亲和柱
- 超高效液相色谱-串联质谱法测定全麦粉中的赭曲霉毒素A
比较不同的免疫亲和柱，鉴于赭曲霉毒素A 本身的特性优化不用的洗脱溶剂，结合高灵敏度的超高液相色谱-串联质谱法（Ultra High Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry，UPLC-MS/MS），建立快捷高效准确的分析方法，为实际生活中测定全麦粉中赭曲霉毒素A 提供参考。1 材料与方法1.1 实验材料全麦粉样品购自国家粮食和物资储备局科学研究院，分别为全麦粉A、全麦粉B、全麦粉C，全麦粉阴性样品、质控样
食品安全导刊 2023年28期2023-11-11
- 小麦粉中呕吐毒素检测能力验证及关键点分析
特曼公司；免疫亲和柱：Romer 公司。1.2 标准品与试剂实验呕吐毒素标准品（CAS：51481-10-8）：100.0 μg/mL，Romer。聚乙二醇：天津光复研究所；甲醇：色谱纯，德国默克公司；磷酸缓冲盐溶液：由氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、氯化钠、超纯水按一定比例配置，用盐酸将pH值调至7.0，涉及药品试剂均来自天津科密欧公司。1.3 能力验证及质控样品能力验证考核样品：由铝塑袋真空包装含未知浓度呕吐毒素的小麦粉样品2 份，计划编号ACASPT
现代食品 2023年10期2023-08-08
- 植物油中黄曲霉毒素B1均匀性和稳定性分析
，稀释液过免疫亲和柱，收集洗脱液经氮吹流动相定容，上机测定。均匀性试验：分别测定10组A、B、C（A、B、C为三个不同浓度的样品）的平行样中的AFB1。稳定性试验：在均匀性试验后，分3次间隔5～7 d后测定A、B、C各10个样中的AFB1含量。1.1 材料与试剂乙腈、水、吐温20、甲醇。1.2 仪器与设备高效液相色谱仪，日本岛津，型号LC-20AD，配有荧光检测器、分析天平、光化学衍生器、全自动固相萃取仪[5]、氮吹仪。1.3 前处理方法称取5 g试样于5
食品工业 2023年3期2023-03-29
- 免疫亲和柱净化-高效液相色谱技术检测食品中呕吐毒素的方法优化
；呕吐毒素免疫亲和柱：3 mL/支，美国Romer labs 公司；934-AH玻璃纤维滤纸，英国Whatman 公司。1.1.2 试剂甲醇、乙腈，色谱纯，默克；聚乙二醇，化学纯，国药；氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钾，分析纯，国药；超纯水，由Milli-Q 超纯水机制备；呕吐毒素标准物质溶液（197.2 mg·L-1）；溶剂（甲醇），色谱级，安谱。1.2 仪器与设备1260 高效液相色谱仪（配置DAD 检测器），美国Agilent 公司；Milli
食品安全导刊 2023年6期2023-03-19
- 快速净化柱在植物油黄曲霉毒素B1测定中的应用
提取方法为免疫亲和柱净化提取法。随着复合型快速净化柱的问世，净化柱法也逐渐得到重视和应用。本文采用免疫亲和柱-同位素稀释液相色谱串联质谱法以及快速净化柱-同位素稀释液相色谱串联质谱法对植物中黄曲霉毒素B1进行了检出限、加标回收率等实验比对，分析了两种方法特点和适用条件。1 材料与方法1.1 主要标准物质及试剂黄曲霉毒素B1内标，0.511 μg/mL,ANPLE公司)；黄曲霉毒素B1，100.2 μg/mL,阿尔塔公司；乙腈，色谱纯, Merck公司；甲醇
粮食与食品工业 2022年2期2022-04-21
- 优化的免疫亲和柱净化-高效液相色谱法检测 食品中的玉米赤霉烯酮
胶中制备的免疫亲和柱具有易于制备和储存、无需激活等优点[5]。已有研究表明[6]，上样、淋洗和洗脱条件都会影响免疫亲和柱的柱回收率，虽然国家标准规定了免疫亲和柱的通用净化方法[4]，但在具体应用中，为了实现痕量真菌毒素的准确检测，对商品化的免疫亲和柱的使用仍有进一步优化的必要。本文对玉米粉、玉米油、醋和黄酒中的玉米赤霉烯酮的提取和净化方法进行优化，通过色谱柱分离以及荧光检测器检测，建立了一种灵敏、准确的食品中玉米赤霉烯酮的检测方法。1 材料与方法1.1 材
食品安全导刊 2022年33期2022-03-23
- 不同前处理方法对粮油中黄曲霉毒素B1检测效果对比
化。目前，免疫亲和柱净化处理其具有基质干扰少、特异性强、灵敏度高等优点已得到广泛的应用[5-8]，并且大部分实验室对样品中黄曲霉毒素检测前处理时常采用手动净化处理。随着科技的进步，为了简化前处理过程，提高检测的自动化水平和检测效率，一些学者已研制全自动亲和纯化仪、免疫磁珠-全自动净化仪等前处理仪器应用于食品中真菌毒素的检测[9-11]。针对国内外文献还没有系统地对比研究这3种前处理方法测定粮油中黄曲霉毒素的净化效果，本研究通过优化色谱条件后，建立柱后光化学
中国粮油学报 2022年1期2022-02-20
- 粮食中呕吐毒素的检测能力验证结果分析
；呕吐毒素免疫亲和柱（ROMER DON StarTM)；磷酸盐缓冲溶液（以下简称PBS）：称取8.00 g氯化钠、1.20 g磷酸氢二钠、0.20 g磷酸二氢钾、0.20 g氯化钾，用900 mL水溶解，调pH=7.0，用水定容到1 000 mL；标准溶液标准品：呕吐毒素（1ST7213-100A-S070305，First Standand）。1.2 仪器与设备液相色谱仪配二极管阵列检查器（Agilent 1200，美国安捷伦）；C18色谱柱（4.6
现代食品 2021年24期2022-01-21
- 高效液相色谱法测定婴幼儿乳粉中乳铁蛋白含量
性好，肝素免疫亲和柱处理后目标峰明确，干扰峰少，且具有前处理简单、用时短等优点。婴幼儿配方乳粉成分复杂，有脂肪、碳水化合物、蛋白质含量高，其中乳铁蛋白含量低，各种杂蛋白干扰大，且单一仪器往往难以满足检测需求，多仪器联用是乳铁蛋白检测方法建立的研究方向。建立婴幼儿配方乳粉中乳铁蛋白含量测定相应的检测方法，并对不同主流品牌婴幼儿配方乳粉进行筛查，为婴幼儿配方乳粉中乳铁蛋白含量分析提供基础参考数据，为国家出台相关检测方法及添加限量要求提供技术支持。1 材料与方法
现代食品 2021年19期2021-11-24
- 免疫亲和净化－超高效液相色谱－串联质谱法测定食品中玉米赤霉烯酮类真菌毒素
简便，利用免疫亲和柱进行净化及液标法进行定量，能够同时测定6种玉米赤霉烯酮类真菌毒素。除了谷物以外，本检测方法还能应用于肉、蛋、乳等食品的检测。一、材料和仪器1.材料和试剂。（1）样品：在市场购买大米、麦片、牛肉、猪肉脯、鸡蛋、牛奶等当作样品，大米和麦片研磨成粉，牛肉和猪肉脯捣碎，鸡蛋和牛奶混匀。（2）试剂：乙腈，色谱纯;乙酸钠，分析纯;玉米赤霉酮标准品、α-玉米赤霉烯醇标准品、β-玉米赤霉醇标准品、α-玉米赤霉醇标准品、β-玉米赤霉烯醇标准品、玉米赤霉烯
中国食品 2021年21期2021-11-07
- 免疫亲和柱净化-HPLC光化学柱后衍生法测定玉米中黄曲霉毒素B1的含量
。本文采用免疫亲和柱净化-HPLC光化学柱后衍生法建立一种快速、准确检测玉米中AFB1的方法。1 材料与方法1.1 仪器与试剂高效液相色谱仪-荧光检测器，岛津LC-20A、RF-20A；光化学衍生器，北京华安麦科生物科技有限公司；水浴恒温振荡器，常州国华电器有限公司；BS1254电子天平，德国赛多利斯股份有限公司；Maxi Mix Ⅱ涡旋振荡器，赛默飞世尔科技有限公司；超纯水机，密理博中国有限公司；0.22 μm针式滤膜，天津津腾实验室设备有限公司；玻璃纤
现代食品 2021年15期2021-10-14
- 免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法测定水环境中微囊藻毒素
收率较低。免疫亲和柱(IAC)是利用抗原抗体特异性可逆结合特性的原理制作而成的SPE 柱，由于抗原抗体的高度选择性，使得免疫亲和柱具有良好的吸附净化性能和高度的特异性。本实验利用液相色谱串联质谱的灵敏性和准确性，结合免疫亲和柱的特异性和专一性，建立一套高效、快捷、灵敏度高的微囊藻毒素检测方法。1 材料与方法1.1 仪器和试剂ACQUITY 超高效液相色谱-质谱仪Quattro Premier XE(美国Waters 公司)；MS2 漩涡混合器(德国IKA公
浙江海洋大学学报(自然科学版) 2021年2期2021-08-05
- 高效液相色谱-柱后光化学衍生法测定变性淀粉中黄曲霉毒素含量的研究
，提取液经免疫亲和柱或多功能净化柱净化处理，用HPLC光化学衍生-荧光检测器检测样品中黄曲霉毒素G2、G1、B2和B1含量，快速可靠。1 材料与方法1.1 材料与试剂样品：市售羟丙基二淀粉磷酸酯。美国Beacon黄曲霉毒素总量免疫亲和柱(上海安谱实验科技股份有限公司)；MycoSep 226多功能净化柱(Romer国际贸易(北京)有限公司)；黄曲霉标准品(G1：1.00 μg/mL；G2：0.300 μg/mL；B1：1.00 μg/mL；B2：0.300
工业微生物 2021年3期2021-06-30
- 鸡饲料及原料中玉米赤霉烯酮污染的检测及分布研究
次研究使用免疫亲和柱、色谱纯、甲醇、乙腈等材料，亲和柱选用的是helix玉米赤霉烯酮免疫亲和柱，并选用10 mg的玉米赤霉烯酮进行实验。在分析提出方面采用广州市广联津化工有限公司的去离子水、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾等物品。试剂制作的步骤：明确试剂提取标准，试剂提取标准为乙腈与水的比例为9:1。制作磷酸盐缓冲液，制作标准为pH 7.4(50 mm PBS)，需要使用磷酸氢二钾7.27 g、磷酸二氢钾1.24 g、氯化钠8.76 g进行溶解，离子水的含量为1L。
畜禽业 2021年6期2021-06-23
- 花生油中黄曲霉毒素B1高效液相色谱 检测方法的探索与研究
霉毒素总量免疫亲和柱。甲醇-水（70+30）；磷酸盐缓冲溶液（PBS）：8.00 g氯化钠、1.20 g磷酸氢二钠、0.20 g磷酸二氢钾、0.20 g氯化钾，用900 mL水溶解，用盐酸调节pH至7.4，用水定容至1 000 mL；1% Triton X-100（或吐温-20）的PBS： 取10 mL Triton X-100， 用PBS定 容 至1 000 mL。所用试剂均为分析纯。黄曲霉毒素B1（AFTB1）标准溶液，标准值2.0 μg·mL-1，由
现代食品 2021年7期2021-06-16
- 粮食中黄曲霉毒素B1检测的免疫磁珠法样本前处理应用研究
方法主要为免疫亲和柱净化法、固相萃取柱净化法、液液萃取、Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe法(QuEChERS)[13-18]。这些提取方式不仅操作繁琐，效率不高，而且需要大量使用包括正己烷、乙酸乙酯、石油醚等在内的各种有机溶剂，此类有机溶剂易对环境产生二次污染，也会对操作人员的健康产生伤害。免疫磁珠为磁性微球和免疫配基结合而成的纳米级材料，表面通常带有氨基、羧基、羟基或巯基等化学官能团，该官能团与不同的免疫配基如
粮食与饲料工业 2021年2期2021-04-27
- 小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇测定方法比较与分析
萃取柱法和免疫亲和柱法对小麦粉样品进行前处理，采用高效液相色谱法测定小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量，并对这3种前处理方法进行了比较分析。1 实 验1.1 材料与试剂甲醇(色谱纯)，默克公司；磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钠、氯化钾、盐酸均为分析纯，国药集团化学试剂有限公司；聚乙二醇(相对分子质量8000)，Sigma-Aldrich；乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准溶液(100 μg/mL)，北京坛墨质检科技有限公司；Poly-Sery HLB Pro固相萃取
广州化工 2020年23期2020-12-16
- HPLC 检测植物油中黄曲霉毒素B1 含量的不确定度评价
C 技术（免疫亲和柱净化法）、SPE 技术（固相萃取净化法））、液相色谱-质谱法（IAC 技术，SPE 技术），检测方法品种多，适用范围不同，使得黄曲霉毒素检测选择繁琐，效率低下，同时一些检测方法的重复性差，引入的不确定度分量多，导致结果在置信区间的范围宽。针对现有技术缺点，本文做了采用ICA 技术的高效液相色谱法对植物油中的黄曲霉毒素B1 进行测定，并进行不确定度评价，分析各不确定度分量对测定结果的影响，从而在试验过程中控制各分量的输入，使测试结果更加可
广州化学 2020年5期2020-11-02
- 原子转移自由基聚合法合成分子印迹聚合物及其吸附性能的研究
层色谱法、免疫亲和柱-高效液相色谱法等[4 - 6]。样品前处理技术对于分析检测至关重要，而且在复杂样品中痕量赭曲霉毒素A的分析中要求更为严格[7]。近年来，分子印迹聚合物(Molecularly Imprinted Polymers，MIPs)以其精确、特异性的吸附能力、高重复性、低检出限、又不易受复杂样品基体干扰的特点，正被逐渐应用于痕量物质的前处理中，弥补了传统固相萃取和免疫分析的不足[8 - 10]。图1 赭曲霉毒素A(OTA)和氯霉素的结构式Fi
分析科学学报 2020年4期2020-09-17
- 全自动免疫亲和固相萃取超高效液相色谱法测定粮油中黄曲霉毒素
成本较高。免疫亲和柱具有有机溶剂消耗少、基质干扰少、特异性强、灵敏度高和适用于各种复杂基质的样品等特点[12,13]，因此免疫亲和层析净化高效液相色谱法是目前国际上普遍采用的黄曲霉毒素精确定量和确认的方法[14-16]。大部分实验室对样品中黄曲霉毒素检测前处理时采用手动净化。而手动净化由于过程繁琐、耗时长等因素制约，导致每天处理样本量少。当样品量较大时，存在时效性差、人为因素影响大等问题。S. Jinap等[17,18]建立了免疫亲和柱在线净化高效液相色谱
中国粮油学报 2020年7期2020-09-03
- 神经性贝类毒素免疫亲和柱的制备与应用
-13]。免疫亲和柱(immunoaffinity column，IAC)是一种基于抗原抗体反应的新型层析柱，可选择性吸附样品提取液中的目标化合物，在特异性富集毒素的同时净化样品基质，净化效果好。作为新型高效的前处理净化技术，免疫亲和柱净化技术正在不断改进发展，在生物毒素检测领域应用越来越广泛[14-16]。试验拟以PbTX-2为研究对象，研制NSP免疫亲和柱的装柱，并建立NSP的免疫亲和柱净化—液相色谱—串联质谱分析方法，以期经免疫亲和柱净化的样品提取液
食品与机械 2020年2期2020-04-13
- 免疫亲和柱在果蔬有机磷农药残留测定前处理中的应用研究
种多功能的免疫亲和柱（MycoSep 226 AflaZon+）可直接应用于水果、蔬菜有机磷农药残留检测中净化有机磷的乙腈提取液。免疫亲和柱是一种特殊的SPE 柱，以极性、非极性及离子交换等几类基团组成填充剂，可选择性吸附样液中的脂类、蛋白类等杂质，现主要被用于黄曲霉毒素含量测定的前处理净化过程中[8-9]。应用该柱对果蔬中有机磷农药残留提取液进行净化处理，可有效去除脂类、蛋白类等杂质，有机磷农药则可顺利通过。该方法净化速度快，省时省力，有望在今后农药残留
浙江林业科技 2019年4期2019-12-13
- 免疫亲和柱净化结合高效液相色谱法测定小麦粉中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇
谱测定法、免疫亲和柱结合高效液相色谱法、同位素稀释液相色谱-串联质谱法是检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇常用的方法[2]。本文使用免疫亲和柱结合高效液相色谱法检测小麦粉中的呕吐毒素，能很好地满足实验分析标准。1 仪器及试剂脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫亲和柱、紫外检测器或二极管阵列检测器（Agilent高效液相色谱仪）、超声波、涡旋振荡器、离心机、真空压力泵与玻璃注射器。2 标准储备溶液及标准工作溶液标准储备溶液（25 μg/mL）：移取1 mL标准储备溶液于10 mL容量
食品安全导刊 2019年18期2019-09-23
- 超速离心法与QIAGEN膜亲和柱法提取前列腺癌细胞培养上清外泌体的方法学比较*
、磁珠法以及膜亲和柱法等[7-8]，超速离心法是外泌体提取的金标准，但超速离心法耗时耗力，并且提取率低；沉淀法虽然简单，但会同时沉淀许多杂蛋白，并且商品化试剂成本高；磁珠法适用于提取血液等起始量要求较低的生物样本来源的外泌体，用途有限；膜亲和柱法适用于提取包括细胞上清、血液及尿液等多种生物体液来源的外泌体，且操作相对简便。基于此，本研究通过常规的外泌体鉴定方法，对比了超速离心法和QIAGEN膜亲和柱法提取外泌体的特点，为外泌体的基础和临床研究提供方法学参考
现代检验医学杂志 2019年3期2019-06-21
- 肝素亲和柱在乳铁蛋白检测中的应用优化
1 mL）肝素亲和柱作为目标化合物纯化和浓缩的前处理步骤[19-20]，由于是首次将该亲和柱应用到乳铁蛋白的检测中，故对应用条件进行了摸索和优化，包括：肝素亲和柱的承载量、淋洗液和洗脱液的浓度、pH值等参数的优化等，建立一种适合乳铁蛋白检测的前处理净化方法。1 材料与方法1.1 试剂与仪器乳铁蛋白标准物质（批号：SP113101）：Tatua公司提供；乙腈为（色谱纯）：美国默克公司；无水乙醇、氯化钠、磷酸、磷酸氢二钠、三氟乙酸（均为分析级）：国药集团化学试
食品研究与开发 2019年6期2019-03-19
- 胶体金免疫层析法快速定量检测饲料中黄曲霉毒素B1残留
；AFB1免疫亲和柱（Romer公司）；玻璃纤维滤纸（Whatman公司）；ROSA黄曲霉毒素B1胶体金快速定量检测条（Charm公司）。Waters 2695高效液相色谱仪（Waters公司）；孵育器、读数仪（Charm公司）。1.2 快速定量胶体金免疫层析法准确称取样品5.0g试样于50ml具塞锥形瓶中，加入20ml试样提取液，密闭，振荡10min，8000 r/min离心5min，取离心后上清液100µl于另一离心管中，加 入1.0 ml稀释缓冲液，
兽医导刊 2019年4期2019-02-12
- 邻苯二甲酸酯类污染物雌激素结合活性筛查
2竞争结合受体亲和柱（受体蛋白通过6×His标签与亲和柱（Ni-NTA-Sefinose Column）上的Ni通过配位结合得到受体亲和柱）上的雌激素受体（Estrogen receptor，ER），剩余未结合的游离态E2通过离心分离后，与荧光标记E2抗体结合。剩余游离荧光标记E2抗体与传感界面上固定的E2-BSA结合，在倏逝场激发下产生荧光，荧光强度与外源化合物的雌激素结合活性呈负相关，由此可以定性考察化合物的雌激素结合活性大小。1 材料与方法1.1 材
生物技术通报 2019年1期2019-01-23
- 高效液相色谱测定乳制品、谷物粉及饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物
ADON）免疫亲和柱（产品编号：HCM30508，柱容量≥1 000 ng） 北京华安麦科生物技术有限公司；Agilent 1260高效液相色谱仪（配备紫外检测器）美国Agilent公司；AB265-S分析天平 瑞士Mettler-Doledo公司；3k30高速离心机 德国Sigma公司；GM 200高速粉碎机（转速10 000 r/min） 德国Retsch公司；筛网（孔径1～2 mm） 安平县鸿凯金属丝网制品厂；TurboVapLV氮吹仪 瑞典Biot
乳业科学与技术 2019年1期2019-01-23
- 免疫亲和柱在真菌毒素检测中的应用
建立了复合免疫亲和柱－在线光化学衍生－高效液相色谱同时测定谷物及其制品中9种真菌毒素的检测方法，该方法重现性好、灵敏度高、结果准确。真菌毒素免疫亲和柱主要利用真菌毒素抗体作为配基来吸附真菌毒素，具有较好的靶标识别性和特异性，可以去除样品基质干扰，降低真菌毒素净化的损失，提高结果的准确性，适用于混合粮食和油料基质中低浓度真菌毒素的检测[2]。本文对免疫亲和柱在真菌毒素检测中的应用进行了相关的总结与分析，为免疫亲和柱的应用与发展提供一定的理论基础。2 真菌毒素
食品安全导刊 2019年21期2019-01-05
- 中药饮片中真菌毒素前处理方法进展
净化方式为免疫亲和柱净化法，但并未对其余中药材及真菌毒素进行限量规定。真菌毒素种类繁杂，且在不同种类和不同基质中药之间都存在着很大的差异，使检测难度增大。其前处理方法的好坏在很大程度上决定了检测结果的准确性，因此为了提高检测结果的准确性，研究不同的基质的中药和不同的毒素的前处理方法尤为重要。1 分类综述1.1 提取方法表1 各国对真菌毒素的限量标准一种好的提取方法不仅要求提取充分，而且要求提取的物质中含有尽量少的非目标组分，这将有利于之后毒素的分离和纯化。
世界中医药 2018年12期2018-12-25
- 复合免疫亲和柱-高效液相色谱法同时测定谷物及其制品中9种真菌毒素
-19]或免疫亲和柱串联[20]的方式对提取的样品溶液进行净化处理,但是前两种方法受样品基质效应影响较大,净化不够彻底,容易产生干扰;当需要测定的真菌毒素种类较多时,免疫亲和柱串联的方式也难以适用。近些年,复合免疫亲和柱成了研究的热点[21-23],然而受到抗体种类的影响,商品化复合免疫亲和柱的使用仍有一定的局限性。本实验有针对性地从商品化免疫亲和柱中获取所需填料,混匀并重新装填后制成真菌毒素复合免疫亲和柱,在此基础上,建立了在线光化学衍生-高效液相色谱同
色谱 2018年12期2018-12-06
- 小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的液相色谱检测与胶体金试纸法分析比较
信公司）、免疫亲和柱（美国Vicam公司）。色谱纯甲醇（中国国药）、色谱纯乙腈（中国国药）、聚乙二醇PEG8000（美国Vicam公司）、超纯水（美国Millipore公司）。呕吐毒素标准储备溶液（纯度大于99.5%）：200 μg/mL。呕吐毒素标准工作溶液：分别取0.1mL呕吐毒素标准溶液，氮气仪吹干后，用流动相（甲醇+乙腈+水=10+10+80）分别配制浓度为100、300、500、1 000、2 000、4 000 μg/L以及6 000 μg/L
现代食品 2018年19期2018-12-05
- 免疫亲和柱净化-高效液相色谱法检测两种饮料中双酚A含量
究首次采用免疫亲和柱净化-高效液相色谱法联用技术检测豆奶和橙汁饮料中双酚A含量,对检测饮料类复杂基质食品中双酚A含量具有参考作用。1 材料与方法1.1 材料与仪器双酚A免疫亲和柱 柱容量500 ng/支 美国VICAM公司;1.5 μm玻璃纤维滤纸 美国3M公司;0.22 μm有机相滤膜 上海安谱公司;乙腈 色谱纯，德国Merck公司;甲醇 色谱纯，德国Merck公司;氯化钠 分析纯，广州化学试剂厂;磷酸氢二钠 分析纯，广州化学试剂厂;磷酸二氢钾 分析纯，
食品工业科技 2018年20期2018-10-24
- 高效液相色谱-柱后衍生法检测大米中黄曲霉毒素B1方法分析
方法大多用免疫亲和柱来净化、分离，其净化效果优异。本文主要采用高效液相色谱-柱后衍生法检测大米样品中的黄曲霉毒素B1，用乙腈-水溶液的混合溶液提取，提取液经免疫亲和柱净化和富集，净化液浓缩、定容和过滤后经液相色谱分离，柱后（碘试剂衍生），经荧光检测器检测，外标法定量。1 试剂和材料甲醇（CH3OH），色谱纯；乙腈（CH3CN），色谱纯；氯化钠（NaCI）；磷酸氢二钠（Na2HPO4）；磷酸二氢钾（KH2PO4）；氯化钾（KCI）；盐酸（HCI）；Trito
现代食品 2018年15期2018-09-21
- 我国主导制修订的《玉米规格》等两项国际标准正式发布
量的测定一免疫亲和柱净化高效液相色谱法》（IS0 15141：2018）两项国际标准，经国际标准化组织（ISO）批准，于2018年7月正式出版。玉米是世界三大主粮之一，2017/18年全球贸易量达到1.45亿吨。《玉米规格》（IS0 19942）标准是粮食领域重要的产品标准，规定了国际贸易中玉米的最低质量要求。该标准在充分考虑进口国和出口国利益的基礎上，统一了玉米质量指标的术语定义和检测方法，并参照我国玉米标准设定了水分和杂质含量要求。赭曲霉毒素A （OT
中国食品 2018年16期2018-09-10
- 免疫亲和柱—超高效液相色谱法测定维生素饮料中维生素B12
色谱法结合免疫亲和柱对样品进行分析，免疫亲和柱对维生素B12具有较高的选择性，可以对样品维生素B12进行纯化和富集，再经超高效液相色谱法检测样品从而达到分析准确、快速、成本低、操作简单的目的。因此，将免疫亲和柱—超高效液相色谱法运用到成分复杂的饮料中低含量维生素B12的测定具有重大的意义。1 试验与材料1.1 仪器与试剂超高效液相色谱仪(美国Waters公司)；超声波清洗仪，美国Auto science公司；氮吹仪，中国安谱公司；固相萃取仪，美国CNW公司
中国食物与营养 2018年3期2018-04-04
- 免疫亲和柱净化-HPLC法测定植物油中黄曲霉毒素
0203)免疫亲和柱净化-HPLC法测定植物油中黄曲霉毒素赖宣丞，廖长儒，曾德斌(海南省疾病预防控制中心检验检测所理化科,海南 海口 570203)目的： 建立一种免疫亲和柱净化-高效液相色谱同时测定植物油中黄曲霉毒素B1,B2,G1，G2的方法。方法： 试样用甲醇水(55+45，体积比)提取，提取液经离心、过滤、稀释后，用免疫亲和柱净化，采用高效液相色谱-大体积流通池荧光检测器检测。结果： 在优化条件下，黄曲霉毒素B1,G1的检出限分别为0.067μg/
山东化工 2017年14期2017-09-16
- 不同净化柱处理对小麦粉中4 种镰刀菌毒素的净化效果
-PREP免疫亲和柱和实验室制备聚苯乙烯-二乙烯苯树脂免疫亲和柱在检测小麦粉中4 种镰刀菌毒素（玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素）过程中的前处理效果。选择MycoSep☒226多功能净化柱、DZT MS-PREP免疫亲和柱和实验室制备聚苯乙烯-二乙烯苯树脂免疫亲和柱，通过不同的提取和前处理方法，以及建立高效液相色谱-串联质谱检测法，对小麦粉中的4 种镰刀菌毒素进行测定。DZT MS-PREP免疫亲和柱处理小麦粉样品所得的回收率为8
食品科学 2017年14期2017-07-20
- 黄曲霉毒素免疫亲和柱性能评价方法及应用
黄曲霉毒素免疫亲和柱性能评价方法及应用徐文远1，倪新1，崔淑华2，朱万燕1（1.临沂出入境检验检疫局，山东临沂276034；2.山东出入境检验检疫局食品农产品检测中心，山东青岛266002）探索建立一种简便可靠的黄曲霉毒素免疫亲和柱性能评价方法并利用该方法对国内市场上5个主流品牌产品进行对比评价。依据评价结果进行产品采购使用，经3年多实用经验证明了方法的可靠性。该性能评价方法不仅能够从确保检测质量和降低检测成本两方面指导亲和柱的采购还能够协助倒逼生产商不断
食品研究与开发 2017年14期2017-07-18
- 针对粮油产品略析其真菌毒素的检测工作
速均质器、免疫亲和柱等，其中黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮免疫亲和柱都属于ToxinFast产品。AflaTest显色剂；玉米赤霉烯酮显色剂；甲醇；乙腈；苯；冰乙酸；Tween-20溶液；PBS缓冲液；3种真菌毒素检测质控样品全部为国家计量标准物质中心产品。黄曲霉毒素B1测定黄曲霉毒素B1提取与净化。随机选取50g研磨好的样品备用，在搅拌容器中加10gNaCl，然后按4：1的比例加入总量为100ml的甲醇/水，进行快速搅拌1min。然后把提取到
食品界 2017年3期2017-04-19
- 不同免疫亲和柱对饲料中黄曲霉毒素检测结果的影响研究
G2的测定免疫亲和柱净化——高效液相色谱法》（GB/T 30955—2014）的发布实施，更促进了免疫亲和柱在饲料霉菌毒素检测的广泛推广。国际、国内的生物技术公司也纷纷推出各自的免疫亲和层析柱，但不同品牌柱子的特异性、重现性和稳定性也良莠不齐，故笔者选取两家公司的黄曲霉毒素免疫亲和柱进行对比试验。1 仪器与材料1.1 仪器与设备Waters2695高效液相色谱仪（美国Waters公司）、荧光检测器（美国Agilent公司）、光化学衍生系统（美国Romer公
饲料工业 2017年14期2017-01-08
- 酱油中黄曲霉毒素B1含量的检测
该方法采用免疫亲和柱净化提取，利用荧光检测器（带柱后光化学衍生系统）检测，检测方法简单快捷、线性好，回收率高。酱油；黄曲霉毒素B1；免疫亲和柱；荧光检测器；光化学衍生试剂和溶液 除非另有规定，所用水为蒸馏水或去离子水；乙腈（色谱纯）；乙腈-水溶液（8+2）：取80ml乙腈加20ml水；氯化钠（分析纯）吐温-20（分析纯）；黄曲霉毒素B1标准溶液（3ug/ml）,保存于4℃备用；黄曲霉毒素B1系列标准工作液：准确移取适量的黄曲霉毒素B1标准溶液，用甲醇稀释成
食品安全导刊 2016年29期2016-11-18
- 以聚苯乙烯-二乙烯苯为载体的多目标免疫亲和柱的制备及应用
体的多目标免疫亲和柱的制备及应用张家宁，丁轲*，韩涛，陈湘宁（北京农学院食品科学与工程学院，食品质量与安全北京实验室，农产品有害微生物及农残安全检测与控制北京市重点实验室，北京 102206）选取3 种不同聚苯乙烯-二乙烯苯基材，通过硝基化、氨基化、活化、偶联抗体等步骤制备免疫亲和柱，用于4 种镰刀菌毒素（玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素）的同时纯化，并将3 种基材制备的免疫亲和柱进行比较。以Cleanert PS型聚苯乙烯-二乙
食品科学 2016年20期2016-11-07
- 谈食品中黄曲霉毒素B1的检测
液的处理、免疫亲和柱等方面做了归纳分析。【关键词】黄曲霉毒素B1的测定 注意事项 免疫亲和层析法高效液相色谱法黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1简写为AFB1)是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素)。黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种。黄曲霉毒素B1对包括人和若干动物具有强烈的毒性，其毒性作用主要是对肝脏的损害。B1是最危险的致癌物，经常在玉米，花生，棉花种子，一些干果中常能检测到。它们在紫外线照射下能
中国科技纵横 2016年1期2016-06-02
- 超滤浓缩-HPLC法测定乳中乳铁蛋白质量分数及功能性评价
先通过肝素免疫亲和柱净化、磷酸氢二钠-氯化钠溶液洗脱，然后采用超滤浓缩后直接测定。采用紫外检测器检测。本方法检出限为0.01 mg/100 g。该法具有样品处理简单方便，灵敏度高，重现性好，分析时间短等优点。该方法测定的为具有活性功能的乳铁蛋白含量，解决了乳铁蛋白质量分数较低的生乳及各类液态乳只采用肝素亲和柱净化后测定灵敏度不能满足测定要求的问题，对评价乳的营养价值提供准确数据。超滤浓缩；乳；乳铁蛋白；高效液相色谱0 引言乳铁蛋白（Lf）是乳中特有的功能性
中国乳品工业 2016年11期2016-02-20
- 免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法测定海洋生物中河豚毒素
回收率低。免疫亲和柱(IAC)是一种基于抗原抗体反应的新型层析柱，利用生物大分子具有对一类生物大分子特异识别和可逆结合的特性制作而成，具有独特的选择专一性和良好的吸附净化性能。目前，尚未见以免疫亲和柱作为前处理净化手段检测河豚毒素的相关报道，本实验基于液相色谱串联质谱的高灵敏性和精确性，利用免疫亲和柱的独特选择识别性，建立一种快速、简便、高效测定海洋生物中河豚毒素的分析方法。2 实验部分2.1 仪器与试剂ACQUITY 超高效液相色谱-质谱仪Quattro
分析化学 2015年2期2015-06-21
- 基于蛋白A-琼脂糖凝胶黄曲霉毒素B1免疫亲和柱的制备
霉毒素B1免疫亲和柱的制备龚 燕1，杨婷婷1，莫晓嵩2，张海涛1，黄 伟2，陆廷瑾1，张东升1,*，汪海峰3（1.江苏省苏微微生物研究有限公司，江苏 无锡 214063；2.江苏省粮食局粮油质量监测所，江苏 南京 210011；3.南京财经大学食品科学与工程学院，江苏 南京 210011）将初步纯化的抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体，定向偶联于蛋白A-琼脂糖凝胶，制备成免疫亲和层析柱。结果显示，辛酸-饱和硫酸铵纯化后的单抗质量浓度为17.5 mg/mL，纯度为4
食品科学 2015年10期2015-01-03
- 黄曲霉毒素免疫亲和柱重复利用的探讨
鱼 刘英慧免疫亲和柱是20世纪90年代在分析领域得到应用的一种新技术，它是将一定量的单克隆抗体偶联在合适的担体上，制成相应的免疫亲和柱。该柱具有高选择性吸附和抗干扰的特性，净化效果好，检测灵敏度高，是目前国际上较为常用的检测真菌毒素样品前处理方法之一[1]。《中国药典》2010年版一部[2]、《欧洲药典》7.0[3]、GB/T 18979-2003[4]中均采用该方法进行黄曲霉毒素的测定。随着《中国药典》中收载需检测黄曲霉毒素的中药材和制剂的品种的增加，以
中国现代药物应用 2014年1期2014-03-27
- 葡萄酒中赭曲霉毒素A检测方法优化
样品时再用免疫亲和柱净化后用高效液相色谱检测进行确证，方 法具有快捷、灵敏、准确等特点，回收率、精密度都能达到检测要求。赭曲霉毒素A；葡萄酒；高效液相色谱法；酶联免疫吸附测定法；方法优化赭曲霉毒素是曲霉菌属和青霉菌属的某些菌种产生的二级有毒代谢产物，包含7种结构类似的化合物，其中赭曲霉毒素A(ochratoxi n A，OTA)在自然界中分布最广泛，毒性最强，对人类和动植物影响最大。OTA是一种稳定的无色结晶化合物，具有耐热性，易溶于稀 的碳酸氢钠溶液和极
食品科学 2013年24期2013-10-27
- 免疫亲和柱的制备及在真菌毒素检测中应用的研究进展
理[5]。免疫亲和柱净化处理方法可选择性地将真菌毒素从提取液中分离出来，提高了荧光分析的灵敏性，降低检测限[2]。与其他提取方法比较，免疫亲和柱的前处理净化技术还有其他优势。主要表现：a.提取时避免使用有毒有机溶剂，减少对操作人员的损害；b.方便快捷，简化了前处理步骤；c.由于净化处理彻底，减少了基质中的杂质干扰，数据更加可靠。本文对免疫亲和柱的原理和制备方式进行了介绍，并且针对几种常见的真菌毒素，综述了免疫亲和柱净化技术在这几种真菌毒素检测分析上的应用。
食品工业科技 2013年24期2013-08-15
- 免疫亲和柱同时净化 HPLC 法测定植物油中黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮
［4］应用免疫亲和柱净化-光化学柱后衍生-高效液相色谱法结合荧光检测器测定了植物油中的黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，隋凯等［5］应用免疫亲和柱净化-高效液相色谱法荧光法测定了玉米中的玉米赤霉烯酮，李军等［6］应用免疫亲和柱同时净化-高效液相色谱法测定了谷物中的黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A 和玉米赤霉烯酮。免疫亲和柱作为样品前处理的方法能有效地将干扰物质去除。采用免疫亲和柱作为样品前处理手段，减少了有机溶剂的使用和目标分析物的损失，具有结合容量大、回收率高、
食品工业科技 2013年9期2013-08-07
- 免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定乳粉中游离叶酸含量
验拟以叶酸免疫亲和柱净化、己烷磺酸钠为离子对试剂，无需柱后衍生，建立了反相高效液相色谱法测定乳粉中叶酸含量的方法。其中将免疫亲和柱净化用液相色谱分析用于乳粉样品中叶酸测定是一个创新，目前文献中还未见有类似的报道。此方法可以满足乳品企业出厂检验与品控及质监部门监督的需要。1 材料与方法1.1 材料与仪器甲醇 色谱纯；pH7.4磷酸盐缓冲液 分别称取1.24g KH2PO4（分析纯）、7.27g K2HPO4（分析纯）和8.76g NaCl（分析纯）溶解于1L
食品工业科技 2013年6期2013-05-18
- 胶体金免疫层析法快速定量检测饲料中呕吐毒素
疫法[12]和亲和柱净化-高效液相色谱法[13]。但这些分析方法需要大型的仪器设备、操作过程复杂、时间长，无法在现场和基础中小型实验室使用。近年来胶体金免疫层析技术在真菌毒素快速检测中得到应用[14-15]，但主要以定性检测为主[15-17]，存在显色模糊，人为判断有误差，假阳性假阴性比例高等问题。本文建立并验证了胶体金免疫层析法快速定量检测饲料中呕吐毒素的分析方法。1 试验材料和方法1.1 试剂和材料除注明外,试剂均为分析纯,试验用水均为超纯水。iChe
饲料工业 2013年14期2013-02-20
- 苏丹红Ⅰ免疫亲和柱的研制与鉴定
)苏丹红Ⅰ免疫亲和柱的研制与鉴定朱立鑫1,2，裘雪梅1，陈兴龙1,2，刘仁荣1,*，徐 玲1，徐富勇1,2(1.江西科技师范学院生命科学学院，江西 南昌 330013；2.南昌大学生命科学与食品工程学院，江西 南昌 330047)以羧基化的琼脂糖凝胶4FF为载体，采用碳化二亚胺法偶联抗苏丹红Ⅰ(SudanⅠ)单克隆抗体，制备苏丹红Ⅰ免疫亲和柱(IAC)。将SudanⅠ样品过免疫亲和柱，乙腈洗脱后以高效液相色谱法(HPLC)检测，紫外检测波长为478nm，流
食品科学 2012年15期2012-10-27
- 花生及其制品中多种霉菌毒素残留同时测定方法*
分析法(有免疫亲和柱-荧光分光光度法和免疫亲和术-HPLC法、酶联免疫吸附法、微柱筛选法和一步式检测金标试纸法)等检测手段[6]，国家标准和行业标准中也有相关测定方法规定，但对多种霉菌毒素的同时测定尚没有相关的标准方法。国外报道Veronica Maria Teresa Lattanzio等[7]利用液相色谱-串联质谱法对玉米中多种霉菌毒素及其代谢产物同时检测，但提取净化手段繁琐或效果不佳，基质单一，不适合于开展日常的检测。笔者利用液相色谱-串联质谱技术对
化学分析计量 2012年6期2012-08-21
- 饲料中伏马毒素的检测方法
检测方法，免疫亲和柱-荧光仪检测法的原理为：将饲料样品与提取液混合、均匀、过滤，然后将滤液通过键合有伏马毒素特殊抗体的分离柱。用淋洗液通过分离柱，将伏马毒素从抗体上分离下来。最后，将淋洗液注入荧光计进行测定。检测范围为0～10 mg/kg，检测限为0.25 mg/kg，检测时间约为15 min，回收率大于80%，变异系数小于15%。免疫亲和柱-HPLC法的原理为：经甲醇-水(4∶1)提取，提取液通过FumoniTest免疫亲和柱净化，净化液经柱前衍生、Sp
化学分析计量 2011年4期2011-04-12
- 免疫亲和柱-高效液相色谱法检测乳制品中氯霉素
0044）免疫亲和柱-高效液相色谱法检测乳制品中氯霉素李应国1，3，赵旭博2，张雷3，李贤良3，郗存显3，王国民1，3，王雄4，果旗4，李正国1（1.重庆大学生物工程学院，重庆 400044；2.西北农林科技大学，陕西杨凌 712100；3.重庆市进出口食品安全工程技术研究中心，重庆 400020；4.北京中检维康技术有限公司，北京 100044）建立免疫亲和柱富集净化、高效液相色谱-紫外法快速测定牛奶和奶粉中氯霉素残留物。样品用乙酸乙酯提取，经免疫亲和色
中国乳品工业 2011年4期2011-01-08
- 免疫亲和柱——高效液相色谱法检测乳制品中玉米赤霉醇及其类似物
0044）免疫亲和柱 ——高效液相色谱法检测乳制品中玉米赤霉醇及其类似物张清杰1，谢洁1，果旗2，江帆2，王彦斐2，王雄2，聂长明1（1.南华大学 化学化工学院，湖南 衡阳 421001；2.北京中检维康技术有限公司，北京 100044）采用高效液相色谱法检测牛奶和奶粉中的6种玉米赤霉醇及其类似物，该方法准确、可靠、灵敏度高。样品用乙腈提取，经免疫亲和柱净化后，用高效液相色谱-紫外检测器检测。结果表明，牛奶和奶粉中添加6种玉米赤霉醇及其类似物回收率均为80
中国乳品工业 2011年12期2011-01-04
- 高效液相色谱法测定谷物及其制品中赭曲霉毒素A
毒素A,用免疫亲和柱净化高效液相色谱法进行了验证。关键词赭曲霉毒素A;高效液相色谱法;谷物及其制品;OchraTest免疫亲和柱中图分类号O657.7+2;TS207.7文献标识码A文章编号 1007-5739(2009)14-0322-01赭曲霉毒素A是曲霉属和青霉属一些菌种的有毒产物,动物毒性试验表明,赭曲霉毒素A具有免疫抑制毒性、神经毒性、致畸性及致癌性。1993年,国际癌症研究中心已将赭曲霉毒素A列为可能的人类致癌物。被赭曲霉毒素A污染的谷物及其制
现代农业科技 2009年14期2009-06-25