桑黄抗肝纤维化及其作用机理的探究

王松伟

延边灵桦工坊生物科技有限公司,吉林 延边 133608

对于肝纤维化来说，其是因为肝损伤后而出现的一种病理修复反应。经过相关的临床实践研究结果与动物实验均已证明，肝纤维化属于慢性肝病发展至肝硬化的必经途径。而肝纤维化自身具有一定的可逆性，通过采取有效的预防措施，可以进一步降低炎症反应的程度，并抑制肝脏内过度表达的胶原合成能力，而且也可以通过提高胶原酶的活性，使已经沉积的胶原可以得到消除。所以说，抗肝纤维化，对肝硬化疾病的预防与慢性肝病的治疗具有非常重要的意义，而在临床中寻找疗效更为确切的药物，也已经成为目前临床研究的重点内容之一，为此，本文主要根据多孔菌科植物桑黄的药理特点，开展抗实验性肝纤维化相关研究，重点探究桑黄抗肝纤维化的作用机理，报告如下。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1实验动物

SD大鼠，性别：雌性；体重：160～200g；

1.1.2实验试药

桑黄、四氧化碳、橄榄油、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、III型前胶原(pclll)、IV型胶原(IV-C)放射免疫分析测定盒。

1.1.3实验仪器

SN-682型放射免疫计数器、7150型自动生化分析仪、WH-3微型漩涡混合仪、BH-2型管血显微镜和LXJ-II型离心沉淀机。

1.2实验方法

1.2.1桑黄对大鼠肝纤维化发生的预防作用实验方法

1.2.1.1配置供试药液

取适当量的桑花，并加入适当剂量水，使用小火进行煎煮，完成煎煮后，收集煎煮液，将剩余药渣使用70%乙醇进行浸泡，将乙醇提取液和水煎煮液进行混合，回收后将乙醇剔除，获取干燥、浓缩的固体提取物，将其研磨成为细粉，过80目筛。在使用前，应该利用蒸馏水，配制成为一定浓度的混悬液，留以备用。

1.2.1.2制作大鼠肝纤维化模型

使用40%CCl4/橄榄油为大鼠进行皮下注射，首次注射剂量为：0.5ml/100g体重，而后每周完成2次注射，每次注射剂量为：0.3ml/100g体重，持续为大鼠注射6周。在开始造模的第2周，给予大鼠食用低蛋白、高脂肪的复合饲料，具体为：0.5%的胆固醇、20%猪油和79.5%玉米粉，大鼠使用两周后，为其饲喂普通饲料。在造模过程中，应该将乙醇作为大鼠的唯一饮用品。

1.2.1.3分组和处理

将大鼠随机分为三组，分别为对照组、模型对照组和桑黄预防组，每组各有8只大鼠，为正常对照组内大鼠饲喂普通饮食，具体为：第1天使用蒸馏水灌胃，剂量：1ml/100g体重，每天1次；对模型对照组大鼠按模型复制方法进行处理，同时使用蒸馏水灌胃，剂量：1ml/100g体重，每天1次；为桑黄预防组胺模型复制方法处理，使用桑黄提取液(1ml含有0.5g生药材)进行灌胃，剂量：1ml/100g体重，每天1次，实验时间为6周[1]。

1.2.2桑黄对大鼠肝纤维化的治疗作用实验方法

1.2.2.1制作大鼠肝纤维化模型

使用40%CCl4/橄榄油为大鼠进行皮下注射，首次注射剂量为：0.5ml/100g体重，而后每周完成2次注射，每次注射剂量为：0.3ml/100g体重，持续为大鼠注射6周。在开始造模的第2周，给予大鼠食用低蛋白、高脂肪的复合饲料，具体为：0.5%的胆固醇、20%猪油和79.5%玉米粉，大鼠使用两周后，为其饲喂普通饲料。在造模过程中，应该将乙醇作为大鼠的唯一饮用品。从第7周开始，给予大鼠饲喂普通饮食，并为其维持病因刺激，每周为大鼠注射一次40%CCl4/橄榄油，剂量：0.3ml/100g体重，持续注射4周。

1.2.2.2分组和处理

将大鼠随机分为三组，分别为对照组、模型对照组和桑黄预防组，每组各有8只大鼠，为正常组内大鼠经皮下注射生理盐水，并给予其饲喂普通饮食，其他两组均复制肝纤维化模型，在治疗的第7周开始，对正常对照组和模型对照组内大鼠进行灌胃蒸馏水，剂量：1ml/100g体重，每天1次；桑黄预防组则为大鼠灌胃1ml含0.5g的桑黄提取液，剂量为1ml/100g体重，每天1次，治疗时间为4周，全部实验过程为10周[2]。

1.3观察指标

使用乙醚对大鼠进行麻醉后，将其眼球摘除，并取血液，离心分离血清。取适当量血清，而后使用自动生化分析对总蛋白、总胆红素、球蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基转移酶、A/G比值等级进行检测，另取部分血清，使用放射免疫试剂盒方法对血清胶原成分HA、PClll、IV-C和LN进行检测.

2 结 果

2.1桑黄对大鼠肝纤维化发生的预防作用

2.1.1大鼠血清酶学检查结果

模型对照组血清胆红素、丙氨酸氨基转移酶水平明显高于正常组，血清白蛋白和A/G比值则明显低于正常组，这也就说明模型组内大鼠的肝功能受到明显损伤。桑黄预防组内大鼠的血清胆红素和丙氨酸氨基转移酶水平接近正常组，同时也提高了血清白蛋白水平，具有纠正A/G的作用，比较有显著差异(P<0.05)。

2.1.2血清胶原成分检测结果

模型对照组内大鼠血清胶原成分层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、III型前胶原(pclll)、IV型胶原(IV-C)含量明显高于正常组，这也就说明模型对照组内大鼠表现出明显的肝纤维化特征，而桑黄预防组内大鼠的层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、III型前胶原(pclll)、IV型胶原(IV-C)含量明显降低，几乎接近正常组，比较有显著差异(P<0.05)

2.2桑黄对大鼠肝纤维化的治疗作用

2.2.1大鼠血清酶学检查结果

模型对照组内大鼠肝功能损伤明显，丙氨酸氨基转移酶、球蛋白水平明显高于对照正常组，A/G比值则低于对照正常组，桑黄治疗组内大鼠的总胆红素、丙氨酸氨基转移酶等水平明显降低，比较有显著差异(P<0.05)。

2.2.2血清胶原成分检测结果

模型对照组内大鼠血清胶原成分分层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、III型前胶原(pclll)、IV型胶原(IV-C)含量显著高于对照正常组，桑黄治疗组内大鼠分层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、III型前胶原(pclll)、IV型胶原(IV-C)含量含量则接近正常组，三组比较有显著差异(P<0.05)。

3 讨 论

经上述实验结果表明，桑黄对肝纤维化具有非常明显的预防效果和治疗效果，这也为今后的临床应用提供了必要的数据支持。对于人体而言，肝脏属于人体全身组织含镁量最为丰富的器官，而且不同的酶在肝小叶不同区域和肝细胞亚结构中的浓度也有所差异，其代谢率和分子量也有明显的不同，所以在肝脏不同病理状况下，代谢率和分子量的升降幅度也有明显的差异。因为肝纤维化的形成机制非常复杂，而中药中含有多种活性成分，在此基础上，就可以将桑黄具有的抗纤维化作用与优势充分的凸显出来。