增菌
- 改良增菌条件应用于Soleris系统对食品中沙门氏菌的检验
验的操作程序,其增菌步骤采用胰蛋白胨大豆肉汤(trypticase soy broth,TSB)于36 ℃培养24 h。随后将增菌培养物以1.0 mL体积转移到氯化镁孔雀绿肉汤(Rappaport-Vassiliadis broth,RV)中42 ℃选择性增菌 8 h。相较于使用TSB的增菌方法,我国国家标准方法中缓冲蛋白胨水(buffered peptone water,BPW)的使用更广泛,配制成本也更低廉。本试验以保证Soleris系统沙门氏菌检验检
中国调味品 2023年11期2023-11-22
- 5 种致泻大肠埃希氏菌不同浓度下的国标法检出率分析
、营养肉汤、肠道增菌肉汤、麦康凯琼脂（MacConkey Agar，MAC）、 伊红美蓝琼脂（Eosin-Methylene Blue，EMB），均购于广东环凯微生物科技有限公司。1.2 仪器与设备恒温培养箱，上海一恒科学仪器有限公司；Bio-II-Advance4 生物安全柜，Telstar；微量移液枪（10 ～100 μL、100 ～1 000 μL），eppendorf。1.3 实验方法1.3.1 前增菌将5 种致泻大肠埃希氏菌标准菌株分别接种于BH
食品安全导刊 2023年28期2023-11-11
- 变质食物中的微生物是这样被检验出来的
祸首”了。增 菌增菌，顾名思义就是增加细菌的数量。食品中病原菌的数量较少，想要针对其进行研究，就必须想办法使其大量繁殖。检验人员一般会选取多份25克的食品样品，采用能抑制多数非病原菌生长的选择性增菌培养基，将样品分别放置在相应的选择性增菌培养基中，进行培养。病原菌对于营养的需求各有特点。比如，金黄色葡萄球菌耐受高浓度盐的环境，可以在7.5%浓度的氯化钠肉汤中生存繁殖。想分析食物中毒是不是金黄色葡萄球菌导致的，就可以用高盐环境的培养基，进行细菌增殖，而其他不
食品与健康 2023年9期2023-09-20
- 低温乳制品中沙门氏菌实时荧光PCR检测方法体系的建立
求较高，需要2步增菌，时间较长[16]。本研究是要建立一套更严格、简单、适合企业操作的沙门氏菌实时荧光PCR方法，以满足低温乳制品生产加工过程及终产品快速放行、及时纠偏的需求，提高致病菌检测技术能力，降低食品安全风险。1 材料与方法1.1 材料与试剂ATCC 14028鼠伤寒沙门氏菌、CICC 21498鸭沙门氏菌、CMCC（B）50071伤寒沙门氏菌、CMCC（B）50093甲型副伤寒沙门氏菌、CMCC（B）50094乙型副伤寒沙门氏菌、CMCC（B）5
食品安全导刊 2022年19期2022-07-22
- 粪便沙门菌、志贺菌和副溶血弧菌分离培养方法研究
放置时间以及使用增菌肉汤时的增菌时间关系到检验分析前和分析中的质量控制，与检出率密切相关。本文就粪便悬液放置温度、放置时间以及增菌肉汤增菌时间对沙门菌、志贺菌和副溶血性弧菌检出率的影响进行研究，以期优化粪便的分离培养方法，现将结果报道如下：1 材料与方法1.1 菌株 沙门菌、志贺菌和副溶血弧菌各20株。其中标准菌株或室间质评菌株16株，来源于国家或广东省卫计委临床检验中心，包括肠炎沙门菌ATCC13076等6株沙门菌、福氏志贺菌ATCC51572等7株志贺
海南医学 2022年12期2022-06-30
- 食品中单核细胞增生李斯特氏菌 改良增菌液的研究
验[14]。李氏增菌肉汤（LB1）为选择性增菌液体培养基，含有萘啶酮酸，广谱抗菌，尤其对革兰氏阴性杆菌的抑制生长能力明显[15]。但单纯的选择性富集培养基可能不利于损伤的单核细胞增生李斯特氏菌恢复。因此，对于受到非致死性损伤的单核细胞增生李斯特氏菌需要高营养的选择性培养基进行恢复。丙酮酸钠有助于受损细胞的修复[16]。酵母浸膏中富含蛋白质、氨基酸类、肽类、核苷酸、B族维生素和微量元素，能够补充氮源和提供微生物生长的多种维生素、氨基酸及生长因子[17]。本研
现代食品 2022年9期2022-06-16
- 酸奶弱后酸化菌株摇瓶增菌工艺及发酵罐扩培试验
菌株的选育、廉价增菌培养基的筛选、细胞增菌培养；菌体细胞浓缩分离；高效保护剂筛选与干燥工艺；高效直投式发酵剂的贮藏稳定性等。本实验室研究人员前期对弱后酸化乳酸菌株进行选育，并对选育的菌株进行廉价增菌培养基的筛选。关于乳酸菌细胞增菌培养技术，考虑到乳酸菌生长繁殖速度较快，采用分批式培养，对培养设备要求简单，易于控制。为获得高浓度细胞培养物，采用分批补料式培养，主要有化学中和法、缓冲盐法、膜渗析法。化学中和法可获得高密度菌体，简便易行，是目前应用最广泛的一种方
中国食品学报 2022年1期2022-02-18
- 单增李斯特菌国标检验培养基质量的比较
016中使用李氏增菌肉汤（LB1、LB2）对食品中可能污染的单增李斯特菌进行两步选择性增菌，再划线到 PALCAM 琼脂培养基和李斯特氏菌显色培养基上对可疑菌落进行分离，并进行生化鉴定。其中 LB1、LB2增菌肉汤和选择分离培养基是影响单增李斯特菌分离效果的重要因素。GB 4789.28-2013《食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》[15]（以下简称 GB 4789.28-2013）选用了一株单增李斯特菌（ATCC19115）和2株非目标菌（大肠埃希
现代食品科技 2022年1期2022-02-15
- 基于LAMP技术检测速冻肉糜类制品中单增李斯特菌的增菌方法研究及应用
，其中复杂成分对增菌、DNA提取、后续LAMP反应的影响尚不明确。本研究基于已建立的速冻肉糜类制品单增李斯特菌LAMP检测技术基础上，通过四种增菌培养基的比较，筛选出一种增殖效果最佳的增菌培养基，以降低LAMP方法的检出限，并实现单增李斯特菌LAMP检测方法在速冻肉糜类制品中的应用，预期一个工作日完成检测，以期为食品企业快速检测速冻肉糜类制品中单増李斯特菌提供技术支撑。1 材料与方法1.1 材料与仪器单核细胞增生李斯特氏菌（Listeria monocyt
食品工业科技 2021年24期2021-12-16
- 细菌培养法与荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对妊娠晚期B族链球菌筛查的应用价值比较
规检测前进行标本增菌培养对GBS感染检出率的影响，报道如下。1 资料和方法1.1 一般资料本次研究对象均为接受GBS感染筛查的妊娠晚期孕妇，共计300例，纳入时间介于2019年3月—2019年9月，产妇孕期介于35周～37周之间；年龄介于22岁～41岁之间，平均年龄为（29.72±1.30）岁。纳入标准：孕周经B超核实相符；一周内无性生活；两周内无抗生素药物治疗史；不存在阴道流血症状；单活胎；孕妇对本研究知情同意；经本院伦理委员会批准。排除标准：取样部位曾
生物医学工程学进展 2021年2期2021-07-02
- 不同检测方法对妊娠晚期B族链球菌的筛查比较
选择性肉汤培养基增菌进行前后检测，并统计分析各方法的检测结果，为临床不同GBS检测需求提供合理的检测方案，现报道如下。1 资料与方法1.1 一般资料选取2018年4月～2019年7月于深圳市盐田区人民医院接受产检的702例妊娠晚期孕妇作为研究对象，年龄22～39岁，平均（28.3±3.9）岁；孕龄35.2～37.1周，平均（35.9±0.6）周。纳入标准：35周≤孕龄＜38周；孕妇知情同意且签署同意书。排除标准：1周内使用过抗菌药或阴道周围外用清洗剂的孕妇
中国当代医药 2021年14期2021-06-26
- 一种软水盐的抑菌效果研究
不同浓度软水盐的增菌肉汤结果(培养24 h)图2 大肠杆菌接种到含不同浓度软水盐的增菌肉汤中的平板结果表1 大肠杆菌接种到含不同浓度软水盐的增菌肉汤中的结果从表1可见，26.5%的软水盐抑菌效果较好，大肠杆菌完全不生长。最初接种到200 mL含26.5%软水盐培养液的大肠杆菌浓度为1.2×103CFU/mL,经过24 h的培养，细菌浓度不但没有增加，下降至0，说明26.5%的软水盐杀菌效果较好。6.6%软水盐，同样最初接种到200 mL含6.6% 软水盐培
盐科学与化工 2021年5期2021-06-17
- 不同检测方法在孕妇B 族链球菌筛查中的应用效果比较
。选择性T-H 增菌肉汤由英国OXOID 公司提供。1.3 方法1.3.1 标本采集 对所有孕妇均采集其阴道和肛周分泌物标本。阴道和肛周分泌物样本采集的位置在阴道口1/3 处、括约肌上面3 cm 左右处。使用无菌拭子,小心旋转1 圈取得分泌物样本。1.3.2 样本检测 采集样本分别采用常规细胞培养法、显色培养法及荧光PCR 法进行GBS 筛查,并以T-H 肉汤增菌培养法为参考标准。①常规血琼脂培养法：将标本接种至哥伦比亚血琼脂培养基上,分区划线后,放入CO
中国现代药物应用 2021年10期2021-06-12
- 食品中单核细胞增生李斯特氏菌能力 验证结果及分析
、试剂及耗材李氏增菌肉汤（LB1、LB2）基础（陆桥）、LB1及LB2添加剂（陆桥）；李斯特氏菌显色培养基（科玛嘉）、PALCAM 琼脂培养基（环凯）、羊血琼脂平板（陆桥）、TSA-YE 琼脂培养基（陆桥）、SIM 培养基（陆桥）、单核细胞增生李斯特氏菌生化鉴定盒（环凯）；VITEK 2 革兰氏阳性细菌GP 鉴定卡（梅里埃）。1.3 仪器及设备立式压力蒸汽灭菌器（YXQ-LS-50SII）、电热恒温培养箱（BPX-272）、生化培养箱（BSP-150）、生
现代食品 2021年6期2021-05-18
- 婴幼儿奶粉中阪崎肠杆菌增菌培养对PCR快速检测的影响
是对待检样本进行增菌培养[16-17]。据调查，实际流通食品中致病菌的含量通常较低，多数奶粉中阪崎肠杆菌的污染水平小于1 CFU/100 g[18]，目前与阪崎肠杆菌相关的快速测方法都达不到如此低的检出限。已报道的基于DNA检测的阪崎肠杆菌快检方法的检出限达到103CFU/mL（g）[19-20]，因此，采用传统的增菌培养方法对目标菌进行增殖，使其快速达到一定的数量是目前各快速检测方法必不可少的关键步骤。据报道，阪崎肠杆菌的最适生长温度为35～40℃，在3
中国乳品工业 2021年11期2021-03-31
- 婴幼儿奶粉中阪崎肠杆菌增菌培养对PCR快速检测的影响
是对待检样本进行增菌培养[16-17]。据调查，实际流通食品中致病菌的含量通常较低，多数奶粉中阪崎肠杆菌的污染水平小于1 CFU/100 g[18]，目前与阪崎肠杆菌相关的快速测方法都达不到如此低的检出限。已报道的基于DNA检测的阪崎肠杆菌快检方法的检出限达到103CFU/mL（g）[19-20]，因此，采用传统的增菌培养方法对目标菌进行增殖，使其快速达到一定的数量是目前各快速检测方法必不可少的关键步骤。据报道，阪崎肠杆菌的最适生长温度为35～40℃，在3
中国乳品工业 2021年11期2021-03-31
- 浓缩配制BPW增菌液对沙门氏菌检测效果的影响
法中都缺少不了前增菌步骤。在《食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》 （GB 4789.4—2016）中要求使用传统分离法进行沙门氏菌检验：取25 g/mL样品置于225 mL BPW中（36±1）℃培养8～18 h进行非选择性前增菌后再经二次选择性增菌，最后进行分离检测[5]。因此，需要提前配制大量BPW增菌液并每份分装225 mL，经121 ℃，15 min灭菌处理后备用，如先大量配制经灭菌后再分装会导致因容量过大而造成灭菌不彻底，直接购买
食品安全导刊 2021年36期2021-03-14
- 不同培养基在沙门氏菌检验中的检出效果观察
究，本文主要针对增菌后在不同培养基中对沙门氏菌检出效果进行分析。1.材料1.1 标本来源选取2018 年1 月—12 月在阳江市人民医院因急性腹泻送检的肛拭样本200 例，纳入标准：患者粪便如水样便、稀便、脓血便、黏液便；大便镜检白细胞≥5/高倍视野）、可见红细胞和巨噬细胞；不考虑采集样本前患者是否使用过抗菌药物。1.2 仪器与试剂SBG增菌液、木糖赖氨酸Tergitol 4（XLT4）培养基、SS平板、木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）、沙门菌显色培养基（CA
医药前沿 2020年20期2020-11-10
- 3种改良B族链球菌检测方法的检测效果比较▲
告，选择性的肉汤增菌能提高GBS的阳性检出率[5]，而免疫层析法、PCR法可快速检测GBS，且检出率相对较高[4-5]。美国疾病预防控制中心推荐的检测方法是先对样本进行增菌，再进行再次培养或者抗原、核酸检测[6]。但在实际工作中，对样本增菌后再进行抗原及核酸检测费时费力，成本高，因此很少采用该方法。本研究结合本院GBS检测开展情况及相关文献，比较采用不同方法进行直接检测及增菌后检测的检测效果，为临床GBS检测需求提供合理的方案。1 资料与方法1.1 临床资
广西医学 2020年18期2020-10-28
- 围产期孕妇B群链球菌三种筛查方法的评估
检测标本，也可对增菌或分离后的标本进行检测，有报道称其敏感性较显色肉汤增菌培养法提高10%～15%[5]。为了对上述GBS筛查方法进行合理评估，笔者对1063份围产期孕妇生殖道或直肠标本进行同时检测，以显色肉汤增菌培养法作为GBS筛查的“金标准”，对Xpert GBS LB法、免疫层析法和普通培养法进行诊断效能评价。1 材料与方法1.1研究对象 选取2019年4—6月湖北医药学院附属医院产科门诊行GBS筛查围产期孕妇(35～37周)1063例,年龄21～4
临床误诊误治 2020年7期2020-07-29
- 一种快速鉴别牛肉中大肠杆菌O157∶H7检测方法的建立及应用
N公司，新生霉素增菌肉汤购自北京陆桥公司，PCR仪为美国ABI公司，电泳仪、凝胶成像系统均为上海天能公司，酶标仪为西班牙基立福公司。1.3PCR引物设计与合成 以大肠杆菌O157∶H7的菌体抗原基因rfbE[17-18]为目的基因，参考陈雅君等[19]报道的引物序列(表1)，委托金斯瑞生物技术有限公司合成。表1 rfbE基因引物序列及预计扩增长度 Tab.1 Primer sequence of rfbE and expected amplificatio
中国人兽共患病学报 2020年4期2020-05-08
- 通过突变甲醇脱氢酶启动子提高甲基营养菌吡咯喹啉醌产量
2 株突变菌株在增菌培养基中MDH 活性下降，PQQ 合成水平高于J1-1，且在生长稳定期（96 h）PQQ 合成水平较起始菌株J1-1 分别提高约9.76%和11.6%。1 材料与方法1.1 材料甲基营养菌J1-1、质粒pCM66-lacZ、自杀质粒pGX 由本实验室保存；大肠杆菌DH5α、λ-pir感受态购自上海唯地生物技术有限公司；快速质粒小提试剂盒购自北京天根生化科技有限公司；限制性内切酶、琼脂糖凝胶DNA 回收纯化试剂盒购自Thermo 公司；D
生物技术通讯 2019年5期2019-12-25
- 禽沙门氏菌鉴别培养基和PCR检测方法的建立
品，分别经BPW增菌，SC和TTB分别增菌后，再利用XLD鉴别培养基培养后，利用PCR方法进行沙门氏菌的分离鉴定。同时，所有样品均按照国家标准检测方法(国标法)进行沙门氏菌的分离鉴定。结果显示，本研究建立的沙门氏菌快速检测方法与国标法相比，沙门氏菌检出率均为41.2%，吻合率100%；血清分型试验显示，该49株沙门氏菌均为鸡白痢沙门氏菌；本研究建立的检测方法用时3d-6d，而国家标准检测方法需要6d-9d。本研究表明，禽沙门氏菌鉴别培养基和PCR检测技术可
山东畜牧兽医 2019年10期2019-10-30
- 羊乳活性发酵饮品中益生元增菌特性及发酵工艺优化
筛选和复配，得到增菌效果较好的益生元；同时对活性益生菌羊乳发酵饮品的发酵工艺进行优化，为活性益生菌羊乳发酵饮品的开发提供理论支撑，以促进羊乳制品种类多样化发展，满足消费者需求。1 材料与方法1．1 材料与试剂1．1．1 材料西北农林科技大学西农萨能乳山羊畜牧基地生产的羊乳；新西兰恒天然（中国）有限公司生产的脱脂乳粉；陕西百跃优利士乳业有限公司提供的低聚果糖（纯度≥95%）、菊粉（纯度≥90%）、低聚半乳糖（纯度≥55%）、低聚异麦芽糖（纯度≥50%）；发酵
中国乳业 2019年8期2019-09-11
- 食源性相关腹泻患者粪弯曲菌检测结果分析
弯曲菌，以了解与增菌培养分离法检测结果的关系，为临床诊疗与公卫服务提供技术支持。1 材料与方法1.1 菌株来源 对2015年1月至2017年12月本系统12家社区卫生服务中心就诊的食源性相关腹泻患者粪便（或肛拭子）标本采用直接分离与增菌分离相结合的方法常规培养分离获得200株致泻菌，其中空肠弯曲菌4株、结肠弯曲菌1株。1.2 仪器与耗材 VITEK-2 compact全自动微生物分析系统（法国bioMérieux公司）及其苛养菌（NH）配套鉴定卡，基因扩增
浙江临床医学 2019年6期2019-07-30
- GBS自动培养检测与普通细菌培养的对比分析
细菌培养法，肉汤增菌法，选择增菌培养自动检测系统及 PCR 法等。由于普通培养方法存在漏检的弊端，本院采用珠海迪尔研制的GBS选择性增菌显色培养自动检测系统，现将二者检测情况报告如下：1 资料与方法1.1 一般资料收集新疆维吾尔自治区人民医院2017年4—12月门诊和住院妊娠35～37周孕妇 672例，患者年龄为19～45岁。纳入标准：新疆维吾尔自治区人民医院住院及门诊的常规产检者，单胎宫内妊娠经B超证实胎儿存活，且自愿加入本研究的同时签署知情同意书的孕妇
中国卫生标准管理 2019年5期2019-04-15
- 多重PCR 同时检测食品中4 种细菌与常见霉菌
]通过12 h的增菌培养可将鸡肉等食品中PCR检测沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7与单核细胞增生李斯特氏菌的检出限由增菌前的102CFU/mL降低至101CFU/mL。闫琳等[11]将人工染菌的禽肉食品样本在增菌12 h后，利用PCR检测沙门氏菌的检出限可低至100CFU/25 g。增菌-PCR检测方法可显著提高致病菌的检出限，然而由于不同微生物生长特性存在差异，需要研究开发通用型培养基应用于多种致病菌的同时增菌培养，并抑制其他非靶标菌的生长，而且增菌-P
食品科学 2019年4期2019-03-11
- 韩国开发出农产品致病菌快速检测方法和工具
在现场使用的优化增菌及快速检测方法。负责本次研究的中央大学研究组表示，“目前食物致病菌的检查通过增菌培养→分离培养→确认试验，需要7～14 天的时间，而本次研究开发的方法通过增菌培养→Multiplex Real time PCR kit 试验，可将试验时间缩短到8 个小时内。本研究开发的工具价格比美国及欧洲低50%左右（3～4 万韩元），1 次检查可减少1～2 万韩元的食物致病菌检查费用。另外，借鉴AOAC（国际分析化学家协会）方法的鉴定实验结果确认，该
中国食品学报 2019年11期2019-01-14
- 高通量测序分析不同增菌温度下冷鲜鸡肉细菌的群落多样性
量测序技术对不同增菌温度下的冷鲜鸡肉细菌群落多样性的研究鲜见报道。冷鲜鸡肉样品在进行高通量测序前，首先需采集样品的细菌并提取DNA。为提取较高质量的DNA，提高细菌的检出率，需对不同贮藏时间的冷鲜鸡肉的细菌进行增菌处理，取其增菌液进行细菌总DNA提取。目前现行的标准GB 4789.2—2010《食品微生物学检验 菌落总数测定》中规定培养温度为（36±1）℃，该条件下培养所得结果只包括嗜中温性需氧微生物菌落总数。目前采取的细菌增菌温度多为37 ℃，而对于以嗜
食品科学 2018年24期2019-01-07
- 冰鲜鸽肉贮藏过程中的微生物菌群多样性
行研究，分析不同增菌温度下冰鲜鸽肉中微生物菌群的菌相构成情况、贮藏过程中各种微生物菌群数量的变化特点以及贮藏过程中肉质新鲜度的变化规律。为了提高DNA的得率，需对细菌进行增菌处理。目前的国家强制性标准中测定菌落总数时的培养温度为（36±1） ℃，但是该条件下培养时的菌落总数测定对象只包括嗜温性需氧微生物。对于低温贮藏冷鲜肉来说，嗜冷菌也可能是优势菌群，如果能对嗜冷菌和嗜温菌进行同时检测，综合评价会更合理。因此，本研究选取4 ℃和37 ℃ 2 种增菌温度，综
肉类研究 2018年9期2018-10-25
- 沙门氏菌及副溶血性弧菌的 共增菌培养基的研制
致病菌有特定的前增菌步骤,沙门氏菌等菌株更是需要进行多步增菌过程,较为费时、费力[8]。因此,研制可同时富集多种致病菌的共增菌培养基成为研究的热点,这对于提高致病菌共检技术的效率具有重要意义。沙门氏菌和副溶血性弧菌均为食品中重要的致病菌,研究其共增菌技术对于控制其疾病的传播及预防相应的食物中毒具有重大意义。目前国内外研究中,涉及多种致病菌共增菌培养基的研究已有:沙门氏菌、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌的共增技术[9],沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的共增技术
食品工业科技 2018年19期2018-10-22
- 流式细胞技术检测酸性饮料中菌落总数的研究
.2.3FCM法增菌:将含菌饮料手动摇匀,在无菌操作环境下,抽滤250 mL含菌饮料,用无菌镊子将滤膜转移至100 mL TSB肉汤,于(36±1) ℃培养箱中正置培养。检测:用无菌移液器移取上述增菌后的菌液100 μL加入20 mL无菌试管中,依次加入90 μL CS13,于无菌环境静置30～60 min。开机清洗校正完成后将含样品的20 mL试管置于SPU样品架,试剂Cleaning 5、还原剂(CSR+DR+隔离油)、CSV和B24放置在试剂架,V2
食品工业科技 2018年4期2018-04-13
- 缓冲蛋白胨水前增菌对冷鲜鸡表面微生物变化的影响
均需选择特定的前增菌介质进行菌体修复和富集，以获得相对丰度较高的目标菌体[6]。常见的非选择性前增菌介质主要是缓冲蛋白胨水(buffer peptone water，BPW)、胰酶大豆肉汤(trypticasesoy broth，TSB)、营养肉汤(nutrient broth，NB)等[7]。其中BPW是食品安全国家标准GB4789.4-2016《食品微生物学检验 沙门氏菌检验》和《食品微生物学检验 克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验》 中用于沙门氏菌和克罗
微生物学杂志 2018年6期2018-02-26
- 一次巧克力中沙门氏菌检验能力验证结果与分析
基及试剂①BPW增菌液、BS平板、SC增菌液、三糖铁琼脂培养基（干粉）、沙门氏菌筛选显色平板、TTB增菌液、营养琼脂（干粉），购自北京陆桥技术有限责任公司。②氧化酶试剂、API 20E，购自法国梅里埃公司。③沙门氏菌诊断血清OMG、O60、He，n，x，购自泰国S& A reagentsLab Ltd, part。④沙门氏菌诊断血清Hr、Hz15、HMC，购自丹麦Statens Serum Institut。以上所用培养基及试剂均在保质期内，并已经质控合。
现代食品 2018年23期2018-02-22
- 从一名三岁女童带菌者直肠拭子中分离出0139群霍乱弧菌
.2.1 第一次增菌 将所有样本接种于碱性蛋白胨水，37℃，6～8h进行第一次增菌。2.2.2 分离培养、第二次增菌和快诊试验 取表层增菌液分别划线接种于碱性琼脂、四号琼脂、TCBS琼脂，37℃，20～24h分离培养；接种碱性蛋白胨水，37℃，6～8h进行第二次增菌；同时用O1群、O139群霍乱弧菌检测试剂盒（胶体金法）做快诊试验。2.2.3 观察菌落特征、涂片染色、血清学试验、纯培养 挑取四号琼脂平板上2～4mm、微凸、圆形、中心黑色、光滑、湿润菌落；T
医药前沿 2018年27期2018-01-16
- 饲料中沙门氏菌的测定方法
他菌，因此选择性增菌是必须的，而且为了激活受伤的沙门氏菌，常进行预增菌。增菌使沙门氏菌抗原浓度增加，更有利于检验结果的呈现。沙门氏菌快速检测试剂盒是专门用来检测饲料中沙门氏菌抗原的。沙门氏菌特异性抗体是快速定性检测的基础，经过增菌（选用营养肉汤进行预增菌，使“致傷”、冷冻的沙门氏菌复苏）和选择性增菌（使用选择性培养基RV进行增菌，使沙门氏菌大量繁殖，同时抑制其它杂菌生长）的阳性样品与染色剂标记的抗体结合形成抗原-抗体复合物，其沿着膜移动，被固定的抗体将使复
课程教育研究·新教师教学 2015年8期2017-09-27
- 不同结核杆菌检测方法的临床应用价值
）、痰涂片试验、增菌聚合酶链反应技术（PCR）四种检测方法对结核杆菌检测的临床应用价值。方法选取我院2015年6月～2016年6月收治的结核病患者60例分为观察组，将同期收治的非结核病患者40例作为对照组。采集所有患者的痰液标本先后进行罗氏培养、PCR技术、痰涂片试验、增菌PCR技术检测，记录检测结果，比较不同检测方法的检测价值。结果观察组患者检测结果显示，罗氏培养检出痰液标本阳性14例，阳性率为23.33%；PCR技术检出痰液标本阳性33例，阳性率为55
临床医药文献杂志(电子版) 2017年29期2017-08-16
- 食品微生物快速检测问答汇总
，必须经历培养、增菌等阶段，无法实现在1～2个小时内出结果。2 食品中微生物快速检测方法具备的特点？食品中微生物快速检测方法具有如下一个或者几个特点：（1）操作简便，检测速度快，检测时间短；（2）灵敏度高、特异性强，检测结果更为精确；（3）自动化程度高，减少人为参与，降低人工成本；（4）对检验人员经验依赖程度低，操作简单，易于标准化；（5）产品更小、更轻、更便携，更适合现场检测。3 目前常用的食品微生物快速检测方法有哪些？常用的食品微生物快速检测技术从大类
食品安全导刊 2017年3期2017-04-28
- B群链球菌显色培养基在孕产妇B群链球菌筛查中的性能评价
，分别直接接种或增菌后接种于血平皿和GBS显色培养基，记录鉴定结果。以筛查出的GBS总阳性数为参考，分别比较直接接种和增菌接种时，显色培养基筛查GBS的敏感性和特异性。结果显色培养基对GBS的检出率、敏感性和特异性优于常规血平皿。标本增菌后接种法孵育24 h得到的阳性率为7.05%(22/312)高于直接接种法(6.41%，20/312)，对GBS筛查的敏感性高于直接接种法(95.65%vs86.96%)，特异性一致(99.65%)。结论显色培养基对GBS
首都医科大学学报 2016年5期2016-11-10
- 大肠杆菌O157：H7快速增菌培养基检测效果的研究
157：H7快速增菌培养基检测效果的研究□ 宫春波 烟台市疾病预防控制中心□ 刘磊 陶文靖 北京良润生物科技有限公司□ 王覃 北京智云达科技股份有限公司为了验证对于大肠杆菌O157:H7菌株特异性、复苏效果以及快速生长的特点，比较了3种培养基对于大肠杆菌O157:H7的增菌效果。研究结果表明，8h培养时间内，MicroFast®快速增菌培养基对于冷损伤和热损伤的大肠杆菌O157:H7菌株具有良好的修复和增殖效果。MicroFast®快速增菌培养基营养组分适
食品安全导刊 2016年22期2016-10-10
- 食源性致病菌快速检测的前增菌培养的研究进展
病菌快速检测的前增菌培养的研究进展钱红玫1,胡文忠2,*,冯可3,萨仁高娃3,邵文俊2(1.大连工业大学食品学院,辽宁大连 116600;2.大连民族大学生命科学学院,辽宁大连 116600;3.大连理工大学生命科学与技术学院,辽宁大连 116024)近年来,由食源性致病菌污染食物导致中毒或死亡事件在全球频发,严重危害人类健康,食源性微生物引起的疾病已成为危害人类健康的头号杀手。目前,食源性致病菌快速检测技术研究已成为国际学者关注的热点,研究的焦点主要集中
食品工业科技 2016年13期2016-09-13
- 沙门菌定性检验方法的关键环节分析
利用BPW进行前增菌，采用TTB和SC实施二次增菌。基于此，通过3种分离培养基，鉴定分离培养。同时，通过实时荧光PCR方法，对比分析前增菌和二次增菌后的增菌效果。结果基于分离培养方法作用下，15件考核样品中有12件样品可检测到沙门菌。基于实时荧光PCR检测方法作用下，15件考核样品中有14件样品可检测到沙门菌。结论在优化沙门菌检测方案的基础上，特别是筛查大规模样本或监测时，前增菌后直接进行检测，或者利用SC二次增菌后鉴定分离培养，有助于减少工作量，减低资源
系统医学 2016年7期2016-09-10
- 大肠杆菌O157：H7快速增菌培养基检测效果的研究
O157：H7的增菌效果。研究结果表明，8h培养时间内，MicroFast?快速增菌培养基对于冷损伤和热损伤的大肠杆菌O157：H7菌株具有良好的修复和增殖效果。MicroFast?快速增菌培养基营养组分适合O157菌株的生长需求，在MicroFast?快速增菌培养基中，大肠杆菌O157：H7菌株的倍增时间为13.5min，远高于mEC+n的28min，且MicroFast?快速增菌培养基能够完全抑制部分G+细菌以及部分G-细菌的干扰，对于大肠杆菌O157
食品安全导刊 2016年8期2016-05-14
- 良润生物：技术引领市场
门氏菌检测需要前增菌、增菌、平板分离、生化鉴定、血清型鉴定5大步骤，需要3～7天的时间，检测时间较长、效率低，市场对快速检测技术的需求不断加大。目前沙门氏菌快速检测技术主要分为3大块：培养改良法、免疫学方法、分子学方法。免疫学方法优势是特异性高，操作时间短、检测结果可靠，适合批量检测和自动化检测（VIDAS），略势为高质量抗体获得困难、产品开发周期长、检测灵敏度受靶标蛋白的影响大。分子学方法优势是靶标明确，操作时间短、检测结果可靠，核酸提取效率和系统稳定性
食品安全导刊 2016年4期2016-05-14
- 沙门菌和志贺菌通用增菌液增菌效果实验观察
志贺菌检验所用的增菌液不同， 即使是对同一份标本也只能分别增菌， 分别划线分离， 使实验室的工作量成倍增加， 同时由于两者增菌时间不相同， （ 沙门菌前增菌 8～ 18 h，TTB、SC增菌18～24h 志贺菌厌氧16～ 20 h） ， 给实验测定的工作安排带来一定困难， 因此， 研究和选择合适的可同时用作沙门、志贺菌增菌的通用增菌液， 对提高实验室的工作效率具有重要的现实意义。选择了市售的 2 个牌号的沙门、志贺菌增菌液与 SC 增菌液及 GN 增菌液分
健康之路（医药研究） 2015年2期2015-10-21
- 如何实现快速检测及有效控制沙门氏菌
的实验员多次转接增菌及生化鉴定才能完成沙门氏菌的初步判断。Micro Fast沙门氏菌快速检测系统由沙门氏菌快速增菌培养基和金标检测卡组成，可实现样品中沙门氏菌最短24小时检测。在沙门氏菌增菌的过程中运用的技术主要是抑制竞争菌的生长，从而达到沙门氏菌的快速增殖，在低菌及高菌环境都能快速有效的实现沙门氏菌快速增菌。快速检测卡应用“双抗体夹心法”的原理，沙门氏菌和金标记的特异性单克隆抗体结合及预包被于NC膜T线位置的特异性多克隆抗体结合，金颗粒的聚集而显示明显
食品安全导刊 2015年4期2015-07-15
- 不同培养基及B族链球菌增菌肉汤检测B族链球菌效果评价
养基及B族链球菌增菌肉汤检测B族链球菌效果评价陆庭嫣，沈俐，唐振华(上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院，上海200030)目的通过分析B族链球菌(GBS)检测的阳性检出率和平板选择性能来评价GBS筛查培养基、哥伦比亚血琼脂培养基和GBS增菌肉汤检测结果的可靠性和临床应用的可行性。方法收集妊娠晚期35～37周孕妇阴道下端及肛周样本242例、中段尿样本15例，同时直接接种及经GBS增菌肉汤增菌后接种哥伦比亚血平板和GBS筛查平板，观察各培养基上GBS的生
检验医学 2015年9期2015-01-12
- 提高饲料中志贺氏菌检测准确性的技术方法研究
制品检定所；肠道增菌肉汤、GN增菌液、志贺氏菌增菌液、XLD培养基、HE培养基、EMB培养基、SS培养基、沙门氏菌生化鉴定管、志贺氏菌生化鉴定管、大肠埃希氏菌生化鉴定管，青岛海博生物工程公司。全自动微生物鉴定系统（BIOLOG MicroStationTM）、GENⅢ细菌鉴定板（GEN III MicroPlateTM），美国BIOLOG公司。电热恒温培养箱、生物显微镜、电子天平等。1.2 方法1.2.1 增菌培养基的优化试验分别取沙门氏菌、志贺氏菌、大肠
饲料工业 2014年1期2014-12-04
- 基于可视化抗体宏阵列技术的出血性大肠杆菌O157∶H7定量检测
1.3.5 模拟增菌实验按照GB/T 4789.36—2008《食品卫生微生物学检验：大肠埃希氏菌O157∶H7/NM检验》中的规定，对超市购买的食品面包、果冻、牛奶进行前处理，在处理好的250 mL样品中加入事先培养并且稀释106倍的标准菌液1 mL，经计数为380 个/mL，然后于37 ℃进行增菌培养，分别于2、4、6、8、10、12、14、16 h后进行宏阵列检测，并同步用大肠杆菌O157∶H7显色培养基涂布平板计数，之后分析平板计数结果与标准曲线推
食品科学 2014年20期2014-01-18
- 细菌性食物中毒回顾性检测分析
选择性平板与运用增菌液增菌后分离相应选择性平板相结合的方法, 筛选优势菌(可疑菌落)进行鉴定。三种方法相结合的检测处理过程加快了检出速度,提高了检出率。现具体介绍如下。1 材料与方法1.1 标本来源 过往18起细菌性食物中毒患者的肛拭、剩余食物等材料114份。1.2 标本采集 肛拭子采集于保存菌种管内, 剩余食物及其他留样材料采集于无菌留样容器内。1.3 检测试剂 PCR仪与PCR细菌检测试剂盒由西安天隆科技有限公司提供； GN肠道增菌液、副溶增菌液、SF
中国实用医药 2013年29期2013-02-02
- 食品中热损伤沙门氏菌选择性增菌及实时荧光聚合酶链式反应检测
伤沙门氏菌选择性增菌及实时荧光聚合酶链式反应检测索 标1,2，滕要辉1，史贤明2，艾志录1(1.河南农业大学食品科学技术学院，河南 郑州 450002；2.上海交通大学农业与生物学院，上海 200240)为了能够高效检测食品中的亚致死损伤沙门氏菌，首先采用热激胁迫的方法得到亚致死损伤沙门氏菌细胞，进而基于选择性增菌培养液SEL建立一种实时荧光聚合酶链式反应检测技术。结果表明：在SEL中经过20h增菌培养后，无论是否经过修复培养，1～2CFU/5mL SEL
食品科学 2012年10期2012-10-25
- 吸水性样品对沙门氏菌和O157检测影响研究
在食品致病菌检验增菌培养过程中，具有较强的吸水性，使增菌液含量明显减少的样品，诸如大豆分离蛋白粉［1］、面包、干海菜等。因为此类样品的吸水作用，使增菌液含量明显减少，发生吸水膨胀成糊现象，进而对增菌液的培养环境，如pH值、含盐量等形成一定的影响。在常见致病菌的检验过程中，前增菌过程是其中一个重要环节，一般常规方法为取具有代表性样品25 g，加入225 mL相应增菌液，培养8～24 h。然而对于一些特殊样品例干海菜、面包、大豆分离蛋白粉等，由于其自身固有属性
微生物学杂志 2012年6期2012-10-25
- 一起O139群霍乱弧菌感染的病原学检测分析
密切接触者扛拭子增菌液以及相关甲鱼的一二次增菌液各2～3滴，滴入检测条加样端15 min内观察结果。1.3.2 常规菌株分离 按《霍乱防治手册》（5版）进行[1]患者腹泻物、可疑者肛拭子直接接种10 mL碱性蛋白胨水中增菌6～8 h后，划线接种庆大霉素琼脂平板，井水和甲鱼养殖水标本450 mL，调pH9.0加50 mL 10倍浓缩碱性胨水，以无菌方式采集甲鱼内脏25 g接种225 mL碱性胨水，增菌6～8 h，划线接种庆大霉素琼脂平板分纯培养，同时取0.1
中外医疗 2012年36期2012-08-20
- 提高双歧杆菌活力的优化增菌发酵技术研究
歧杆菌活力的优化增菌发酵技术研究何枫媛，葛武鹏，卫伟，朱红，刘锐(西北农林科技大学食品科学与工程学院，陕西杨凌 712100)以MRS为基础培养基，选取添加4种不同的增菌因子，即：魔芋胶水解物、薏苡仁浸提液、山药浸提液、菊粉，以单因素实验筛选出较优的3种增菌因子，通过正交实验以活菌数为活力评价指标，确定最佳增菌配方。结果表明，单因素实验中，魔芋胶水解物增菌效果最佳，当其在MRS培养基中添加体积分数为35 mL/L时，双歧杆菌的活菌数可达1.21×109mL
中国乳品工业 2012年5期2012-01-08
- 响应曲面法优化鼠李糖乳杆菌L7-13增菌因子
乳杆菌L7-13增菌因子胡博，梁金钟（哈尔滨商业大学食品工程学院，哈尔滨150076）采用响应面方法对鼠李糖乳杆菌L7-13的增菌因子进行了优化。以MRS培养基作为基础培养基，在此基础上添加增菌因子；采用单因素实验设计法，对几种乳酸菌生长促进因子对鼠李糖乳杆菌L7-13的增菌影响进行评价；筛选出对鼠李糖乳杆菌L7-13增菌效果显著的3种物质以其最佳添加量；然后用旋转中心组合设计及响应面分析法确定了3种显著增菌因子的最佳配比。在优化后的培养基中，鼠李糖乳杆菌
中国乳品工业 2011年1期2011-10-19
- 小肠结肠炎耶尔森菌前增菌方式的选择
结肠炎耶尔森菌前增菌方式的选择牛 蕾1，祝长青1,2，周光宏1,*，徐幸莲1，李 彬1，江 芸1(1.南京农业大学 国家肉品质量安全控制工程技术研究中心，江苏 南京 210095；2.江苏出入境检验检疫局，江苏 南京 200001)小肠结肠炎耶尔森菌作为一种食源性致病菌逐渐引起了关注。本实验利用胰蛋白胨培养基、改良磷酸盐缓冲液和氯苯酚-替卡西林-氯酸钾培养基对小肠结肠炎耶尔森菌前增菌，并采用实时荧光PCR方法对增菌效果进行检验。结果表明：在纯菌体系中胰蛋白
食品科学 2011年5期2011-10-18
- 食品沙门氏菌检测方法的发展
法是食物样品分步增菌，以增加病原的可检出率，这种培养方法总体可分4个不同阶段或步骤。第一步（预增菌），将样品加到一种高营养、无选择性的培养基中，温度37℃，使那些“致伤”的细菌复苏及使所有微生物生长。虽然缓冲胨水被建议常规使用（由于其可保持溶液pH值稳定），但对培养基的选择仍存有争论。第二，是选择性增菌步骤，它使沙门氏菌生长而使肉汤中同时存在的微生物数量减少，与预增菌培养基相似，对选择性培养基的选择，也存在许多不同的观点。目前应用的主要有如下3种类型：连四
河南科技 2011年5期2011-08-15
- 外环境样本中产毒型O1群霍乱弧菌双重荧光定量PCR快速检测方法的建立＊
接种于营养肉汤,增菌6h,用“煮沸法”提取核酸:即取1mL上述增菌液加入1.5mL离心管中,4 000r/min离心 6min富集,去上清,加入 100μL DEPC水重悬,煮沸 10min,10 000r/min离心 2 min,吸取上清液作为模板DNA,-80℃保存备用。1.4 病原菌的定量标准 纯培养增菌6h,取一份菌液,煮沸 10min后测 OD492nm值,调节浓度使OD492nm=0.1(相当于 1.0 ×107cfu/mL)[6],依次作10
中国人兽共患病学报 2011年1期2011-01-24
- 乳制品常见致病菌选择性共增菌技术研究
见致病菌选择性共增菌技术研究张巧艳1，何腾飞2，范萍3，平丽英3，周育1（1.浙江省农业科学院农产品质量标准研究所，杭州 310021；2.浙江工业大学药学院，杭州 310014；3.中美华东制药有限公司发酵工程实验室，杭州 310011）以乳制品常见致病菌大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌为目标菌，研究6种基础培养基、2种培养模式、20种培养基添加剂对增菌的影响，并以无显著抑制效应的添加剂对背景微生物进行了抑菌效应研究，建立了一种选择性富集目标菌的ESS
中国乳品工业 2011年5期2011-01-08