茶基料栽培长根菇技术初探*

蒋玉兰 ，张海华 ，潘俊娴 ，吕杨俊 ，刘 均 ，朱跃进 ，张士康 **

（1.中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院，浙江 杭州 310016；2.浙江省茶资源跨界应用技术重点实验室，浙江 杭州 310016）

长根菇（Oudemansiella radicata），又名长根金线菌 （Collybia radicata），隶属于真菌界 （Eumycetes） 担子菌门 （Basidiomycota） 层菌纲 （Hymenomycetes） 伞菌目 （Agaricales） 白蘑科 （Tricholoma taceae） 小奥德蘑属（Oudemansiella），是珍稀的食（药） 用真菌之一[1]。长根菇作为1种木腐菌，其分解木质纤维的能力很强，生产中栽培主料有杂木屑、棉籽壳、甘蔗渣、玉米芯等农副产物，栽培辅料有麸皮、米糠、玉米粉等[2]，自然环境中常见于油茶树林[3]。关于茶园栽培食用菌的研究，国内外能查到的文献资料非常有限，为数不多的研究主要集中在云南、福建、贵州的茶园和食用菌复合栽培技术方面，杨国育[4]等研究了在云南大叶种茶园套种香菇大山18号和黑木耳云耳1号，结果表明茶树和食用菌复合种植模式可显著提高茶园经济效益。茶园套种食用菌可以提高土壤肥力，改善土壤物理性状，促进茶树生长，提高茶叶品质，防治水土流失，而且经济效益明显高于纯茶园[5]。

目前，茶产业中以名优茶为主的产业结构增值几乎触顶，但茶园修剪枝、茶叶加工以及精深加工副产物等茶资源却未得到充分利用，食用菌产业受制于日益增高的林木资源和劳动力价格，生产效益空间面临紧缩。鉴于茶产业和食用菌产业发展面临的突出问题，结合国内外相关研究，课题组设计“茶+食用菌”的生态循环课题，集成“茶园-食用菌-茶园”的资源循环技术，在以茶渣为基料栽培食用菌、菌种筛选[6]、茶枝替代部分木屑栽培长根奥德蘑[7]等方面取得很多研究成果。本文以课题组前期工作为基础，进一步研究茶基料栽培长根菇技术，以期为茶资源充分增值转化，降低食用菌生产原料成本或增加原料可选择性，提高茶农、菇农经济效益提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

长根菇母种菌种由杭州华丹农产品有限公司提供；木屑、棉籽壳、麸皮等原料均购于杭州市下城区石桥乡食用菌场菌种站；碳酸钙、糖均为市售；安吉白叶1号茶树修剪枝由浙江安吉宋茗白茶有限公司等提供；栽培基地由杭州华丹农产品有限公司提供；PDA培养基等试剂购自浙江美迪康贸易公司。切碎机（MQF-500型），购自福建省古田县顺利食用菌机械制造厂；粉碎机（MQ-400型），购自遵化市力丰机械厂；拌料机（WF-70型）、装袋机（WP型）、常压蒸汽灭菌锅（WSG-320型），购自福建省古田县顺利机械制造有限责任公司；接种箱（ZLK.2716型），购自北京卓乐康科技有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 长根菇栽培种制作

长根菇母种（图1所示），来源于组织分离培养的野生标本，采用PDA试管培养基培养。配方：马铃薯200 g、葡萄糖20 g、琼脂15 g～20 g，自来水1 000 mL，自然pH。培养基经灭菌后，放在37℃恒温箱培养24 h，无菌生长的可使用。

长根菇原种和栽培种（图1所示），采用统一配方，具体为棉籽壳45%、木屑33%、麸皮20%、碳酸钙1%和糖1%。具体操作如下：定量称量配方中的主辅料，先将主料棉籽壳（预湿）和木屑充分混匀，加水搅拌，再依次混入麸皮、糖和碳酸钙，控制水分含量在65%左右，充分搅拌混合，使用装袋机装入聚乙烯菌种袋（直径10 cm、高度25 cm，菌袋为圆柱体状） 中，于常压105℃蒸汽灭菌12 h，冷却，接种PDA母种，在温度25℃、相对湿度60%～70%、黑暗条件下培养，至菌丝完全覆盖培养基表面熟化后即可使用。

1.2.2 茶树修剪枝处理

图1 长根菇母种、原种和栽培种（从左至右）Fig.1 The mother culture,mother seed and cultivated species of Oudemansiella radicata(from left to right)

茶树枝条按照茶园正常管理程序修剪，事前关注天气情况，选择1周或5 d内天气无雨为宜，枝条修剪长度以茶园管理实际需要为准，一次修枝，整齐叠放，用绳或布条单独捆绑，每捆鲜重40 kg～50 kg，于阳光下曝晒以实现快速干燥，干燥后保存于通风、干燥的仓库内待用，保存中忌雨水，并且仓库底部需垫放垫板以防茶枝霉变。茶枝经自然晒干后进行规格统一的粉碎处理，过孔径5 mm～15 mm的筛网后所得茶枝粉碎料装袋，并置于通风干燥仓库中保存待用。

对茶枝进行农残、主要危害重金属（铅、镉、铬、铜）等安全指标评价（GB/T23204-2008），同时进行粗蛋白 （GB/T6432-1994）、粗纤维 （GB/T8310-2013）、有机碳（重铬酸钾氧化容量法[8]）、有机氮（NY/T2017-2011）、木质素（Klason法[9]）、茶多酚（GB/T 8313-2008） 和锌[10]7个主要营养指标测定，计算茶基料的C/N比值。

1.2.3 茶基料栽培长根菇菌袋制作与接种

参照表1配方制作茶基料菌袋，共进行5批次试验，各批次的每个配方分别制作菌袋800个，并于同一时间制袋、灭菌、接种，于同一地点相同环境下培养。根据生产季节安排菌袋制作，先将棉籽壳于自然温度下浸泡预湿8 h，然后依次混入木屑、茶枝粉碎料、麸皮、糖和碳酸钙，加水后充分搅拌至含水量65%、pH 6.5左右，装料至聚乙烯菌袋（直径17 cm、高度34 cm） 中，控制每袋湿料约1.0 kg左右，袋装完成后在常压105℃蒸汽灭菌12 h，冷却至自然温度后，在洁净接种室内接种等量长根菇栽培种。

表1 茶基料栽培长根菇的菌袋配方Tab.1 Formulation of fungi bags for Oudemansiella radicata grown on culture with tea by-products

1.2.4 发菌管理

接种结束后转移至发菌室发菌，控制发菌室条件为温度20℃～25℃、空气相对湿度60%～70%、暗光。7 d～10 d后翻堆检查1次菌袋，如发现杂菌污染，及时将其清理，同时将菌袋上下位置互换。发菌15 d以后菌丝生长速度加快，呼吸旺盛，可适当松动袋口套圈棉塞以增加供氧。40 d～50 d菌丝长满全袋，再经25 d后熟期，在室外最低气温达到15℃以上时，可进行出菇管理。在发菌室发菌期间，随时观察并记录菌丝发育情况，待菌丝开始萌发后，从各配方菌袋中随机挑选菌丝洁白、生长良好的菌袋，记录菌丝生长，待菌丝萌发至菌袋环颈处时开始划线，并每隔5 d划线1次，同时记录菌丝萌发、菌丝长满1/2菌袋所需时间，以及菌丝长满菌袋所需时间。

1.2.5 出菇管理和生物学效率

待菌丝长满菌袋后进行覆土出菇，将菌袋转移至基地大棚内进行室内出菇管理，大棚室内覆土出菇参数：沟深30 cm，将脱袋菌袋立于沟中，用土填埋，并覆土厚3 cm～5 cm，调节大棚内的温度、湿度以及光照等条件，并维持土壤湿度在80%以上，随时记录大棚内温度、湿度等条件和整个出菇期的产量，计算生物学效率。同时记录因杂菌污染、破袋等引起的淘汰菌袋数量，计算淘汰率。生物学效率为食用菌鲜重除以培养基料干重乘以100%。菌袋淘汰率（P） 公式为：

式中：n1表示破袋菌袋、污染杂菌菌袋数量；n表示试验菌袋总数。

1.2.6 茶基料栽培长根菇稳定性试验

确定适宜的茶基料配比后，进行2个批次的小试生产以确定配方的生产稳定性，每批次制作菌袋10 000个，采用表1中T0配方作为对照，菌袋制作、接种、发菌和覆土出菇方法同上，其中灭菌条件调整为常压115℃蒸汽灭菌15 h。

对采收的长根菇子实体营养成分和主要农残进行分析，具体参照检测方法为：农残（毒死蟑、乐果、敌敌畏、百菌清）测定参照NY/T761-2008；粗纤维含量测定参照GB/T5009.10-2013；粗蛋白含量测定参照GB/T5009.5-2013；总糖含量测定参照GB/T15672-2009；镉含量测定参照 GB/T5009.15-2014；总灰分含量测定参照GB/T12532-2008；水溶性灰分含量测定参照GB/T5009.4-2016；铁含量测定参照GB5009.90-2017； 锌 含 量 测 定 参 照 GB5009.14-2017；硒含量测定参照GB5009.93-2017；钙含量测定参照 GB5009.92-2017。

1.3 数据处理

同一试验的观察记录结果，以不同批次作为重复，单一批次作为1个样本，进行统计处理，以样本平均值表示。同一样品的化学检测均重复3次，取平均值作为结果。

2 结果与分析

2.1 茶树修剪枝安全和营养成分分析结果

茶树修剪枝安全和营养成分分析结果见表2。

由表2可知，茶枝农残和主要危害性重金属检测结果均符合《NYT1935-2010食用菌栽培基质质量安全要求》，因此可作为食用菌栽培基质。

根据长根菇生长对有机碳、有机氮、粗纤维、木质素等主要营养需求，并且考虑茶多酚的抑菌可能性，茶枝相关成分的测定结果如表2所示。茶枝中粗纤维和粗蛋白含量均较高，其中木质素含量占粗纤维含量的37%，说明茶枝的营养具有适宜长根菇生长的可能性；茶多酚含量较低，不足2%，且现有研究表明茶多酚主要作用是抑制细菌生长[11]，推论茶枝中的茶多酚对长根菇菌种的生长负面影响可能较小；茶枝中含有锌27.3 mg·kg-1，而人体吸收利用锌后具有增强智力的功效，而此部分锌能够被长根菇吸收利用并贮藏；茶枝C/N为14.58，略低于长根菇生长所需的约为20的C/N，因此需通过使用其他高C/N的原辅料进行调配。

表2 茶枝农残、主要重金属和营养成分检测结果（干基）Tab.2 Detection results of pesticide residues,major heavy metals and nutritional ingredients of tea branches（dry base）

2.2 不同配方茶基料对长根菇菌丝发育的影响

采用不同配方茶基料栽培长根菇，进行室内发菌管理，长根菇发菌及菌丝生长情况如图2所示。不同配方的茶基料菌袋对菌丝发育的影响见图3。

图2 室内发菌和菌丝生长情况Fig.2 Conditions of development and growth of mycelium indoor

图3 茶基料菌袋不同配方对菌丝发育的影响Fig.3 Effects of different formulations of fungi bags with tea byproducts on mycelium development

从图3中可以看出，T0、T1、T2、T3、T4配方菌丝萌发用时基本一致，为3 d；T0、T1和T2配方菌丝长满菌袋顶面用时一致，为7 d，T3和T4配方菌丝长满菌袋顶面比T0配方晚2 d～3 d；T1、T2、T3、T4配方菌丝长满1/2菌袋用时均比对照配方T0长；T1、T2、T3、T4配方菌丝满袋用时比T0配方迟。对发菌过程整体观察发现，与T0配方相比，T1配方和T2配方菌丝生长情况与T0配方基本相同，菌丝生长速度快，菌丝粗壮、浓密、洁白；T3、T4配方菌丝生长较慢，菌丝形态与对照组基本相同。覆土15 d左右出现咖啡色菇蕾，见图4。

图4 长根菇子实体Fig.4 Fruiting bodies of Oudemansiella radicata

从图4可以看出，子实体生长发育良好，每潮采收后及时清理菇体残留，用土补平，休养3 d后增湿促进下潮菇形成。

2.3 长根菇生物学效率及品质分析

采用室内出菇的方式，茶枝对长根菇生物学效率的影响见表3。

表3 茶枝对长根菇生物学效率的影响Tab.3 Effect of tea branches on the biological efficiency of Oudemansiella radicata

从表3中可以看出，与对照配方T0相比，T1、T2、T3配方生物学效率均比对照组有所提高，T2配方生物学效率最高达83%，T4配方生物学效率较低，为51%。同时记录因杂菌污染、破袋等引起的淘汰袋数量，计算淘汰率。生产小试中长根菇菌丝生长和出菇情况见表4。

由表4可以看出，T2配方无论生物学效率还是淘汰率方面均较T0配方有优势，在菌丝长势和生长时间上相当，且2批次试验结果差异不大，说明T2配方可作为生产配方备选。对长根菇子实体营养成分及主要农残安全指标进行了分析，结果见表5。

表4 生产小试中长根菇菌丝生长和出菇情况Tab.4 The fruiting and growth of Oudemansiella radicata mycelium during production test

表5 长根菇子实体营养成分及主要农残情况（干基）Tab.5 Nutritional ingredients of Oudemansiella radicata fruiting body and its major agricultural residues(dry basis)

从表5结果来看，T2配方和T0配方获得的长根菇子实体的主要农残（毒死蟑、乐果、敌敌畏、百菌清）均在方法检出限以内，符合相关标准要求，再次验证了栽培基料的质量安全性。从营养成分分析结果看，粗蛋白、粗纤维和总灰分以T2配方高，总糖以T0配方高，这些营养成分的差异推测主要是因为基料差异所致，进一步推测茶基料的应用可以影响长根菇子实体的营养组分结构。

3 小结

通过测定茶枝农残和主要危害性重金属安全指标，为茶基料作为长根菇栽培基质辅料把好安全第一关。进一步分析茶枝营养成分，较高含量的粗纤维和粗蛋白为茶基料栽培长根菇提供了可能性。根据其他学者研究结果表明，本研究所选用的茶枝中茶多酚含量不足2%，可能不会抑制长根菇菌丝生长。考虑到茶基料菌袋中的碳源、氮源和矿物质元素对长根菇菌丝生长及发育的影响，通过调整棉籽壳、麸皮、糖及碳酸钙等原辅料，使得菌袋中C/N约为20，满足长根菇的营养需求。以同一试验的不同批次作为重复，观察记录菌丝生长和发育情况，结合长根菇的生物学效率和菌袋淘汰率，确定T2配方即茶枝替代率10%为最佳长根菇生长的茶基料配方。进行了2批次、每批次10 000袋茶基料栽培长根菇稳定性生产试验，并对长根菇子实体进行了营养成分和主要农残安全指标分析，进一步推测茶基料的应用会影响长根菇子实体的营养组分结构。虽然本研究得出茶园中茶和长根菇生态循环栽培模式具有可行性，但因农业生产季节性关系，技术熟化尚待后续大量工作的支撑，产业化应用任重道远，有待继续努力。