西安地区健康人群血清胃泌素-17生物参考区间的建立

陈慧昱，杨 光，陈健康，吴永昌，房 艳，邢瑞青，刘 杨，李 静，彭道荣

（1.空军军医大学西京医院检验科，陕西 西安710032；2.空军军医大学唐都医院肿瘤科，陕西 西安710038）

生物参考区间是解释检验结果、分析检验信息的基本尺度和依据。确立可靠的参考区间能为临床提供准确的实验室依据［1］，指导临床对患者或体检者进行诊断和治疗。临床上常见的胃部疾病有慢性萎缩性胃炎、胃溃疡、胃癌等。其中胃癌是我国常见的消化道恶性肿瘤，其病死率较高，早发现、早治疗对提高胃癌患者的生存率尤为关键［2］。目前，胃镜联合组织病理学检查仍用于胃癌的确诊，但由于其属于侵袭性的检测方法并且费用较昂贵，因此并不适用于胃癌高危人群的初步筛查［3］。近年来，血清学肿瘤标志物胃泌素-17等的检测已用于胃癌的早期筛查［4］。胃泌素-17可以经过胃粘膜的毛细血管而进入血液循环，它在血液中可以稳定存在，能够客观地反应胃粘膜的总体功能与状态。因此，血清胃泌素-17水平对慢性萎缩性胃炎、胃溃疡、胃息肉等胃部疾病也有重要的诊断与筛查价值。此外，幽门螺杆菌的感染与胃泌素-17水平也具有一定的相关性［5］。国内尚无胃泌素-17生物参考区间建立的相关报道，因此本文以西安地区健康体检人群为研究对象，按照ISO 15189实验室认可文件《血清胃泌素-17 ELISA法检测标准操作规程》要求，对西安地区10039例健康体检者进行血清胃泌素-17的检测，并对检测结果进行统计学分析和比较，以求建立本地区健康人群血清胃泌素-17的生物参考区间，为临床相关疾病的诊治提供帮助。

材料和方法

1 一般资料

收集2017年7月至2018年6月在西京医院进行健康体检者共计10039例，其中男性6073例，女性3966例；年龄l3～89岁，平均年龄45.5±11.5岁。纳入标准：按照NCCLS要求［6］，健康者的原则是乙、丙肝血清标志物、HIV、梅毒抗体检测阴性，心肺功能正常，血压正常，影像学检查正常，近期没有过量饮酒，没有服药、手术及住院治疗，无肥胖症，无家族遗传病史，排除消化系统疾病、慢性病及肿瘤的健康体检者。本次分析的10039例健康体检者均为西安及周边地区的常住居民。所有体检者均通过“知情问卷调查”，为符合NCCLS要求的健康体检者。

2 仪器与试剂

检测仪器为基因有限公司生产的ELx808酶标仪，检测试剂由必欧瀚生物技术有限公司提供。在此检测试剂盒中，制造商使用商业合成的胃泌素-17多肽（Gastrin I human，G9020，Sigma Stlouis Missouri USA）作为标准品。该标准品的固定值为10，根据本实验室质控累积的结果，其测定结果浮动范围为10±0.3。

3 血清胃泌素-17的检测

受检者早7：30至9：30空腹抽血，采集3mL静脉血于真空干燥促凝管中，标本置于3000r/min离心机离心5min，取血清立即检测。应用ELx808酶标仪及必欧瀚生物技术有限公司的胃泌素-17检测试剂盒，采用双抗体夹心法（ELISA）进行胃泌素-17的测定。测定过程严格按照试剂的操作说明书及仪器的标准操作规程进行。

4 统计学处理

采用统计软件SPSS24.0对胃泌素-17检测结果进行统计学处理。先对所得数据进行正态性检验，若所得结果属正态分布，用±s表示正态分布数据，按±1.96s计算参考区间。若数据的分布属于偏态分布，用中位数（四分位数范围）［M（P25～P75）］表示，其参考区间为百分位数2.5%和97.5%的对应值。不同性别间比较采用Mann-WhitneyU检验，不同年龄组之间两两比较采用Kruskal-WallisH检验，P＜0.05说明差异有统计学意义。

结 果

1 西安地区健康人群血清胃泌素-17水平的频数分布

10039例健康体检者血清胃泌素-17检测结果呈偏态分布（见图1），故应采用非参数检验进行统计分析。

图1 健康人群血清胃泌素-17水平频数分布图

2 不同性别健康人群血清胃泌素-17水平及生物参考区间（pmol/L）

由于胃泌素-17检测结果属偏态分布，百分位数2.5%和97.5%的对应值为其参考区间。男性参考区间为0.1～29.52 pmol/L，女性参考区间为0.1～41.89pmol/L。总体参考区间为0.1～32.7 pmol/L。不同性别之间差异非常显著，有统计学意义（P＜0.01）（见表1）。

表1 不同性别健康人群血清胃泌素-17水平及参考区间（pmol/L）

3 各年龄组血清胃泌素-17检测结果的比较

对健康体检者按年龄进行分组，由于＜20岁年龄组和≥80岁年龄组人数较少，不具备建立生物参考区间的条件，因此这两组体检者血清胃泌素-17水平不参与组间比较。对其余各年龄组的检测结果进行两两比较，发现各组间胃泌素-17水平不全相同，部分组间差异有统计学意义（P＜0.05），其中包括：20～29岁组与40～49岁组、50～59岁组、60～69岁组、70～79岁组的比较（P＝0.015、P＜0.001、P＝0.001、P＜0.001）；30～39岁组与40～49岁组、50～59岁组、60～69岁组、70～79岁组的比较（P＜0.001、P＜0.001、P＜0.001、P＜0.001），差异有统计学意义（见表2）。

表2 各年龄组健康人群血清胃泌素-17水平及参考区间（pmol/L）

4 相同性别各年龄组之间及同年龄组不同性别之间血清胃泌素-17检测结果的比较

同性别各年龄组之间及同年龄组不同性别之间胃泌素-17检测结果两两比较（＜20岁年龄组和≥80岁年龄组不参与比较），部分组间差异有统计学意义（P＜0.05），其中包括：同一年龄组中，30～39岁、40～49岁、50～59岁、60～69岁及70～79岁组中男女两性之间比较（P＝0.005、P＝0.001、P＜0.001、P＝0.001、P＝0.004），差异有统计学意义。男性中，30～39岁组与40～49岁组及50～59岁组的比较（P＝0.015、P＝0.009）；女性中，20～29岁组与50～59岁组、60～69岁组及70～79岁组的比较（P＝0.016、P＝0.009、P＜0.001）；30～39岁组与50～59岁组、60～69岁组及70～79岁组的比较（P＝0.002、P＝0.002、P＜0.001）；40～49岁组与70～79岁组之间的比较（P＝0.034），差异有统计学意义（见表3）。

表3 两性不同年龄段健康体检者血清胃泌素-17水平（pmol/L）

讨 论

胃泌素是一种多肽类的胃肠激素，具有刺激胃酸分泌、促进胃粘膜再生、调节胃肠功能等作用，空肠及十二指肠少量分泌，主要由胃窦部的G细胞分泌，其中80%～90%是胃泌素-17。胃内pH值及胃窦部G细胞的数量影响胃泌素-17的分泌水平，胃酸可抑制胃窦G细胞释放胃泌素-17，胃酸与胃泌素-17之间存在负反馈调节机制，当胃窦萎缩时，胃泌素-17水平下降［7］。它是反应胃功能的敏感指标。有研究发现，胃泌素-17可以反应胃黏膜的状态，若胃部黏膜发生病理性的改变时，血清中的胃泌素-17水平也会发生变化［8-9］。在萎缩性胃炎、胃溃疡、胃息肉、胃癌等疾病中，血清胃泌素-17均存在高表达的状态，且表达呈递增趋势。这可能与胃粘膜病变的严重程度有一定的相关性，当胃粘膜组织的改变越接近胃癌粘膜组织的状态时，血清中胃泌素-17的水平升高越明显［10］。这就为胃泌素-17在胃癌及癌前病变的筛查中能够发挥出重要的作用提供了理论支持。也有研究表明，萎缩性胃炎合并高胃泌素的状态对于胃黏膜的癌变也有一定的促进作用［11］。因此，对血清胃泌素-17水平进行监测，可以间接反应胃黏膜的状态及功能，可称为是胃粘膜状态的“血清学活检查”。

胃泌素-17是一个非特异性的肿瘤标志物，只能用作胃癌等肿瘤的辅助筛查诊断指标，其升高不一定是患有肿瘤，其结果正常也不能绝对排除疾病。为提高胃癌等肿瘤疾病早期诊断的灵敏度，应使用多种肿瘤标志物联合检测［12］，且对肿瘤疾病的综合判断应结合临床其他症状，最好能做到定期监测。虽然胃泌素-17的检测不能作为胃癌的确证实验，但其检测方便，可用于大规模健康人群的筛查实验。若临床初筛发现胃癌可疑病例，即可及时通过胃镜及病理检查以确诊，就能够达到对疾病早发现、早治疗的效果，从而降低病死率。目前，这项检测已被芬兰、日本、挪威等国家用于对胃癌及癌前病变的筛查［13］。确立血清胃泌素-17的生物参考区间，即成为该筛查指标的首要任务。

由于地域、生活环境、生活方式、饮食习惯及检测方法的不同，均可影响胃窦部G细胞对胃泌素-17的分泌，造成健康人群血清胃泌素-17水平的检测结果存在差异。各个实验室有必要根据当地的人群特点选择合适的检测方法建立相应的参考区间。本研究中西安地区健康人群血清胃泌素-17水平呈偏态分布。表1的统计结果显示：西安地区健康人群不同性别之间血清胃泌素-17水平存在差异。本研究发现按年龄分组，部分组间两两比较结果差异也具有统计学意义。说明不同性别及年龄的胃粘膜状态不同，胃泌素-17的水平也不同。因此，各实验室应按性别及年龄分别建立胃泌素-17的生物参考区间。

健康人群参考区间的建立是应用该项检测指标的首要条件，此范围只代表一个特定的人群。参考区间的建立是实验室为临床提供服务，保证质量的重要任务之一。本研究以西安地区的健康人群为基础，考虑到性别，年龄因素的影响，建立了符合西安地区人群特征的血清胃泌素-17水平参考区间，为临床相关疾病的诊治提供了可靠的实验室依据，对胃部炎性疾病、癌前病变及胃癌的早期筛查具有重要意义。