30%醚菌酯悬浮剂在黄瓜和土壤中的残留降解行为及安全使用技术

葛谦　苟春林　姜瑞

摘要[目的]评价30%醚菌酯悬浮剂在设施栽培黄瓜上使用后的残留行为及环境安全性。[方法]参照《农药残留试验准则》，通过气相色谱法检测分析黄瓜中醚菌酯含量，研究了30%醚菌酯悬浮剂在黄瓜上的残留动态。[结果]醚菌酯在银川、长沙、哈尔滨黄瓜中的半衰期分别为2.8～3.1、2.4～3.7、2.1～5.1 d，施药3、5、7 d黄瓜中醚菌酯的残留量均低于0.500 0 mg/kg，未超出国家限量标准。[结论]建议设施栽培条件下，最高制剂用药量270 g.a.i/ha（制剂0.09 g/m2），最多施药3 次，安全间隔期3～5 d。

关键词30%醚菌酯悬浮剂；黄瓜残留；消解动态；残留分析

中图分类号S481+.3文献标识码A文章编号0517-6611（2014）22-07422-04

黄瓜（Cucumis sativus Linn.）属葫芦科，是我国主要出口蔬菜品种之一。黄瓜对环境条件要求严格且抗逆性较差。随着栽培方式的变化，病虫害已成为黄瓜生产中突出的问题，严重影响黄瓜的产量和品质。病虫防控过程中不合理使用农药及安全间隔期过短已成为影响蔬菜农药残留超标的重要因素，农产品常常因农药残留问题而影响出口，黄瓜生产中如何控制农药残留以保证其食用安全已成为一个迫切需要解决的问题。

醚菌酯[1-3]是一种高效、广谱、新型杀菌剂。 其对由半知菌、子囊菌、担子菌、卵菌纲等真菌引起的多种病害具有很好的活性，如葡萄白粉病、小麦锈病、马铃薯疫病、南瓜疫病、水稻稻瘟病等病害。 醚菌酯不仅具有广谱的杀菌活性，同时兼具有良好的保护和治疗作用。与其他常用的杀菌剂无交互抗性，且比常规杀菌剂持效期长。 醚菌酯具有高度的选择性，对作物、人畜及有益生物安全，对环境基本无污染。有关其残留分析方法常用的有气相色谱法（GC）[4-7]、液相色谱法（LC）[8]、气相色谱-质谱联用法（GCMS）[9-10]和高效液相色谱-串联质谱法（HPLCMS/MS）[11]等。有关其消解方面，已有研究表明醚菌酯在苹果及其土壤中的消解半衰期分别为7～10和12 ～13 d[12]，在草莓及其土壤中的半衰期分别为 5～6和8～12 d[13]，但就其残留降解行为和对环境生态的风险评估等研究较少。为此，笔者参照《农药残留试验准则》，采用气相色谱法分析了银川、长沙、哈尔滨三地30%醚菌酯悬浮剂在黄瓜和土壤中的残留降解动态，旨在为该制剂在蔬菜安全生产中的应用提供借鉴。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1供试品种及试验地概况。供试黄瓜品种为板桥白，采用保护地栽培方式。试验于2012年6月至2013年9月在宁夏贺兰县洪广镇金鑫村、黑龙江省哈尔滨市、湖南省长沙市进行。宁夏平均日照时数830～1 550 h，平均气温20.7 ℃，平均降水量167～408 mm，土壤类型为淡灰钙土，pH 8.23；黑龙江平均日照时数2 808 h，平均气温16.0 ℃，平均降水量300～700 mm， 土壤类型为黑钙土，pH 5.76；湖南平均日照时数602～635 h，平均气温26.0～3.0 ℃，平均降水量450～510 mm，土壤类型为粘土，pH 6.20。

1.1.2药剂。供试农药30%醚菌酯悬浮剂由海南力智工程有限责任公司生产。

1.1.3仪器。Agilent 6890N气相色谱仪，配ECD检测器（美国安捷伦公司）；高速匀浆机（德国T18basic型）； 组织捣碎机（吉列布朗K600）；漩涡混匀器（德国MS3 digital）；电子天平（精度0.01 g，梅特勒-托利多国际股份有限公司）；旋转蒸发器（瑞士步琪R15）；离心机（TD40L，上海安亭科学仪器厂）；电热鼓风干燥箱（DHG9240A型，上海一恒科学仪器有限公司）。

1.1.4试剂。醚菌酯标准品：纯度98.0%，由德国DR公司提供；乙腈：色谱纯；石油醚：分析纯；正己烷：色谱纯；丙酮：色谱纯；去离子水；氯化钠：分析纯，140 ℃烘烤4 h；无水硫酸钠：分析纯，550 ℃高温干燥；弗罗里硅土（60～100目）：550 ℃活化，4%蒸馏水灭活；弗罗里硅柱：玻璃层析柱底部塞棉花，按1 cm无水硫酸钠、3 cm弗罗里硅土、1 cm无水硫酸钠分别装入填料，备用。

1.2方法

1.2.1消解动态试验。

1.2.1.1黄瓜样品。施药时期为黄瓜果实生长至成熟个体半大时，喷雾。施药时应保证用于动态试验的黄瓜均匀着药，对着药黄瓜进行标记。施药剂量为360 g.a.i/ha（制剂1 200 g/hm2），对水稀释（900 kg/hm2），施药后2 h、1、2、3、5、7、10、14、21、30、45 d采集黄瓜果实，每处理3次重复，处理间设保护隔离区，另设清水对照。随机在试验小区内采集12个以上无病害的黄瓜果实，将采集好的黄瓜田间样本用不锈钢刀切成1 cm大小的碎块，充分混匀，用四分法缩分样品，分成2份150.00 g的样品，分别装入封口样品容器中，于-20 ℃冰柜中保存。小区边行和每行距离两端0.5 m内不采样。

1.2.1.2土壤样品。选一块30 m2的地块，单独施药，施药浓度为制剂量0.15 g.a.i/m2（制剂0.5 g/m2），对水稀释（900 kg/hm2），施药后2 h、1、2、3、5、7、10、14、21、30、45 d采样，另设清水对照。随机选择12个采样点，用土钻取0～10 cm土层，每小区每次采集土壤样本2.00 kg，去除碎石杂草等杂物，混匀，四分法取200.00 g装入封口袋，于-20 ℃冰柜中保存。

1.2.2最终残留试验。设2个施药剂量：低剂量和高剂量。低剂量按制剂量180 g.a.i/ha（制剂600 g/hm2），高剂量按制剂量270 g.a.i/ha（制剂900 g/hm2）施药。各设3次施药和4次施药2个处理，每个处理3次重复，小区面积30 m2，按照试验设计时间开始第1次施药，施药间隔期7 d。采样时间距离最后一次施药的间隔时间为2、3、5、7 d。另设清水对照，处理间设保护带。黄瓜样本的采集同“1.2.1.1”，土壤样本的采集同“1.2.1.2”。

1.2.3分析方法。

1.2.3.1黄瓜样品的提取。称取10.00 g试样于50 ml离心管中，加入20.0 ml乙腈，用均质器在15 000 r/min下匀浆提取1 min，加入5.00 g已烘烤的氯化钠，摇匀，将离心管在3 000 r/min下离心5 min，取上清液10.0 ml于浓缩瓶中（相当于5.00 g试样量），待净化。

1.2.3.2土壤样品的提取。称取5.00 g试样于50 ml离心管中，加入20.0 ml乙腈，室温振荡1 h，加入5.00 g干燥氯化钠，摇匀，将离心管在3 000 r/min下离心5 min，取上清液10.0 ml于浓缩瓶中（相当于2.50 g试样量），待净化。

1.2.3.3净化。将盛有上清液的浓缩瓶置于旋转蒸发仪上，35 ℃水浴蒸发近干，加入2.5 ml丙酮+石油醚（10+90）待净化。将弗罗里硅柱用10.0 ml石油醚预淋洗，条件化，当溶剂液面到达吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液，用浓缩瓶接受洗脱液，用丙酮+石油醚（10+90）冲洗浓缩瓶后淋洗弗罗里硅柱，并重复1次。将盛有淋洗液的浓缩瓶置于旋转蒸发仪上，在水浴温度35 ℃下蒸发至干。用正己烷定容至5.0 ml，在旋涡混合器上混匀，待测。

1.2.3.4仪器分析条件。色谱柱：DB35MS色谱柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；模式：不分流；载气：N2；加热器：290 ℃；压力：27.41 Psi；总流量：101 ml/min；流量：3.2 ml/min；平均线速度：59 cm/s；柱箱温度：60～300 ℃；尾吹气流量：N2，60 ml/min；进样量：1.0 μl。在上述条件下，醚菌酯保留时间为10.6 min左右。

2结果与分析

2.1标准曲线将1.0 mg/ml醚菌酯标准溶液用正己烷稀释配制0.02、0.05、0.10、0.20、1.00、2.00 mg/L系列标准溶液，在“1.2.3.4”液相色谱条件下进行测定，以醚菌酯标准溶液浓度与峰面积作标准曲线。标样线性方程为：y=36 703x-255.95，相关系数（r）为0.999 8，其中y为醚菌酯峰面积，x为标准溶液浓度（图1）。

图1醚菌酯标准曲线2.2添加回收率与相对标准偏差分别在空白黄瓜和土壤样品中添加0.05、0.20、0.50 mg/kg 3个浓度的醚菌酯标准溶液，每个浓度5次重复，测定回收率。由表1可知，黄瓜中回收率为80.2%～114.0%，变异系数为2.1%～5.8%；土壤中回收率为95.1%～106.5%，变异系数为3.1%～7.3%，醚菌酯的最低检出量为2.5×10-2 ng，最低检出浓度为2.5 μg/kg。