荧光定量PCR法在产前筛查B族链球菌感染中的临床应用价值和意义

张文茂

摘要 目的：探讨不同检测方法对产前筛查B族链球菌感染的诊断准确度。方法：收治接受产前筛查的孕妇1500例，采集其阴道分泌物标本，以基因测序作为金标准，比较细菌培养和荧光PCR法在筛查B族链球菌感染的准确度、敏感度和特异性。结果：荧光定量PCR法检出B族链球菌感染的准确度、敏感度和特异性均明显高于细菌培养（P<0.05）。结论：荧光PCR法在筛查B族链球菌感染的准确度和敏感度中处于较高水平。

关键词 荧光定量PCR;准确度;B族链球菌;孕妇;产前筛查

B族链球菌是一类位于人体阴道和下消化道内的致病菌，该病原菌可能会感染胎儿，导致胎儿窘迫、败血症等疾病[1]，严重影响孕妇和胎儿的健康。孕妇阴道内B族链球菌的感染率约10%～30%，因此开展产前筛查具有重要的临床意义。临床通常将基因测序作为B族链球菌诊断的金标准，但该方法目前无法普及，对设备和检测技术的要求较高[2]，因此本文分析荧光定量PCR法和细菌培养在产前筛查B族链球菌感染检测中的作用，现报告如下。

资料与方法

选取接受产前筛查的孕妇1500例，纳入标准：①采集标本1周内没有应用抗生素类药物者;②孕周均34～37周。

方法：采集研究对象的阴道分泌物标本，每例孕妇均采集3份，并在48h内应用不同检测方法诊断B族链球菌感染。细菌培养法：该方法具体是将标本在特定的培养基上涂匀接种，并将培养基置于37℃、5%CO₂无菌条件下培养24h，按照培养后菌落的形态、染色、CAMP等方法给予菌种鉴别。

荧光定量PCR法：该方法具体是将1mL缓冲液加入标本并震荡，离心取下层沉淀并加入缓冲液再次离心，将下层沉淀重悬后添加核酸提取剂，破碎细胞后置于100℃条件下10min，离心提取上清液备用，然后依仪器说明书实施PCR扩增反应操作。试剂盒来自于北京博尔诚有限公司，荧光PCR型号为AB17500。感染阳性评价标准为荧光信号曲线呈S形，且CT指标<36。

基因测序：标本送第三方检验中心检测。

观察指标：以基因测序作为金标准，比较细菌培养和荧光PCR法在筛查B族链球菌感染的准确度、敏感度和特异性。

统计学分析：数据均使用统计学软件SPSS22.0分析，计数资料以%的形式描述，组间比较采用Xx检验，P<0.05为差异有统计学意义。

结果

荧光PCR法和细菌培养检出B族链球菌感染的阳性率差异有统计学意义（P<0.05），前者阳性率25.0%（390例），后者阳性率13.3%（200例）;荧光PCR法检出B族链球菌感染的准确度、敏感度和特异性均明显高于细菌培养（P<0.05），见表1。

讨论

孕妇B族链球菌感染后会诱发产褥感染，还会通过垂直传播引起胎儿病原菌感染，导致早产，影响妊娠结局，甚至会诱发新生儿脑膜炎，严重威胁孕妇和新生儿的生命。研究发现，在孕妇B族链球菌感染早期采用有效的药物治疗则会明显改善妊娠结局，降低胎儿病原菌感染率[3]。在临床中，常规诊断B族链球菌感染的方法通常为细菌培养，但是经验发现部分感染孕妇仍无法有效地检出，从而延误病情。在本研究中，荧光定量PCR法和细菌培养检出B族链球菌感染的阳性率差异有统计学意义（P<0.05）;荧光定量PCR法检出B族链球菌感染的准确度、敏感度和特异性均明显高于细菌培养（P<0.05），提示荧光定量PCR法筛查B族链球菌感染的准确度和敏感度处于较高水平。向燕群等[4]的文献研究中表明，荧光定量PCR法可有效地检出B族链球菌感染病例，这同本研究一致。同细菌培养法相比，荧光定量PCR法的检测耗时偏低，节省了孕妇的等待时间，而且该方法操作便捷，无须检验人员进行接种、培养和鉴别操作，简化了流程，明显提高了检验人员的工作效率和可重复性[5]。另外，借助于B族链球菌的特异性核酸序列并以荧光标记和扩增，可检出微量病原菌，该方法中标本的保存环境基本不会影响检测结果，也能检出已死亡的B族链球菌，因此其敏感度较高，从而使得感染孕妇能在早期进行用药干预，保证妊娠和分娩的安全性。

综上所述，荧光定量PCR法診断B族链球菌感染的准确度和敏感度处于较高水平，可用于临床孕妇的产前筛查中。

参考文献

[1]谢雯，陈敏，谭继权.长沙地区围产期孕妇B族链球菌带菌状况分析及对妊娠结局的影响[J].湖南中医药大学学报，2018，9（5）：590-592.

[2]李青，邓家德，陈惠玲.B族溶血性链球菌孕期感染分离株的耐药基因检测[J].广州医药，2010，41（2）：47-49.

[3]黄锦平.抗菌药物干预治疗孕妇生殖道B族链球菌感染对妊娠和新生儿结局的影响[J].抗感染药学，2017，14（7）：1332-1334.

[4]向燕群，范汉恭，袁春雷.2种方法在孕妇产前B族链球菌感染检测中的价值[J].国际检验医学杂志，2016，37（18）：2612-2614.

[5]郭琦，杨启文，胡静，等.孕晚期阴道B族链球菌定植的两种筛查方法比较[J]协和医学杂志，2018，9（3）：242-245.