索氏抽提仪测定粗脂肪的方法研究

◎ 金 凯，丁 萍，蔡燕斌

（1.江苏君信新华安全科技有限公司，江苏 张家港 215600；2.张家港检验认证有限公司，江苏 张家港 215600）

脂肪是食物的重要成分之一，包括动物脂肪和植物脂肪。植物脂肪广泛存在于许多植物的种子果实中，其中大豆使用最为广泛。准确测定大豆的粗脂肪含量为收购大豆以质论价、计算出油率、研究大豆油料营养价值以及对其进行合理利用等提供参考，是评价产品品质和组织生产的重要依据[1]，因此测定大豆中粗脂肪含量显得尤为重要。测定大豆中粗脂肪含量的方法很多，目前最常用的有经典索氏抽提法[2-5]和索氏抽提仪法[4-5]，近年来不少文献对大豆粗脂肪含量测定影响因素进行分析[6-8]，对两种测定方法也做过对比[4]。目前多数实验室使用索氏抽提仪测定粗脂肪，不同型号的仪器对样品的前处理方法没有明确的要求，对于仪器操作方法介绍的比较笼统，也未见有文献关于这方面的相关报道。笔者采用索氏抽提仪，通过对称样量、浸提溶剂、沸腾温度、沸腾时间、以及淋洗时间等条件的改进，最终筛选出了最优测定条件。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

索氏抽提仪（FOSS 8000型）；电热鼓风干燥箱（DGH-9070A）。

石油醚60～90 ℃、石油醚30～60 ℃（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）。

大豆样品由张家港检验认证有限公司实验室提供，使用前需要除去杂质和损伤粒，并使用刀式样品磨研磨均匀。

1.2 方法步骤

称取已磨碎充分混匀试样0.5 g（准确至0.000 1 g），全部转移到滤纸筒内；将滤纸筒放入索氏抽提器的抽提筒内，连接已干燥至恒重的接收瓶，由抽提器冷凝管上端加入60～90 ℃石油醚80 mL于接收瓶内；在沸腾温度125 ℃，沸腾时间20 min，淋洗时间45 min，回收时间10 min的条件下，使石油醚不断回流抽提，提取结束后，取下接收瓶，再于（100±5）℃干燥30 min，放干燥器内冷却45 min后称量，重复以上操作直至恒重。

2 结果与分析

2.1 浸提溶剂的选择

使用30～60 ℃石油醚浸提，沸腾温度为90 ℃，沸腾时间为1 h，淋洗时间为4 h，回收时间为10 min；使用60～90 ℃石油醚浸提，沸腾温度为125 ℃，沸腾时间为20 min，淋洗时间为45 min，回收时间为10 min。分别使用两种方法测定同一个大豆样品，平行测定6次。结果如表1所示。

由表1可知，两种测定粗脂肪方法中使用60～90 ℃石油醚，浸提时间短，相对标准偏差低，因此选用60～90 ℃石油醚作为浸提溶剂。

表1 两种浸提溶剂的测定大豆的粗脂肪表

2.2 称样量

大豆的油分比较高，称样量太小则没有代表性，太大浸提又不完全，分别称取0.400 0 g、0.500 0 g、0.600 0 g和0.700 0 g已磨碎充分混匀试样，按照实验方法测定大豆的粗脂肪，称样量与脂肪含量的关系见表2。由表2可知，称样量为0.500 0 g时结果最佳。

表2 称样量与脂肪含量的关系表

2.3 抽提条件

将样品全部转移到滤纸筒内，将滤纸筒放入抽提筒内，连接已干燥至恒重的接收瓶，加入80 mL石油醚，在合适的沸腾温度下沸腾、淋洗一段时间。影响测定结果的主要因素是沸腾温度、沸腾时间、淋洗时间，为了找到既准确又省时的检测条件，设计L9(34)的正交试验，因素水平和实验数据见表3和表4。最优条件测定结果与其他实验室结果比较情况见表5。东海粮油实验室采用国标GB 5009.6—2016第一法[9]测定，抽提时间为6～10 h。由表5可知，实验条件A2B3C3是最准确又省时的，即在125 ℃沸腾温度下，沸腾20 min，淋洗45 min。

表3 L9(34)因素水平表

表4 L9（34）试验计划、结果记录及分析计算表

表5 最优条件测定结果与其他实验室结果比较表

3 结论

本文建立了索氏抽提仪测定大豆中粗脂肪的方法，该方法准确度高、精密度好，极大的缩短了操作时间，可用于批量样品检测，提升了检测效率。该方法使用60～90 ℃石油醚浸提，该石油醚沸点高、不易挥发、毒性小，不仅减轻了对人体的危害，也减少了对环境的污染；实验沸腾温度高达125 ℃，能适应各种常规的实验检测条件，不同检测环境对结果带来的影响不大，检测重复性好。