肠道微生物制剂对小儿肠易激综合征肠道菌群、Th1/Th2细胞水平的影响

樊琳，巩玉钰，戴春威，李伟平,陈俊洋

肠易激综合征(irritable bowel syndrome，IBS)是缺乏结构性病理改变的肠道功能紊乱疾病，临床多伴有腹泻、腹痛、腹胀表现。近年来随着医疗技术的进步，IBS治疗方案繁多，患儿治疗效果得到显著改善，临床也已形成共识，但其总体疗效仍不满意，且其具体机制尚不明确[1-2]。有学者提出肠道微生物失衡是造成IBS的重要诱因[3]，因而通过补充肠道微生物制剂可能有助于改善患儿临床症状，但目前有关肠道微生物制剂改善IBS的具体机制尚不明确。本研究纳入本院84例IBS患儿作为研究对象，探讨肠道微生物制剂的临床作用及其对肠道微生物菌群相关指标的影响。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

前瞻性纳入2017年5月至2019年5月84例IBS患儿作为研究对象。纳入标准：①符合中华医学会消化病学分会胃肠功能性疾病协作组推荐IBS标准[4]；②患儿年龄<12岁；③患儿家属均知悉本研究内容，且签署知情同意书。排除标准：①既往有精神病史或认知功能障碍者；②合并有慢性胃炎、消化性溃疡及炎症性肠病者；③肝肾功能不全者。采用随机数字表法将84例患儿分为观察组(n=42，常规治疗联合肠道微生物制剂)和对照组(n=42，常规治疗)。两组患儿基本资料无显著性差异(P<0.05)，见表1。本研究经我院伦理委员会审批同意(批号2017-03)。

表1 两组基本资料比较

1.2 治疗方案

两组患儿入院后均行饮食干预：补充膳食纤维，每日按20 kcal/(kg·d)标准补充能量，营养素比：碳水化合物55%、脂肪30%及蛋白质15%。口服马来酸曲美布汀(国药准字H20030290，天津田边制药有限公司，100 mg×12 s)，50 mg/次，3次/d。口服思密达(国药准字H20000690，博福-益普生制药有限公司，3.0 g/袋)，3.0 g/次，3次/d。观察组在此基础上加用微生物制剂，口服双歧杆菌四联活菌(国药准字S20060010，杭州龙达新科生物制药有限公司，0.5 g×24 s)，500 mg/次，3次/d。两组患儿均连续干预4周。

1.3 观察指标

在治疗4周后评价疗效[5]。显效：大便成形无黏液，无腹痛腹胀，大便1～2次/d；有效：大便基本成形，腹痛腹胀缓解，大便次数较治疗前减少一半；无效：未达到显效和有效标准。以(显效+有效)/总例数×100%计算总有效率。分别在治疗前和治疗后收集大便标本10.0 g，低温封闭后即刻送检，肠杆菌和肠球菌分别采用选择性培养基EMB与PSE琼脂，双歧杆菌和乳酸杆菌分别为选择性培养MRS和选择性培养基LBS。EMB、MRS及LBS培养基接种后在厌氧箱中培养3 d，PSE琼脂培养基接种后在恒温箱中培养2 d。观察菌落形态、颜色，参照公式菌落数=稀释度平均菌落数×稀释倍数×50[6]，计算菌落数。分别在治疗前和治疗后收集肘静脉血5 mL，采用酶联免疫吸附法检测两组患儿Th1/Th2相关因子γ型干扰素(interferon γ，IFN-γ)和白介素-4(interleukin-4，IL-4)水平，试剂盒均购自武汉伊莱瑞特生物科技有限公司，方法按试剂盒说明进行。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 两组治疗效果比较

观察组总有效率为97.62%，显著高于对照组的80.95%，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 两组治疗效果比较[n(%)]

2.2 两组肠道菌群分布比较

治疗后观察组肠杆菌和肠球菌较治疗前均显著降低，双歧杆菌和乳酸杆菌较治疗前均显著升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组肠球菌和肠杆菌均低于对照组，双歧杆菌和乳酸杆菌均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。两组治疗后大便标本检查结果见图1和图2。

图1 治疗后观察组大便标本检查结果 A：肠杆菌；B：肠球菌；C：双歧杆菌；D：乳酸杆菌

图2 治疗后对照组大便标本检查结果 E：肠杆菌；F：肠球菌；G：双歧杆菌；H乳酸杆菌

表3 两组肠道菌群分布比较

2.3 两组Th1/Th2水平比较

治疗后观察组IFN-γ和IFN-γ/IL-4较治疗前均显著降低，IL-4较治疗前显著升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组IFN-γ和IFN-γ/IL-4均低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组IL-4显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 两组Th1/Th2水平比较

3 讨论

IBS临床以腹泻型多见，其在儿童中的发病率可达12%，且有上升趋势[7]。马来酸曲美布汀可通过促进血管活性肠肽和胃泌素分泌，激活μ和δ受体，提高平滑肌的兴奋性[8]，使胃肠道运动恢复正常节律。李要锋[9]报道还认为曲美布汀可通过抑制Ca2+内流和肾上腺素释放，并抑制乙酰胆碱的释放，发挥双向调节作用，进而改善临床腹痛腹泻症状。思密达是具有双层结构的消化道黏膜保护剂，通过吸收肠道气体，调节高渗性溶液，进而改善局部细胞吸收分泌功能[10]。另外，思密达具有纹状结构和非均匀性电荷分布特点，可直接覆盖肠黏膜[11]，发挥屏障保护作用。Lavikainen等[12]也认为思密达对肠道黏膜上皮的修复再生均具有积极作用，有助于提高肠黏膜的自我免疫保护能力。因而，本研究两组基础治疗均选用马来酸曲美布汀与思密达，结果显示对照组总有效率为80.95%。

近年来报道显示肠道微生物失衡是IBS的重要诱因，肠道微生物数量减少和优势菌群含量降低，造成肠道微生物分布失调，使肠内短链脂肪酸水平降低[13-14]，影响肠道对水电解质的吸收。本研究观察组中加用肠道微生物制剂，补充肠道优势菌群，恢复肠道黏膜屏障功能。结果也显示治疗后双歧杆菌和乳酸杆菌较治疗前均显著升高，而肠杆菌和肠球菌较治疗前均显著降低，提示肠道微生物制剂有助于调整肠道菌群，进而增强患儿肠道免疫功能，抑制肠道炎症。

另外，Th1/Th2是IBS患儿炎症免疫应答的关键因子，而炎症免疫应答与IBS病理机制关系密切[15-16]，分子实验研究还证实Th1/Th2平衡向Th1漂移是IBS的重要机制[17]。IFN-γ与IL-4是Th1与Th2的特征性细胞因子[18]，本研究显示治疗后IFN-γ/IL-4较治疗前显著降低，提示肠道微生物制剂可通过调节Th1/Th2细胞因子，抑制有害免疫应答[19]，减轻IBS肠道黏膜炎症，改善局部腹泻症状。本研究也显示观察组总有效率显著高于对照组，可能与此有关。

综上所述，肠道微生物制剂联合马来酸曲美布汀与思密达用于IBS患儿，有助于提高临床疗效，这可能与其恢复肠道微生态环境，调整Th1/Th2细胞相关因子水平有关。