床乙脑病毒感染的早期检测和定量分析猪乙脑病毒感染程度。关键词：猪乙脑病病毒;SYBR-GreenⅠ;荧光定量PCR;检测中图分类号： S
江苏农业科学 2020年18期2020-10-20
- 实时荧光定量PCR技术在手足口病检测中的应用
討实时荧光定量PCR技术在手足口病检测中的应用。 方法 选择本溪市疾病预防控制中心2018年2月～2019年6月收治的120例手足口病患儿作为研究对象，根据检测方法不同分为对照组和观察组。对照组利用常规PCR技术检测手足口病组，实时荧光定量PCR技术检测手足口病为观察组。比较两组的检出肠道病毒分型EV、EV71、CoxA16阳性率，特异性和灵敏度。 结果 采用实时荧光定量PCR技术与常规PCR技术检测手足口病肠道病毒分型EV、EV71、CoxA16的阳性率
中国现代医生 2020年15期2020-08-04
- 实时荧光定量PCR技术及其应用研究进展
实时荧光定量PCR技术是在传统PCR技术上发展而来的，不仅能判断某一基因的有无，而且还能对其进行定量分析。由于该技术与常规PCR相比，能够进行实时监测、自动化程度高而被广大研究者青睐。本文对实时荧光定量PCR的原理、数据分析、定量方法、分类以及应用进行了系统而详细的综述。关键词 荧光定量PCR;原理;定量方法;分类;应用中图分类号 Q503 文献标识码 A文章编号 1007-5739（2020）06-0001-03
现代农业科技 2020年6期2020-04-23
- 评价荧光定量PCR技术在痰结核菌检测中的应用
中应用荧光定量PCR检测方式的临床效果。方法：建立检测痰结核荧光定量PCR技术，对多种敏感性和特异性进行检验，通过对150例住院患者痰结核细菌检测，得出相关数据，并进行对比分析。结果：使用荧光定量PCR技术的患者标本阳性检出率为35.33%。培养法的患者标本阳性检出率为17.33%，涂片法的患者标本阳性检出率为12.00%。荧光定量PCR技术均优于培养法和涂片法，更能有效检测出结合杆菌，数据比较存在显著差异性，P结论：荧光明显定量PCR技术明显优于传统的结
健康必读（上旬刊） 2020年3期2020-04-19
- 虾虹彩病毒TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测方法的建立
B探针荧光定量PCR，为实现虾虹彩病毒病（SIVD）快速诊断及疫情监测提供一种新的技术手段。【方法】根据SIV的MCP基因保守序列设计特异性引物和TaqMan-MGB探针，将目的片段克隆至pMD18-T载体制备重组质粒pMD18-T-MCPSIV;优化反应体系及扩增条件后建立检测SIV的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR，以pMD18-T-MCPSIV为标准品绘制标准曲线，并通过特异性、敏感性、重复性试验及临床应用验证其实用性。【结果】制备的重组质粒（
南方农业学报 2020年2期2020-04-14
- 荧光定量PCR在脑脊液结核分枝杆菌DNA检测中的应用价值分析
的：对荧光定量PCR在脑脊液结核分枝杆菌DNA检测中的应用价值展开分析与探讨。方法：选择在我院接受检查的结核性脑膜炎患者91例和非结核性脑膜炎患者42例纳入本次研究，分别利用荧光定量PCR和改良罗氏培养法对研究对象的脑脊液样本进行检测，比较两种检测方法的检测结果。结果：荧光定量PCR和改良罗氏培养法对结核性脑膜炎患者脑脊液中结核分枝杆菌的检验阳性率分别为60.44%、16.48%，相较于改良罗氏培养法，荧光定量PCR对结核性脑膜炎患者脑脊液中结核分枝杆菌的
特别健康·下半月 2020年4期2020-04-09
- 减施化肥对水稻土壤nirK型反硝化菌丰度的影响
，采用荧光定量PCR技术，研究了紫云英配施减量化肥对水稻土壤nirK型反硝化菌丰度的影响。结果表明，MF60处理是一种既节能又高效的施肥制度;种植绿肥的，土壤有机质含量明显增加，在化肥减施的情况下，土壤全氮和有效氮的含量并不降低;与单施化肥相比，绿肥配施减量化肥降低了土壤反硝化潜势;种植绿肥的土壤nirK基因丰度显著低于单施化肥处理;土壤nirK基因丰度与土壤反硝化潜势呈极显著正相关。关键词：绿肥;减施化肥;反硝化菌;nirK基因;荧光定量PCR中图分类号
安徽农学通报 2020年1期2020-02-29
- 水质中大肠杆菌荧光定量PCR检测方法的建立及应用
杆菌群荧光定量PCR检测方法。[方法]根据Genbank中大肠杆菌保守的uida基因序列，设计特异性引物，扩增并构建重组质粒作为标准品。同时设计荧光定量PCR引物，优化荧光定量PCR定量反应体系，建立水质中大肠杆菌的绝对定量方法。[结果]成功地构建了含uida基因的重组质粒，利用标准质粒为参照，分别对不同来源的水质进行检测，成功检出每微升水质中大肠杆菌的基因拷贝数，且方法具有特异性好、重复性高的特点。[结论]初步建立水质中大肠杆菌的荧光定量PCR检测方法，
科技创新与应用 2019年35期2019-12-19
- 虹鳟HMGCR基因克隆及组织差异表达分析
，采用荧光定量PCR技术，比较HMGCR基因在虹鳟肝脏、肠道、胃、心脏、鳃、脾脏、肾脏、肌肉8种组织器官中的表达差异。[结果]虹鳟HMGCR基因的mRNA序列与大西洋鲑的同源性达97%，其蛋白序列与脊椎动物的同源性都在70%以上，表明该基因在物种进化过程中比较保守;该基因在虹鳟肝脏、肠道、胃、心脏、鳃、脾脏、肾脏、肌肉8种组织器官中均有表达;其中，该基因在肝脏和心脏中的表达量较高，而在胃中的表达量最低。[结论]该研究克隆出虹鳟胆固醇合成关键限速酶HMGCR
安徽农业科学 2019年18期2019-11-01
- 电化学发光法定量检测乙型肝炎表面抗原与荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA载量的关系探讨
g）与荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA（HBV-DNA）载量的关系。方法 选择2018年1月至2019年2月我院收治的170例慢性乙型肝炎患者为研究对象，抽取患者静脉血液分离血清，同时采用ECLIA法和荧光定量PCR法对患者血清进行HBsAg含量和HBV-DNA载量检测，对检测结果进行分析。结果 有151例患者血清检测结果为HBsAg阳性，所占比率为88.82%，有96例患者血清检测结果为HBV-DNA阳性，所占比率为56.47%，有96例患者的血清检测结
人人健康 2019年10期2019-10-14
- 玫瑰痤疮与肠道菌群紊乱的相关性研究
。采用荧光定量PCR检测肠道菌群中双歧杆菌、肠球菌、肠杆菌、拟杆菌、梭杆菌和乳酸杆菌的拷贝数，分析两组肠道菌群拷贝数的差异，以及肠道菌群与玫瑰痤疮的相关性。结果：玫瑰痤疮志愿者肠道菌群中乳酸杆菌、梭杆菌、双歧杆菌的拷贝数及双歧杆菌与肠杆菌比值 （B/E值）均低于健康对照组，肠球菌及拟杆菌拷贝数高于健康对照组，差异有统计学意义（均P<0.05）;肠杆菌拷贝数稍低于健康对照组，但差异无统计学意义（P>0.05）。乳酸杆菌、梭杆菌及双歧杆菌拷贝数与玫瑰痤疮病情呈
中国美容医学 2019年7期2019-07-13
- 蓖麻GA20-氧化酶基因表达分析
CR和荧光定量PCR技术，对GA20氧化酶基因在蓖麻的不同器官及器官发育的不同阶段的表达特异性进行分析。结果表明，蓖麻的矮化不是由GA20氧化酶基因的突变所引起;GA20氧化酶基因在种子和嫩叶中的表达量最高，在成熟叶中可大量表达，在茎中可微量表达，在根中可痕量进行表达;同一生长时期，高秆品种的GA20氧化酶基因表达量明显高于矮秆品种，不同生长时期高秆品种GA20氧化酶基因的表达量呈现由高到低再升高的变化趋势，而矮秆蓖麻GA20氧化酶基因的表达量始终处于相对
江苏农业科学 2019年10期2019-07-08
- 制药废水厂微生物群落和多种抗性基因相关性分析
技术和荧光定量PCR技术对制药废水厂中活性污泥进行检测。荧光定量结果表明：sul1，sul2，tetO，tetQ，tetW，OXA-1和可移动遗传元件int1在制药废水厂中各个阶段均能被广泛地检测到，总抗性基因浓度范围为3.09×108～2.26×109 copies/g（干重），基因总浓度上升了7.3倍。Miseq测序结果表明：制药废水中主要优势菌门为Proteobacteria，Bacteroidetes，Firmicutes，Thermus和Gemm
河北科技大学学报 2019年2期2019-06-11
- 两种荧光定量PCR试剂检测HBV-DNA的比较与评价
键词：荧光定量PCR;乙肝病毒;凯杰试剂;之江试剂;罗氏试剂中图分类号：R512.62;R440 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.06.057文章编号：1006-1959（2019）06-0174-03Abstract：Objective To investigate the correlatio
医学信息 2019年6期2019-06-09
- 杨树枯萎病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
为建立荧光定量PCR检测杨树枯萎病的方法和明确前期分离的拮抗菌N6-34对杨树枯萎病致病菌尖孢镰刀菌的作用，本试验采用常规PCR法扩增尖孢镰刀菌的特异性片段，将此片段与载体连接构建质粒，提取质粒DNA在实时荧光定量PCR仪上采用两步法进行扩增并绘制实时荧光定量PCR标准曲线，同时对杨树进行不同灌根处理（T1：1×106 cfu/mL的尖孢鐮刀菌孢子悬液和未接N6-34菌株的发酵培养液各20 mL;T2：1×106 cfu/mL的尖孢镰刀菌孢子悬液和灭活的N
山东农业科学 2019年2期2019-04-06
- 多重荧光定量PCR测定登革热Ⅰ~Ⅳ型方法的建立与初步评价
討多重荧光定量PCR测定登革热Ⅰ～Ⅳ型方法的建立与初步评价。 方法 针对登革热Ⅰ～Ⅳ型使用自建的引物探针对反应条件及温度进行调整，且对阳性样本进行不同浓度的稀释，检测自建多重荧光定量PCR在登革热Ⅰ～Ⅳ型测定中的重复性、灵敏性及特异性。 结果 6份登革热阳性样本通过自建的检测方法来进行检测，全部能够显示明显的S曲线扩增，且与原有确证方法相比，不同型别的结果一致。其他10份病毒阳性样本及阴性样本全部没有显示扩增曲线，提示自建的检测方法特异性良好。分别检测登革
中国现代医生 2019年34期2019-02-20
- 牛病毒性腹泻病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
Ⅰ实时荧光定量PCR方法。将标准阳性样品10倍梯度稀释检测灵敏度，用能感染奶牛的其它病毒做对照检测特异性，用临床样本检测重复性。结果表明，该方法与能感染奶牛的其它幾种病毒均无交叉反应，检出敏感度达4.87 × 101 copies/μL，比常规PCR检测方法高10倍。同时检测了5个规模化奶牛场送检的67份奶牛腹泻样本，其BVDV检出率为46.27%（31/67）。本研究成功建立了BVDV SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法，为BVDV的快速
山东农业科学 2019年12期2019-02-10
- 基于荧光定量PCR的羊绒、牦牛绒混合物定量检测方法
，借助荧光定量PCR技术，建立羊绒和牦牛绒的定量标准曲线，实现这两种混合物的定量检测。关键词：羊绒;牦牛绒;荧光定量PCR;DNA定量检测中图分类号：TS137文献标志码：A文章编号：1009-265X（2019）05-0034-05Abstract：It is hard to identify the fibers of some special animals with close relation in species， physical and c
现代纺织技术 2019年5期2019-01-14
- 模式植物狗尾草响应不同干旱及盐胁迫表达的内参基因actin及其应用
，设计荧光定量PCR引物，以不同程度的干旱及不同浓度盐胁迫处理的狗尾草幼苗cDNA做模板，进行荧光定量PCR试验，通过实时荧光定量PCR扩增片段电泳分析，扩增曲线及溶解曲线综合分析，结果表明登录号Sevir.9G114100对应的actin基因是8个actin基因中最合适的内标基因。并对所选内标的实用性进行了验证，验证的结果与转录组数据的结果保持一致，证明所选内标基因可用于后续狗尾草响应不同干旱及盐胁迫狗尾草转录组基因表达的验证工作，为深入研究狗尾草功能基
热带作物学报 2019年12期2019-01-09
- 荧光定量PCR法在产前筛查B族链球菌感染中的临床应用价值和意义
结果：荧光定量PCR法检出B族链球菌感染的准确度、敏感度和特异性均明显高于细菌培养（P关键词 荧光定量PCR;准确度;B族链球菌;孕妇;产前筛查B族链球菌是一类位于人体阴道和下消化道内的致病菌，该病原菌可能会感染胎儿，导致胎儿窘迫、败血症等疾病[1]，严重影响孕妇和胎儿的健康。孕妇阴道内B族链球菌的感染率约10%～30%，因此开展产前筛查具有重要的临床意义。临床通常将基因测序作为B族链球菌诊断的金标准，但该方法目前无法普及，对设备和检测技术的要求较高[2]
中国社区医师 2018年27期2018-12-14
- miRNA的研究进度与问题总结
ot；荧光定量PCR；miRNA芯片研究目的：一小部分miRNA被发现有着调节细胞生长，组织分化的作用，因而与生命过程中发育，疾病有关。例如，miR-273和ly56，编码的miRNA的研究在医学上是一个极受关注的领域。一、研究背景DNA、RNA和蛋白质是生命科学研究的三大主体，DNA、RNA和蛋白质之间的关系是经典和现代化法则的核心内容；通常情况下，RNA是DNA和蛋白质之间的“过渡”。近年来的研究表明，RNA在生命进程中扮演的角色远比我们早年设想的更为
速读·中旬 2018年8期2018-10-23
- 支气管肺泡灌洗液结核杆菌检测在菌阴肺结核中的诊断价值
培养、荧光定量PCR检测结核DNA，以分析我院BALF检测在菌阴性肺结核患者中的诊断价值。结果 BALF三种检查方法确诊肺结核患者26例，占43.3%。荧光定量PCR在菌阴性肺结核患者中的检测灵敏度为84.5%，特异度为94.1%，阳性预测值为91.7%，阴性预测值为88.9%；培养法在菌阴性肺结核灵敏度为46.2%，特异度为100.0%，阳性预测值为100.0%，阴性预测值70.8%，与非结核疾病比较，检测结果均具有统计学差异（P[关键词] 肺泡灌洗液；
中国现代医生 2018年12期2018-09-13
- 拟环纹豹蛛热休克蛋白20基因的克隆与分析
并采用荧光定量PCR检测镉胁迫下PpHSP20基因的相对表达量。【结果】克隆获得的PpHSP20基因编码区长525 bp，编码174个氨基酸，其编码蛋白分子量20.08 kD，等电点5.97，具有小分子热休克蛋白家族典型的α-晶状体蛋白结构域，与温室拟肥腹蛛（Parasteatoda tepidariorum）α-晶体蛋白A有较高的相似性（58%）。荧光定量PCR分析结果显示，镉胁迫下PpHSP20基因的表达量显著增加（P关键词： 拟环纹豹蛛；HSP20基
南方农业学报 2018年8期2018-09-10
- 羽衣甘蓝BoRACK1基因克隆、亚细胞定位及表达分析
。利用荧光定量PCR（qRT-PCR）检测BoRACK1基因在不同组织中及在非生物胁迫（200 mmol/L NaCl、100 μmol/L ABA和1 mmol/L H2O2溶液）下幼苗中的表达情况。【结果】PCR扩增获得BoRACK1基因的开放阅读框（ORF）序列，其cDNA全长980 bp，编码326个氨基酸，氨基酸序列与其他植物的RACK1具有较高同源性，在65%以上，尤其与拟南芥的同源性高达93%。BoRACK1基因在羽衣甘蓝的根、茎、叶、花和种
南方农业学报 2018年4期2018-09-10
- 猪乙型脑炎病毒SCYA201201株感染小鼠后突破血脑屏障能力研究
时利用荧光定量PCR方法检测其血液、脑组织E基因拷贝数，探究该毒株突破小鼠血脑屏障的能力，从而评估SCYA201201株(F122代次)作为弱毒活疫苗的潜力。结果显示，SCYA201201株(F122代次)高度弱化，对乳鼠的脑内半数致死量(LD50)仅为4×105PFU·40μL-1。该毒株腹腔接种24h内，小鼠脑部未出现病理变化，且荧光定量PCR检测为阴性，表明该毒株不能突破小鼠的血脑屏障，具有很高的安全性。关键词：猪乙型脑炎病毒；半数致死量；荧光定量P
浙江农业学报 2018年6期2018-06-28
- 茉莉花JsPAL2基因的克隆与表达分析
并采用荧光定量PCR技术检测JsPAL2在茉莉花发育过程、开放过程以及经MeJA处理过后花朵中的表达量变化。结果表明，在花蕾生长发育时期，JsPAL2的表达量随着天数的增加而升高，在5 d时达到最高；在不同开放时期，18：00花朵未开放时JsPAL2表达量最低，22：00花朵半开放时表达量最高；经外源茉莉酸甲酯处理后，JsPAL2的表达量明显增加，在处理后7 h达到最高，随后逐渐降低，推测该基因可能与茉莉花香气物质的合成有关，同时MeJA可能对其表达有诱导
热带作物学报 2018年7期2018-05-14
- γ—干扰素释放试验、荧光定量PCR、结核菌素皮肤试验联合检测对涂阴性肺结核的诊断价值
A）、荧光定量PCR（FQ-PCR）、结核菌素皮肤试验（TST）三种方法联合检测对涂阴性肺结核的诊断价值。方法：选取确诊的33例涂阴性肺结核和30例非结核的肺部感染患者，分别使用酶联免疫法（ELISA法），测定患者全血干扰素的浓度，荧光定量PCR法检测患者肺泡灌洗液的结核杆菌DNA，卡介菌纯蛋白衍生物（BCG-PPD）进行结核菌素皮肤试验。结果：γ-干扰素释放试验、荧光定量PCR、结核菌素皮肤试验三种检测方法在肺结核组和非肺结核组的阳性率比较，差异均有统计
中国医学创新 2017年33期2018-01-23
- Roche定量试剂和国产PCR试剂检测HBV—DNA的比较分析
系统；荧光定量PCR[中图分类号] R446.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2017）34-0114-04Comparative analysis of Roche quantitative reagent and domestic PCR reagent for detection of HBV-DNAZHOU Meiying1 GAO Guosheng2 HU Airong31.Center Laboratory，Zheji
中国现代医生 2017年34期2018-01-23
- 乳品中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌快速检测的新体系
探索了荧光定量PCR技术在快速检测乳品中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的应用，并进行了大量的验证试验和实际检测，形成了乳品中致病菌快速检测的新体系。该体系可以在24h内完成金黄色葡萄菌和沙门氏菌的增菌与检测，缩短了整体检测时间，降低了检测成本，为进一步改良乳品中致病菌快速检测提供了参考数据。关键词：乳品 金黄色葡萄菌 沙门氏菌 荧光定量PCR 检测在食品安全问题日益多元化的今天，在食品中占特殊地位的乳及乳制品的安全性一直是社会和科学研究关注的焦点。乳制品营养丰富
食品安全导刊 2017年12期2018-01-04
- 猪圆环病毒2型体外刺激猪髋动脉血管内皮细胞的炎症相关细胞因子mRNA转录分析
样品，荧光定量PCR方法检测细胞因子IL-1β、IL-8及IL-18 mRNA转录水平的变化。结果显示，PCV2感染PIEC后，对促炎症细胞因子IL-1β、IL-18及趋化因子IL-8主要起上调表达作用。由此推测细胞因子在体内的综合效应会导致PCV2感染早期机体产生过度炎症反应，并趋化中性粒细胞，引发机体免疫抑制，影响机体特异性免疫应答的正常运转，为PCVD的发病创造条件。关键词：猪圆环病毒2型；猪髋动脉血管内皮细胞；炎症相关细胞因子；荧光定量PCR；mR
江苏农业科学 2017年21期2017-12-13
- 长期夜班工作医护人员肠道菌群结构的变化
，利用荧光定量PCR方法定量分析两组人群肠道主要菌群结构的变化。 结果 试验组与健康对照组相比，长期夜班工作的医护人员的拟杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌含量均有下降，差异有高度统计学意义（P[关键词] 长期夜班工作医务人员；肠道菌群；荧光定量PCR；调查[中图分类号] R378 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2017）28-0126-04[Abstract] Objective To investigate the changes of
中国现代医生 2017年28期2017-11-17
- 基于线粒体DNA COⅠ基因鉴别畜禽肉中鸡源性成分
R）和荧光定量PCR检测。结果表明：所设计的引物仅对鸡肉DNA模板有扩增条带和典型扩增曲线，且循环阈（cycle threshold，Ct）值为21.78，对其他动物DNA模板无扩增。方法特异性较强，灵敏度较高，达pg级，可以用于畜禽肉与肉制品中鸡源性成分的快速、有效、準确检测。关键词：鸡源性成分；线粒体DNA；COⅠ基因；荧光定量PCRIdentification of Chicken Origin Ingredients in Livestock an
肉类研究 2017年8期2017-11-16
- 儿童肺炎支原体感染三种实验诊断方法评价
检测及荧光定量PCR（Polymerase chain reaction）分析。以快速培养鉴定镜检法为诊断肺炎支原体感染金标准，比较抗体检测、抗原检测及荧光定量PCR三种诊断方法的灵敏度、特异度和Youden指数（正确诊断指数）。结果：抗体檢测的灵敏度、特异度和Youden指数分别为76.3%、77.9%、54.2%；抗原检测为37.7%、89.5%、27.2%；荧光定量PCR为93.0%、96.5%、89.5%。荧光定量PCR法的灵敏度、特异度和Youd
中国医学创新 2017年25期2017-11-14
- 猕猴桃细菌性溃疡病病原菌的荧光定量PCR检测方法优化
方面对荧光定量PCR方法检测猕猴桃溃疡病病原菌方法进行了优化，并应用于染病样品的檢测。结果显示，10μM引物浓度、58℃退火温度为最适条件；优化后的方法能检测出猕猴桃溃疡病染病枝条，特异性较高，稳定性较好。优化后的荧光定量PCR方法可用于猕猴桃栽培中溃疡病菌的快速准确检验。关键词：猕猴桃；溃疡病病原菌；荧光定量PCR；优化中图分类号 S436.634.1 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2017）19-0018-3Condition Opti
安徽农学通报 2017年19期2017-11-08
- 泌尿生殖道淋球菌、解脲支原体、沙眼衣原体感染特点分析
应用荧光定量PCR（FQ-PCR）技术对424例患者，取其宫颈、尿道分泌物或前列腺液同时进行NG、CT、UU、HSV的检测。结果 424例患者单项感染检出率为26.10%，混合感染检出率为1.40%，单项感染模式显著高于混合感染模式，差异有统计学意义（？字2=4.32，P0.05）。108例阳性患者中，年龄在20～40岁的性活跃期青壮年病原体感染阳性率86.10%。检测结果显示：UU检出率最高，在UU阳性患者中女性略高于男性，差异无显著的统计学意义（？字
医学信息 2017年20期2017-10-10
- 2个育性恢复基因Rf1a和Rf1b在红莲型水稻中的表达量分析
物结合荧光定量PCR技术，在红莲型水稻近等恢复基因系L-Rf5、L-Rf6，恢复系9311和不育系粤泰A（YTA）中检测2个包台型恢复基因Rf1a和Rf1b的表达量。[结果]Rf1a在L-Rf5、L-Rf6、9311中都能表达，而Rf1b只能在部分材料或部分组织中表达。对同一时期二者的表达量分析发现，L-Rf5和9311的相同组织中Rf1a表达水平显著高于Rf1b，L-Rf6叶片中Rf1a的表达量则低于Rf1b。[结论]该研究结果对研究红莲型恢复系的遗传多
安徽农业科学 2017年25期2017-05-30
- 肉制品中沙门氏菌荧光定量PCR标准质粒的构建
门氏菌荧光定量PCR的标准质粒。方法 设计针对沙门氏菌invA基因的引物，扩增特异片段，转入质粒载体中构建重组质粒。将构建的重组质粒作为标准品，进行优化后的实时荧光定量PCR，建立标准曲线，并考察该标准品灵敏性及稳定性。结果 成功构建含有沙门氏菌invA基因的质粒标准品，用其建立的标准曲线循环阈值（Ct值）与模板的拷贝数呈良好线性关系（r2=0.9979），最低可以检出10 拷贝/反应。该标准质粒经验证具有良好的稳定性。用该质粒标准品检测肉制品中的沙门氏菌
上海预防医学 2017年4期2017-05-18
- 国产PCR试剂和COBAS系统血清HBV—DNA检测结果不一致的原因分析
系统；荧光定量PCR[中图分类号] R512.6 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2017）02-0000-03Analysis of the causes of inconsistency of serum HBV-DNA test results between homemade PCR reagent and COBAS systemJIANG Xinhua1 GAO Guosheng2 HU Airong31.Clinical
中国现代医生 2017年2期2017-04-06
- 弗氏柠檬酸杆菌SYBRGreenⅠ荧光定量PCR诊断方法的建立及耐药性分析
n Ⅰ荧光定量PCR反应条件优化，建立弗氏柠檬酸杆菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR诊断方法，结果显示重复性好、特异性高，灵敏度可达1.0×101拷贝/μL，说明建立的弗氏柠檬酸杆菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法适合于弗氏柠檬酸杆菌病临床疑似病料样品的快速诊断。对分离得到的83株弗氏柠檬酸杆菌进行药敏试验，结果表明冷水鱼养殖中耐药性问题日益严重。关键词：弗氏柠檬酸杆菌；荧光定量PCR；快速诊断；耐药性中图分类号： S855.1+2 文献标
江苏农业科学 2016年11期2017-03-21
- 自然感染鲤疱疹病毒Ⅱ的病毒载量研究
因）的荧光定量PCR法，分别检测了自然感染CyHV-2的金鱼、鲫样品，并结合人工感染试验，分析了脾和肾组织内CyHV-2的载量及其引发的组织病理变化。结果表明，自然感染CyHV-2的金鱼和鲫的病毒拷贝数范围为102～105，人工感染CyHV-2的异育银鲫在感染后第五天脾和肾组织内病毒的拷贝数高达1010。人工感染条件下鱼体呈现系统性病理损伤，自然感染状态下鱼体脾和肾的病理变化分别表现为细胞嗜性的转变和炎症。关键词：鲤疱疹病毒Ⅱ；自然感染；荧光定量PCR；组
湖北农业科学 2016年4期2016-11-19
- 鸡体抗病毒蛋白基因荧光定量PCR检测方法的建立和初步应用
水平的荧光定量PCR方法，并将其应用于实践，本研究设计和筛选了3个基因的特异性扩增引物，制备了各基因的质粒标准品，绘制了荧光定量PCR的标准曲线，并检测了该方法的灵敏度、重复性和特异性。结果表明所建立的方法敏感度高、特异性强、检测线性范围广、重复性好，应用该方法检测了新城疫病毒感染SPF鸡胚后相关基因的表达情况，发现在病毒感染后IFIT5、PKR与OASL基因的表达水平均迅速提高。关键词：鸡；抗病毒蛋白；检测；荧光定量PCR中图分类号：S851.34+7.
山东农业科学 2016年4期2016-11-19
- PCR—荧光探针法检测严重少精子症或无精子症患者Y染色体微缺失的研究
键词]荧光定量PCR；Y染色体微缺失；男性不育[中图分类号]R698+.2 [文献标志码]A已婚孕龄夫妇中不孕不育症的发病率约为15%，其中男性因素约占50%。由遗传缺陷引起的精子发育障碍约占男性不育的30%以上，而Klinefelter综合征与Y染色体微缺失是最主要的遗传性因素。2015年我国男性生殖遗传学检查专家共识中指出，非梗阻性无精子症及严重少精子症患者，建议进行Y染色体微缺失检测（包括AZFa、AZFb、AZFc和AZFd区共8个位点），这对男性
中国性科学 2016年6期2016-09-14