遗传转化
- 苹果PRE6-like基因的克隆及在花青素合成中的功能分析
冠苹果果实，遗传转化苹果愈伤和拟南芥进行功能验证。【结果】MdPRE6-like cDNA全长279 bp，编码92个氨基酸，相对分子质量10 450.75 Da，理论等电点（pI）为6.41，含有HLH结构域，亚细胞定位预测结果为细胞核。组织特异性表达分析表明，MdPRE6-like基因在花、果皮中的表达量显著高于根和叶。瞬时表达金冠苹果表明，MdPRE6-like显著促进了金冠苹果果皮注射部位花青素的积累，并显著提高了花青素合成通路相关结构基因的表达水
果树学报 2024年5期2024-06-15
- 农杆菌介导的厚皮甜瓜遗传转化体系的建立
效的厚皮甜瓜遗传转化体系，为基因功能验证和厚皮甜瓜种质改良提供技术支撑。【方法】以厚皮甜瓜B8为材料，用携带植物双元表达载体pQY002005的根癌农杆菌介导转化B8子叶诱导再生，通过探究影响甜瓜遗传转化过程中的重要因子的作用，建立以B8为基础的甜瓜遗传转化体系。【结果】以正常光周期培养3 d的无菌苗子叶节为外植体，对其进行微刷+ 10 s超声处理可提高农杆菌侵染效率，荧光芽获得率达29.6%；压力85 kPa的2次5 min的抽真空侵染方式（间隔1 mi
果树学报 2024年3期2024-04-30
- 谷子基因组学研究进展
历史与现状、遗传转化体系的研究进展以及基于谷子全基因组序列发掘基因资源取得的成果。谷子功能基因组学与传统育种技术的有机结合必将促进高效、精准谷子育种体系的构建，加快突破性谷子品种的培育，满足产业发展和消费者的需求。关键词：谷子；基因组；全基因组测序；遗传转化；基因挖掘中图分类号：S515 文献标识码：A 文章编号：1002?2481（2024）01?0001?09随着2000 年世界上第一个测序完成的模式植物——拟南芥（Arabidopsis thalia
山西农业科学 2024年1期2024-04-23
- 西瓜遗传转化体系的优化
立高效的西瓜遗传转化体系。结果表明，在播种2 d时，YL、CYY298、CYY171及CYY137之间的种子发芽率差异不显著且均显著高于其他材料，但在不同浓度GA3诱导下，YL外植体的不定芽诱导率均最高；以YL材料为基础进行体系优化，发现播种2 d后的种子状态最适于侵染；刀片划伤后的外植体荧光亮度最强，荧光率最高达74.9%；菌液浓度OD600=0.8，共培养时间为3 d时，外植体分化状态最佳且荧光率最高为70.3%；真空负压方式可以显著提高侵染效率，外植
中国瓜菜 2024年3期2024-04-02
- 马铃薯高效再生及遗传转化体系的优化
薯高效再生及遗传转化体系，研究鄂马铃薯3号茎段外植体在不同激素浓度配比下愈伤组织及分化情况，获得最佳愈伤组织及分化激素配比，再采用根癌农杆菌的遗传转化进行筛选，获得最佳转化体系，为马铃薯优质品种的基因工程育种提供依据。结果表明，不同激素浓度配比下愈伤组织及分化率差异较大，其中2.0 mg/L ZR+0.1 mg/L IAA 激素配比下可高效再生出芽，出芽率高达100%，芽长势粗壮。通过构建植物表达载体pCambia1301，以GV3101为介导菌株，预培养
安徽农业科学 2024年3期2024-03-11
- 大麦条纹病菌基因Pgr03902致病功能研究
RNA干扰；遗传转化；致病性大麦病害种类多样，其中由真菌麦类核腔菌Pyrenophora grarnznea侵染导致的条纹病（barleyleaf stripe）是大麦的主要病害之一，严重影响大麦的产量和品质。病原菌侵染后，大麦叶片上产生和叶脉平行的条纹状病斑并不断延展，最终引发叶片枯死，穗部发生畸变不结实或种子带菌。发病严重年份可造成70%以上的产量损失。目前，大麦条纹病的主要防治措施为建立无病种子田、化学药剂防治、栽培管理防治及选育推广抗条纹病品种。无
植物保护 2023年6期2023-12-28
- 番木瓜胚性细胞悬浮系高效遗传转化体系的建立
，ECS）为遗传转化受体，利用植物表达载体pCAMBIA1301和农杆菌介导法进行遗传转化，对抗生素浓度筛选、侵染时间、继代培养、抗性胚的诱导与萌发以及植株再生整个过程进行探索，最后获得抗性再生植株。【结果】通过设置不同浓度的头孢霉素和潮霉素处理，观察ECS细胞状态，筛选、确定头孢霉素和潮霉素最适处理质量浓度分别为200 mg·L-1和5 mg·L-1。工程菌和ECS共培养侵染2 d后转到含有头孢霉素和潮霉素的液体筛选培养基上进行继代培养，继代周期为14
果树学报 2023年10期2023-10-27
- 葡萄属植物遗传转化影响因素研究进展
首次成功获得遗传转化植株，葡萄属植物遗传转化发展迅猛。多年研究证实利用分子育种建立完整、高效的葡萄遗传转化体系对葡萄基因改良有着至关重要的作用。阐述了葡萄属植物遗传转化的4个阶段，并对遗传转化的影响因素进行具体分析，针对这些影响因素进行资料收集和对比研究，总结葡萄遗传转化体系研究现状并提出展望，以期对葡萄基因改良研究提供参考。关键词：葡萄；遗传转化；影响因素文章编号：2096-8108（2023）04-0067-06 中图分类号：S663.1 文献标识
山西果树 2023年4期2023-07-13
- 基于绿豆发状根的快速CRISPR/Cas9基因编辑方法
乏有效稳定的遗传转化体系，导致基因编辑技术在绿豆中的应用受到极大限制，也使绿豆基因功能研究受到极大阻碍。因此，建立一套基于发根农杆菌的操作简便、快速且高效的绿豆嵌合植株转化技术，可以为绿豆基因功能研究提供技术支撑。首先在CRISPR/Cas9载体骨架中插入1个绿色荧光蛋白（greenfluorescentprotein，GFP）表达框用于阳性发状根的快速筛选，然后将含有靶标基因gRNA的CRISPR/Cas9质粒导入发根农杆菌K599。菌液注射侵染绿豆幼苗
江苏农业科学 2023年10期2023-06-17
- 甘蔗镰孢菌插入突变体库的构建、致病变异突变体筛选及突变基因定位
农杆菌介导；遗传转化；致病力相关基因；侧翼序列；甘蔗梢腐病中图分类号：S435.661 文献标识码：A甘蔗梢腐病（pokkah boeng disease， PBD）是甘蔗重要的真菌性病害之一，在我国主要甘蔗产区普遍发生，且有逐年上升的趋势[1]。通常年份甘蔗梢腐病可使甘蔗减产5%～20%，发病严重的年份可减产30.2%～48.5%，糖分降低2.63%～5.21%，造成甘蔗产量及糖分巨大损失[1-2]。有效防治甘蔗梢腐病已成为目前确保甘蔗糖产业稳定发展急需
热带作物学报 2023年2期2023-05-30
- 石榴离体再生体系建立及遗传转化技术研究进展
养技术及构建遗传转化体系，对培育脱毒苗和选育优良品种提供了技术手段。通过对国内外研究成果进行收集分析，对石榴离体培养及遗传转化技术、现状、问题分析及未来研究发展趋势等进行阐述，以期为开展石榴的科学研究和生产实践提供理论基础和科学依据。关键词 石榴；离体培养；再生体系；遗传转化中图分类号 S665.4 文献标识码 A文章编号 1007-7731（2023）04-0017-05Research Progress on Establishment of in
安徽农学通报 2023年4期2023-05-18
- 宁夏枸杞潮霉素抗性浓度筛选研究
功能的研究、遗传转化提供参考。以宁夏枸杞无菌苗叶片为外植体，设置4个潮霉素浓度梯度，研究其对诱导愈伤组织和愈伤组织诱导分化芽的影响，以选出适合枸杞转化体筛选的抗生素剂量。结果表明，随着潮霉素浓度的升高，其对枸杞诱导愈伤组织和愈伤组织诱导芽分化的抑制作用加强。潮霉素浓度越高，枸杞叶片的出愈率越低，愈伤组织的褐化率越高，且叶片逐渐变黄、白化甚至死亡。将潮霉素作为抗性选择标记时，抗性浓度以2 mg/L为最佳。关键词：宁夏枸杞；潮霉素；抗性浓度；选择标记；遗传转化
农学学报 2022年4期2022-07-14
- 直播稻金粳818成熟胚遗传转化体系的建立
818成熟胚遗传转化体系。[方法]以直播稻品种金粳818成熟胚为外植体，设计4种诱导培养基，筛选适合金粳818的诱导条件;设计5种分化培养基，筛选适合金粳818的分化条件;获得的愈伤组织用农杆菌介导法进行转基因再生。[结果]最佳诱导培养基为4.10 g/L NB+2 mg/L 2，4-D，诱导率为89.3%;最佳分化培养基为MS+5.0 mg/L KT+0.5 mg/L NAA，分化率为81.1%，成苗率为52.1%;经PCR分子检测，再生幼苗100%为转
安徽农业科学 2022年9期2022-05-17
- 茉莉花JsMYB108和JsMYB305基因的克隆及其对TPS基因的激活作用
茎段愈伤组织遗传转化体系检测其对愈伤组织中4个JsTPS基因表达水平的影响。结果显示：转化了JsMYB108和JsMYB305的愈伤组织内能检测到GFP荧光和2个MYB基因转录本;JsMYB108可显著提高JsTPS2表达水平，JsMYB305可显著提高4个JsTPS基因的表达，暗示JsMYB108和JsMYB305可能不同程度地参与了萜类合成的调控。该研究结果为今后茉莉花香气调控的深入研究提供参考。关键词：茉莉花;MYB转录因子;TPS基因;愈伤组织;遗
热带作物学报 2021年6期2021-08-04
- 欧李再生和遗传转化体系的研究进展
李再生体系和遗传转化体系的研究结果发现：1.带有芽点的茎段是构建无性系的主要材料;2.叶片更适合诱导愈伤组织产生;3.培养基中添加细胞分裂素和生长素的比例接近时有利于诱导愈伤组织产生，比例升高时会促进愈伤组织的分化;4.单独添加生长素可以诱导生根;5.欧李遗传转化的方法是农杆菌介导法。同时总结和讨论了影响欧李再生率、转化率的主要因素。关键词： 欧李; 组织培养; 植株再生; 遗传转化; 外植体中图分类号： S 662. 5
林业科技 2021年3期2021-07-19
- 农杆菌介导禾本科牧草遗传转化的研究进展
禾本科牧草的遗传转化体系对于种质资源利用具有重要意义.近年来，假俭草（Eremochloa ophiuroides）、黑麦草（Lolium perenne）、结缕草（Zoysia japonica）、柳枝稷（Panicum virgatum）、高羊茅（Festuca elata）、二穗短柄草（Brachypodium distachyum）、匍匐剪股颖（Agrostis stolonifera）、朝鲜碱茅（Puccinellia chinampoensis
上海师范大学学报·自然科学版 2021年1期2021-03-30
- 不同基因型荞麦遗传转化体系初探
研究旨在利用遗传转化基础，打破荞麦杂交困难、种质创新难的瓶颈，提升荞麦研究水平。本试验以甜荞‘PI647061’和苦荞‘ZNQ152’为材料，设置正交实验对下胚轴进行组织培养，并通过农杆菌介导法侵染愈伤组织，用组织化学染色观察GUS基因的瞬时表达。试验结果表明：MS+2.0 mg/L 2，4-D+ 1.0 mg/L 6-BA可使下胚轴出愈率达90%以上。10种不同基因型荞麦下胚轴在MS+0.5 mg/L NAA + 1.0 mg/L 6-BA中分化率最高，
农学学报 2021年8期2021-01-18
- 甘蔗梢腐病菌FusariumsacchariCYP51基因克隆及遗传转化
基因枪介导的遗传转化方法将干扰片段成功转化至甘蔗受体材料，为研究FsCYP51基因功能和创制抗梢腐病甘蔗种质奠定基础。关键词：甘蔗镰刀菌;CYP51;基因克隆;HIGS;遗传转化中图分类号：S432.1 文献标识码：AAbstract： CYP51 is a very important enzyme for the biosynthesis of biological cell membrane， and plays a very impor-
热带作物学报 2021年12期2021-01-13
- 基于科研创新能力培养的综合型拓展实验研究与实践
;创新能力;遗传转化高效的人才培养主要是通过教学和科研活动来实现的。教师在长期的科研活动中所取得的成果，转化为教学资源，是对实验教学内容的补充，也是实验教学模式的更新。通过这种模式缩小了理论与实践距离，促进了学生实践能力和创新能力的提高，也促进了实验教学的改革。农学专业是我校传统优势专业，在学科建设、基地建设、实验室建设等方面都取得了很大成绩，为了更好地利用这些资源，弥补实验教学中出现的实验项目独立、前后项目无关联、综合型项目偏少，理论与实践联系不紧密、学
科技风 2021年34期2021-01-01
- 农杆菌介导棉花遗传转化的影响因素
菌介导的棉花遗传转化的影响因素：棉花基因型是影响体细胞胚胎发生的关键因素;培养1周且分化不成熟的棉花下胚轴是诱导胚胎发生的首选外植体;高比值的KT/2，4-D可有效诱导胚性愈伤组织的产生，低比值则可以促进体细胞胚胎发生;葡萄糖比麦芽糖更适合诱导产生愈伤组织。在转化过程中，胚性愈伤是农杆菌侵染较合适的原始转化材料;菌液的培养温度、浓度、侵染时间及乙酰丁香酮（AS）浓度都会影响组织的转化效率;合适的抗生素浓度也是抗性愈伤筛选的必要保证。关键词 棉花;农杆菌
南方农业·上旬 2020年8期2020-12-24
- 多抗转基因马铃薯植株的获得及农杆菌介导试管薯遗传转化体系优化
薯，并对影响遗传转化的因素进行了优化。结果表明，薯片分化和生根阶段的选择压分别为Kan 50、75 mg/L，薯片分化和生根阶段有效抑菌浓度分别为Cb 500、200 mg/L，农杆菌活化时间为4.5 h、侵染时间为7 min、共培养时间为2 d时利于遗传转化。通过该体系将4种病毒CP融合基因导入马铃薯，获得了具卡那霉素抗性的转化植株，经PCR检测，外源基因已导入马铃薯基因组中。关键词：马铃薯;试管薯;农杆菌介导;遗传转化中图分类号：S532
甘肃农业科技 2020年11期2020-12-06
- 沟叶结缕草遗传转化体系的建立
的沟叶结缕草遗传转化体系，以沟叶结缕草愈伤组织为受体材料，通过农杆菌介导法将笔者单位克隆的耐盐相关基因ZmPDI基因转入野生型植株中，研究共培养时间、侵染液浓度、侵染时间和抗生素浓度等因子对转化效率的影响。结果表明：最佳遗传转化体系为菌株OD600值为0.4，侵染30 min，共培养3 d后进行选择培养。特美汀在选择培养阶段最适抑菌浓度为250 mg/L，潮霉素愈伤组织筛选的最适选择压力为40 mg/L，苗筛的最适浓度为15 mg/L。通过GUS活性的组织
热带作物学报 2020年8期2020-09-26
- 桂花与石楠叶片中瞬时表达体系的建立试验初报
本植物的稳定遗传转化难以建立或所需时间长，而在这些木本植物中建立瞬时遗传转化可大大提高基因功能分析的效率。因此，使用根癌农杆菌介导的瞬时侵染技术，以桂花和石楠叶片为材料，以β-葡糖醛酸酶基因（β-glucuronidase，GUS）作为实验结果检测的报告基因，建立瞬时表达体系。结果发现，侵染过程中，农杆菌对于桂花和石楠叶片有一定的毒性，可加速叶片衰败;蔗糖溶液相对于水可减缓叶片衰败;GUS基因表达的蛋白质可能因为叶片木质化程度太高或叶片脱色后褐化而无法检测
南方农业·中旬 2020年6期2020-08-19
- 优选盆栽小菊高效再生及转化体系的建立
性状;再生;遗传转化;选择压力中图分类号：S682.1+10.4+3 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2020）11-0061-06收稿日期：2019-06-04基金项目：江苏省农业科技自主创新资金[编号：CX（17）3036];江苏现代农业（花卉）产业技术体系综合示范基地项目（编号：JATS2018002）;青海省科技项目（编号：2018HZ819）;教育部高校科研基地业务费项目（编号：KJFP201703）作者简介：罗宇婷（1995
江苏农业科学 2020年11期2020-08-04
- 百合分子生物学研究进展
和利用;百合遗传转化体系的构建，包括农杆菌介导法、基因枪法、电激法和花粉管介导法;百合减数分裂基因、花发育基因及抗逆性相关基因的克隆和表达分析。最后指出了当前研究存在的问题，并展望了进一步研究的方向。关键词 百合;分子标记;遗传转化;基因克隆中图分类号 S644.1 文献标识码 A文章编号 1007-5739（2020）12-0069-05
现代农业科技 2020年12期2020-07-06
- 薰衣草及其次生代谢产物的分子生物学研究概述
遗传多样性及遗传转化等研究进展，介绍了薰衣草次生代谢产物分子组成及其影响因素，次生代谢产物发挥主要功效的分子机制，为深入开展薰衣草理论和实践研究提供参考和基础。【关键词】 薰衣草;遗传多样性;遗传转化;次生代谢产物;分子生物学中图分类号：Q949.99 文献识别码：A 文章编号：2096-1073（2020）05-0056-60[Abstract] An in-depth understanding
现代农业研究 2020年5期2020-05-30
- Cams1基因在烟草上的同源克隆及生物信息学分析
制育性功能。遗传转化结果表明，突变株的Ntms1基因表达量和有活力花粉量极显著低于野生型植株，证明了烟草Ntms1基因具有控制烟草花粉育性功能。关键词：烟草;雄性不育;ms1基因;生物信息学;遗传转化Homologous Cloning and Bioinformatics Analysis of Gene Cams1 in TobaccoZHAO Tingting1， CHEN Qian1， XIA Zhilin2， WANG Jun2， YU Qiwe
中国烟草科学 2020年2期2020-05-25
- 根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展
农杆菌介导的遗传转化是近20年来真菌研究的主要技术之一。农杆菌介导转化（ATMT）技术已广泛应用于随机突变试验中，以确定哪些基因是真菌与昆虫、植物、哺乳动物甚至其他真菌的致病相关基因。该技术广泛地应用于正向和反向遗传学，使得许多真菌基因功能得以阐明。尽管ATMT技术影响深远，但该技术作为一种转化工具在真菌中的应用并不均衡。本文综述了ATMT技术在发掘真菌功能基因方面的最新进展，以及它的优点和局限性。关键词：根癌农杆菌;丝状真菌;遗传转化;ATMT技术中图分
江苏农业科学 2020年3期2020-04-10
- TePDS1基因功能番茄遗传转化分析
S1进行番茄遗传转化。试验结果显示，TePDS1已整合于番茄基因组中，获得了表达万寿菊PDS基因的番茄植株，且转化番茄果实中的番茄红素含量明显高于野生型，表明TePDS1基因具有功能活性，可用于提高植物果实中色素含量。关键词 万寿菊;八氢番茄红素脱氢酶;番茄;遗传转化;番茄红素中图分类号 Q943.2文献标识码 A文章编号 0517-6611（2019）22-0107-04Abstract In this study， PDS gene （TePDS1）
安徽农业科学 2019年22期2019-12-13
- 根癌农杆菌介导单子叶植物遗传转化研究进展
要：在植物遗传转化研究的进展中，因根癌农杆菌具有转入的外源DNA结构完整、外源基因表达比较稳定、经济简便、技术仪器要求低等优势，成为了目前应用较为广泛的转基因技术。对根癌农杆菌介导单子叶植物的发展状况、影响因素和提高转化效率进行了综述，以期为提高单子叶植物遗传转化效率和转化技术提供参考依据。关键词：根癌农杆菌;单子叶植物;遗传转化;研究进展将农杆菌作为载体成功获得转基因烟草的试验发生在1983年，其后的30多年，农杆菌介导的遗传转化技术在双子叶植物的研究
种子科技 2019年18期2019-10-21
- 拟南芥的遗传转化
基因的拟南芥遗传转化，将目的基因转入到野生型拟南芥中。通过筛选和鉴定后，得到阳性的转基因植株，最终得到纯合T3代转基因株系。后续可以通过对纯合转基因株系和野生型拟南芥进行比较鉴定，即可推断目的基因在拟南芥中的功能。关键词：拟南芥;遗传转化;实验一、实验材料（一）试验材料转基因所需的菌株：农杆菌EHA105;转基因所需的模式植物：野生型拟南芥;转基因所需的植物表达载体：pCAMBIA3301。（二）试验试剂本实验所需试剂主要有：Mu-rashige Skoo
河南农业·教育版 2019年9期2019-09-10
- 籼稻明恢86多基因遗传转化体系的研究
恢86多基因遗传转化的条件，为创制含高产、抗逆、抗虫、抗病等基因的水稻新材料奠定基础。【方法】以籼稻明恢86为受体材料，将构建好的含作物高产基因RRM2、耐旱基因 HS1、抗除草剂基因EPSPS、抗虫基因Bt、细胞凋亡抑制基因iap和促细胞再生基因p35等多基因载体（载体分别命名为P5和P8）进行遗传转化。在此基础上，分别对多基因遗传转化体系的受体材料、农杆菌浓度、侵染时间、共培养方式、G418筛选浓度和草甘膦筛选浓度等主要影响因素进行试验，探讨其适宜的转
福建农业学报 2019年6期2019-09-10
- 水稻OsTZF3基因敲除和过量表达载体的构建与遗传转化
;过量表达;遗传转化;OsTZF3DOI：10.13651/j.cnki.fjnykj.2019.03.001Abstract：In order to further study the biological function of OsTZF3 gene in rice， the CRISP/Cas9 knockout expression vector pKTZF3 and overexpression vector pCXUNTZF3 of OsTZ
福建农业科技 2019年3期2019-09-10
- 辣椒胶孢炭疽菌遗传转化体系的建立
胶孢炭疽菌的遗传转化体系。试验结果表明，可有效筛选阳性转化子的潮霉素B浓度为500 mg/L;PCR及Southern blot结果显示，eGFP表达基因已单拷贝整合至辣椒胶孢炭疽菌转化子的基因组中;使用荧光显微镜观察第一代及继代培养后的转化子，菌丝与分生孢子均表现出强烈的绿色荧光信号，说明GFP能在转化子中稳定遗传;将转化子与野生型菌株相比，菌落形态、生长速率及致病力水平无明显差异。本研究建立了辣椒胶孢炭疽菌遗传转化体系并获得了稳定表达绿色荧光蛋白的转化
植物保护 2019年4期2019-09-04
- 农杆菌介导的番茄遗传转化体系优化
448的最佳遗传转化体系。结果显示，诱导愈伤组织及不定芽分化的最适培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.5 mg/L IAA+3 mg/L AgNO3;诱导生根的最适培养基为1/2 MS+0.3 mg/L IAA。关键词：番茄;农杆菌介导;再生体系;遗传转化中图分类号： S641.201文献标志码： A文章编号：1002-1302（2019）09-0096-04番茄（Lycopersicon esculentum Mill.）作为具备良好加工特性的蔬菜
江苏农业科学 2019年9期2019-08-20
- 农杆菌介导的水稻快速高效基因转化系统
菌介导的水稻遗传转化体系被广泛应用于水稻功能基因研究、T-DNA插入突变体库创建和农艺性状改良等研究领域。然而水稻转基因操作需要超过3个月的组织培养时间。运用组织培养和农杆菌介导的遗传转化技术，对水稻遗传转化体系进行快速高效的优化。结果表明，成熟种子用2，4-D诱导愈伤7 d后，与农杆菌共培养转化效率最佳;抗性筛选时间以2～4周为最佳。根据以上优化条件，从成熟种子诱导愈伤至获得转基因株系的时间被缩短到6周左右。将有效降低水稻长时间组培导致的体细胞无性系变异
江苏农业科学 2019年4期2019-08-10
- 茶树遗传转化体系研究进展
桢摘要 茶树遗传转化技术是指应用重组DNA技术、细胞组织培养技术或种质系统转化技术，有目的地将外源基因或DNA片段插入到茶树受体基因组中并使其在后代植株中得以表达的过程，在茶树遗传改良、品种选育中发挥重要作用。对茶树遗传转化中受体系统建立、茶树遗传转化方法进行概述，阐述了茶树遗传转化研究重点、方向以及当前茶树遗传转化研究所面临的转化效率低和离体再生困难的问题，提出了原位转化技术在茶树遗传转化中的应用潜力，从而达到优化茶树遗传转化体系的目的。关键词 遗传转化
安徽农业科学 2019年12期2019-07-19
- 露地菊脚芽农杆菌真空渗透转化技术体系的建立
进行目的基因遗传转化，分析其PCR结果，以抗性分化苗叶片进行β-葡萄糖苷酸酶（β-glucuronidase，GUS）组织染色验证转基因植株，分析农杆菌真空渗透转化率。【结果】将含AtLFY基因和AtCO基因的表达载体分别转入露地菊根部脚芽中，通过PCR检测GUS染色鉴定后，真空渗透1次的平均转化率为11.97%，真空渗透2次的平均转化率为15.86%，菌液浸染10 min的平均转化率为3.64%，菌液浸染20 min的平均转化率为11.14%，总体嵌合率
南方农业学报 2018年11期2018-09-10
- 鸭梨PAL基因的反义遗传转化及表达分析
义PAL基因遗传转化鸭梨、降低鸭梨内源PAL基因的表达。结果表明：（1）采用RT-PCR技术，利用根据GenBank中西洋梨PAL基因序列设计特异性引物，扩增得到496 bp的鸭梨PAL基因片段。（2）将扩增片段反向插入载体pBI121的MCS区域，构建植物PAL基因反义表达载体pBI121-AsPAL。接着采用电转化法将反义表达载体转入农杆菌EHA105中，并制备出农杆菌工程菌液。（3）利用农杆菌介导法对鸭梨组培苗叶片外植体进行遗传转化，得到23株转基因
广西植物 2018年4期2018-09-10
- 用单性结实基因2A11-iaaM转化罗汉果的研究
立罗汉果高效遗传转化体系，转化和创制单性结实罗汉果种质，通过基因特异引物对的PCR扩增，初步检测出转基因阳性植株，将之移栽大田，观察转基因植株的单性结实性的表现。结果表明：构建罗汉果单性结实性相关的pBAI-Gus植物双元表达载体获得成功;建立了农杆菌介导的罗汉果叶盘遗传转化优化体系，即农杆菌菌液OD600值为0.3～0.5，侵染10 min，最优选择培养基为MS+TDZ 0.7 mg·L-1+IBA 0.5 mg·L-1+Kan 5 mg·L-1+Cef
广西植物 2018年12期2018-09-10
- 农杆菌介导EuABP2基因遗传转化杜仲下胚轴研究
的杜仲下胚轴遗传转化效率，本研究以杜仲种子为材料，采用正交试验设计，研究了NAA浓度、种子切割方式及光照强度对杜仲萌发及下胚轴直径和长度的影响；获得筛选标记草铵膦用于杜仲遗传转化的适宜浓度，并对杜仲抗性芽生根方式进行了优化。结果表明：NAA （0.5 mg/L） ，正中横切，暗培养15 d，能有效的促进杜仲种子萌发及下胚轴的生长。本试验条件下杜仲种子萌发率可达95%，下胚轴直径1.21 mm，长度22.5 mm；以0.25 mg/L的草铵膦能够对杜仲转基因
山地农业生物学报 2018年3期2018-07-13
- 向日葵转化和再生的研究进展
；组织培养；遗传转化向日葵是世界上非常重要的油料作物之一，并且从转化和再生的角度来说，它也是一种非常具有挑战性的物种[1]。关于向日葵转化和再生，国内外都有许多尝试，但是转化效率都不高，并且可重复性较低[2]。向日葵的离体培养和转化，大多通过器官发生和胚胎发生。向日葵的转化和再生受到许多方面的影响，本文着重讨论影响向日葵转化和再生的几个方面。1.向日葵的再生1.1向日葵品系的选择向日葵的品种众多，在研究的过程中，不同的研究者选择了不同的株系，有HA300B
科学与财富 2018年13期2018-06-13
- 刺葡萄DFR基因植物表达载体构建及转化茉莉花愈伤组织的研究
莉花愈伤组织遗传转化体系的建立，验证了花色苷合成相关基因转化茉莉花愈伤组织的可行性，为今后通过植物转基因技术丰富茉莉花的花色奠定基础。关键词 茉莉花；DFR基因；植物表达载体；愈伤组织；遗传转化中图分类号 S685.16；Q812 文献标识码 APlant Expression Vector Construction and Jasmine （Jasminum sambac （Linn.） Aiton） Callus Transformation of D
热带作物学报 2018年6期2018-05-14
- 子房注射法转化‘紫宝石’蝴蝶兰的研究
子房注射法；遗传转化；PCR中图分类号 S682 文献标识码 AAbstract The method of ovary injection was reported for Phalaenopsis ‘Purple Gem transformation in this study. Results showed that different injection treatments in different development stage of P.
热带作物学报 2018年4期2018-05-14
- 亚麻愈伤组织诱导和遗传转化体系建立
亚麻愈伤组织遗传转化条件进行了初步探索。结果表明，亚麻无菌苗接种培养基为MSB+1 mg/L 6-BA时有利于亚麻愈伤组织出愈，适合亚麻愈伤组织诱导的培养基为MSB+01 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA，或在此基础上添加10 mg/L 2，4-D，2种培养基在愈伤组织诱导阶段差别不大。愈伤组织继代扩增培养基为MSB+01 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA，在此培养基上，愈伤组织量在25 d时达到顶峰。由抗生素抗性试验得出亚麻愈伤组织卡那霉
江苏农业科学 2017年16期2017-10-27
- 头孢霉素与卡那霉素对花生组培苗生根的影响
菌介导的花生遗传转化过程中不可或缺的步骤，但是抗生素的使用对花生组培苗的生长与生根有着显著影响。为了明确抗生素对花生组培苗生根的敏感质量浓度，本试验以花生栽培品种丰花1号组培苗为材料，在培养基中添加不同浓度的头孢霉素与卡那霉素，检测花生组培苗的生根率及植株生长状况并进行统计分析。结果表明：0～250 mg/L的头孢霉素对花生组培苗生根及植株生长基本无影响。卡那霉素对花生组培苗生根影响较为显著，0～10 mg/L卡那霉素对花生组培苗生根与生长基本无影响，10
山东农业科学 2017年8期2017-09-09
- 狗尾草胚性愈伤高效农杆菌转化体系的建立
词 狗尾草；遗传转化；农杆菌介导法中图分类号 S544.3 文献标识码 AAbstract Setaria viridis is a wild-type species of Setaria italica and is an excellent model for studying the photosynthesis of C4. It is also a model for studying monocotyledonous plants， abio
热带作物学报 2017年6期2017-05-30
- 丹参不同愈伤组织诱导及遗传转化体系优化
和稳定高效的遗传转化体系，该研究以丹参叶片和茎段为外植体，采用含不同浓度的植物激素（植物生长物质）的Murashige Skoog（MS）培养基，探索诱导丹参产生不同愈伤的条件；采用正交法考察浸染时间、共培养时间、筛选压等对农杆菌介导的丹参遗传转化体系的影响，并根据出芽率及转化阳性率优化丹参遗传转化体系。结果表明：（1）能较快诱导丹参叶片产生愈伤的是MS+0.5 mg·L1 6BA+0.5 mg·L1 2，4D；诱导茎较快产生愈伤的是MS+0.1mg·L1
广西植物 2017年1期2017-05-30
- 四价抗马铃薯病毒植物表达载体构建及其对烟草的转化
2试管苗进行遗传转化，转化后的烟草植株经PCR检测，有40株转化植株可扩增出目的条带，表明XSYVrh融合基因已成功转入烟草基因组中。关键词： 马铃薯病毒， 融合基因， 载体构建， 遗传转化， 转基因烟草中图分类号： S532文献标识码： A文章编号： 10003142（2017）01008709Abstract： In order to simultaneously foster antifourvirus potato varieties（PVX， P
广西植物 2017年1期2017-05-30
- 紫花苜蓿的抗菌肽基因Rev4遗传转化
介导紫花苜蓿遗传转化，GUS瞬时表达检测转化体系建立成功；压力筛选后叶片基因组DNA的PCR成功检测到抗菌肽基因条带，PCR产物回收测序得到13株转化紫花苜蓿。关键词：紫花苜蓿；抗菌肽；遗传转化中图分类号： Q785文献标志码： A文章编号：1002-1302（2017）07-0044-03紫花苜蓿（Medicago sativa L.）为四倍体异花授粉的多年生草本植物，属于豆科苜蓿属，基因组大，是很好的水土保持植物与绿肥植物，在世界范围内广泛种植，以“牧
江苏农业科学 2017年7期2017-05-23
- 农杆菌介导遗传转化在水稻基因工程育种中的应用
从农杆菌介导遗传转化的科学原理入手，概要阐述了农杆菌介导遗传转化在水稻基因工程中的影响作用、优质特点以及应用范围，以期为农杆菌介导遗传转化技术在水稻基因工程中的科学应用起到一定的参考作用。关键词：农杆菌；遗传转化；水稻育种；基因工程水稻作为我国最主要的粮食作物之一，在我国的粮食生产方面长期占据着不可替代的重要作用。现代社会，随着科学技术水平的不断发展，农杆菌介导遗传转化的技术手段在水稻基因工程育种方面已经取得了显著的成效，并对多抗、高产的高品质水稻植株的培
农家科技下旬刊 2017年3期2017-04-26
- 紫杉醇关键酶基因TwDBAT在平菇中的遗传转化及表达
BAT基因；遗传转化；基因表达中图分类号： S188文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）10-0098-05收稿日期：2016-03-31基金项目：内蒙古自治区高等学校科学研究项目（编号：NJZC14383）。作者简介：康俊（1982—），女，内蒙古乌兰察布人，硕士，讲师，主要从事植物病理及遗传育种的教学研究工作。E-mail：kang_jun@163.com。紫杉醇是从红豆杉属植物中分离出的1种二萜类生物碱，因具有广谱抗癌活性和独特抗
江苏农业科学 2016年10期2017-02-05
- 多花水仙花色基因与遗传转化研究进展
仙花色基因与遗传转化研究进展秦军1，2，潘腾飞1，2，郭志雄1，2，潘东明1，2(1.福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所350002； 2.福建农林大学园艺学院)摘要：综述近年来多花水仙在花色基因研究与遗传转化研究方面的进展，包括多花水仙花色成分、花色基因的克隆及其表达调控、花色基因的遗传转化等方面，分析该领域存在的问题，并对其应用前景进行展望。关键词：多花水仙；花色；基因克隆；遗传转化多花水仙(NarcissustazettaL.)是石蒜科水仙属多年生草
福建农业科技 2016年4期2016-12-18
- 棉花GhGGPase2基因克隆、功能序列分析、原核表达及烟草的遗传转化
表达；克隆；遗传转化中图分类号： S562.032 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2016）07-0026-05棉花是全球重要的经济作物，也是我国重要的农产品及纺织原料，是国民经济的支柱产业之一，具有极其重要的战略地位[1]。棉花纤维品质中最重要的参考指标是纤维的强度和长度，而细胞的伸长或膨大发育与纤维的最终品质密切相关[2]。抗坏血酸是广泛存在于植物组织中的一种抗氧化小分子物质，尤其是在细胞分裂旺盛的植物组织中含量较高，不仅对植物生长发
江苏农业科学 2016年7期2016-10-20
- 东方百合‘索邦’基于喷雾式植物反应器的AtCKX3基因转化1)
植物反应器；遗传转化；AtCKX3基因百合(Lilium spp.)，百合科百合属多年生草本球根植物，是世界六大鳞茎作物之一[1]，被广泛应用于切花、盆花和园林绿地，可观赏，亦可食用和药用，具有较大的经济价值。优良百合新品种选育主要依赖于常规杂交，但远缘杂交出现受精障碍现象十分普遍[2]。此外，亲本遗传背景也是重要的制约因素。另一方面育种周期长，后代分离复杂，定向选育困难。而现代生物技术可弥补其不足，将育种材料并不存在的目的基因引入到受体植物，定向改良其性
东北林业大学学报 2016年7期2016-08-06
- 提高番茄品质的番茄去泛素化酶基因AMSH3
特异过表达;遗传转化;转基因番茄;果实品质改良0引言植物生长发育的各个阶段,包括胚胎发生、种子萌发、营养生长、果实成熟和叶片衰老等都受到多种激素信号的控制[1]。虽然植物激素的分子结构比较简单,但具有十分复杂的生理效应[2]。大量研究表明,泛素蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)在植物生长发育,包括激素合成、感知和下游信号传导、自交不亲和、抗病、表观遗传及植物形态建成等过程都发挥着重要作用[3]。该途径也是一个被
合肥工业大学学报（自然科学版） 2016年4期2016-06-17
- PEG介导的苹果果生刺盘孢Colletotrichumfructicola原生质体转化
icola的遗传转化体系，以果生刺盘孢SQ06-E的幼嫩菌丝为受体，通过PEG介导的原生质体转化法，将含有潮霉素标记的质粒pCB1003转入果生刺盘孢菌丝的原生质体中；对获得的转化子进行遗传稳定性检测、PCR检测和Southern杂交分析。试验获得果生刺盘孢的最优转化体系为：密度为1×106 mL-1分生孢子在M3S培养基中，28 ℃、200 r/min震荡培养8 h；过滤收集菌丝，在质量浓度为0.25 g/mL崩溃酶+0.05 g/mL溶壁酶的10 mL
西北农业学报 2016年3期2016-06-03
- BraSDG2 RNA干扰载体的构建和拟南芥的遗传转化
扰；拟南芥；遗传转化中图分类号：S634.301文献标识号：A文章编号：1001-4942（2016）10-0007-05据估计，50%～70%的被子植物在其进化过程中至少经历过1次多倍化过程[1]，基因表达的变化在多倍体化过程中起着重要作用[2]。组蛋白甲基化修饰作为一种重要的表观遗传修饰，在参与重塑染色质结构与基因表达方面起到重要作用，其主要包括赖氨酸和精氨酸的甲基化[3]。组蛋白赖氨酸（K）甲基化修饰包括组蛋白H3的K4、K9、K27、K36和组蛋白
山东农业科学 2016年10期2016-05-30
- 矮牵牛‘漫波红色’再生及遗传转化体系的初步建立
基础上建立其遗传转化体系。结果表明，诱导矮牵牛叶片分化的最佳培养基为Ms+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/LNAA；最佳生根培养基为1/2MS+0.1 mg/L NAA；最适出芽和生根的卡那霉素筛选压分别为100 mg/L和20 mg/L；最适头孢霉素抑菌浓度为200 mg/L。关键词：矮牵牛；漫波红色；再生体系；遗传转化中图分类号：S681.603.6 文献标识号：A 文章编号：1001—4942（2016）03—0014—04矮牵牛比较容易再
山东农业科学 2016年3期2016-05-30
- 脂氢过氧化物裂解酶基因对生菜遗传转化的研究
基因；生菜；遗传转化中图分类号 S636.2 文献标识码 AAbstract Ponarus trifoliata is a kind of plant with higher plant odor components. The key hydroperoxide lyase（HPL） gene encoding odorants synthesis was isolated from P. trifoliate， and the expression
热带作物学报 2016年5期2016-05-30