连续超长切片在胃肠活检病理标本制片中的应用

杨 洋，季昌华，杨京彦，王海涛，于 洁，潘成然，周成军

迈新·技术交流

连续超长切片在胃肠活检病理标本制片中的应用

杨 洋，季昌华，杨京彦，王海涛，于 洁，潘成然，周成军

病理技术；连续超长切片；小标本制片

胃肠镜检查是目前发现胃肠道肿瘤及癌前病变最简便、最安全、最有效的方法，胃肠活检病理是诊断该类疾病的金标准。工作中，活体胃肠活检标本较小，在石蜡包埋中，一般采用6～8张切面铺片仅有限覆盖病变，造成小标本诊断信息丢失，影响诊断医师准确而全面的病理诊断；为呈现最大限度覆盖病变，避免造成小标本表浅病变诊断信息丢失。胃肠活检病理采用三段连续超长切片，行全切片铺片，最大限度覆盖病变，避免造成小标本诊断信息丢失。现将具体方法总结如下。

1 材料与方法

1.1标本外检胃、肠镜下活检病理标本(总体积大小0.4 cm×0.3 cm×0.3 cm)。

1.2方法(1)修刮蜡块：将包埋好的蜡块脱水盒边缘多于蜡边修掉；利用美工刀沿组织周围2 mm外石蜡四面边缘90°垂直修边，蜡块待切面呈矩形(各个边长不小于3 mm)，修边深度超过组织厚度即可。(2)第1次修片切片(图1)：缓缓修切蜡块，去除表面多余石蜡暴露组织即停，取下蜡块放入冰水中水化5 min后，连续切片7～9片(根据组织大小为一排数量)，40 ℃温水漂片，待组织展平后，左手持载玻片磨砂面，磨砂边略高于载玻片底端，略竖直放入温水中待捞片位置即可(不可全部浸入水中)，捞片从磨砂面向载玻片底端捞取组织并依次缓缓上提离开温水，将组织捞入载玻片上侧缘处。(3)第2次修片切片：将组织大部分修出，同“第1次修片切片”步骤，切第2排组织捞入载玻片长轴中间位置(图2)。(4)第3次修片切片：此时应将所有组织最大面修出，同“第1次修片切片”步骤，即最大面切一排，捞入载玻片长轴下侧缘。(5)晾净拷片染色：待载玻片水分晾干后移至拷片仪，65 ℃烤15 min后待组织和载玻片充分黏牢后行常规HE染色。

①②图1 第1次修片后切片 图2 第2次修片后捞片

2 结果

规范化取材、脱水、浸蜡、包埋、制片后，活体胃肠镜夹取下的标本较小，一般采用6～8张切面铺片仅有限覆盖病变；应用连续超长切片，行全切片铺片(图3、4)，最大限度覆盖病变，避免造成小标本诊断信息丢失。同时，有的部位会夹取多块组织，每个蜡块放≤4块组织，包埋后的组织利于在同一平面上，便于连续长切片、行全切片铺片。

③④图3 三段连续超长切片法所制切片 图4 三段连续超长切片法数字切片

3 讨论

胃肠镜检查的诊断依赖于病理诊断。胃肠镜活检取材组织较小，用擦镜纸包裹组织放入脱水盒内，在侧壁标注放入的块数，防止标本丢失遗落；同一标本若夹取多块组织，每个脱水盒放≤4块组织，包埋时所有组织包于同一平面便于制出3段连续超长切片。

取材时使用裁剪合适的擦镜纸包裹待检组织，防止组织遗失。单独脱水机处理程序时，可在第1缸95%乙醇中加入1/100体积的1%醇溶性伊红溶液，以使组织着色便于识别组织利于后续包埋、切片；若为各种组织混合脱水时在取材时用1%水溶性伊红将组织染色[1]。

胃肠镜活检若夹取到黏膜肌层，夹取下的组织因黏膜肌经固定液收缩呈“马蹄形”或“U形”，该类标本包埋面应按“马蹄形”或“U形”立埋；若为菲薄组织应按薄面立埋[2]。以便呈现组织全层结构，利于诊断医师做出准确全面的病理诊断。

蜡块修边时，应把脱水盒边缘石蜡用美工刀挂掉。组织四周2 mm外的石蜡用美工刀沿表面垂直按压，修出“矩形”，深度为组织厚度即可，太深时易造成组织太“凸”、与脱水盒粘连牢实度不足，过浅会造成切片逐步增大，增加制片难度。“矩形”便于连续切片，在漂片时连续成排便于3次切片即可完成该法制片，制片效率高。

载玻片进水过深，造成带水过多，导致组织移位，增加后续捞片难度。捞片完毕后，放于漂片仪前端竖直沥干载玻片与组织间多于水分，已减少因拷片时水的张力导致组织位移变形，组织形态结构发生变化，影响组织正确诊断。

运用连续超长切片，行全切片铺片，在胃肠等活检病理中最大限度覆盖病变，避免造成小标本表浅诊断信息丢失。

[1] 王德田, 董建强. 实用现代病理学技术[M]. 北京: 中国协和医科大学出版社, 2012:244-245.

[2] 丁 伟, 王德田. 简明病理学技术[M]. 杭州: 浙江科学技术出版社, 2014:16-18.

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1001-7399(2017)10-1160-02

时间：2017-10-23 13:30 网络出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20171023.1330.026.html

10.13315/j.cnki.cjcep.2017.10.026

接受日期：2017-04-16

山东大学第二医院病理科，济南 250033

杨 洋，男，技士。E-mail: sddxdeyyblkyy@163.com

周成军，男，副主任医师，通讯作者。Tel: (0531)85875340，E-mail: chengjunzhou@126.com