李可月 陈岭
基金项目:2022年度浙江省高校国内访问工程师校企合作项目“二十四节气养生茶饮配方优化与功效成分研究”(FG2022125);2022年度浙江经贸职业技术学院横向课题“四季养生花茶复合配方开发与优化”(22HX26);2023年浙江经贸职业技术学院大学生创新项目“基于顺时养生理念的二十四节气养生茶饮开发及体外抗氧化功效评价”(0080221157)。
作者简介:李可月(2001—),女,贵州遵义人,大专。研究方向:食品检验检测技术。
通信作者:陈岭(1977—),女,畲族,浙江慈溪人,硕士,副教授。研究方向:食品营养与功能性成分。E-mail:loyola
@163.com。
摘 要:采用沸水浸提法提取茶饮中的活性物质,分别采用三氯化铝比色法、苯酚-硫酸法及福林酚法测定浸出液中黄酮、多糖及总酚的含量,并研究其抗氧化活性。结果表明,荷叶山楂红枣茶浸出液中总黄酮含量是乌梅山楂茶浸出液的2倍多,两款浸出液中多糖含量接近,而乌梅山楂茶浸出液中总酚含量则是荷叶山楂红枣茶浸出液的3倍多,对DPPH自由基的清除能力则是荷叶山楂红枣茶优于乌梅山楂茶。
关键词:黄酮;多糖;总酚;抗氧化活性
Comparison of the Active Ingredients and Antioxidant Activity of Two Summer Healthy Tea
LI Keyue, CHEN Ling*
(Zhejiang Institute of Economics and Trade, Hangzhou 310018, China)
Abstract: The active substances in the tea beverage were extracted by boiling water extraction method, and the contents of flavonoids, polysaccharides and total phenols in the extract were determined by aluminum trichloride colorimetric method, phenol-sulphuric acid method and Folin-phenol method, respectively, and their antioxidant activities were studied. The results showed that the total flavonoid content in the lotus leaf hawthorn red date tea extract was more than twice as much as that in the dark plum hawthorn tea extract, and the polysaccharides content in the two extracts was close to each other, while the total phenols content in the dark plum hawthorn tea extract was more than three times as much as that of the lotus leaf hawthorn red date tea extract, and in terms of the scavenging capacity of the DPPH radicals, it was better for the lotus leaf hawthorn red date tea than that of the dark plum hawthorn tea.
Keywords: flavones; polysaccharide; total polyphenols; antioxidant activity
山楂荷葉红枣茶中的山楂性温,味酸、甘,归脾、胃、肝经,具有消食化积、行气散瘀、化浊降脂的功效,对于食积、泻痢腹痛、瘀阻胸腹痛等症状有一定的缓解作用;荷叶具有疏散风热、清利头目等功效,对于暑热烦渴、暑湿泄泻、血热吐衄等症状有一定的缓解作用。乌梅山楂茶口感独特,酸甜适宜,可增加唾液以及胃液的分泌,促进消化,增强食欲,改善食欲不振的情况,且山楂、乌梅均含有一定的膳食纤维,可促进胃肠蠕动,具有润肠通便的功效。山楂荷叶红枣茶、乌梅山楂茶均适合在夏季饮用,本文以两款茶饮为研究对象,通过沸水浸提法模拟人体直接饮用两款茶饮的方式,提取茶饮中的黄酮类化合物、多糖类化合物及总酚,并测定其对DPPH的清除率,为消费者判定养生茶饮的功效及选购茶饮提供参考。
1 材料与方法
1.1 仪器与设备
T6新世纪紫外可见分光光度计,北京普析通用仪器有限责任公司;分析天平,奥豪斯仪器(常州)有限公司。
1.2 材料与试剂
苯酚,上海凌峰化学试剂有限公司;硫酸、无水乙醇,湖州双林化学科技有限公司;无水碳酸钠,上海虹光化工厂有限公司;醋酸钾,国药集团化学试剂有限公司;结晶氯化铝,上海美兴化工有限公司;DPPH、芦丁、FoLin & Ciocalteu试剂,浙江常青化工有限公司;葡萄糖,广东光华科技股份有限公司;荷叶、山楂、乌梅和红枣,购自浙江杭州。
1.3 实验方法
1.3.1 花茶浸提液的制备
分别称取荷叶山楂红枣茶原料6.5 g和乌梅山楂茶原料5 g,料液比为1∶30(g∶mL),用沸水进行冲泡,浸泡30 min,过滤后的茶汤冷却备用。
1.3.2 黄酮含量测定
根据龙跃等[1]的方法测定花茶浸出液中的总黄酮含量,并进行适当修改。以芦丁的浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制黄酮含量标准曲线。准确吸取样品浸出液0.1 mL,用60%乙醇稀释至5.0 mL,加入
3.0 mL 2.5% AlCl3溶液以及5.0 mL 10% KAc溶液,并摇匀室温放置40 min,在波长510 nm处测定吸光度值,同时做空白对照。茶饮中黄酮含量的计算公式为
(1)
1.3.3 多糖含量测定
根据朱艳等[2]的方法测定花茶浸出液中的多糖含量,并进行一些修改。以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制多糖含量标准曲线。将浸出液样品稀释成浓度为0.1 mg·mL-1的样品溶液,移取0.1 mL于10 mL具塞比色管,补充水至1.0 mL,加入1.0 mL 5%苯酚,摇匀后加入5.0 mL硫酸,摇匀后将其放置于沸水浴中加热20 min,冷却至室温后,于490 nm波长下测定吸光值,同时做空白对照。茶饮中多糖含量的计算公式为
(2)
1.3.4 总酚含量测定
根据李楠等[3]的方法测定花茶浸出液中的总酚含量,并进行适当修改。以没食子酸浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制总酚含量标准曲线。准确吸取
1.0 mL浸出液样品加入试管中,加5.0 mL 10%福林酚溶液并摇匀,反应5 min后加入4.0 mL 7.5%碳酸钠溶液,常温下避光反应60 min,在765 nm处测定其吸光度,同时做空白对照。茶饮中总酚含量的计算公式为
(3)
1.3.5 对DPPH清除能力的测定
根据李楠等[3]的方法测定花茶浸出液的DPPH清除能力,并进行适当修改。准确吸取0.1 mL浸出液样品加入试管中,再加入0.1 mmol·L-1的DPPH-乙醇的溶液3.0 mL,振荡摇匀后,25 ℃避光反应
30 min,用无水乙醇调零,于517 nm处测定其吸光度值。DPPH自由基清除率计算公式为
(4)
式中:A0为DPPH溶液和无水乙醇的吸光度值;As为DPPH-乙醇溶液和样品溶液的吸光度值;A1为样品溶液和无水乙醇的吸光度值。
2 结果与分析
2.1 黄酮含量比较
黄酮含量的标准曲线如图1所示,其回归方程为y=11.585x+0.008 3,相关系数R2=0.999。经测定,荷叶山楂红枣茶浸出液中黄酮平均含量为10.66 mg·g-1,乌梅山楂茶浸出液中黄酮平均含量为5.25 mg·g-1,荷叶山楂红枣茶中的黄酮含量明显高于乌梅山楂茶。
黄酮类化合物又称生物黄酮或植物黄酮,是由3个碳原子连接2个苯环(A环和B环)形成的具有C6-C3-C6结构的一类化合物。按苯环的不同组成,黄酮类化合物可以分为多个不同种类,包括黄酮类、黄酮醇类、异黄酮类、查耳酮类、花色素类和黄烷醇类等。黄酮类化合物是许多中药的主要有效成分之一,广泛存在于某些中药的根、茎、叶、花、果实和种子等部位。中药的黄酮类化合物种类繁多,不同中药中含量也各不相同,其药理作用丰富。现代药理学研究证实,中药中黄酮类化合物具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等作用,对心血管、肝脏等相关疾病均具有良好的疗效[4]。从两款养生茶的原料来看,荷叶中含有丰富的黄酮类物质,如槲皮素、槲黄素、柚皮素和柠檬素等,对于促进人体健康发挥着重要的作用。
2.2 多糖含量比较
多糖含量的标准曲线如图2所示,其回归方程为y=10.772x-0.002 9,相关系数R2=0.999。经测定,荷叶山楂红枣茶浸出液中多糖平均含量为
0.29 mg·g-1,乌梅山楂茶浸出液中多糖平均含量为
0.28 mg·g-1,两者相近。
图1 黄酮含量标准曲线
《中华人民共和国药典(2020年版)》记载,红枣归脾、胃、心经,味甘,性温,具有补中益气、养血安神的功效。现代研究表明,红枣功效的发挥与其富含的糖类、氨基酸、黄酮类、多酚类等多种活性成分具有密切联系。红枣多糖作为红枣的主要活性成分之一,经研究表明具有抗氧化、保肝护肝、降糖、降脂、菌群调节、免疫调节、抗癌和抗凝等多种生物活性[5]。但是,本实验中两款茶饮的多糖检测含量不高,推测可能与红枣的预处理方式、浸提液的浸泡温度和时间有关。
图2 多糖含量标准曲线
2.3 总酚含量比較
总酚含量的标准曲线如图3所示,其回归方程为y=0.014 6x-0.009 1,相关系数R2=0.999 4。经测定,荷叶山楂红枣茶浸出液中总酚平均含量为0.74 mg·g-1,乌梅山楂茶浸出液中总酚平均含量2.96 mg·g-1,乌梅山楂茶中的总酚含量明显高于荷叶山楂红枣茶。
总酚具有较强的抗氧化作用,可以减少自由基的产生,防止氧化反应的发生。有研究表明,加热可使中草药糖浆中的总酚含量增高,当加热温度较低或加热时间较短时,总酚含量变化不明显,而随着加热温度升高或加热时间延长,总酚含量明显增高[6]。对于养生茶而言,可以考虑将沸水冲泡改为用养生壶煮茶,以期获得更高的总酚含量。
图3 总酚含量标准曲线
2.4 对DPPH自由基清除能力的比较
荷叶山楂红枣茶的DPPH自由基清除率为82.85%,乌梅山楂茶的DPPH自由基清除率为24.94%,相比之下,荷叶山楂红枣茶对DPPH自由基的清除效果更为理想。
3 结论
通过实验测定了荷叶山楂红枣茶和乌梅山楂茶的功效成分含量,并比较了抗氧化活性。结果表明,荷叶山楂红枣茶浸出液中总黄酮平均含量为
10.66 mg·g-1,多糖平均含量为0.29 mg·g-1,总酚平均含量为0.74 mg·g-1;乌梅山楂茶浸出液中总黄酮平均含量为5.25 mg·g-1,多糖平均含量为0.28 mg·g-1,总酚平均含量为2.96 mg·g-1。结合DPPH清除能力的测定结果,推测黄酮对抗氧化能力的贡献度更高。两款夏季养生茶中,荷叶山楂红枣茶相对于乌梅山楂茶有更强的抗氧化活性。本研究可为消费者认知养生茶功效成分及选购养生茶提供一定的依据。
参考文献
[1]龙跃,寇娴,程素霞,等.三氯化铝比色法测定中草药雀儿舌头中总黄酮研究[J].郑州大学学报(工学版),2010,31(4):113-115.
[2]朱艳,李先芝,严玲,等.苯酚-硫酸法测定保健酒中多糖含量的分析研究[J].酿酒科技,2023(2):118-121.
[3]李楠,杨欣,孙元琳,等.20种花茶黄酮、总酚及抗氧化活性分析[J].福建中医药,2021,42(18):34-39.
[4]苏圆圆,王雪艳,李成林,等.中药中黄酮类化合物的药理药效研究进展[J].中兽医医药杂志,2023,42(6):42-46.
[5]魏炳琦,高小雨,刘延鑫,等.红枣多糖的结构、生物学活性及产品开发进展[J/OL].食品工业科技:1-14[2023-12-08].https://doi.org/10.13386/j.issn1002-0306.2023080051.
[6]殷倩倩,何志勇,陈洁,等.不同加热条件对中草药糖果中总酚和主要功效成分含量及抗氧化性的影响[J].安徽农业科学,2018,46(16):167-171.