膜联蛋白A1、sd-LDL、Angptl2与冠心病及对冠状动脉粥样硬化病变程度的诊断价值

吴威 衣欣 蒙奕兵 张雪

冠心病（Coronary heart disease，CHD）作为日益增长的公共健康问题，已发展成严重威胁中老年群体健康的首要病因[1]。临床加强CHD病情评估，并针对性治疗是改善预后、降低住院率、病死率的关键环节。低密度脂蛋白（Low Density Liporotein，LDL）表达异常已成为医学界公认的CHD独立危险因素[2]。近年随血脂蛋白研究深入发现，不同形态LDL诱发动脉粥样硬化能力存在差异性，其中以小而密低密度脂蛋白（sd-LDL）与CHD发病发展关系最为密切[3]；此外，基础研究显示，血清膜联蛋白A1（AnxA1）与冠状动脉粥样硬化形成存在一定关联性，可作为评价斑块性质的特异性指标[4]；血管生成素样蛋白2（Angptl2）是一种内脏脂肪细胞分泌蛋白，与动脉粥样硬化、胰岛素抵抗、炎症反应等病理生理有关，但与CHD患者冠脉病变严重程度的报道鲜见[5]。基于此，本研究通过分析血清AnxA1、sd-LDL、Angpt l2与CHD患者冠状动脉狭窄演化的关联性，旨在为临床完善诊断、治疗方案提供新思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2017年8月至2019年8月102例CHD患者作为研究对象。符合CHD诊断标准[6]；查体、超声心动图诊断确诊；首次发病，既往无相关治疗史；入组前3个月内未服用影响血脂药物；患者、家属知情研究签署同意书。排除标准：伴其他心血管疾病者；合并严重感染性疾病者；存在恶性肿瘤疾病者；伴血液系统疾病者。本研究经医学伦理委员会审批通过。

1.2 方法

血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2水平检测。①样本采集：晨空腹坐位以非抗凝真空管取肘静脉血2mL，静置10min，离心9min（半径8 cm，转速3500r/min），分离血清保存至液氮待测。②检测：取血清室温解冻（避免反复融冻）用全自动生化分析系统（西门子，型号：Adiva 2400）以过氧化酶法测sd-LDL；以酶联免疫吸附法测AnxA1、Angptl2水平。试剂、试剂盒均为上海纪宁实业有限公司提供。相同资深专科医师参考试剂盒说明书规范完成。

1.3 观察指标

①不同临床特征患者血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2水平。②血清Anx A1、sd-LDL、Angptl2与Gensini评分相关性。Gensini评分标准[7]：狭窄＜25%计1分；25%～50%计2分；51%～75%计4分；76%～90%计8分；91%～99%计16分；100%计32分。不同病变节段冠状动脉×对应系数：左主干病变×5。左前降支近段×2.5、中段×1.5、远段×1，左回旋支近段×2.5、远段、后降支×1，后侧支×0.5，第一对角支×1，第二对角支×0.5，右冠进/中/远段×1。各分支积分相加为总分。③血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2与冠状动脉病变支数相关性。④血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2对冠状动脉粥样硬化严重病变的诊断价值。⑤血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2联合对冠状动脉粥样硬化严重病变的诊断价值。

1.3 统计学处理

采用SPSS 22.0统计分析软件，计数资料以%表示，两组间比较采用χ2检验；相关性以Pearson分析；符合正态分布的计量资料以（）表示，两组间比较采用t检验；应用受试者工作特征（Receiver Operating Characteristic,ROC）曲线分析血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2对冠状动脉粥样硬化严重病变的诊断价值。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同临床特征患者血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2水平

不同年龄、性别患者血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2水平相比，差异无统计学意义（P＞0.05）；不同疾病类型、Gensini评分、冠状动脉病变支数患者血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2水平存在显著，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 不同临床特征患者血清Anx A1、sd-LDL、Angptl2水平比较[n，（±s）]Table1 Comparison of serum ANXA 1，SD LDL and Angptl2 levels in patients with different clinical characteristics[n，（±s）]

表1 不同临床特征患者血清Anx A1、sd-LDL、Angptl2水平比较[n，（±s）]Table1 Comparison of serum ANXA 1，SD LDL and Angptl2 levels in patients with different clinical characteristics[n，（±s）]

临床病理特征年龄（岁）＜60≥60性别男女疾病类型（例）稳定型心绞痛不稳定型心绞痛急性心肌梗死Gensini评分（分）0～2021～60＞60冠状动脉病变支数（支）12≥3 n 5547534946223438 34305729 16 AnxA1（μg/L）1.55±0.401.59±0.38 1.56±0.331.58±0.36 1.17±0.201.49±0.352.16±0.571.20±0.221.54±0.38 2.07±0.551.31±0.241.62±0.322.41±0.50 t/F/P值-1.044/0.299-0.293/0.770-63.411/＜0.001-41.118/＜0.001-76.518/＜0.001sd-LDL（mmol/L）1.27±0.301.29±0.271.26±0.28 1.30±0.251.02±0.16 1.27±0.201.64±0.39 1.04±0.121.33±0.18 1.52±0.211.08±0.171.35±0.241.87±0.35 t/F/P值-0.351/0.726-0.759/0.450-53.079/＜0.001-68.751/＜0.001-78.045/＜0.001Angptl2（ng/mL）2.30±0.422.21±0.452.28±0.502.24±0.46 1.41±0.372.53±0.643.24±0.701.42±0.402.38±0.613.19±0.831.57±0.39 2.76±0.573.81±0.86 t/F/P值0.515/0.6080.419/0.676-108.006/＜0.001-69.042/＜0.001-125.570/＜0.001

2.2 血清AnxA1、sd-LDL、Angpt l2与Gensini评分相关性

Pearson相关系数分析血清AnxA1（r=0.723）、sd-LDL（r=0.784）、Angptl2（r=0.644）与Gensini评分呈正相关，差异具有统计学意义（P＜0.05），图1～3。

图1 血清AnxA1与Gensini评分相关性Figure1 correlation between serum ANXA1and Gensiniscore

图2 血清sd-LDL与Gensini评分相关性Figure2 correlation between serum SD LDL and Gensiniscore

图3 血清Angpt l2与Gensini评分相关性Figure3 correlation between serum Angptl2 and Gensiniscore

2.3 血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2与冠状动脉病变支数相关性

Pearson相关系数分析血清AnxA1（r=0.787）、sd-LDL（r=0.780）、Angptl2（r=0.855）与冠状动脉病变支数呈正相关，差异具有统计学意义（P＜0.05），图4～6。

图4 血清AnxA1与冠脉病变支数相关性Figure4 correlation between serum ANXA1and number of coronary lesions

图5 血清sd-LDL与冠脉病变支数相关性Figure5 correlation between serum SD LDL and number of coronary lesions

图6 血清Angptl2与冠脉病变支数相关性Figure6 correlation between serum Angptl2 and number of coronary lesions

2.4 血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2对冠状动脉粥样硬化严重病变的诊断价值

将Gensini评分＞60分定义为冠状动脉粥样硬化严重病变。ROC曲线分析显示，血清AnxA1诊断冠状动脉粥样硬化严重病变的ROC曲线下的面积（Area Under Curve,AUC）值为0.791，大于血清sd-LDL、Angptl2，当截断值＞1.61μg/L时，敏感度为84.72%，特异度为66.67%。见表4。

表4 ROC分析结果（%）Table4 ROC analysis results（%）

2.5 3者联合诊断

血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2联合诊断冠状动脉粥样硬化严重病变AUC为0.895，95%CI为0.819～0.947，诊断敏感度为79.17%，特异度为90.00%，见图7。

3 讨论

sd-LDL是LDL主要类型之一，有学者对sd-LDL与CHD间关系进行研究，B型分布的血清LDL是独立于年龄、体质量、性别之外的独立危险因素，可使CHD患者继发心肌梗死风险提高3倍[9]。学者孙爱梅等[10]研究表明，血清LDL在不稳定型心绞痛、在急性心肌梗死患者中表达异常升高，经多因素回归分析其表达与高血压史、腰臀比有关，但校正上述因素后，与健康群体对比，血清sd-LDL表达仍与急性冠状动脉综合征存在相关性。本研究结果显示，不同疾病类型、Gensini评分、冠状动脉病变支数患者血清AnxA1存在显著差异（P＜0.05），其介导冠状动脉病变的机制可能是sd-LDL氧化活性强，血浆清除缓慢，与血管壁粘附后易进入动脉壁内并不断积聚，致动脉壁氧化损伤，加重斑块不稳定性[11]。学者秦明明等[12]研究显示，血清sd-LDL诊断动脉粥样硬化的敏感度73.6%。本研究显示，血清AnxA1诊断冠状动脉粥样硬化严重病变的AUC值最大，为0.791，最佳敏感度为84.72%，略高于上述研究，可能是因本研究采取ROC曲线分析可连续性、动态分析诊断效能，更接近实际诊断价值。

Angptl2是一种分泌型糖蛋白，具有广泛性生物学作用，绝大多数介导血管生成，少量参与血糖、脂质代谢过程[13]。病理研究显示，Angptl2能通过加重胰岛素抵抗，促进血小板凝聚进一步恶化机体炎症反应[14]。炎症反应与CHD发病关系密切，已得到临床广泛性证实。因此推测：Angptl2可能通过激活、强化机体炎症反应过程加重冠脉血管斑块形成，诱发CHD发生。本研究检测发现，CHD患者普遍存在血清Angptl2高表达状态，且不同冠脉病变类型患者间表达存在显著差异（P＜0.05）。Angptl2与Toll样受体4配体结合后可通过整合素有关途径大量激活炎症细胞因子表达，继而产生抗血管内皮细胞损伤效应，促进血管壁重塑，介导动脉粥样硬化形成，且会增加斑块不稳定性，加重病情。学者何攀文等[15]研究显示，随CHD患者Gensini评分升高，血清Angptl2表达呈上升趋势。本研究结果显示，血清Angptl2表达与CHD患者Gensini评分呈正相关（P＜0.05），与上述研究结果近似，同时本研究还发现，血清Angptl2表达与冠状动脉病变支数存在密切关系，进一步ROC曲线分析显示，血清Angptl2诊断冠状动脉粥样硬化严重病变的AUC值为0.723，可为临床诊断提供参考数据。

AnxA1是重要炎症调控蛋白之一，在人体大多数组织细胞，尤其是单核细胞、粒细胞中呈强阳性表达，参与中性粒细胞/单核细胞、炎症代谢产物与血管内皮细胞的黏附过程[16]。学者霍倩倩等[17]采取RT-PCR技术、Westernblot探究AnxA1与颈动脉粥样硬化斑块间关系，发现无论是基因层面还是AnxA1蛋白表达层面，粥样硬化斑块患者均显著升高。与本研究结果一致，学者梁蓉[18]研究显示，AnxA1基因组异常改变、编码蛋白质失活与动脉粥样斑块稳定性关系密切。但以往研究中未见血清AnxA1对CHD诊断价值分析，本研究ROC曲线分析结果表明，血清AnxA1诊断冠状动脉粥样硬化严重病变的敏感度为84.72%，特异度为66.67%，能有效诊断冠状动脉粥样硬化，但特异性欠佳，可能存在误诊情况，临床需首先排除肿瘤、其他血管疾病或辅助其他诊断手段。

综上可知，CHD患者存在血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2异常表达情况，且与冠脉病变严重程度关系密切，3者联合检测在CHD患者冠脉严重病变诊断中价值最高，可为临床诊断、完善治疗方案提供数据参考。