不同溶出介质中利福昔明片体外溶出行为比较

陶伟博，冷柏榕，严相平

（江苏省药物研究所，江苏 南京 210009）

不同溶出介质中利福昔明片体外溶出行为比较

陶伟博，冷柏榕，严相平

（江苏省药物研究所，江苏 南京 210009）

目的考察利福昔明片自研制剂与原研制剂在不同溶出介质中体外溶出行为的相似性。方法以国外上市的利福昔明片作为参比制剂，采用桨法进行溶出试验。溶出介质分别为pH=1．2盐酸溶液[含1．0%十二烷基硫酸钠溶液(SDS）]、pH=4．5醋酸-醋酸钠缓冲液（含1．0%SDS）、pH=6．8磷酸盐缓冲液（含1．0%SDS）和水（含1．0%SDS），采用紫外分光光度法检测含量，以相似因子（f2）法对溶出曲线的相似性进行评价。结果在不同pH的溶出介质中，自研制剂与参比制剂比较，f2均大于50。结论自研制剂和参比制剂在不同溶出介质中的体外溶出行为相似。

利福昔明片；溶出曲线；相似因子

利福昔明是利福霉素类衍生物，为非氨基苷类半合成抗菌药，抗菌谱广，抗菌作用强，能在肠道内形成较高血药浓度，对革兰阳性、革兰阴性需氧菌均有高度的抗菌活性。利福昔明的不良反应远低于氨基苷类，它不损伤听觉功能，不引起肾脏功能不全，且可避免二重感染。2010年3月，美国食品和药物管理局（FDA）批准了 Salix制药有限公司的利福昔明（rifaximin)550 mg规格片剂（Xifaxan）的新药申请，用于减少18岁及以上终末期肝病患者的显性肝性脑病复发风险。利福昔明是近30年来在美国获准用于治疗此类患者的第1种药物[1-4]。本试验中以国外上市的原研制剂为参比制剂，考察江苏省药物研究所自研利福昔明片（规格为550 mg）在不同 pH的溶出介质中的溶出情况，并采用相似因子 f2法评价其内在质量。

1 仪器与试药

ZRS-8G型智能溶出仪（天津天大天发科技有限公司）；Sartorius BS21S型电子天平；岛津 UV-2450型紫外 -可见分光光度计。利福昔明片（参比制剂，Salix Pharmaceuticals公司，商品名为Xifaxan，批号为CBPK；自研制剂，江苏省药物研究所药物制剂与质量研究室，批号为20101011，规格为550 mg）；利福昔明对照品（浙江思贤制药有限公司，批号为100102）；水为实验室自制纯水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2．1 检测波长确定

取不同溶出介质配制的对照品溶液，按紫外-可见分光光度法在200～400 nm波长范围内扫描，均在235 nm波长处有最大吸收。图1为水[含1．0%十二烷基硫酸钠溶液(SDS)]配制的对照品溶液紫外扫描图。

2．2 溶液制备

精密称取经105℃干燥至恒重的利福昔明对照品适量，用相应溶出介质（含1．0%SDS）溶解并稀释制成10 μg／mL的溶液，摇匀，即得对照品溶液。取不同时间点溶出液5 mL（同时补充同温新鲜介质5 mL），经0．8 μm微孔滤膜滤过，作为供试品贮备液；再精密吸取贮备液1 mL，置50 mL容量瓶中，加相应溶出介质稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2．3 溶出度测定方法

参照2010年版《中国药典（二部）》附录ⅩC第二法[5]，即桨法，分别采用pH=1．2盐酸溶液（含1．0%SDS）、pH=4．5醋酸-醋酸钠缓冲液（含1．0%SDS）、pH=6．8磷酸盐缓冲液（含1．0% SDS）和水（含 1．0%SDS）为溶出介质，体积为 900 mL，转速为75 r／min，以紫外-可见分光光度法为溶出度的检测方法。

图1 水（含1．0%SDS）配制的对照品溶液紫外扫描图

2．4 方法学考察

空白辅料干扰试验：取处方量空白辅料适量，以不同溶出介质配制成相应浓度，在235 nm波长处测定吸光度。结果在4种溶出介质中，空白辅料在235 nm波长处吸光度值均为0，表明空白辅料对溶出度测定无影响。

线性关系考察：取利福昔明对照品10 mg，置100 mL容量瓶中，用不同溶出介质溶解，并稀释至刻度，精密吸取 2．5，3．0，3．5，4．0，4．5，5．0，5．5，6．0，6．5 mL，置50 mL容量瓶中，用相应的溶出介质稀释至刻度，在235 nm波长处分别测定吸光度。以测定质量浓度（C，μg／mL）为横坐标、吸光度（A）为纵坐标进行线性回归，回归方程见表1。结果表明，利福昔明在4种溶出介质中的线性关系均良好，质量浓度线性范围均在5～13 μg／mL之间。

表1 线性关系考察结果(n=9)

精密度试验：取不同溶出介质条件下溶出度测定的供试品溶液，测定235 nm波长处的吸光度，每份溶液平行测定6次。结果在4种溶出介质中吸光度的 RSD均小于1．0%（n=6），表明仪器精密度良好。

重复性试验：取同一溶出杯中的供试品溶液，在每个溶出介质条件下取6份，分别依法进样测定。结果在4种溶出介质中溶出度的 RSD均小于2．0%（n=6），表明方法重复性良好。

稳定性试验：取测定同一供试品溶液，分别于0，1，2，4，6，8 h时在235 nm波长处测定吸光度。结果在4种溶出介质中吸光度的RSD均小于2．0%（n=6），表明供试品溶液在8 h内稳定。

回收率试验：称取空白辅料约84 mg（共9份），置100 mL容量瓶中，分别加利福昔明约80，100，120 mg（相当于处方量80%，100%，120%），精密称定。用 pH=1．2盐酸溶液（含1．0%SDS）溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过。取上述溶液各1 mL，置100 mL容量瓶中，用溶出介质定容，在235 nm波长下测定吸光度，计算回收率。同法考察在其他3种溶出介质中的回收率。结果在4种溶出介质中的平均回收率均在98%～102%，RSD小于2．0%（n=9）。

2．5 参比制剂和自研制剂溶出曲线测定

2．5．1 不同溶出介质中的溶出曲线

按桨法，于5，10，20，30，45 min时分别取样，按拟订方法制备供试品溶液，另取对照品溶液依法测定吸光度。按外标法以吸光度值分别计算出每片利福昔明在不同时间点的溶出度，并计算累积溶出量。2种制剂中利福昔明在不同溶出介质中的溶出曲线见图2。

2．5．2 溶出曲线评价

采用FDA《口服固体制剂溶出度试验技术指导原则》推荐使用的相似因子（f2）法，选用5，10，30 min的时间点计算 f2因子，评价参比制剂与自研制剂的溶出度差异，计算公式为：

其中，Rt为 t时间参比制剂平均累积溶出量；Tt为 t时间自研制剂平均累积溶出量；n为取样点个数（n=3～5，且 Rt＞85%的点不超过1个）。若50≤f2＜100，则表示自研制剂与参比制剂溶出行为相似。结果，利福昔明片在pH=1．2盐酸溶液（含1．0% SDS）、pH=4．5醋酸-醋酸钠缓冲液（含1．0%SDS）、pH=6．8磷酸盐缓冲液（含 1．0%SDS）和水（含 1．0%SDS）中 f2分别为94．4，98．1，93．3，92．6（n=3），表明自研制剂和参比制剂的体外溶出行为具有相似性。

图2 2种制剂在不同溶出介质中的溶出曲线

3 讨论

转速选择：50 r／min的搅拌速度被看作与中老年人体胃肠道蠕动强度相当[6]，但15 min时，同批样品单个片剂的溶出具有较大的变化，变异较大，分析可能是转速较低杯底粉末堆积所致，故考虑提高转速为75 r／min。

溶剂选择：利福昔明在水中几乎不溶解，我国上市的0．1 g的样品以0．3%的SDS溶液作为溶出介质。由于本品规格为550 mg，0．3%的SDS溶液不能达到漏槽条件，故测定37℃时本品在不同浓度SDS溶液的饱和浓度。取利福昔明适量，置溶出杯中，分别加入不同浓度的 SDS溶液，37℃以溶出桨100 r／min的转速搅拌 24 h，以0．45 μm滤膜过滤，取续滤液稀释至合适浓度测定在235 nm波长处的吸光度，并与已知浓度对照品溶液的测定值进行计算。结果利福昔明在0．3%SDS溶液中溶解度为625 mg／L，在0．5%SDS溶液中溶解度为879 mg／L，在0．8%SDS溶液中溶解度为1 909 mg／L、在1．0%SDS溶液中溶解度为2 331 mg／L。可见，利福昔明的溶解度与SDS的浓度呈高度正相关。在1．0%的浓度下，方可达到漏槽条件，故选用1．0%的SDS溶液进行溶出度测定。

[1]刘洪艳．利福昔明的研究[J]．黑龙江医药，2013，26（3）：480-481．

[2]赵丽筠，王 炜，杨小丽．新药利福昔明临床研究[J]．海南医学，2005，16（5）：108-110．

[3]何 丽，李小池．利福昔明胶囊的稳定性考察[J]．中国药业，2004，13（8）：33-34．

[4]Steffen R，Sack DA，Riopel I，et al．Therapy of travelers′diarrhea with rifaximin on various continents[J]．The American Journal of Gastroenterology，2003，98（5）：1 073-1 078．

[5]国家药典委员会．中华人民共和国药典（二部）[M]．北京：中国医药科技出版社，2010：附录ⅩC．

[6]谢沐风．如何科学、客观地制订溶出度试验质量标准[J]．中国医药工业杂志，2012，43（3）：A23-A32．

Comparison of Rifaximin Tablets In-vitro Dissolution Behavior in Different Dissolution Media

Tao Weibo，Leng Borong，Yan Xiangping
（Jiangsu Provincial Institute of Materia Medica，Nanjing，Jiangsu，China 210009）

Objective To investigate the similarity of the dissolution behavior of self-made rifaximin preparation and original rifaximin preparation in different dissolution media．Methods The paddle method was used to perform the dissolution experiment with abroad listed Rifaximin Tablets as the reference preparation．The dissolution media were pH=1．2 hydrochloric acid solution（containing 1．0%SDS），pH=4．5 acetic acid-sodium acetate buffer solution（containing 1．0%SDS），pH=6．8 phosphate buffer solution（containing 1．0%SDS）and water（containing 1．0%SDS）．The UV spectrophotometry was used to determine the rifaximin content．The similarity factor（f2）method was adopted to evaluate the similarity of dissolution curves．Results In different dissolution media，f2of rifaximin from the self-prepared preparation and the reference preparation were all more than 50．Conclusion The dissolution behaviors in vitro of the self-prepared preparation and the reference preparation are similar in different dissolution media．

Rifaximin Ttablet；dissolution curve；similarity factor

R927．11；R978．1

A

1006－4931(2015)04－0021－02

陶伟博（1962-），男，江苏泰州人，药师，主要从事药物分析工作，（电子信箱）taoweibonj＠ sina．com；严相平（1974-），男，江苏东台人，副研究员，主要从事药物分析工作，本文通讯作者，（电子信箱）yanxpsci001＠sina．com。

2013－12－31；

2014－07－19)