层析柱
- 静注人免疫球蛋白纯化用层析介质使用寿命的验证
纯化用材料（如层析柱填料）重复使用的可接受限度进行验证，即层析填料的寿命验证［3］。本研究在不改变工艺参数的条件下，对静注人免疫球蛋白制备工艺中使用的TMAE层析介质在缩小模型的使用寿命进行界定，通过对离子交换层析洗脱组分中的杂质蛋白分析确定杂质蛋白成分，并进行检测分析，以确保产品具有良好的质量。1 材料与方法1.1 静注人免疫球蛋白样品 由华兰生物工程股份有限公司制备。1.2 主要试剂及仪器Fractogel®EMD TMAE层析介质及层析柱购自德国默克
中国生物制品学杂志 2022年11期2022-11-27
- 洋紫荆粉色花的化学成分及其酪氨酸酶抑制活性研究
yl-650C层析柱，是一种甲基丙烯酸聚合物，具有很高的化学稳定性，可用于离子交换、疏水作用或亲和分离等替代色谱模式，650C型粒径为100 μm，适用于亲水性或者水溶性较大的酚酸类分离；Chromatorex C18层析柱为硅胶柱，吸附量小，适合分离螯合化合物和酸、碱性化合物，是正、反相分析及制备HPLC和MPLC的理想填料；MCI gel CHP 20P基体是聚苯乙烯和二乙烯基共聚物或聚甲基丙烯酸酯，可用于反相色谱分离，CHP树脂高分介质的化学稳定性好
林产化学与工业 2022年4期2022-09-13
- 层析介质Capto Core400 和Sephacryl S-1000纯化乙型肝炎病毒核心蛋白病毒样颗粒效果的比较
随着洗脱液流出层析柱。层析介质Sephacryl S-1000 是葡聚糖交联N，N-亚甲基二乙酰胺形成的一种纯化介质，所能分离蛋白质的截留相对分子质量为5×105～1×108，具有良好的机械性能。两种介质在生物制品纯化中均有较广阔的应用价值［4］。本研究采用两种层析介质纯化HBc VLPs蛋白粗提液，并对纯化效果进行比较，以期为HBc VLPs的纯化选择一种简便可靠的纯化工艺。1 材料与方法1.1载体及菌株 载体pET-43.1a（+）及感受态E.coli
中国生物制品学杂志 2022年7期2022-07-19
- 测定土壤中六氯环己烷和双对氯苯基三氯乙烷的方法研究
008）提到的层析柱净化法具有同样的净化效率，而且安全系数高，适用于大批量的测定。本文以福建省莆田市的部分农田土壤作为研究材料，采用快速溶剂萃取法提取有机氯农药，重点研究如何优化净化条件，提高净化效率，确定气相色谱法分析条件，研发一种安全便捷、操作简便、结果准确可靠、适合大批量测定的试验方法。1 供试材料取福建省莆田市境内的部分农田的表层土壤为测试样本，经研磨过筛后备用。（共12 个，样品编号为1001～1012）2 分析方法2.1 土壤样品快速溶剂萃取称
中国资源综合利用 2022年2期2022-03-21
- 高纯度纤溶酶-α2-纤溶酶抑制剂和凝血酶-抗凝血酶复合物的制备
pharose层析柱，以0.05 mol/L PB pH 7.5流速为1 mL/min，冲洗20 mL，以0.05 mol/L PB、0.5 mol/L NaCl pH 7.5洗去杂质，再以0.05 mol/L PB、0.01 mol/L EACA pH 7.5洗脱，收集洗脱与洗杂液。1.2.4 TAT的制备(1)T的制备。取按文献[12]已处理的血浆200 mL，缓慢滴加16 mL 1 mol/L BaCl2，搅拌20 min；静置30 min，8 50
生物学杂志 2022年1期2022-02-21
- 大孔树脂吸附桦褐孔菌多糖色素的机理及工艺优化
D-500装入层析柱，平衡。10 mg/mL桦褐孔菌多糖溶液上样，洗脱流速1.0 mL/min，每40 s收集一支试管，当洗脱液中有样品泄露停止。以蒸馏水为空白对照，在450 nm波长处测定吸光度，绘制泄露曲线。树脂吸附量=泄露点前上柱样品体积×样品浓度1.2.6.2 径高比优化 层析柱分别按径高比1:8、1:10、1:12装柱，平衡。10 mg/mL桦褐孔菌多糖溶液上样于3个层析柱，每个柱中1 mL，吸附1 h，蒸馏水以流速1.5 mL/min洗脱，收集
食品工业科技 2021年22期2021-11-14
- 栀子苷的提取及酶促水解生产京尼平的研究
孔吸附树脂加入层析柱，用无水乙醇对层析柱进行淋洗，直至流出的无水乙醇滴入清水中无白色浑浊；用3个柱体积的去离子水洗涤层析柱；将用去离子水稀释2倍的栀子苷浸取液以1 mL·min-1的流速进样，上样完成后使用2个柱体积的去离子水洗涤层析柱；先使用30%乙醇溶液进行洗脱，收集保存洗脱液，然后用50%乙醇溶液再次洗脱层析柱，保存洗脱液。1.4 酶促水解栀子苷粗提液参照Ouyang[12]等人的报道制备以壳聚糖为载体的β-葡萄糖苷酶(壳聚糖@β-葡萄糖苷酶)。将0
大连民族大学学报 2021年3期2021-10-18
- Ni离子螯合亲和层析法分离大叶海藻中的抗氧化多肽
化多肽后经亲和层析柱分离提取，从而保证抗氧化多肽的高纯度和优良的活性。1 材料与方法1.1 材料、试剂和仪器大叶海藻（正禾生物科技有限公司）；NaHCO3（济南明星化工有限公司）；丁醇（山东诺尔化工有限公司）；IDA（湖北远成赛创科技有限公司）；壳聚糖（南京松冠生物科技有限公司）；CH3COOK（广州三鑫化工有限公司）；span 60（江苏海安石油化工厂）；Na2S2O3（郑州欣茂化工产品有限公司）；CH3COOH（南京化学试剂股份有限公司）；NiSO4（
食品工业 2021年8期2021-08-25
- 菠菜色素的提取与分离实验教学优化探索
器有限公司），层析柱（20×1.0cm），研钵，蒸馏烧瓶，冷凝管，抽滤瓶，烧杯，量筒。试剂：中性氧化铝（150～160目）、乙醇（95%）、石油醚、丙酮、丁醇、甲醇、无水Na2SO4，以上均为分析纯试剂；新鲜菠菜。2.2 实验过程菠菜色素的提取分离过程如图5所示。图5 菠菜色素的提取分离2.3 实验操作规程2.3.1 菠菜色素的提取称取20 g新鲜干净无水的菠菜叶，剪碎后与20 mL的甲醇拌匀后在研钵中仔细研磨2～5 min，用布氏漏斗抽滤，弃去滤液后将糊
皮革与化工 2021年4期2021-08-17
- 桦褐孔菌多糖的分离纯化及其抗氧化活性测定
.2 大孔树脂层析柱脱色法 分别称取IOP 100 mg溶于100 mL的蒸馏水中，配成多糖溶液。将配好的多糖溶液分别加到预处理后的大孔树脂D101、S-8中进行吸附，收集洗脱液，于359 nm测定上清液的吸光度，根据式（3）计算脱色率，苯酚-硫酸法检测多糖，根据式（1）计算多糖保留率。1.2.4.3 聚酰胺吸附柱层析法脱色素 称取IOP 100 mg溶于100 mL的蒸馏水中，配成多糖溶液液。将配好的多糖溶液分别加到预处理后的聚酰胺吸附柱中进行层析，以蒸
食品工业科技 2021年11期2021-06-15
- 石油中不同环数芳烃化合物的精细分离和制备
提72 h)，层析柱(内径9～10 mm，长度12 cm)，若干小烧杯和注射器。2 实验流程2.1 样品去沥青质称取60 mg左右的原油样品放入小烧杯中，加入约10 mL的石油醚，使用超声波震荡仪震荡2 min之后，再用塞有脱脂棉的漏斗过滤掉沥青质，将去掉沥青质组分的原油样品在通风橱中让溶剂自然挥发，待分离。2.2 “一步法”分离步骤在层析柱底部填塞适量脱脂棉，先加入2 g层析硅胶，再加入2 g中性氧化铝，轻轻敲击层析柱使固定相填充均匀，立即加入适量的石油
石油实验地质 2021年3期2021-06-02
- 连续流层析及用于抗体分离的新进展
，通过顺序切换层析柱，实现连续上样分离，又称为周期性逆流层析(periodic counter-current chromatography，PCC)。图1(a)是典型的蛋白穿透曲线，为了避免损失，常规的批次层析通常采取较低的穿透点上样，此时介质的利用率较低(一般为50%~60%)，相当于图1(a)中仅A部分的介质容量被利用，造成了蛋白A层析介质的浪费。为提高介质利用率，可以将常规的单柱批次处理方式(图1(b))转变为多柱串联的连续上样模式(图1(c))：
高校化学工程学报 2021年1期2021-03-19
- 环境空气中多氯联苯单体净化方法的研究
浓硫酸、硅酸镁层析柱和复合硅胶柱净化方法，为环境空气中多氯联苯分析提供了四种可靠净化方法。1 实验部分1.1 硅酸镁固相萃取柱（SPE）净化取1g 硅酸镁固相萃取柱，依次用10ml 丙酮、10ml 正己烷冲洗柱床，待柱内充满正己烷后关闭流速控制阀浸润5min，打开控制阀，弃去流出液。在溶剂流干之前，关闭控制阀。将浓缩后的样品提取溶液加入到柱内，打开控制阀，接收流出液于浓缩瓶中。用约1ml 的正己烷洗涤装样品的浓缩瓶两次，将洗涤液转移至固相萃取柱。用10.0
科学技术创新 2021年4期2021-03-06
- 烟草多酚氧化酶的分离与纯化
箱；Z 型系列层析柱；BS-100A 型自动部分收集器；HL-2 恒流泵；2000ml 梯度混合器；HD-21-88 核酸蛋白检测仪；721 分光光度计；透析袋； 800 型离心机；PHS-2C型精密酸度计；XS-204 电子天平；磁力搅拌器；可调式电炉等。1.2 药品及材料新鲜烟叶； Tris；聚乙烯吡咯烷酮；乙二胺四乙酸二钠；抗坏血酸；半胱氨酸；磷酸二氢钠；氯化钠；硫酸铵；石英砂；十二烷基磺酸钠；N,N,N,N- 四甲基乙二胺；甲叉丙烯酰胺；丙烯酰胺；
商品与质量 2020年52期2020-12-18
- 微波萃取法处理海洋沉积物中的有机氯农药（666.DDT）
国药集团；玻璃层析柱：定制；氮吹仪；带水浴的旋转蒸发仪；K-D浓缩瓶；圆底烧瓶；微波萃取装置；.索氏提取装置。二、实验方法及气相设备条件（一）微波萃取法实验过程微波萃取中取沉积物样品5g，加入0.25g铜粉，加入15ml正己烷和丙酮混合溶液（1：1），微波条件为70℃萃取5min，90℃萃取5min，110℃萃取10min，萃取液通过玻璃层析柱过滤（过滤条件为10mm高的无水硫酸钠，5.0g佛罗里土，10mm高的无水硫酸钠），使用二氯甲烷-正己烷（30：7
魅力中国 2020年8期2020-12-07
- 羟乙基纤维素溶液冷冻传热性能的模拟分析
升高体系温度，层析柱内的冰晶融化前所占据的空间就形成超大孔隙[3]。本文将使用羟乙基纤维素作为晶胶介质，探索羟乙基纤维素溶液降温过程的温场变化及其规律。1 计算流体力学(CFD)计算流体力学通过各种计算流体力学相关软件对流体力学问题进行计算并处理。直观的使用图和表来描述计算结果，处理解决流体力学问题时主要将连续的多个物理量进行有规则的网格划分，划分后的网格形成有限的离散单元，再根据流体力学的基本方程列出有限体积的离散单元物理量的各个物理量方程组，最后通过迭
化工管理 2020年23期2020-11-06
- 苗药课币有水溶性黄酮的纯化*
1.5 cm的层析柱中，分别以流速：1 mL·min-1、2 mL·min-1、3 mL·min-1、4 mL·min-1加入水溶性黄酮溶液溶液各70 mL，收集流出液，照2.2.3项下的方法进行测定。绘制不同流速聚酰胺树脂的泄漏曲线，见图2。结果显示，在直径为1.5 cm的层析柱中，以1 mL·min-1的流速上样，聚酰胺树脂泄漏缓慢，即以流速/直径比为0.67时上样，动态吸附能力最优。图2 不同流速聚酰胺泄漏曲线Fig.2 Polyamide leak
贵州科学 2020年5期2020-09-02
- 植物乳杆菌素M1-UVs301 阳离子交换法分离纯化的研究
选择阳离子交换层析柱纯化植物乳杆菌素M1-UVS300，经离子交换层析柱和小肽柱两步纯化，探究其精确分子量和纯度，并对样品氨基酸成分及含量进行，为植物乳杆菌素M1-UVs301 的结构及功能特性研究提供数据支持及理论基础。1 材料和方法1.1 实验菌株植物乳杆菌M1-UVs300，为实验室前期诱导分离保藏菌种；指示菌：金黄色葡萄球菌、荧光假单胞杆菌，由黑龙江八一农垦大学食品微生物实验室提供。1.2 主要试剂仪器主要试剂：MRS 培养基，杭州百思生物技术有限
黑龙江八一农垦大学学报 2020年4期2020-09-01
- 通过两步离子交换层析建立保留HLA-A2二聚体构象的纯化方法*
通过蛋白A亲合层析柱浓缩纯化。将收集的300 mL 7A2D细胞培养上清用滤纸过滤去除沉淀；取3 mL蛋白A凝胶加入5 mL体积的层析柱中，并置于4℃层析柜中；用结合缓冲液(0.1 mol/L PBS，pH=7.0)以1 mL/min的速度，平衡蛋白A层析柱，平衡30 min；将过滤好的样品以1 mL/min的速度经过蛋白A层析柱，使样品中的HLA-A2二聚体与蛋白A充分结合；当样品过滤完后，用结合缓冲液再次过柱，以洗涤未结合于蛋白A上的其它杂蛋白，流速为
华中科技大学学报（医学版） 2020年3期2020-08-04
- 自动分离提纯系统的研制及其在同位素分析测试中的应用
进样器; C—层析柱; S—柱塞泵或蠕动泵; W—废液收集器; V—换向阀。图1 自动分离提纯系统工作原理示意图Fig.1 Schematic diagram of the developed automated separation and purification system目前已经商业推广或者在我国正在研制的产品，主要有两大目的：一种是完全模拟人工分离提纯操作，其原理是将批量、重复性动作交由机械臂完成，其难点完全归结成机械自动化，由于其分离是基于自
岩矿测试 2020年3期2020-06-29
- 中毒家兔体内盐酸哌替啶的分布研究*
Z1-WuYH层析柱优化生物样品中盐酸哌替啶的分离和提取，分析盐酸哌替啶在家兔体内的分布，旨在为盐酸哌替啶滥用引起中毒事件的检测提供一定的参考依据。1 材料与方法1.1材料 选择家兔6只，中位体质量2 kg。随机分为实验组(盐酸哌替啶)和干扰组(盐酸哌替啶+氢氯噻嗪)。实验组中3只家兔分别标号1、2、3号，同时，分别抽取0.8 mL盐酸哌替啶生理盐水溶液(4 mg/mL)，经耳缘静脉注射，观察家兔的呼吸与心跳等生命体征。干扰组中3只家兔分别标号4、5、6号
检验医学与临床 2020年7期2020-04-20
- 食品中除虫菊酯类农药残留量测定的气相色谱法
00mL。3.层析柱：长17cm，内径1cm 玻璃层析柱，按次序加少许玻璃棉或脱脂棉，2g无水硫酸钠，4g 氟罗里硅土、4g 无水硫酸钠，稍加振动使之充实。4.旋转蒸发器5.超声波提取器。6.离心机：3000r/min。7. 气相色谱仪：电子捕获检测器（ECD），毛细管柱，内径0.25mm，柱长2.5m，db-l 液膜厚度2-3μm。三、试样制备样品经混合均匀后，根据四分法，缩减至100g，粉碎使之完全通过0.45mm 筛孔，再充分混合，备用。四、步骤1.
经济技术协作信息 2020年13期2020-03-01
- 复杂基质中短链氯化石蜡前处理方法的建立和优化
表2.2 复合层析柱净化效果分别采用弗罗里硅土和硅胶层析柱分离纯化不同基质中的SCCPs。将5 μL SCCPs标准品(氯含量63.0%)和5 μL13C-反式氯丹作为回收率内标混合后,分别加入弗罗里硅土层析柱，硅胶层析柱以及复合弗罗里硅土-硅胶层析柱，考察不同层析柱对SCCPs主要干扰物质如PCBs、氯苯和有机氯农药等的去除效果。层析柱分离纯化SCCPs洗脱程序为:首先用50 mL正己烷淋洗层析柱，去除脂类化合物和PCBs、氯苯等有机氯农药；然后用100
分析科学学报 2019年6期2020-01-14
- RAFT发剂的制备及PCL-b-PEG嵌段共聚物的合成和自组装
E)的提纯1)层析柱的搭建。首先，取层析柱，用铁架台将其垂直固定，并关闭下部截止阀。其次，取一定量的硅胶粉(目数为200～300)于500 mL的烧杯中，并向烧杯中加入300 mL的正己烷，搅拌均匀，而后导入层析柱中(柱高约为层析柱的2/3)。最后，将层析柱静置12 h，备用。2)引发剂(BSTSE)过柱操作[5]。第一，配置一系列不同体积比的正己烷/乙酸乙酯混合液。第二、将BSTSE粗产物倒入层析柱中，打开层析柱下部截止阀，用小烧杯收集流出组分。第三、依
山东化工 2019年9期2019-05-31
- 小鼠多亚型热休克蛋白/肽疫苗联合PD-L1免疫检查点抑制剂的抗肿瘤实验研究*
研究所。蛋白质层析柱（离子层析柱、高分辨率分子层析柱、亲和免疫层析柱）和WB电泳以及转膜槽购自于美国博士德公司。HSP70、HSP90、HSP96、HSP110 Elisa试剂盒购自于CUSABIO公司，IFN-γ和TNF-α Elisa试剂盒购自中国联科公司。使用的实验仪器共聚焦显微镜，WB曝光影相机，蛋白层析仪来自于中国人民解放军总医院转化研究中心。1.2 方法1.2.1 免疫组织化学、Elisa实验测定肿瘤中各亚型热休克蛋白的表达 MCA207细胞复
中国肿瘤临床 2019年6期2019-05-11
- 糖化血红蛋白分析仪层析柱反向安装的应用价值
件，排除故障。层析柱和过滤器都是原厂生产的消耗性配件，检验成本较高，经济效益较差，给科室的成本核算带来一定的压力。为了解决上述问题，我们在工作实践中通过反方向安装层析柱的方法，对达到或接近使用寿命的层析柱再生使用，解决了一些实际问题。现分析反方向安装糖化血红蛋白分析仪层析柱的基本情况，探讨其应用价值。1 达到或接近预期寿命层析柱的故障现象当层析柱检测次数接近或大于8 000检测次数时，仪器通常出现压力高警报，表现为柱压力升高及色谱图的峰异常，更换过滤器后，
医疗装备 2019年7期2019-04-29
- 气相色谱-质谱联用法测定均匀剂中多环芳烃含量
公司产品；玻璃层析柱，上海楚定分析仪器有限公司产品；BSA224S型电子天平，德国赛多利斯公司产品；KQ3200B型超声波清洗器（可控温），昆山市超声仪器有限公司产品；IKA RV10-V型旋转蒸发仪，广州仪科实验室技术有限公司产品；SHZ-D（III）型循环水式真空泵，河南省予华仪器有限公司产品。2.1.3 样品制备2.1.3.1 样品粉碎用研钵将均匀剂颗粒粉碎。2.1.3.2 溶剂萃取称取1 g粉碎好的均匀剂（精确到0.000 1 g），放入适当容器中
橡胶科技 2018年11期2018-07-21
- 自动组成分析仪测定石油沥青四组分
作人员手动淋洗层析柱，对各组分进行分离、恒重和计算，由于该分析项目自动化程度低，试验用时较长，危险化学品的用量较大，人工操作的步骤繁琐，因此难以满足对石油沥青进行快速评价的科研生产需求。本实验采用自动组成分析仪对脱沥青质后的石油样品进行测定，通过优化条件、设定自动化控制程序，实现了对石油沥青四组分的快速测定。1 实验部分1.1 仪器自动组成分析仪：BN-118A型，包括吸附柱自动淋洗装置和溶剂自动回收装置，大连邦能公司生产；真空干燥箱：DZG-6090型；
分析仪器 2018年3期2018-06-07
- 淀粉糖浆中纯味控制技术研究
。1.2 仪器层析柱，上海沪西分析仪器厂；恒温水浴箱，天津比朗实验仪器有限公司；蠕动泵，保定兰格恒流泵有限公司；数显折光仪，配有20℃恒温水浴，ATAGO；抽滤装置，MILLIPORE；高效液相色谱仪，Waters 515水泵，2414示差折光检测器等；电子天平，上海越平科学仪器有限公司；超声波；酸度计，美国奥立龙公司；电导率仪，上海雷磁仪器厂。1.3 方法1.3.1 层析柱装填及大孔吸附树脂预处理向每组层析柱中装填60 mL大孔吸附树脂（DA201-C
食品工程 2018年1期2018-04-10
- 色谱技术在食品分析中的应用及发展
为了精确测量其层析柱种类较多，大致分为两类一类为毛线层析柱，一类为粗层析柱。在使用中对于层析柱的旦体上涂上极性或非极性的有机溶剂，其中固定液的选用是非常重要的，因为固定液的多少对于分析结果有着直接影响，比如使用同一种固定液由于使用的分量不同就会是同一种测定物呈现出两种不同的色谱。在使用毛细层析柱时要特别注意，毛细层析柱由于通过量较少，需要的仪器灵敏度较高。所以如果固定液使用不当，会造成层析柱报废。色谱分析技术的发展对于离子色谱分析技术而言其技术本身较为成熟
环球市场信息导报 2017年21期2018-01-23
- 色谱技术在食品分析中的应用及发展
为了精确测量其层析柱种类较多, 大致分为两类一类为毛线层析柱，一类为粗层析柱。在使用中对于层析柱的旦体上涂上极性或非极性的有机溶剂 , 其中固定液的选用是非常重要的，因为固定液的多少对于分析结果有着直接影响,比如使用同一种固定液由于使用的分量不同就会是同一种测定物呈现出两种不同的色谱。 在使用毛细层析柱时要特别注意，毛细层析柱由于通过量较少，需要的仪器灵敏度较高。所以如果固定液使用不当，会造成层析柱报废。色谱分析技术的发展对于离子色谱分析技术而言其技术本身
环球市场信息导报 2017年31期2017-12-25
- 聚合物吸附剂脱除淀粉糖色素的研究*
2 仪器与设备层析柱，上海沪西；恒温水浴箱，天津比朗；蠕动泵，保定兰格；紫外-可见分光光度计，Perkin-Elmer；密度仪，Anton Parr；数显折光仪，配有20℃恒温水浴，ATAGO；抽滤装置，MILLIPORE。1.3 方法1.3.1 聚合物吸附剂的预处理用10%的NaCl溶液浸泡聚合物吸附剂24 h，滤去浸泡液，用水洗涤漂净。1.3.2 层析柱的装填向每组层析柱中装填60 mL聚合物吸附剂，用水从层析柱底部缓慢灌满以排空柱内气体，再用65℃水
食品工程 2017年2期2017-10-23
- 气相色谱法测定铁皮石斛、浙贝母和人参中嘧菌酯残留
正己烷溶解，待层析柱净化。1.2.2净化层析柱从下往上依次是2 cm无水Na2SO4，1 g弗罗里硅土，5 g中性Al2O3混合物(铁皮石斛样品需再加入0.1 g活性炭)，2 cm无水Na2SO4，均匀敲实。首先用15 mL的二氯甲烷∶乙酸乙酯(9∶1，V/V)和15 mL二氯甲烷预淋洗，待液面接近上层无水Na2SO4底部时，立刻加入上述溶解液，再依次加入20 mL正己烷、30 mL二氯甲烷淋洗，均弃去以上淋出液，最后用80 mL二氯甲烷∶乙酸乙酯(9∶1
分析科学学报 2017年2期2017-10-15
- 副溶血弧菌耐热直接溶血素4种亚基制备条件的研究
液经过镍琼脂糖层析柱进行纯化，镍琼脂糖层析柱用5mL Ni-IDA填充。将适量的提取液加入到镍琼脂糖层析柱中，用200mL A液冲洗层析柱，然后用200mL B液冲洗层析柱，再用50mL D液冲洗层析柱，最后用200mL C液洗脱重组TDH亚基，并收集洗脱液。2.2.5 去标签重组TDH亚基所带标签为组氨酸标签（histidine-tag），histidine-tag 与 TDH 亚基之间通过肠激酶识别位点（DDDDK）相连，因此选用肠激酶（enterok
质量安全与检验检测 2017年3期2017-07-18
- 绿脓杆菌RNA降解蛋白PNPase与RNase E表达 纯化及相互作用
胶、GST亲和层析柱、DEAE 层析柱、分子筛 Superdex 75 购自 GE 公司。试剂 IPTG 等均为国产分析纯。1.3 引物设计 对PNPase与RNase E基因序列分析及应用Primer 5软件进行PCR引物设计，限制性内切酶分别为 BamH I、Hind III和 BamH I、Xho I。表1 PCR扩增所用的引物及其序列1.4 PCR扩增目的基因 用绿脓杆菌PAO1的基因组为模板，PCR扩增PNPase与RNase E，反应条件均为：
浙江临床医学 2017年12期2017-02-09
- 河蚬肉抗氧化肽的分离及活性研究
00 HR凝胶层析柱进行分离，得到抗氧化性最强的组分经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离，并对各组分的体外抗氧化活性进行测定。结果：经Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱分离得到5个活性组分A、B、C、D和E，其中组分C的抗氧化活性较强，其总抗氧化能力A700 nm、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为1.79、83.33%和26.35%。组分C经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离得到2个活性组分C1
食品工业科技 2016年4期2016-09-14
- 教师要做“懒”教师
质的是（ ）A层析柱高 B层析柱直径 C缓冲液 D样品分布 我选的是B选项，而有的学生选的是D选项。D选项为什么不对，我一时还没有想好怎么解释。于是我让选D的学生韩群利讲她的理由，韩群利站起来说：“我认为选D正确，根据凝胶色谱法分离蛋白质的原理，在其他条件适合的情况下，样品分布无论呈什么形状，由于大小分子蛋白质的流动速度和路径不同，所以对实验结果无影响；而层析柱直径越大，越有利于大分子运动，若直径过小，大分子下不来，堆积在上面，使小分子也被堵在了上面，就无
读写算·教研版 2016年11期2016-06-12
- 尖吻蝮蛇凝血酶分离纯化新工艺研究*
e plus；层析柱：GE Healthcare，型号：XK 50/30、XK 50/60；膜过滤分离系统：GE Healthcare，型号：QuixStandand Benchtop System；微滤柱：GE Healthcare，型号：CFP-4-E-4MA(420 cm2，0.45 μm)；超滤柱：GE Healthcare，型号：UFP-10-E-4MA(420 cm2，10 NMWC)；层析柜：上海青浦沪西仪器厂，CXG-1；便携式pH计：OH
中山大学学报(自然科学版)(中英文) 2016年6期2016-06-05
- 重组人胸腺肽α1在大肠杆菌中的表达纯化与鉴定
清液,上样CS层析柱,采用p H 8.0的含20 mmol/L NaCl的50 mmol/L Tris-HCl缓冲液和p H 8.0的含20 mmol/L NaCl和50 mmol/L咪唑的50 mmol/L Tris-HCl缓冲液,以线性梯度方式洗脱目的蛋白,按峰收集目的样.1.2.4rhTα1融合蛋白的酶解亲和层析捕获的rh Tα1融合蛋白,用截留分子质量为5 ku的超滤膜(0.1 m2)浓缩,通过超滤将溶液替换成p H 8.0的含1 mmol/L C
厦门大学学报（自然科学版） 2016年2期2016-04-11
- 一种高效纯化辅酶Q10的新工艺
安捷伦公司）；层析柱φ5 cm× 20cm（玻璃）；2.2 HPLC检验方法色谱柱∶SB-C18; φ4.6mm×150mm（Agilent公司生产）；检测波长275nm；柱温∶30℃；流动相∶甲醇∶乙醇=65∶35（V/V）；流速∶1mL/ min；进样∶2μL；停止时间∶18min；Q10的保留时间∶14min。分析方法∶在上述的色谱条件下,依次进Q10标准品、样品的接收液各2μL，平行进样两次，用外标法进行定量。2.3 辅酶Q10粗品的纯化2.3.1
信息记录材料 2016年1期2016-02-07
- 气相色谱法测定大豆中戊唑醇的残留
过多次萃取以及层析柱的净化，最后，采用应用气相色谱发，使用氮磷检测器进行检测。经回收率实验验证，该方法达到该农药残留检测的要求准确度和精密度。使得大豆这一动物饲料重要原料的使用安全更有保障。大豆；戊唑醇；气相色谱大豆是我国饲料生产的重要原料，富含大量的脂肪和蛋白质，是我国北方重要的经济作物之一。在大豆生长的各个阶段都会喷洒农药，其中戊唑醇是其中最常用的药品之一。在喷洒到田间之后，会快速的透过植物的叶子以及植物根被大豆植株吸收，并且会在很短的时间内，均匀的分
现代畜牧科技 2015年8期2015-02-23
- 响应面法优化大孔树脂纯化百合多糖研究
器有限公司）。层析柱（3cm ×30cm）；D101、D315、AB-8、717 阴离子交换树脂、ADS-7 树脂。（2）实验药品 百合，龙山县现代中药材开发有限公司提供（生产批号：1204003）；苯酚、盐酸、浓硫酸、95%乙醇、氢氧化钠，购自湖南长沙化学试剂有限公司；葡萄糖标准品，江苏药物研究所提供；蒸馏水；以上试剂均为分析纯。2.试验方法（1）百合粗多糖的制备 参照文献[11]所述，称取过20 目筛的百合颗粒料液比为1:20，提取温度为70℃，此条件
当代化工研究 2015年3期2015-02-20
- 超声萃取-气相色谱法测定黄瓜中残留的百菌清和毒死蜱
12].传统的层析柱填料主要有活性炭、氧化铝、石墨化炭黑、硅胶和硅藻土等，有研究指出：利用活性炭和石墨化炭黑来去除萃取液中的叶绿素效果比较明显，但是有机氯农药回收率较低[13-14].本实验提出了超声波萃取，正己烷-丙酮混合液提取、层析柱分离的气相色谱方法，能快速、准确地测定黄瓜中百菌清和毒死蜱的残留量.1 材料与方法1.1 仪 器气相色谱仪(Agilent，7890A)、旋转蒸发仪(Buchi，R-215)、超声振荡仪(上海科导超声仪器有限公司，SK32
浙江工业大学学报 2014年3期2014-08-25
- “绿色植物中色素的提取”实验仪器和技术的改进
为实验材料，用层析柱作为柱色谱分离的仪器，用干法装柱，用9：1石油醚-丙酮、7∶3石油醚-丙酮和3∶1∶1正丁醇-乙醇-水分别作洗脱剂。这种实验方法，不仅色素分离的步骤繁琐，而且所用的化学试剂总类多、用量大，存在着诸多弊端，因此很有必要对此实验进行适当改进。二、改进的内容（一）改进实验材料此实验用新鲜的菠菜叶作为实验材料，由于北方菠菜的种植易受季节的限制，经过大量的实验验证，可用韭菜、香菜、生菜、芹菜和空心菜等四季均可种植的蔬菜来代替菠菜。改进后，解决了此
中国校外教育(下旬) 2014年3期2014-07-19
- 连续中压PVPP柱层析纯化茶多酚及EGCG的研究
层析系统：玻璃层析柱根据文献[6]自制，柱长1 500 mm，内径200 mm，耐压20 MPa；2J-X16/15柱塞式计量溶剂泵：杭州之江科学仪器厂；层析仪：自制；SHB-IIIG循环水式多用真空泵：郑州长城科工贸有限公司；R201D旋转薄膜蒸发器：上海申胜公司；D99型台式高速微型离心机：宁波新芝科器研究所；LC-1500高效液相色谱仪：1580泵，UV- 1575紫外检测器，日本Jasco公司。1.2 实验方法1.2.1 提取液的制备茶多酚提取液根
化工科技 2014年3期2014-06-09
- 苯扎氯铵对单克隆抗体亲和层析填料的杀菌效果及其残留量的检测
抗亲和层析胶的层析柱（层析柱规格为10mm×100mm），首先用 25mmol／L， pH 7.0 的PBS缓冲液平衡3根层析柱5CV，然后分别用0.1%的甲醛和0.1%的苯扎氯铵平衡层析柱5CV，使单抗层析柱中充满该两种杀菌剂，并静置2h；以不加任何杀菌剂处理的单抗层析柱作为空白对照。待分别用25mmol／L，pH 7.0的PBS缓冲液冲洗层析柱10CV，清除层析柱中的甲醛和苯扎氯铵后，再往层析柱中加入10 mg蛋白样品；然后依次用 25mmol／L，p
生物技术进展 2014年2期2014-05-02
- 用于MALDI-TOF MS分析的毛细管层析柱制备方法研究
近年来，基于微层析柱的样品预处理方法研究日益增多[13-15]。毛细管层析柱内可装填离子交换层析介质，用于从蛋白酶解产物中快速富集磷酸化多肽[16]。将亲和配基直接固定到MALDI的靶盘上也可用于目标物快速富集[17]，基于亲和层析的样品处理技术可从样品中富集出目标物并用于MALDI-TOF MS分析，如采用金属螯合层析的毛细管柱可实现含磷酸化多肽的快速富集[18-19]等，但传统方法所能处理的样品量低，导致目标物浓度低而难以被检测出。本研究旨在探索一种毛
生物学杂志 2014年6期2014-03-26
- 密蒙花麦角甾苷锥形柱分离工艺优化
市场。5°砂芯层析柱(入口径30mm出口径10mm长度25cm)，15°砂芯层析柱(入口径45mm出口径15mm长度25cm)，45°砂芯层析柱(入口径65 mm 出口径10 mm 长度25 cm)，90°砂芯层析柱(内径25 mm长度25 cm)。1.3 实验方法1.3.1 密蒙花麦角甾苷样品制备将密蒙花在温度60℃的条件下用60%乙醇溶液回流提取，密蒙花与乙醇溶液体积比为1∶10，共提取3次，每次提取时间2 h，合并提取液，浓缩得到粗提浸膏。粗提浸膏过
武汉轻工大学学报 2013年1期2013-10-23
- 燕麦嗜酸菌鞭毛素的提纯及其活性检测
min流速平衡层析柱，然后以3mL/min的流速，通过上样泵上蛋白样品（阳离子层析柱上pH为 3.5的粗提物样品，阴离子层析柱上pH7.5的粗提物样品）。然后用 2倍柱体积的A液，以5mL/min的流速冲洗层析柱。最后以线性方式洗脱蛋白（盐梯度使用NaCl的浓度由0-1mol/L），洗脱10个柱体积，用UV 214nm 监测洗脱峰，收集出峰的组份。1.2.5 SDS-PAGE 检测和 Western blot 验证 取出峰组份，吸取20μL与等体积的2×S
生物技术通报 2013年7期2013-09-13
- 油脂高压水解副产物粗甘油的精制工艺研究
；恒温水浴槽；层析柱；马弗炉。1.3 试验方法在恒温水域槽中加入一定量的甜水，升温到60 摄氏度，加入一定量的盐酸。静置一段时间后，取出一定量加入到分液漏斗中去除上层的油脂。将下层液体放入烧瓶中，加入一定量的纯碱调节pH 值，然后再加入一定量的偏铝酸钠，待产生大量絮凝物后加入一定量的絮凝剂，持续搅拌几分钟后过滤。过滤后的甜水依次通过装有阳离子交换树脂、阴离子交换树脂和阴阳离子交换树脂的层析柱。检测经过层析柱后的甜水中的盐含量，采用测其灰分的办法来进行检测。
山东工业技术 2013年11期2013-08-16
- 卷烟主流烟气中拟除虫菊酯类农药含量的检测方法
司）、石英玻璃层析柱、M110马弗炉（德国Heraeus公司）、电热鼓风干燥箱（101C-3，上海市实验仪器厂有限公司）、Agilent 6890气相色谱仪-电子捕获（ECD）检测器（美国安捷仑公司）、100 mL带尾管的浓缩瓶（尾管的刻度分别为1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL）、250 mL三角具塞锥形瓶、量筒等。标准品：氟氯氰菊酯（纯度98%）、氯氰菊酯（异构体混合物）（纯度99%）、顺式氰戊菊酯（纯度98%）、溴氰菊酯（纯度99%）、
中国烟草学报 2013年1期2013-03-14
- 高效液相色谱法测定食品中亮蓝同分异构体
合物。用聚酰胺层析柱净化，高效液相色谱法分离。色谱柱为Inertsil ODS-SP C18 (150mm×4.6mm，5μm)，流动相为甲醇-0.02mol/L乙酸铵溶液，检测波长629nm。加标回收率为91.1%～94.7%。亮蓝同分异构体；高效液相色谱；食品食品色素是食品添加剂的重要组成部分，是食品工业不可缺少的原料之一。食品色素是以调节食品色泽为目的的重要食品添加剂，又称食用染料或着色剂，分为天然色素和合成色素两大类，其中，合成色素因色泽鲜艳、着色
食品科学 2012年8期2012-10-28
- 大孔吸附树脂对玉米蛋白水解液脱盐效果的研究
；大孔吸附树脂层析柱：Φ2.6cm×30cm，上海华美实验仪器厂；DA201－C 大孔吸附树脂：江苏苏青水处理工程集团有限公司；其它试剂：分析纯，市售。1.2 仪器与设备食品蒸煮挤压机：DS56－Ⅲ型，济南赛信膨化机械有限公司；振荡培养箱：BS－2E型，金坛市国旺实验仪器厂；超微量分光光度计：K5600 型，北京凯奥科技发展有限公司。1.3 试验方法1.3.1 玉米多肽的制备 将一定条件下挤压膨化出的玉米蛋白粉烘干、粉碎、过筛，按料液比1∶10（m∶V）加
食品与机械 2012年6期2012-03-20
- 高效液相色谱法同时测定糕点中4种食用合成色素
成色素，聚酰胺层析柱进行净化。色谱柱：Inertsil ODS－SP C18（150mm×4.6mm，5μm），流动相为乙腈－乙酸铵溶液 （0.02mol/L），梯度洗脱，检测波长254nm。加标回收率为91%～103%。结果准确可靠，方法易于推广。高效液相色谱；糕点；食用合成色素食品色素是以调节食品色泽为目的的食品添加剂，又称食用染料或着色剂，分为天然色素和合成色素两大类，其中，合成色素因色泽鲜艳、着色力强、稳定性好、价格低廉等特点而被广泛使用。最常用的
食品与机械 2011年4期2011-12-27
- 杨树菇培养料中农药消解动态分析
WH-851；层析柱等各种玻璃器皿。丙酮、正己烷、乙腈、氯化钠、活性碳均为分析纯；硅胶（农残级，使用前130 ℃活化2h，用5 %的蒸馏水降活使用）；中性氧化铝（农残级，550 ℃灼烧4h，后130 ℃下烘3 h，3%蒸馏水降活使用）；弗罗里硅土（农残级，130 ℃活化3 h，用2 %蒸馏水降活使用）；六六六（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、滴滴涕（o，p' -DDT、p，p' -DDT、p，p' -DDD、p，p' -DDE）、溴氰菊酯
中国蔬菜 2011年16期2011-05-21
- 采用甲醇提取-气相色谱法检测食用油中两种抗氧化剂的研究
中前处理需要装层析柱，需要大量的有机溶剂，费时长，检测成本高。笔者采用甲醇提取食用植物油中的抗氧化剂，仅用甲醇一种有机溶剂，用量少，快速简便，大大缩短了样品前处理时间，提高了检验效率，节约了实验成本。1 实验部分1.1 主要仪器、材料与试剂气相色谱仪：6890型，配带FID检测器、Cerity色谱工作站，美国安捷伦公司。蒸发器：容积200 mL；硅胶G:180～250 μm(60～80目)，于120℃活化4 h，置于干燥器中备用；弗罗里矽土(Florisi
化学分析计量 2011年5期2011-01-22
- 硅胶柱层析法分离提纯双基药中的硝化甘油
的索氏提取器,层析柱为5.0cm×84cm的玻璃柱。图1 提取与层析柱分离装置示意图Fig.1 Equipments of extraction and purificationAgilent 6890N-5975气质联用仪,美国 Agilent公司。色谱分析条件:使用DB-5型毛细管柱(30m×0.25mm× 0.25μm);柱温:初始温度 50℃ ,以 10℃ /min升温速率升至 150℃,然后以 3℃ /min升温速率升至 230℃后恒温;载气为氦
火炸药学报 2010年4期2010-09-18