多囊卵巢综合征不孕患者肠道菌群与血清性激素及脂肪因子关系

彭丽敏 韩丽荣 焦玉梅

1.北京市中关村医院(100190)；2.首都医科大学附属北京地坛医院

多囊卵巢综合征(PCOS)为好发于育龄女性的内分泌紊乱性疾病，可引起月经紊乱甚至造成不孕[1-2]。PCOS发生发展与炎症反应、肠道菌群紊乱、胰岛素抵抗(IR)、免疫失衡、性激素异常等有关[3-4]。研究发现，PCOS患者肠杆菌等肠道菌群发生改变，二甲双胍、苍附导痰汤、穴位埋线联合治疗可有效改善PCOS患者肠道菌群[5]；欧英霞等[6]研究发现，PCOS患者血清促黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平较高，可能影响PCOS的进展；另外，内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)、Apelin是机体内重要的两种脂肪因子，均与PCOS病变过程密切相关[7-8]。但PCOS不孕患者肠道菌群分布与LH、促卵泡刺激素(FSH)、T、雌二醇(E2)、促甲状腺激素(TSH)及Vaspin、Apelin的相关性尚不明确。因此，本文通过测定PCOS不孕患者血清LH、FSH、T、E2、TSH、Vaspin、Apelin水平，探究其与肠道菌群的关系。

1 资料与方法

1.1 资料

回顾性收集2019年1月-2022年1月本院收治的PCOS不孕患者82例为PCOS组，因输卵管异常致不孕女性82例为对照组。纳入标准：①符合PCOS诊断标准[9]，结合临床表现、超声等确定为PCOS所致不孕；②检查资料齐全，无其他代谢性、内分泌疾病。排除标准：①近3个月有严重感染或使用糖皮质激素、避孕药；②伴有糖尿病、严重肝肾功能异常；③患有高血压或其他心血管疾病；④合并肿瘤或长期酗酒、吸烟；⑤患有库欣综合征、高泌乳素血症、精神疾病。纳入对象对本研究知情同意。本研究经本院伦理委员会审批。

1.2 检测方法

1.2.1肠道菌群含量收集纳入对象新鲜粪便1 g，取0.1 g 0.9%氯化钠注射液稀释，振荡均匀，在肠道菌群发酵培养基上培养双歧杆菌、乳酸杆菌、肠杆菌、肠球菌(其中双歧杆菌、乳酸杆菌于厌氧条件下培养48～72 h，肠杆菌、肠球菌于常规恒温箱中培养24～48 h)，记录各个稀释平板中菌落数。

1.2.2血清激素水平收集纳入对象月经周期第3 d空腹外周血(闭经女性采血时间不限，月经不规律女性在B超检查未见优势卵泡时采血)，分离血清，使用全自动化生化分析仪(美国雅培公司，i2000)测定血清LH、T、E2、FSH、TSH水平；酶联免疫吸附法检测血清Vaspin、Apelin水平，人Vaspin试剂盒(上海瓦兰生物科技有限公司)、Apelin试剂盒(上海信帆生物科技有限公司)。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 基本情况

PCOS组年龄(27.4±3.4)岁(22～32岁)，腰臀比(WHR)(0.68±0.14)(0.57～0.87)；对照组年龄(27.68±3.55)岁(22～32岁)，WHR(0.70±0.16)(0.57～0.87)。两组年龄、WHR无差异(P>0.05)。

2.2 肠道菌群含量

PCOS组双歧杆菌、乳酸杆菌含量低于对照组，肠球菌、肠杆菌含量高于对照组(均P<0.05)。见表1。

表1 两组肠道菌群含量比较

2.3 血清激素水平

PCOS组血清LH、T、E2、FSH、TSH水平均高于对照组(均P<0.05)。见表2。

表2 两组血清激素水平比较

2.4 血清脂肪因子水平比较

PCOS组血清Vaspin(0.61±0.20 g/L)、Apelin(692.24±230.75 ng/ml)水平高于对照组(0.38±0.13 g/L、465.78±155.26 ng/ml)(t=8.731、7.373，均P=0.000)。

2.5 PCOS不孕患者肠道菌群与血清激素、脂肪因子水平关系

Pearson法分析显示，PCOS不孕患者双歧杆菌、乳酸杆菌与血清LH、T、TSH、Vaspin、Apelin均呈负相关，而肠球菌、肠杆菌与LH、T、TSH、Vaspin、Apelin均呈正相关(均P<0.05)。见表3。

表3 PCOS不孕患者肠道菌群与血清激素、脂肪因子水平的相关性

3 讨论

PCOS可表现为高雄激素血症、无/稀发排卵，其不仅影响女性生育，还可引发抑郁、心脑血管疾病、子宫内膜癌[10-11]。因此，寻找影响PCOS疾病进展的相关机制，为诊治PCOS提供更多参考。

肠道菌群位于人体肠道屏障上，其可影响机体免疫平衡，参与机体代谢，调节炎症反应，与高脂血症、肥胖、PCOS病理发展相关[12-13]。既往研究显示，PCOS患者双歧杆菌、乳酸杆菌水平较低，肠球菌、肠杆菌水平较高，经针刺与中药联合治疗后，双歧杆菌、乳酸杆菌水平升高，肠球菌、肠杆菌水平降低，肠道菌群可能影响PCOS疾病进展[14]。本研究显示，PCOS组双歧杆菌、乳酸杆菌含量低于对照组，肠球菌、肠杆菌含量高于对照组，与李东海等[14]研究趋势相似，提示肠道菌群失调可能参与了PCOS的发生。分析可能原因：双歧杆菌、肠球菌、乳酸杆菌、肠杆菌在粪便中含量较稳定，是肠道菌群的重要组成部分，而肠道菌群失调可破坏肠道绒毛，影响肠壁细胞间连接，升高肠黏膜通透性，造成肠道内炎症，促进细菌分泌的脂多糖快速进入体循环，进而激活机体免疫系统引起炎症反应，影响胰岛素受体功能，促使胰岛素水平升高，导致卵巢产生更多雄激素，影响正常卵泡发育[15]，从而造成PCOS患者不孕。

IR和高雄激素血症在PCOS发展中起重要作用，IR可引发代谢紊乱和高胰岛素血症，引起雄激素大量分泌，影响PCOS患者排卵[16-17]。LH、T、E2、FSH是反映人体性激素的重要指标，与卵泡成熟关系密切，而TSH不仅能调节甲状腺功能、状态，还可经下丘脑-垂体-卵巢轴影响卵巢功能，进而影响机体性激素水平，在PCOS中发挥作用[18]。既往报道显示，PCOS患者血清LH、T、E2、FSH水平较高，经二甲双胍治疗后可降低，四者可能通过影响机体排卵情况进而影响PCOS进程[19]；吴惠芹等[18]研究发现，PCOS患者血清TSH水平较高，经来曲唑与尿促性素联合治疗后水平降低，TSH在PCOS的内分泌调节过程中起重要作用。本文中PCOS组血清LH、T、E2、FSH、TSH水平均高于对照组，提示上述激素可能与PCOS患者不孕关系密切，推测其通过影响卵泡成熟进而影响PCOS病理过程。

Vaspin是一种脂肪细胞因子，可调节血糖，增加胰岛素敏感性，影响炎症反应，与肥胖、IR、糖尿病发生发展有关[20]；Apelin也是一种脂肪因子，可参与糖脂代谢、调节心血管功能，影响血压，调控垂体激素及胰岛素分泌，与高血压、肥胖、糖尿病等疾病进展相关[8]。李文君等[7]研究发现，Vaspin在PCOS中呈高水平，与IR呈正相关，Vaspin可能参与PCOS疾病过程；周洁等[8]研究发现，Apelin在PCOS中水平升高，与糖代谢有关，有评估PCOS患者治疗效果价值。本研究显示，PCOS不孕患者血清Vaspin、Apelin水平均异常升高，提示Vaspin、Apelin水平异常可能与PCOS患者不孕有关。分析原因：Vaspin、Apelin可能通过影响患者胰岛素敏感性，调节垂体激素及胰岛素分泌，参与糖脂代谢，进而在PCOS中发挥作用。

有关报道显示，肠道菌群可影响T水平[21]。但肠道菌群分布与PCOS不孕患者血清激素、脂肪因子的关系尚不明确，因此，本文分析了PCOS不孕患者双歧杆菌、乳酸杆菌、肠球菌、肠杆菌与血清LH、T、E2、TSH、FSH、Vaspin、Apelin的相关性。结果显示，双歧杆菌、乳酸杆菌、肠球菌、肠杆菌与LH、T、TSH、Vaspin、Apelin均显著相关，提示肠道菌群失调可能与性激素、脂肪因子与PCOS疾病有关，推测肠道菌群失调与LH、T、TSH、Vaspin、Apelin发生异常共同影响患者的胰岛素分泌及IR作用强度，进而影响PCOS病变进程。

综上，PCOS不孕患者肠道菌群发生失调，且与患者机体LH、T、TSH及Vaspin、Apelin水平有关，肠道菌群、激素、脂肪因子可能成为PCOS不孕的治疗靶标。后期将扩大样本、从多角度分析PCOS不孕患者肠道菌群与激素及脂肪因子的关系。