稽留流产细胞遗传学病因分析及生化指标检测的临床意义

龙驭云 汤欣欣 顾 莹 杨舒婷 孙玉华 金培芹

江苏省连云港市妇幼保健院 (222000)

稽留流产是一种妊娠早期发生的并发症[1]。部分女性甚至会发生多次稽留流产，严重影响女性的身心健康[2]。绒毛组织在细胞学上与受精卵及胚胎组织拥有相同的遗传背景[3]，对绒毛组织进行核型分析能够诊断胚胎核型。由于绒毛组织旺盛的分裂能力[4]，体外培养后能够满足核型分析所需要的细胞数目[5]。为从细胞遗传学的角度探究稽留流产的病因以及临床意义，本研究对稽留流产患者进行了核型及部分生化指标分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2015年1月—2017年3月本院就诊并确诊的稽留流产患者98例(观察组)。纳入标准：停经8周内经B超检查有胎心搏动，之后再经B超检查胎心搏动消失；妊娠期没有接受过药物保胎治疗。排除标准：人工流产史、病毒感染史。选择同期本院终止妊娠的早孕(对照组)。观察组年龄(34.3±1.9)岁(25～45岁)，孕周(8.3±0.4)周(6～11周)。孕妇均签署知情并同意书，本研究得到医院伦理委员会批准。

1.2 实验方法

两组均采用负压技术吸取绒毛组织[6]。绒毛组织用生理盐水清洗过后，一部分组织用于免疫组化技术检测人基质金属蛋白酶(MMP-9)、凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)表达；一部分组织应用G显带技术进行核型分析。

1.3 观察指标

统计细胞中染色体数目。使用Image-Pro Plus 6.0软件，对免疫组化的表达及表达分级进行统计分析。RT-PCR的结果由仪器自动显示。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 两组核型分析

观察组核型分析98例，其中42例分析失败；分析成功56例中，45，XO 6例，单体-常1例，三体35例，嵌合7例，缺失重复6例，易位1例；对照组核型均为44+XX或44+XY。

2.2 整倍体核型分析

进一步分析整倍体核型与临床诊断和生育史， 见表1。

2.3 非整倍体核型分析

非整倍体核型与临床诊断及生育史，见表2。

2.4 绒毛组织MMP-9、TSP-1表达

绒毛组织中MMP-9阳性率对照组高于观察组，而TSP-1表达水平低于观察组(P<0.05)，见表3。

表1 不同胚胎停育整倍体核型分析

表2 不同胚胎情况非整倍体核型分析

表3 两组绒毛组织中MMP-9、TSP-1表达对比(例)

3 讨论

稽留流产是一种常见的妊娠早期自然流产类型[7]，最具标志性的是稽留流产的死胎不会立刻排出体外，虽然不再继续胚胎发育，但仍停留在母体子宫内[8]。待孕妇产生流产样症状1～2月后停止发育的胚胎从孕妇体内排除[9]。人们对稽留流产的病因进行分析，找出了宫内感染、免疫反应、染色体异常等原因，其中染色体异常是众多研究人员所认同[10]。

在本研究中，观察组进行了98例核型分析，分析成功56例。对绒毛组织整倍体核型患者的一般资料进行临床分析，患者均出现了胚胎停育现象；而绒毛组织非整倍体核型患者，除胚停外，还出现了无胚芽、未见胎心等。这是因为在早期卵裂过程中发生染色体分离异常，导致每个细胞内染色体数目不再是44+XX或XY，是造成胚胎停育的重要原因[11]。染色体单体使得基因组无法进行有丝分裂，导致胚胎在早期发生流产。其他类型的染色体数目异常产生原因：自发突变；在配子形成过程中双亲的原始生殖细胞可能发生了异常减数分裂或有丝分裂；双受精[12]。

一些生化指标也能对稽留流产的诊断起到辅助作用。MMP-9表达过低会导致胚胎无法正常着床，以及着床后不能正常发育[13]。而TSP-1的高表达则会影响着床过程[14]。绒毛组织中的氧化应激反应失常也会导致胚胎停止发育[15]，最终引起稽留流产的发生。本研究中，对照组中的MMP-9阳性率高于观察组，而TSP-1表达水平低于观察组。映证了上述的研究观点。

综上所述，细胞遗传学分析能够对稽留流产进行病因诊断，MMP-9、TSP-1生化指标可起到辅助诊断作用，由于这种检测方法失败率较高，还需不断提高诊断技术水平，有望成为稽留流产的有效检测指标。