单克隆
- 单克隆接种／成像设备VIPS在CHO工程细胞株单克隆筛选中的应用
。工程细胞株的单克隆源性指用于制备产品的细胞要求来源于同一祖细胞，是影响产品质量的关键因素，获取工程细胞株单克隆源性的证明是药物研发整体控制策略的关键步骤［3-4］。传统单克隆筛选采用有限稀释法，克隆形成率较低，为确保获得足够的候选克隆，每次实验均需接种30～50块96孔板，且进行连续2轮筛选，工作量极大［5-8］。采用单克隆筛选仪器ClonePix 并基于半固体培养基进行单克隆挑选可提高克隆形成率，但也需进行连续2 轮筛选或另加1 轮有限稀释法筛选亚克隆
中国生物制品学杂志 2023年12期2024-01-02
- 禽腺病毒血清4型中国流行株fiber2蛋白单克隆抗体制备与鉴定
4 细胞融合与单克隆抗体制备1.4.1 细胞融合及杂交瘤细胞的筛选取冲刺免疫后3 d的小鼠的脾脏组织，分离脾细胞后与SP2/0 细胞用PEG1500进行融合。融合后3 d，用含有HAT的RPMI 1640筛选培养基继续培养。用以fiber2蛋白为包被抗原的间接ELISA筛选能够分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。选取检测结果为阳性、生长状态良好的细胞进行转孔、亚克隆以及冻存。1.4.2 腹水的制备与纯化取0.5 mL弗氏不完全佐剂对2只16周龄雌性BALB/c小鼠
畜牧与兽医 2023年11期2023-11-10
- 单克隆抗体技术在畜禽疾病诊断中的应用
抗绵羊红细胞的单克隆抗体，由此发现了可产生抗体的杂交瘤细胞。他们发现，杂交瘤细胞具有单一的特异性抗原识别位点，具有小鼠淋巴细胞的特性和骨髓瘤细胞持续增殖的能力[1]。单克隆抗体的识别性专一，只针对特定的抗原决定簇反应，大大提高了敏感性。杂交瘤细胞表达的是针对淋巴细胞的特异性抗体，以及其在组织培养中生长的骨髓瘤细胞的永生特征。重要的是，杂交瘤是单克隆的，因为培养的细胞起源于一个细胞。杂交瘤细胞可注射到组织相容性小鼠体内产生腹水细胞肿瘤，此方法成为高浓度单克隆
中国畜禽种业 2022年3期2022-11-22
- FDA批准紧急使用授权礼来新冠抗体Bebtelovimab对Omicron有效
的中和IgG1单克隆抗体（mAb），维持了针对目前已知和报道的所有变异株的结合和中和活性，包括Omicron和BA.2。此次获批是基于一项2期随机单剂量临床试验，评估了bebtelovimab单药和bebtelovimab联合其他单克隆抗体治疗轻至中度COVID-19的疗效。该试验的安慰剂对照部分招募了380名低风险患者。在这部分试验中，患者被随机分为单次输注bebtelovimab、bebtelovimab与其他单克隆抗体或安慰剂。结果显示，与安慰剂相比
首都食品与医药 2022年19期2022-11-19
- 鸡白细胞介素18单克隆抗体的制备与鉴定
-18的商品化单克隆抗体或试剂盒较为罕见。为此，本试验制备了抗chIL-18单克隆抗体，为深入研究chIL-18的生物学功能及炎性小体细胞焦亡的检测打下基础。1 材料与方法1.1 质粒、细菌种类、蛋白、细胞类型和实验动物 pGEX-6p-1、pET-28a两种质粒，大肠埃希菌(E.coli)BL21/DH5α，标签蛋白His-IL-1、His-IFN-β、His-IL-10，骨髓瘤细胞SP2/0，均为本实验室留存；6～8周龄BALB/c小鼠，购自北京维通利
中国兽医杂志 2022年9期2022-11-17
- 犬瘟热病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
的特异性反应。单克隆抗体具有灵敏高、特异性强和制备方便等优点，已被广泛应用于疾病的诊断与治疗[10]。国内检测CDV的抗体产品质量不一，虽然国外有比较成熟化的抗体产品，但其价格高昂。前期研究已制备了高纯度、特异性强的CDV NP。本研究以CDV NP为抗原免疫BALB/c小鼠，采用PEG1500为化学诱导剂，进行细胞融合，间接ELISA法筛选单克隆杂交瘤细胞，进行腹水诱生，并对制备的抗体进行生物特性鉴定。本研究制备的CDV NP单抗对犬瘟热的诊断及防控具有
重庆理工大学学报(自然科学) 2022年10期2022-11-07
- 抗破伤风类毒素单克隆抗体的制备与鉴定①
抗破伤风类毒素单克隆抗体的制备为破伤风疫苗效价检测新方法的建立、低含量破伤风类毒素测定、吸附度测定等奠定基础，以提升我国破伤风疫苗质量控制水平。1 材料与方法1.1 材料破伤风类毒素由本室提供；HRP标记的羊抗鼠二抗为Invitrogen产品；石蜡油为MP Bio‐medical产品；DMEM培养液、胎牛血清为Gibco产品；G蛋白柱为GE Healthcare产品；超滤管为Milli‐pore产品；96孔聚苯乙烯酶标板为Greiner Bio-One G
中国免疫学杂志 2021年18期2021-09-25
- 伯氏疟原虫PbPH表达特点和单克隆抗体传播阻断效应研究
备了抗PbPH单克隆抗体，通过WB和IFA检测PbPH的表达阶段和抗PbPH单克隆抗体的特异性，并通过体外配子体出丝和动合子形成实验检测抗PbPH单克隆抗体的传播阻断效果。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 试验材料 伯氏疟原虫(Plasmodiumberghei)ANKA 株，为中国医科大学基础医学院免疫学教研室保存；6～8周龄的雌性BALB/c小鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司。1.1.2 培养基 裂殖体培养基：RPMI1640，50 mg/L
微生物学杂志 2021年2期2021-07-01
- PD-1/PD-L1在骨肉瘤中的研究进展
-L1为靶点的单克隆抗体可以有效阻断PD-1/PD-L1信号通路，促使T细胞恢复免疫活性，提高其杀伤肿瘤细胞的能力。目前经美国FDA批准上市的抗体有6种，其中帕博利珠单克隆抗体(pembrolizumab)、纳武利尤单克隆抗体(nivolumab)和西米普利单克隆抗体(cemiplimab)均是PD-1单克隆抗体，阿特珠单克隆抗体(atezolizumab)、阿维鲁单克隆抗体(avelumab)和度伐鲁单克隆抗体(durvalumab)均是PD-L1单克隆
现代免疫学 2021年3期2021-04-17
- 猪细小病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定
16]。中和性单克隆抗体具有特异性强、敏感性高，能够阻断病毒感染等特点，被广泛用于病毒的免疫学检测、免疫保护评价和病毒感染机制研究等领域[17-20]。孙建慧等[21]利用杆状病毒表达的重组PPV VP2蛋白免疫BALB/c小鼠，经细胞融合后采用免疫过氧化物酶单层细胞试验（Immunoperoxidase monolayer assay，IPMA）筛选，共获得8 株抗PPV 的单克隆抗体，这些单克隆抗体均与PPV 感染的猪睾丸细胞反应。刘秀芬等[22]利用
河南农业科学 2021年12期2021-02-16
- 抗猪瘟病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定
制备了一系列的单克隆抗体，广泛应用于CSFV诊断方法的建立[19-20]。中性单克隆抗体能够有效抑制病毒感染活性，在病毒与宿主的相互作用、病毒中和性抗原表位研究和免疫评价方法建立方面发挥重要作用。但是，具有中和活性的CSFV单克隆抗体报道较少，限制了CSFV的相关研究[21-24]。为此，分别以CSFV SM株和杆状病毒表达的CSFV E2蛋白免疫BABL/c小鼠，用经典的杂交瘤技术筛选针对CSFV E2蛋白中和表位的特异性单克隆抗体，为进一步研究CSFV
河南农业科学 2019年12期2019-12-05
- 《动物细胞融合与单克隆抗体》教学设计
动物细胞融合和单克隆抗体”是人教版高中生物选修3《现代生物科技专题》的动物细工程的内容，其中的单克隆抗体技术是动物细胞工程的新技术，与当前人类社会的生活、生产密切相关，是本节教材的重点内容；但又因其实验操作技术复杂，目前普通中学的实验设备、精密仪器和药品配备等大都不能满足学生实验需求，故又是难点内容。传统课堂教学中一般以讲述形式先对动物细胞融合部分进行授课，再学习单克隆抗体的制备。经过多年教学实践，笔者发现以上述形式开展教学，学生往往印象不深刻且很难深入理
学校教育研究 2019年2期2019-09-22
- 猪流感病毒NP蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
体的概念。由于单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、生产成本低等优点[11]，已被广泛应用于病毒学诊断中。为此，本研究利用H1N1和H3N2病毒感染犬肾MDCK细胞，建立免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)单克隆抗体检测方法，筛选具有保守性的SIV单克隆抗体，为猪流感的检测奠定基础。1 材料和方法1.1 供试动物、细胞系和毒株SPF级鸡胚购自北京勃林格殷格翰维通生物技术有限公司，SPF级6～8周龄雌性BALB/c小鼠购自济南朋悦实验动物繁殖有限公司，H1N1
河南农业科学 2019年8期2019-08-23
- IPMA筛选猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体方法研究
]。病毒特异性单克隆抗体是研究病毒免疫机制，特别是体液免疫识别机制的基本工具，也是开发和诊断检测试剂的必需材料。制备病毒的单克隆抗体需要经过抗原纯化、小鼠免疫、细胞融合、单抗筛选、鉴定等重要步骤。其中，单抗筛选是指用病毒抗原来识别鉴定混合在大量杂交瘤细胞中少数能够分泌特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株的过程。建立准确、简单、快速的高通量病毒单克隆抗体筛选方法，在细胞融合后用于短时间内数百至数千个培养上清样品的筛选，是制备病毒单克隆抗体的关键技术。PRRSV具有高
华北农学报 2019年3期2019-07-05
- MDCK单克隆细胞生长特性分析
6]。MDCK单克隆细胞是本实验室由MDCK工作库细胞通过有限稀释法所制备，共制备114株.不同的MDCK单克隆细胞株在生长特性上有较大的差异.本研究前期通过有限稀释法将MDCK细胞进行单克隆化，获得了自建MDCK单克隆细胞库，库内共有114株单克隆细胞.现通过复苏MDCK单克隆细胞，统计细胞复苏活率、生长状态、生长速度和生长形态等特性，确定MDCK单克隆细胞库的可用性，旨在为后期筛选病毒敏感的MDCK单克隆细胞实验提供资源和理论参考，为流感疫苗的生产提供
西北民族大学学报（自然科学版） 2019年1期2019-04-04
- 有血液学意义的单克隆免疫球蛋白血症1例并文献复习
启科【摘要】 单克隆免疫球蛋白血症由一组异质性疾病组成， 其特征在于B淋巴细胞或浆细胞克隆性增殖产生免疫球蛋白， 浆细胞疾病的特征在于单克隆浆细胞的增殖。大多数患者血液或尿液中可检测到单克隆免疫球蛋白。这种疾病谱广泛、疾病表现多样， 可侵及多器官， 如心脏、肝脏、皮肤、肾脏和神经等， 而且大多为少见甚至是罕见疾病， 而有血液学意义的单克隆免疫球蛋白血症报道较少， 此病发病率低， 极易被误诊。【关键词】 单克隆免疫球蛋白血症;肿瘤单克隆免疫球蛋白血症由一组异
中国实用医药 2019年36期2019-01-30
- 抗牛免疫球蛋白G单克隆抗体的制备及鉴定
18-19]。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、均一性好的特点。国外学者已研制出抗牛IgG、IgG1、IgG2和IgG Fc片段的抗体[18-21]。国内高东微[22]、王平[23]、韩秀娥[24]等研究了牛IgG单克隆抗体的制备，但目前还没有商品化的抗牛IgG单克隆抗体，仅有的2 株单克隆抗体由国外进口，价格十分昂贵。因此，利用杂交瘤技术制备分泌抗牛IgG的单克隆抗体，对于牛IgG的免疫学检测技术的建立，具有重要的实际应用价值和理论研究意义。1 材料与方
食品科学 2019年2期2019-01-28
- 单克隆抗体抗肿瘤药物研究进展与市场动态分析
研究背景最初，单克隆抗体药物源于鼠身体中的细胞。随着患者应用鼠源单抗相关药物的增多，此种药物负面作用也在临床治疗中所显现出来。因此，国内外着重研究治疗效果相对的较好的抗体药物。伴随着生物技术的进步，2007年利用能够产生人类抗体的转基因小鼠XenoMouse技术，首个完全人源化单克隆抗体药物Panitumumab上市，代表着着单克隆抗体抗肿瘤药物进入了一个新的发展阶段。2.单克隆抗体抗肿瘤类药物新药研制状况2.1 单克隆抗体来源的抗肿瘤类药物经典品种随着基
医药前沿 2019年7期2019-01-05
- 232例膜增生性肾小球肾炎的重新评估
着对补体调节及单克隆免疫球蛋白相关肾损害的认识，对MPGN分类有了新的看法。2012年，Sethi等[2]在新英格兰杂志提出MPGN的新分类，将MPGN根据免疫荧光分为免疫球蛋白伴补体(Ig和C3均阳性)沉积的MPGN和单纯补体(Ig-、C3+)沉积的C3肾小球病，前者(免疫复合物介导的MPGN)再根据血、尿有无单克隆免疫球蛋白(monoclonal gammopathy，M蛋白)、病毒感染等体液标志物分为单克隆免疫球蛋白和自身免疫、感染相关的MPGN。随
肾脏病与透析肾移植杂志 2018年4期2018-08-31
- 单克隆抗体纯化方法比较论述
830000）单克隆抗体制备的理论基础是F. Macfarlane Burnet的克隆选择学说（1959）：每个哺乳动物B淋巴细胞有特异性抗体的潜力。抗体链的恒定区域可能会改变在淋巴细胞克隆的分化过程中，但可变区保留这种奇异的特异性。1975年Kohler和Milstein开发出一种能提高抗原表位的特异性抗体技术；这种技术被命名为杂交瘤技术，用这种方法生产的抗体称为单克隆抗体。随着单克隆抗体的广泛应用，其纯化技术也在快速发展。本文将介绍几种试用于中小规模的
中国畜牧兽医文摘 2018年1期2018-01-23
- 用于狂犬病暴露后预防处置的重组单克隆抗体
犬病病毒中和性单克隆抗体为人类进行有效的狂犬病暴露后处置奠定了基础。同人或马狂犬病多克隆免疫球蛋白相比，人源化或全人狂犬病病毒中和性单克隆抗体具有数个显著的优势。最先进的人源化或全人狂犬病病毒中和性单克隆抗体应当广谱中和狂犬病病毒街毒株，与狂犬病病毒糖蛋白保守的抗原决定簇结合，在体内实验中对狂犬病病毒表现出高的中和效价。组合使用的人源化或全人狂犬病病毒中和性单克隆抗体应当分别识别不重叠的抗原表位。本文综述了对抗狂犬病治疗性抗体的基本要求，讨论了寻求新的狂犬
中华实验和临床病毒学杂志 2018年5期2018-01-17
- 对单克隆抗体制备技术及应用研究进展的认识
於瑞敏 陈赢对单克隆抗体制备技术及应用研究进展的认识● 於瑞敏 陈赢单克隆抗体是现代生命科学研究的重要内容，本文对单克隆抗体的类别进行了简单分析，并且明确指出了现阶段应用的多种单克隆抗体制备技术，同时，也对单克隆抗体制备技术的应用研究进展进行了一定的介绍，希望能够为我国生命科学研究事业的发展提供一定的理论支持。单克隆抗体;制备技术;应用研究在分子生物学及细胞生物学发展的影响下，单克隆抗体技术逐渐被应用在多个领域。单克隆抗体就是用特定的培养基筛选出既能稳定生
保健文汇 2017年12期2017-11-01
- 重要危害因子单克隆抗体的制备及其食品安全快速检测技术应用
重要危害因子单克隆抗体的制备及其食品安全快速检测技术应用食品潜在污染物种类繁多，发展简便、快速、高灵敏、低成本的检测方法是保障食品安全的根本途径。基于单克隆抗体的各类免疫分析技术是现代食品安全快速检测技术发展的主要方向之一。因此，高活性单克隆抗体的制备及其应用自然为众多研究者所关注。单克隆抗体的制备过程涉及到很多技术环节，包括抗原制备、免疫剂量设计、细胞融合、活性杂交瘤细胞筛选以及抗体纯化等。江南大学胥传来教授团队发展了基于理论模型来预测抗原抗体配对的新方
食品与生物技术学报 2017年3期2017-04-07
- 单克隆抗体药物耐药机制的研究进展
傅秀慧，刘晓志单克隆抗体药物耐药机制的研究进展张怀民1，傅秀慧2，刘晓志3*单克隆抗体药物的问世，使疾病治疗的方式发生了革命性的变化。过去的20年，单克隆抗体药物在癌症、自身免疫等疾病的治疗领域发挥了重要的作用。单克隆抗体药物低毒和高特异性优势是其成功的关键。单克隆抗体药物的这两个优势使其快速替代传统的化学疗法，但其治疗效果也同样受到耐药性的困扰。耐药性是导致单克隆抗体药物治疗效果被抑制的原因之一，单克隆抗体药物靶向结合肿瘤细胞后又被清除的情况，称为抗体的
实用药物与临床 2017年1期2017-04-03
- 抗鸡白细胞介素4单克隆抗体的制备及鉴定
鸡白细胞介素4单克隆抗体的制备及鉴定关晓宇，徐志超，王永强，李晓齐，曹红，郑世军中国农业大学 动物医学院 农业生物技术国家重点实验室，北京 100193为了制备鸡白细胞介素4 (chIL-4) 单克隆抗体，将成熟的chIL-4基因亚克隆至原核表达载体pET-28a和pGEX-6P-1上，然后在大肠杆菌中分别诱导重组蛋白His-chIL-4和GST-chIL-4的表达，并纯化。将纯化后的His-chIL-4作为免疫原免疫BALB/c小鼠，经4次免疫后，取小鼠
生物工程学报 2017年1期2017-03-07
- 氨基端前B型钠尿肽单克隆抗体的制备及其鉴定
端前B型钠尿肽单克隆抗体的制备及其鉴定谌海兰 陈 特 毕小云(重庆医科大学附属第一医院检验科,重庆 400016)目的 通过经典单克隆抗体制备技术制备氨基端前B型钠尿肽(NT-proBNP)单克隆抗体，将单克隆抗体进行特异性和亲和力鉴定，并用于免疫学检测试剂盒的开发。方法 用带His-Trx-标签蛋白的NT-proBNP免疫Balb/C小鼠制备单克隆抗体。使用PEG1500化学融合法将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。用不带标签的NT-proBNP
中国老年学杂志 2017年3期2017-02-28
- 抗鹅免疫球蛋白轻链单克隆抗体的鉴定及其应用
免疫球蛋白轻链单克隆抗体的鉴定及其应用郭永丽，高明春，罗修鑫，鞠环宇，安东，刘莹，王君伟东北农业大学 动物医学学院，黑龙江 哈尔滨 150030郭永丽, 高明春, 罗修鑫, 等. 抗鹅免疫球蛋白轻链单克隆抗体的鉴定及其应用. 生物工程学报, 2016, 32(11): 1531−1538.Guo YL, Gao MC, Luo XX, et al. Characterization and application of a monoclonal antib
生物工程学报 2016年11期2016-12-12
- 传染性囊病病毒（IBDV）VP3蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
V）VP3蛋白单克隆抗体的制备与鉴定王彬，李淑芹，李晓齐，曹红，王永强，郑世军（中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室，北京海淀100193）为制备抗IBDV VP3蛋白的单克隆抗体，以VP3-His蛋白免疫BALB/c小鼠，经4次免疫、融合、亚克隆，筛选出1株能够稳定分泌抗VP3蛋白单克隆抗体的细胞株，命名为4H8F7C10。经间接ELISA方法检测，小鼠的腹水效价为2.05× 106，单克隆抗体的解离常数（kD）为9.67×10-8，此株抗体
中国兽医杂志 2016年8期2016-11-11
- 人IgE-Fc结构域的基因克隆、原核表达及单克隆抗体的制备
隆、原核表达及单克隆抗体的制备崔璐璐，毕嘉成，李俊鑫，刘绿艳，叶秀峰，郑明星，万晓春，于广【摘要】目的通过制备小鼠抗人 IgE 单克隆抗体，为过敏性疾病的研究及诊断打下基础。方法以 CRL8033 细胞的 cDNA 为模板扩增人 IgE Fcε3-4 段基因序列并将其连接到 pET-32a（+） 载体中，转化BL21（DE3）大肠杆菌并进行表达。然后将表达所得包涵体进行变复性，把复性所得蛋白进行亲和纯化，通过 SDS-PAGE验证纯化效果。最后将纯化的蛋白
中国医药生物技术 2016年3期2016-06-21
- 细胞转染中单克隆与混克隆干扰基因效率的比较※
科)细胞转染中单克隆与混克隆干扰基因效率的比较※刘 燕1，朱吉海2，孙 伟1，赵 珺1(1.青海大学医学院免疫学教研室；2.青海大学附属医院心胸外科)目的 比较细胞转染中单克隆与混克隆干扰基因效率。方法 采用胃泌素特异干扰载体转染人胃癌原代细胞株L25，经G418抗性筛选获得混克隆和单克隆细胞，应用RT-PCR、Western blot和免疫荧光三种方法对混克隆细胞和单克隆细胞干扰胃泌素基因的效率进行比较。结果 RT-PCR结果显示混克隆细胞胃泌素mRNA
中国高原医学与生物学杂志 2016年4期2016-04-19
- 单克隆抗体治疗炎症性肠病的进展
230601)单克隆抗体治疗炎症性肠病的进展聂琳，章礼久(安徽医科大学第二附属医院消化内科，安徽 合肥230601)摘要：治疗炎症性肠病应用较为广泛的抗肿瘤坏死因子药物，出现了很多治疗失败的情况。各种新型的有潜力成为治疗IBD的药物已经被多个临床试验所评估，考虑到单克隆抗体的靶向性较好，副作用较少等优点，该文收集了最新的相关文献并归纳总结了单克隆抗体治疗IBD的进展。关键词：结肠炎，溃疡性；克罗恩病；抗体，单克隆炎症性肠病(inflammatorybowe
安徽医药 2016年5期2016-03-18
- 单克隆抗体的制备现状及应用前景
610021）单克隆抗体的制备现状及应用前景刘 曦（信息产业电子第十一设计研究院科技工程股份有限公司，四川成都 610021）随着我国细胞生物学技术以及分子生物学技术的不断发展，单克隆抗体作为重要的生命科技相关研究技术在食品、农业、生物科技以及医学等各不同领域均得到较为广泛的应用。其在蛋白质的相关结构以及功能和基因工程等相关方面发挥着极为重要的作用，现本文主要对单克隆抗体在医学领域的相关疾病诊断以及疾病治疗等方面进行阐述。单克隆抗体；制备；应用前景近年来，
化工设计通讯 2016年4期2016-03-13
- 猪伪狂犬病毒单克隆抗体的研究进展
张秋月单克隆抗体是指由杂交瘤细胞分泌，针对复合抗原分子上单个抗原决定簇的抗体。其制备原理是将骨髓瘤细胞sp2/0和免疫过的小鼠的脾细胞在促融剂作用下融合，然后檢测其上清液的抗体，将阳性孔经过4～5次亚克隆之后进行扩大培养，收集上清液及制备腹水，最后将杂交瘤细胞冻存起来以备将来所需。随着科技的发展，单克隆抗体技术的应用也更加广。由于其可以针对特异的抗原决定簇，可用于疾病的特异性治疗。血清治疗根据定义可知其是运用免疫血清来治疗疾病，但是血清包含的免疫球蛋白是多
新农业 2015年6期2016-01-05
- 胃泌素释放肽前体双抗体夹心酶联免疫吸附法的建立及其应用
验室自行研制的单克隆抗体进行筛选;采用改良过碘酸钠法对抗体进行辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)标记，从而建立双抗体夹心酶联免疫吸附法(enzyme-linked immune sorbent assay，ELISA)，并将此方法应用于癌症患者PGRP浓度的检测，现报道如下。1 材料与方法1.1 实验材料 PGRP抗原(本实验室自行研制);抗原决定簇PGRP(31－98)序列中N端到C端的3个抗原肽段—GSLKQQLRE
医学研究生学报 2015年1期2015-09-28
- 化学法、单克隆抗体法和联合免疫法检测便隐血的临床比较
杨芳化学法、单克隆抗体法和联合免疫法检测便隐血的临床比较杨芳目的 对比化学法、单克隆抗体法和联合免疫法检测便隐血的临床效果。方法 选取大便标本90例，采用化学法、单克隆抗体法和联合免疫法3种试验方法，对其进行便隐血检测。结果 化学法、单克隆抗体法和联合免疫法3种方式检测出血红蛋白的最低检出率分别为2、0.2、0.2mg/ L；化学法对人和动物的血红蛋白可发生反应，联合免疫法和单克隆抗体仅和人的血红蛋白发生反应；维生素C浓度超过10g/L可引起化学法的阴性结
当代医学 2015年7期2015-07-31
- 临床三种常规粪便隐血实验的方法学评估
洞法、血红蛋白单克隆抗体法(单克隆抗体法)和转铁蛋白(Tf)/血红蛋白(Hb)联合免疫法(联合免疫法)进行性能评估。方法通过300例临床样本和不同的动物血红蛋白(Hb)、维生素C(VitC)进行检测，从灵敏度、干扰性实验、反应时间等检测指标来反映三种方法的检验效能。结果匹拉米洞法、单克隆抗体法和联合免疫法检测Hb最低浓度分别为2.5µg/ml、0.1µg/ml、0.1µg/ml，联合免疫法检测Tf的最低浓度为0.05µg/ml。匹拉米洞法可以和人以及不同动
海南医学 2015年7期2015-04-13
- 单克隆抗体制备的筛选过程及意义
摘要：随着单克隆抗体技术应用的愈加广泛，其生产技术也日臻完善。本文就单克隆抗体制备的筛选过程及意义进行了阐述。关键词：单克隆；抗体；筛选中图分类号：R392 文献标识码： A 文章编号： 1674-0432（2014）-17-20-11975年英国剑桥皇家医学委员会分子生物学实验室的Kohler和Milstein成功的用细胞杂交方法把能够产生针对特定抗原的抗体分泌细胞分离出来，在体外长期传代并分泌特异性抗体，这些细胞经过克隆化，可以形成单克隆细胞，能产生针
吉林农业 2014年9期2014-09-18
- EPO单克隆抗体抑制CFU-E研究
，陈 有EPO单克隆抗体抑制CFU-E研究黄学文，李素芝，黄 跃，谢晓饿，刘厚东，闫春城，石泉贵，丁浩平，何 锋，陈 有目的 探讨EPO单克隆抗体是否具有抑制红系集落形成单位(CFU-E)形成的功能。方法 对大鼠骨髓进行定向体外CFU-E培养，按以下条件进行分组培养：空白对照组(不加EPO)、常规组(加EPO，不加EPO单克隆抗体)、EPO单克隆抗体干预组(EPO+EPO单克隆抗体)。培养168 h后，观察各组CFU-E数量。结果 空白对照组、常规组、EP
西南国防医药 2014年1期2014-07-25
- C型凝集素受体Dectin-2和Dectin-3的单克隆抗体制备
ectin-3单克隆抗体的单克隆杂交瘤细胞，并初步鉴定其生物学活性，为进一步研究Dectin-2和Dectin-3的生物学功能研究提供有效的工具。1 材料与方法1.1 材料质粒 pET28a(+)、pRV3-Dectin-2、pRV3-Dectin-3及菌株E.coliDH5α与BL21(DE3)由本实验室保存;RT-PCR反应试剂盒、高保真DNA聚合酶购自美国TaKaRa公司;限制性内切酶BamHⅠ、XholⅠ和T4 DNA连接酶购自美国Thermo公司
同济大学学报（医学版） 2014年2期2014-05-10
- 用血清游离轻链分析法检测单克隆Y-病
轻链分析法检测单克隆Y-病王继贵(中南大学湘雅二医院,湖南长沙410011)单克隆免疫球蛋白游离轻链,对单克隆γ-病是一种重要的诊断标志物.150多年来一直沿用尿加热试验检查Bence-Jones蛋白,以及用血清蛋白电泳及尿蛋白电泳检查M蛋白区带,诊断单克隆γ-病.这些方法敏感度低,特异性差,远远不能满足该病诊断和分类的要求.近十年来,发展了血清游离轻链的自动化免疫试验,能独立地测定κ链、λ链、κ/λ比率和游离轻链总量,大大地提高了单克隆γ-病的诊断、分类
实验与检验医学 2014年3期2014-04-04
- 化学法、单克隆抗体法和联合免疫法检测便隐血的临床比较
000化学法、单克隆抗体法和联合免疫法检测便隐血的临床比较张野铁岭市妇婴医院检验科，辽宁铁岭112000目的探讨化学法、单克隆抗体法和联合免疫法检测便隐血的临床效果。方法选取该院2013年5月—2014年5月间收治的大便标本90例作为研究对象，通过灵敏性、干扰性和特异性对化学法、单克隆抗体法和联合免疫法三种试验方法进行比较，并采用三种试验方法同时对90例大便标本进行便隐血检测。结果联合免疫法、化学法以单克隆抗体法三种方式检测出血红蛋白的最低检出浓度分别为2
中国卫生产业 2014年36期2014-03-07
- 犬瘟热病毒截短P蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
V）P1蛋白的单克隆抗体（McAb），本研究利用重组犬瘟热病毒P1蛋白免疫BALB/c小鼠，并将其脾淋巴细胞与SP2/0进行融合，用CDV包被ELISA板，通过间接ELISA法筛选出两株稳定分泌抗CDV-P1的杂交瘤细胞株（E9E4C10、E9F8D9）。间接ELISA检测腹水效价均为1∶106，亚类鉴定结果均为IgG2b。Western blotting和间接免疫荧光（IFA）分析结果表明，两株单克隆抗体均能与重组P1蛋白和CDV发生反应；ELISA叠加
中国畜牧兽医文摘 2014年3期2014-01-27
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备和鉴定
。对PRRSV单克隆抗体的研究可为PRRSV快速检测方法的建立提供技术支持，是PRRS研究中的热点之一。本研究采用纯化的PRRSV全病毒作为抗原，通过淋巴细胞杂交瘤技术，获得了高亲和力、高特异性抗PRRSV M蛋白的单克隆抗体，并对单克隆抗体的生物学特性进行了鉴定，为建立基于单克隆抗体的双抗体夹心ELISA、间接免疫荧光试验、胶体金试纸条等快速检测技术奠定基础。1 材料与方法1.1 毒种和细胞PRRSV HUB1毒株、Marc-145细胞、小鼠骨髓瘤SP2
中国动物检疫 2012年9期2012-09-11
- HER-2阳性乳腺癌靶向治疗药物研究进展
加以综述。1 单克隆抗体1.1 曲妥珠单克隆抗体 曲妥珠单克隆抗体（trastuzumab）是人源化的重组抗HER-2单克隆抗体，是一个95%来自人和5%来自鼠的IgG抗体。曲妥珠单克隆抗体能够选择性作用于HER-2的细胞外部分，通过阻断HER-2介导的信号转导通路、降低细胞膜HER-2蛋白浓度、加速HER-2受体蛋白降解、参与抗血管生成作用导致细胞生长受抑制和诱导细胞凋亡，以及通过ADCC诱导机体杀死肿瘤细胞。曲妥珠单克隆抗体是针对HER-2靶点设计的第
实用医药杂志 2012年8期2012-04-13