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超速离心

  • 奶牛乳源外泌体提取方法的优化及效果评价
    体可通过差速超速离心法、化学沉淀法、蔗糖密度梯度离心法、超滤分离法、尺寸排阻色谱法、免疫亲和法、微流控法和其他商业试剂盒等提取方法得到。超滤分离法主要通过滤膜孔径不同来分离外泌体,该方法操作简单、耗时短,且保证外泌体生物活性,但易堵塞滤膜,与外泌体同等大小的蛋白质杂质与之混杂,且过膜压力会对外泌体造成机械性损伤,导致分离纯度低,因此仅适用于尿液、细胞培养液等的外泌体提取;尺寸排阻色谱法是通过固定相多孔凝胶孔径大小分离外泌体,方法简单高效,纯度高且色谱柱可重

    动物营养学报 2024年2期2024-03-05

  • 污水中新型冠状病毒富集方法研究进展
    离心和过滤或超速离心和再悬浮的组合,如超速离心法、超滤法、常规过滤法等。其中,PEG絮凝沉淀和超滤被世界卫生组织推荐用于脊髓灰质炎病毒循环的环境监测,膜吸附脱附被美国环保局作为检测水中隐孢子虫和贾第鞭毛虫的标准方法。2022年,国家卫健委将PEG絮凝沉淀、铝盐絮凝沉淀、离心超滤作为污水中新冠病毒富集的行业标准发布实施。本文将重点介绍几种当前最为常用的富集方法(表1)。1.1 膜吸附-洗脱法膜吸附-脱附法基本过程是将含有病毒的水体通过吸附性过滤器,利用过滤器

    净水技术 2023年12期2024-01-04

  • 银屑病皮损间充质干细胞来源外泌体对PBMCs分泌细胞因子的影响
    ima XE超速离心机来自美国Beckman公司,透射电镜来自日本电子株式会社。1.2 实验细胞DMSCs来源于太原市中心医院皮肤科门诊的寻常型银屑病患者及泌尿外科行包皮环切术后留存的正常包皮皮肤组织,PBMCs来源于太原市中心医院门诊诊断的寻常型银屑病患者外周血及健康志愿者外周血。该研究已通过太原市中心医院伦理委员会批准(批准号2022011)。所有健康志愿者均除外银屑病。所有研究对象已排除其他免疫疾病及炎症性疾病,取材前3个月内未使用糖皮质激素、生物制

    山西医科大学学报 2023年10期2023-11-24

  • PABPC1对人单核白血病细胞系THP-1翻译活性的影响
    溶液体积到达超速离心管刻度线上方2 mm左右,同样方法加入50%浓度的蔗糖溶液。待加完蔗糖溶液盖上超速离心管的的短帽,在自动梯度仪上选取参数为SW41,sucrose,20%～50%,点击“RUN”键进行梯度制备。运行结束后直接掀开短帽,枪头贴在液面下吸出多余的蔗糖梯度溶液,吸完后沿侧壁缓慢加入样品。待蔗糖梯度溶液中加入样品后,将超速离心管转移至SW1转子的转子架内,拧紧转子盖,在超速离心机38 000 r/min,3 h进行超速离心。离心结束后再按照Bi

    基础医学与临床 2023年5期2023-05-04

  • 外泌体分离提取技术的研究进展
    志物等特征，超速离心法、超滤法、亲合法等外泌体提取方法被应用在不同研究场景中。本文对目前主要的外泌体提取方法的基本原理、优势及缺陷、技术进展等进行归纳与总结，旨在为研究者提供参考借鉴。1 超速离心法Johnstone等[7]首次在网织红细胞培养基中提取外泌体时采用了超速离心法。经过不断改进，目前超过80%的研究者选择超速离心法提取外泌体[8]。超速离心法以不同的离心力或离心时间循环，逐步淘汰较大的颗粒，最终得到底部沉淀的外泌体，主要分为2个步骤，首先以中低

    湖北理工学院学报 2023年1期2023-04-16

  • 巴西完成铀浓缩厂一期工程建设
    行第10 个超速离心机级联落成仪式，标志着雷森迪铀浓缩厂一期工程完成建设。第10 个级联投运后，该浓缩厂将能满足安格拉1号机组70%的年浓缩服务需求。巴原工表示，铀浓缩厂使用的技术由巴西海军和巴西能源与核研究所（IPEN）联合研发，是一种完全国产化的技术。巴西目前拥有2台核电机组，即60.9万千瓦的安格拉1 号和127.5 万千瓦的安格拉2 号机组。巴西正在建设1 台压水堆机组，即134 万千瓦的安格拉3 号机组，该机组将于2026 年底前投运。雷森迪铀浓

    国外核新闻 2022年12期2023-01-23

  • 高效阴离子交换色谱-脉冲安培法检测冻干b 型流感嗜血杆菌结合疫苗的游离多糖含量
    nt 公司；超速离心机 OptimaTMMAX-XP（转头型号TLA-120.2）、超速离心管（型号 343778）均购自美国 Beckman 公司；214SPE3000 C4 固相萃取柱（5 ml）购自 VydacBioSelect 公司。50% 氢氧化钠溶液（HPLC 级）购自美国Thermo Fisher 公司；醋酸钠（NaAc，纯度 ≥ 99%）购自美国 Sigma 公司；甲醇（HPLC 级）、氯化钠均购自国药集团化学试剂有限公司；实验用水均为超纯

    中国医药生物技术 2022年6期2022-12-09

  • 切向流过滤结合超速离心分离小细胞外囊泡方法的建立
    方法主要包括超速离心法［7］、密度梯度分离［8］、尺寸排阻色谱柱［9］、聚乙二醇沉淀法［10］等。聚乙二醇沉淀法易获取、产量较高，但会同时沉淀出其他杂蛋白；密度梯度分离和尺寸排阻色谱柱分离纯度较高，但获取效率较低，耗时偏长；超速离心法最为常用，但处理体积受到仪器限制，难以进行大批量分离［11-12］。在过去几年中，切向流过滤逐步在脂质体、慢病毒等纳米颗粒分离中推广应用，与传统死端过滤不同，切向流过滤系统中的流体沿膜包表面切向流动，既不会堵塞过滤孔径，也可根

    中国生物制品学杂志 2022年9期2022-09-17

  • 两种巨噬细胞外泌体制备方法的对比研究
    取方法主要有超速离心法[5]、密度梯度离心法[6]、超滤法[7]等，但这些方法是否适合巨噬细胞外泌体的提取有待进一步研究，巨噬细胞外泌体提取的纯度及浓度决定了相关实验研究的深入性以及精确性。本研究主要以聚合物沉淀法和超速离心法提取的巨噬细胞外泌体进行对比，探索适用于巨噬细胞外泌体的制备方法，为后续外泌体的进一步研究提供方法和参考，提高相关实验的精确性。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 细胞株 鼠源巨噬细胞RAW264.7，购自武汉普诺赛生命科技有限公司

    新疆医科大学学报 2022年8期2022-09-16

  • 大鼠腹膜源肥大细胞外泌体的分离、培养与鉴定*
    上清液，采用超速离心法分离上清液中的外泌体，通过透射电镜，纳米流式细胞仪从外泌体形态、粒径和表面标志蛋白三个方面鉴定外泌体。分离得到的肥大细胞被甲苯胺蓝染成蓝紫色，分离的肥大细胞外泌体呈典型盘状，粒径分布范围为30～150 nm，平均粒径为75.33 nm，外泌体表面标志蛋白CD9和CD81呈阳性表达。Percoll密度梯度分离法联合超速离心法分离大鼠腹腔灌洗液中肥大细胞外泌体的方法是可行的。肥大细胞；外泌体；超速离心肥大细胞（mast cells， MC

    中国病理生理杂志 2022年6期2022-07-06

  • 差异超速离心法对不同种属间充质干细胞外泌体分离的可靠性研究
    通过同种差异超速离心的方法分离细胞培养上清中的外泌体，旨在探究差异超速离心法对BMSCs 来源外泌体分离的可靠性和稳定性，为进一步研究BMSCs 外泌体的生物学功能及其临床转化应用提供一种可靠的方法。1 材料和方法1.1 材料1.1.1 实验动物 4～6 周清洁级C57 小鼠20 只，体重14～16 g，4～6 周清洁级SD 大鼠20 只，体重180～200 g，由南方医科大学实验动物管理中心提供，动物使用许可证号SYXK(粤）2016-0167。1.1.

    中国临床解剖学杂志 2022年3期2022-06-06

  • 巨噬细胞来源外泌体的分离与鉴定
    n 公司)，超速离心机(美国Thermo 公司)，透射电镜(日本Hitachi 公司)，粒径分析仪(厦门NanoFCM公司)，多功能酶标仪(美国Thermo公司)，凝胶成像系统(上海CLINX 公司)，DMEM 培养基、青霉素-链霉素和胎牛血清FBS (美国Gbico 公司)，PBS缓冲液(美国Hycone 公司)，BCA 蛋白浓度测定试剂盒(上海Beyotime 公司)，兔单克隆抗体CD9、CD81、TSG101、Calnexin(英国Abcam公司)。

    海南医学 2022年7期2022-04-18

  • PSMA-CAR慢病毒颗粒包装浓缩及感染CIK细胞的研究*
    f，德国)；超速离心机(Beckman，美国)；超净工作台(苏州泰安空气技术有限责任公司，中国)。1.3 实验方法1.3.1 慢病毒包装 将HEK-293FT细胞以1～2×106个/孔的密度接种于10 mm培养皿中，培养液为10%FBS+DMEM高糖，37℃、5% CO2培养箱中培养过夜。病毒包装前用新鲜预热的DMEM高糖培养基换液，继续培养2 h。以空载体PCDH-CAR(空载体)作为阳性对照，PSMA-CAR慢病毒载体的用量为20 μg，慢病毒包装质粒

    肿瘤预防与治疗 2022年3期2022-03-29

  • 肝癌细胞来源外泌体对肿瘤相关M2型巨噬细胞极化的影响
    ，本研究通过超速离心的方法提取外泌体，研究来源于HCC细胞的外泌体对巨噬细胞极化的影响，探讨其在巨噬细胞极化过程中的作用。1 材料与方法1.1 细胞系 Hep G2细胞株、L02细胞株、人源单核细胞巨噬细胞(THP-1)购自上海中国科学院细胞培养中心。1.2 试剂和仪器1.2.1 主要试剂 DMEM、RPMI 1640(美国Gibco公司)；胎牛血清、胰蛋白酶(美国Hyclone公司)；TSG101、CD63(英国Abcam公司)；Arg-1、CD163(

    临床肝胆病杂志 2022年3期2022-03-28

  • 微生物检验技术在慢性胃炎幽门螺杆菌临床诊断中的价值研究
    、组织培养、超速离心等方式，对微生物进行检验的技术。作为医学检验的一项重要组成部分，微生物检验技术能够帮助临床对感染性疾病作出微生物学的诊断参考，并且经过系统的检验方案，对临床标本作出及时、准确的病原学诊断、抗菌药物敏感性报告[1]。目前临床已普遍认为，通过微生物实验室检验技术，能够加强临床医师对临床诊治的把握。本研究就此展开探讨，以微生物检验技术的临床价值为重点，纳入50 例慢性胃炎患者，分析该技术对临床治疗的影响。1 资料与方法1.1 一般资料选取20

    中国当代医药 2022年2期2022-02-12

  • 过滤对超速离心法提取外泌体的影响
    离纯化方法。超速离心法作为外泌体提取的“金标准”是最常用的提取和纯化手段[8]。有研究[9-10]报道在超速离心提取外泌体时，先用0.22 μm滤器过滤，认为这样可以去除标本中的大分子物质，容易获取外泌体。但过滤对外泌体的提取数量有何影响？是否提高了外泌体的纯度？相关报道较少。本实验通过纳米颗粒追踪分析(nanoparticle tracking analysis，NTA)方法和Amnis量化成像流式检测外泌体特异性抗体CD9、CD63的方法，检测过滤前后

    首都医科大学学报 2021年6期2021-12-20

  • 三种方法提取血清外泌体的比较研究
    分离方法包括超速离心法、密度梯度离心法、免疫吸附法、沉淀法及尺寸排阻色谱法等[6-8]。本研究拟选择超速离心法、沉淀法和尺寸排阻色谱法提取并鉴定血清外泌体，旨在验证采用不同方法提取血清外泌体的得率和纯度，为后续外泌体的研究和应用提供参考依据。1 材料和方法1.1 研究对象 随机选取2021年1月～3月赣南医学院第一附属医院健康体检者8 例，其中男性4 例、女性4 例，年龄20～40 岁，所有体检者体检结果均在参考区间内。使用普通真空采血管采集受试者静脉血1

    现代检验医学杂志 2021年6期2021-12-14

  • 血清脂蛋白亚组分和脂蛋白（a）分离技术的研究进展
    等[12]用超速离心结合IM法得到4种LDL亚组分，分别为LDL-Ⅰ、LDL-Ⅱ、LDL-Ⅲ和LDL-Ⅳ，其粒径分别为21.99～23.80、21.10～21.99、20.17～21.10和18.00～20.17 nm。KRAUSS等[13]采用IM法将LDL分为7种亚组分，LDL1的粒径为22.46～23.32 nm，LDL2a的粒径为22.20～22.45 nm，LDL2b的粒径为21.41～22.19 nm，LDL3a的粒径为20.82～21.40

    检验医学 2021年10期2021-12-07

  • 毛细管超速离心技术在体外预测大量胎母输血综合征的研究*
    在评估毛细管超速离心技术在ABO血型不一致的大量胎母输血的临床检测限及检出率，现报道如下。材料与方法1 标本来源 母体模拟血液标本：采集O型育龄期非妊娠期健康女性捐献者静脉全血2 mL，以EDTA-K2抗凝；胎儿模拟血液标本：A和B型新生儿脐带血，EDTA-K2抗凝。2 试剂及仪器 抗A、B单克隆抗体（批号：20201216）为上海血液生物医药有限公司提供，HbF-GITC单克隆抗体（552829），为BD Biosciences公司；湘仪L550型离心机

    临床输血与检验 2021年3期2021-06-25

  • 小鼠血清外泌体不同提取方法的比较
    1.2.1 超速离心法 采用超速离心法提取小鼠血清外泌体，具体步骤如图1所示。将6只60日龄昆明系小鼠摘眼球采集小鼠血液，收集血液于离心管中，待血液凝固后，放入离心机中，3 000 r/min，4℃离心5 min，上清液即为血清。将上清液转移到新的离心管中，300 g，4℃离心10 min；取上清液转移到新的离心管中，2 000 g，4℃离心10 min；取上清液转移到新的离心管中10 000 g，4℃离心70 min；取上清液转移到新的超离管中，100

    甘肃畜牧兽医 2021年3期2021-04-23

  • 血浆外泌体提取方法的比较
    提取方法包括超速离心法、膜亲和法、沉淀法、免疫磁珠法、超滤法、排阻色谱法等[4-5]。本研究拟选择超速离心法、膜亲和法、沉淀法提取并鉴定血浆外泌体，旨在了解及验证不同方法提取血浆外泌体的效率。1 材料和方法1.1 研究对象随机选取2018年12月—2019年2月复旦大学附属中山医院进行体检的表面健康者8名，其中男4名、女4名，年龄21～36岁，所有对象体检结果均在参考区间内。采集所有对象静脉血10 mL，乙二胺四乙酸二钾抗凝，1 000×g离心10 min

    检验医学 2020年12期2021-01-04

  • 尿液细胞外囊泡的单颗粒水平多参数定量表征
    ]通过对尿液超速离心后的沉淀物进行蛋白质组学分析，发现沉淀物中含有大量膜蛋白，为尿液中存在具有膜结构的EVs提供了实验证据。2004年，Pisitkun等[6]通过超速离心，首次提纯了uEVs，并且通过蛋白质组学发现uEVs携载的很多蛋白与人类疾病密切相关。近几年，uEVs携载的分子标志物已被用于多种泌尿系统疾病(如急性肾损伤、前列腺癌和膀胱癌等)的诊断与治疗监控[7～13]。尽管uEVs的生物学功能及临床应用价值不断地被发掘，但由于uEVs自身具有高度的

    分析化学 2020年10期2020-10-22

  • 淋巴瘤来源外泌体的提取方法比较与鉴定
    或通过小体系超速离心进一步纯化外泌体。1.3.3 exoEasy试剂盒提取外泌体 取细胞上清液，先用0.8 μm孔径的滤头过滤，去除细胞、细胞碎片、凋亡小体等；再用试剂盒中溶液与细胞上清液等量上下颠倒混匀、离心过柱，用洗脱液将外泌体从柱上洗脱下来备用。1.3.4 超速离心法提取外泌体 取细胞上清液，500 g离心5 min，去沉淀物；2 000 g离心10 min，去细胞和细胞碎片；然后依次经0.45、0.22 μm带有聚偏二氟乙烯膜滤膜的滤头过滤；再经超

    浙江医学 2020年13期2020-07-30

  • 鸡胚来源的外泌体不同提取方法比较
    样品前处理、超速离心、液体样本外泌体提取的商业化试剂盒分离鸡胚组织来源的外泌体，比较各方法所获外泌体含量与纯度，为后续深入解析鸡胚中活性物质及其作用机制提供依据。1 材料与方法1.1 试验材料从广东省农业科学院动物科学研究所家禽试验场收集处于产蛋高峰期的惠阳胡须鸡受精蛋30枚。于收集当天置于数字孵化器中孵化，孵化条件为37 ℃、相对湿度65%～75%，每小时自动翻蛋1次，孵化至13 d时，取出鸡胚蛋终止孵化，选择大小及重量相近的胚蛋12枚，分为3组，每组4

    广东农业科学 2020年5期2020-07-27

  • 肾小管上皮细胞来源包含miroRNA-21的微囊泡在心肌肥大中的作用
    培养液，分别超速离心，留取沉淀用透射电镜观察，发现条件培养液沉淀物中有呈簇状的双层膜结构的小囊泡，直径在50～200 nm，符合MVs的形态学特征，见图1。图1 肾小管上皮细胞产生的条件培养液超速离心获得的沉淀物的冷冻电镜照片a.无TGF-β1 处理的供体肾小管上皮细胞产生的条件培养液超速离心获得的沉淀物；b.5 ng/ml的TGF-β1处理的供体肾小管上皮细胞产生的条件培养液超速离心获得的沉淀物。标尺=100 nm2.2Dil-C18 染料标记的MVs可

    临床荟萃 2020年3期2020-04-01

  • 外泌体提取方法及其miRNA在非小细胞肺癌中的应用*
    集方法，包括超速离心法、蔗糖密度梯度离心法、沉淀法、试剂盒法、尺寸排阻法(SEC)、超滤法、基于表面成分亲和力分离法、交流电动力学(ACE)分离法及微流控芯片法。2 外泌体的提取纯化方法2.1基于密度的分离方法2.1.1超速离心法 超速离心法是最常用的外泌体提取方法[5]，首先，施加较低速度的离心力300 g以从细胞培养液中去除细胞；然后，对上清液施加较大的离心力(10 000～20 000 g)，去除大的细胞碎片和破碎的细胞器；最后，再次进行高速(100

    国际检验医学杂志 2020年15期2020-03-03

  • 基于超速离心技术的油液自动净化处理装置的研发
    的重视。1 超速离心技术及其在油液净化中的应用分析[2,3]超速离心技术是利用旋转的转子带动液体产生高速运动，通过离心力使不同密度的液体、杂质和油液分离。将超速离心技术应用到油液净化中，其基本的工作原理是：设置一个带有双喷式喷油嘴的转子，借助由油液产生的压力来提供其驱动力。设备开启后，油泵将油液输送到转子内，待油液充满转收稿日期：由编辑部登记子后，就沿转子下部喷油嘴喷出，既而产生驱动力使转子高速旋转，其转速可高达4000～6000rpm以上，所产生的力量为

    制造业自动化 2019年11期2019-12-05

  • 外泌体中的miRNA-744-5P调控骨肉瘤细胞转移的体外实验研究
    主要通过梯度超速离心法。1.2.3 转染实验 用于转染的miRNA-744-5P inhibitor序列5’-3’：UGCUGUUAGCCCUAGCCCCGCA该产品购自苏州泓迅生物科技公司，miR-744-5P inhibitor是miRNA抑制物，本实验中即反义RNA寡聚物anti-miRNA，是化学修饰的成熟miRNA互补单链，产品为冻干粉形成的即用型试剂，使用前瞬时离心，用RNase-free H2O或灭菌dd H2O配制成20μM储存液，分装保存

    医药前沿 2019年23期2019-09-05

  • 单采血小板来源外泌体的提取与鉴定
    1 实验材料超速离心机（美国Thermo Scientific公司）；离心水平转头（美国Thermo Scientific公司）；透射电镜（日本JEOL公司）；全能型化学发光成像系统（美国BIORAD公司）；血小板震荡仪（美国Forma Scientific公司）；0.22μm filter（美国Millipore公司）；BCA蛋白质定量试剂盒（Solarbio公司）；CD9单克隆抗体、β-actin内参、二抗、（Bioworld Technology公司

    标记免疫分析与临床 2019年2期2019-08-10

  • 超速离心法与QIAGEN膜亲和柱法提取前列腺癌细胞培养上清外泌体的方法学比较*
    的提取方法有超速离心法、蔗糖密度梯度离心法、PEG沉淀法、磁珠法以及膜亲和柱法等[7-8]，超速离心法是外泌体提取的金标准，但超速离心法耗时耗力，并且提取率低；沉淀法虽然简单，但会同时沉淀许多杂蛋白，并且商品化试剂成本高；磁珠法适用于提取血液等起始量要求较低的生物样本来源的外泌体，用途有限；膜亲和柱法适用于提取包括细胞上清、血液及尿液等多种生物体液来源的外泌体，且操作相对简便。基于此，本研究通过常规的外泌体鉴定方法，对比了超速离心法和QIAGEN膜亲和柱法

    现代检验医学杂志 2019年3期2019-06-21

  • 新剂型药物血浆中游离药物浓度研究方法概述
    度测定方法（超速离心法、超滤法、平衡透析法和快速平衡透析法）及其优缺点和适用范围做一个概要介绍，为新剂型药物的研发提供帮助。关键词 游离药物浓度 超速离心 超滤 平衡透析中图分类号：R969.1 文献标志码：A 文章编号：1006-1533（2019）07-0074-04Summary of research methods for free concentration of new dosage forms drug in plasmaMA Zhiyu*

    上海医药 2019年7期2019-05-06

  • 不同离心方法提取及鉴定精浆外泌体的效果比较
    取方法多样，超速离心法、ExoPerfectTM⁃MU法与PEG6000法比较提取外泌体在细胞上清［12］和其他的体液中都有成功的报道［13］，而3种方法比较提取精浆外泌体的应用报道较少。本研究比较及鉴定超速离心法、Exo⁃PerfectTM⁃MU法及PEG6000法提取的精浆外泌体，为外泌体的研究提供不同的选择方法。1 资料与方法1.1 研究对象收集2017年3月至7月南方医科大学南方医院检验中心30例正常志愿者的精浆样本。纳入标准：均符合WHO第5版诊

    医学研究生学报 2019年2期2019-03-22

  • 三种方法浓缩慢病毒后绿色荧光蛋白转染效率的比较
    较超滤管法、超速离心法及病毒浓缩液法这三种方法浓缩慢病毒后的GFP转染效率。1 材料与方法1.1 材料 293T细胞；DMEM基础培养液；0.25%胰酶(0.25%胰蛋白酶/1 mmol/L EDTA)；胎牛血清(FBS)(康源生物科技有限公司)；psPAX2菌种;pMD2.G菌种；GFP慢病毒载体菌种；LB液体培养液，质粒提取专用试剂盒；EntransterTM-H4000试剂盒。1.2 方法1.2.1 pMD2.G、psPAX2及GFP慢病毒载体质粒的

    武警医学 2019年1期2019-02-21

  • 外泌体的提取、鉴定和保存方法研究进展
    方法1.1 超速离心法(差速离心法) 超速离心法是目前制备外泌体的经典方法，是根据外泌体的沉降系数差速离心将其分离出来。该方法是在4℃条件下依次以300 g，2000 g，10 000 g离心以去除细胞与细胞碎片，再以100 000 g超速离心达到分离、富集外泌体的目的。磷酸缓冲液(PBS)清洗可部分去除残存蛋白质。超速离心法具有操作简单、不被分离试剂污染、获得的外泌体数量较多的优点，因此最常用，也被认为是外泌体提取纯化的金标准。但是超速离心法，需要昂贵的

    现代检验医学杂志 2018年5期2018-11-06

  • 外泌体分离方法研究进展
    法。3.1 超速离心法 超速离心法分离外泌体是目前最普遍的一种方法。据估计，采用超速离心法的研究者占所有外泌体分离方法的56%［21］。超速离心法的步骤［22］如图2所示。最后用PBS洗涤，获得外泌体。该法不需要对外泌体进行标记或者使用其他分离试剂，不易被污染，适用于大剂量样品分离。但是在分离过程中，由于超高速离心，外泌体的结构、功能很容易遭到破坏，并且易聚集成块，下游分析不利。此外，该法较为耗时且需要专门的技术人员。图2 超速离心法分离外泌体步骤示意图3

    转化医学电子杂志 2018年4期2018-05-24

  • 高中物理中对惯性参考系和加速参考系的一些探讨
    加速参考系；超速离心机一个参考系，如果在其中对一个据信没有受到任何作用力和约束的粒子没有观察到加速度，那么它就被认为是一个惯性参考系。凡是相对惯性参考系做加速运动的参考系都是非惯性参考系，也叫做加速参考系。牛顿第一、第二定律只有在惯性参考系中作观察时才是成立的。这一点，从日常经验来看是显然的。如果观察者的参考系是静止在一个旋转木马上。那么，即使没有外力的作用，观察者在这个参考系中的加速度也不会是零。观察者只有顶住旋转木马的某个部分，按照牛顿第三定律该部分产

    考试周刊 2018年36期2018-04-19

  • 非小细胞肺癌患者血清外泌体的分离与鉴定
    研究的前提。超速离心分离外泌体的方法是当前外泌体分离的金标准。本研究利用超速离心的方法分离并鉴定非小细胞肺癌患者血清中的外泌体，同时也为研究非小细胞肺癌的发生、发展以及早期筛查提供新的切入点。1　材料与方法1.1材料BCA蛋白浓度测定试剂盒(博士德生物工程有限公司)；RIPA裂解液(碧云天生物技术研究所)；兔抗CD9、CD63单克隆抗体、辣根过氧化物酶标记抗兔二抗(武汉爱博泰克生物科技有限公司)；ECL化学发光液(上海七海复泰生物科技有限公司)；高速离心机

    中国实验诊断学 2016年9期2016-11-01

  • 高密度脂蛋白胆固醇的检测方法及临床应用
    估。方法依据超速离心法、电泳法、化学沉淀法和均相测定法操作标准进行HDL-C含量测定，以NECP标准比较四种检测方法的精确度和变异系数。结果超速离心法耗时耗力，精密度较低；电泳法样品用量少，不适用于大规模样本检测；沉淀法方便快捷且精密度最高，适用于临床研究；均相法可完全自动化检测大规模样本。结论四种方法精密度均在NECP允许误差范围内。临床检验中，需根据样本数量、专业水平和仪器试剂等多方面因素选择最适宜的HDL-C检测方法。HDL-C；检测方法；临床应用流

    中国医药指南 2016年33期2016-01-28

  • 延边黄牛血液Exosome的提取和鉴定
    后取上清置于超速离心管中，放入超速离心机中，50 000 r/m离心1 h。离心后，弃上清，用0.01 mol/L PBS将沉淀吹下，吸入EP管中，使用移液器反复吹打，使其溶解。再次将溶液于超速离心管中，放入超速离心机中，50 000 r/min离心1 h。离心后弃上清，吸入小离中，加入0.01 mol/L PBS溶液，使用移液器将沉淀反复吹打，使其完全混匀即为Exosomes溶液。于4℃下短期保存，-20℃下长期保存。1.2.2 Exosome 的形态观

    安徽农业科学 2015年6期2015-12-24

  • 心肌细胞的培养鉴定及β3-AR蛋白提取方法的比较
    用总蛋白法、超速离心法、试剂盒法提取心肌细胞β3-AR膜蛋白；BCA法进行蛋白定量；Western blot法检测蛋白样品中β3-AR和GAPDH相对含量及提取蛋白的特异性。结果 优化心肌细胞的培养方法可以使所得细胞产量大、浓度高，满足后续实验。试剂盒法提取蛋白的浓度（8.26±0.29）g/L＞总蛋白法提取法的（5.12±0.47）g/L＞超速离心法的（3.20±0.37）g/L，差异均有统计学意义。Western blot检测结果示，试剂盒提取法所得β

    天津医药 2015年6期2015-08-24

  • 高效液相色谱法同时测定阿霉素/姜黄素载双药纳米粒的药物含量及包封率
    性等，并结合超速离心法测定DOX/CUR-NPs的包封率。结果 成功制备了DOX/CUR-NPs；在建立的色谱条件下，DOX和CUR专属性好，精密度、回收率、重复性等试验均符合方法学要求。两药在0.5～50.0μg/ml浓度范围内线性关系良好（r=0.9999），纳米粒中DOX与CUR的包封率分别为（58.9±1.11）%和（75.4±1.76）%。结论 HPLC法准确可靠、简单快速，可用于DOX/CUR-NPs的药物含量及包封率的同时测定。阿霉素 姜黄素

    浙江医学 2015年10期2015-01-19

  • 优化的密度梯度离心法提取质粒DNA
    1 仪器日立超速离心机，型号CP100WX，转头型号SRP83VT.1.2 方法1) 配制试剂：溶液I(50 mmol/L葡萄糖，25 mmol/L pH 8.0 Tris-Cl，10 mmol/L pH 8.0 EDTA)，溶液Ⅱ(0.2 mol/L NaOH, 1 g/L SDS)，溶液Ⅲ(294 g/L 醋酸钾, 115 mL/L冰醋酸)，EB溶液(10 mg/mL)，10 × SSC(1.5 mol/L NaCl, 0.15 mol/L柠檬酸钠).

    衡水学院学报 2014年4期2014-11-23

  • 不同等电点沉淀法和超速离心法提取牛奶乳清蛋白的双向电泳分析
    电点沉淀法和超速离心法提取牛奶乳清蛋白的双向电泳分析陈静廷1,2，卜登攀1,3,4,*，马 露1，杨永新1，李发弟2（1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，动物营养学国家重点实验室，北京 100193；2.甘肃农业大学动物科学技术学院，甘肃 兰州 730070；3.中国农业科学院-世界农用林业中心，农用林业与可持续畜牧业联合实验室，北京 100193；4.东北农业大学 食品安全与营养协同创新中心，黑龙江 哈尔滨 150030）为探索牛奶乳清蛋白提取的最适方

    食品科学 2014年20期2014-01-18

  • 不同逆转录载体系统应用于水牛胎儿成纤维细胞转基因的探索
    缩本试验采用超速离心的方法对病毒进行浓缩．由于pMSCV 和pMX 逆转录病毒系统所使用的包膜蛋白不同(分别是10A1 和VSV-G)，在超速离心力的作用下不会对VSV-G 所包装出的病毒颗粒造成破损［5］．因此，本试验仅对pMX 逆转录病毒系统所产生的病毒上清液进行超速离心浓缩．超速离心的参数是:12 000 r/min，4 ℃，120 min．离心后，去掉上清液，加入PBS 重悬底部的病毒颗粒，分装备用．1．6 病毒滴度测定采用经典的LaSRT 病毒滴

    华南农业大学学报 2013年4期2013-07-12

  • 基于贝叶斯网络的超速离心机故障诊断专家系统研究*
    速旋转机械，超速离心机是转速大于30000r/min的高性能离心机。实际使用时，转子在封闭的环境下高速旋转，经历这样的高负荷运行，长时间后即会出现转子不平衡、不对中和转轴磨损等一系列机械故障，并由此引发异常振动，使其故障率增高，影响生产和操作人员的安全性［1］。目前，国内对于离心机的故障诊断主要采用人工感官和简单仪表诊断，存在诊断效果差、耗时长、准确性低等问题。因此，研究一种超速离心机专用的故障诊断专家系统是十分必要的，可以有针对性的对超速离心机运行过程中

    传感器与微系统 2012年2期2012-07-25

  • 基于红外技术的超速离心机测温系统研究与设计*
    离心机被称为超速离心机。当转子高速旋转时，与空气摩擦生热，转子中被分离的样品温度也会随之升高，将会造成样品变质。因此，需要正确地测量转子的实际温度，以保证分离完成后样品的品质。直接测量旋转中的转子的实际温度比较困难，普通离心机通常是在离心室底部离转子较近的地方安装接触式温度传感器来测量离心室温度，从而间接测出转子温度。而超速离心机离心室则是处在高真空度环境中，传统的接触式测温方法会造成较大的测量误差。本文采用非接触式的红外传感器来直接测量转子的温度。1 红

    传感器与微系统 2012年3期2012-07-25

  • 新生大鼠脑组织中线粒体的分离
    生大鼠6只、超速离心机、电子显微镜、天平、动物手术器械、匀浆器1.2 试剂 0.25M蔗糖、0.5 mM K+-EDTA、10 mM Tris-HCl、10mg/ml牛的血清白蛋白、用线粒体缓冲液稀释的浓度分别为12%、26%、40%的Percoll、2.5%戊二醛、2%四氧化锇、乙醇、丙烯氧化物、树脂。1.3 方法1.3.1 线粒体的分离(1)迅速摘取新生大鼠的脑,称重400-500 mg,移入冰冷的线粒体分离缓冲液(0.25 M蔗糖,0.5 mM K+

    中国实验诊断学 2011年6期2011-05-30

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