pH敏感结肠宁靶向微丸的制备及体外释药性能评价

王英婷 ，韩 勇 ，王宏丽

（1．山东省济宁市第一人民医院，山东 济宁 272000； 2．山东省济宁市药品检验所，山东 济宁 272000）

溃疡性结肠炎是指大肠黏膜层与黏膜下层的炎症性病变，以溃疡糜烂为主，主要累及直肠和乙状结肠，亦可累及全部结肠。王翠云等[1]的研究证明，九芝堂结肠宁灌肠剂治疗溃疡性结肠炎临床症状缓解率高，短期内有效率高于柳氮磺吡啶，且不良反应发生率低，但需灌肠用药，增加了用药难度，也影响了患者的遵医行为[2]。口服结肠靶向给药方式易于接受，能减轻患者的痛苦和医护人员的负担[3]。笔者应用靶向技术对结肠宁进行了制剂延伸性研究，制备了口服结肠宁靶向微丸。

1 仪器与试药

Mini-250型实验室型低温挤出滚圆制丸机（筛孔 0．5 mm，深圳信宜特科技公司）；Mini-XYT型实验型多功能流化床制粒包衣机（深圳信宜特科技公司）；ZRS-8G型智能溶出度仪（天津因赛科技发展公司）；Agilent 1200型高效液相色谱仪；FA2004A型分析天平（上海天平仪器技术有限公司）；FD-1型真空冷冻干燥机（北京博医康实验仪器有限公司）。Eudragit®S100（德固赛化工股份有限公司）；结肠宁灌肠剂（九芝堂股份有限公司，批号为121231）；微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠（安徽山河药用辅料公司）；没食子酸对照品（中国食品药品检定研究院，批号为 110831-201106，纯度为 89．9% ）；纯化水（自制），甲醇（色谱纯，国药集团），其他试剂均为药用级。

2 方法与结果

2．1 色谱条件

色谱柱：Agilent TC-C18柱（250 mm × 4．6 mm，5 μm）；流动相：甲醇 -0．1% 磷酸溶液（5 ∶95）；柱温：35 ℃ ；流速：0．5 mL ／min；波长：273 nm；进样量：5 μL。

2．2 结肠宁药粉制备

取结肠宁灌肠剂，用 1～1．5倍纯化水稀释，-20℃冰冻成块，然后以真空冷冻机干燥，得结肠宁粉末。

2．3 微丸制备

取结肠宁粉末250 g、微晶纤维素550 g、交联羧甲基纤维素钠100 g和羧甲基淀粉钠100 g，充分混合，以纯化水为润湿剂，制备软材，经Mini-250型实验室型低温挤出滚圆制丸机制备微丸。工艺参数：挤出速度为 50 r／min，滚圆速度为 500 ～900 r／min，滚圆时间为8 min，进风温度为65℃，物料温度为45℃，干燥时间为45 min。

2．4 包衣

取290 g Eudragit®S100溶于500 mL异丙醇溶液中，得 A液。取58 g滑石粉，加入250 mL异丙醇中，搅拌至沸石粉被完全湿润，加入柠檬酸三乙酯29 g，用匀质化器匀化10 min，得混悬液B液。将B液倒入A液，匀质化均化，得包衣液，包衣过程中持续搅拌。将干燥好的500 g微丸放到洁净的Mini-XYT实验型多功能流化床进行包衣，分别包衣增重10%，15%，18%。

工艺参数：进风、排风转速均为2 000 r／min，物料温度上限为65℃，下限为 36℃，滚圆转速为 150 r／min，喷液速度为 300～400 mL ／L，雾化压力为 0．26 MPa。

2．5 释放度测定

酸中释放度：以0．1 moL／L盐酸溶液750 mL为溶出介质，注入每个溶出杯，实际量取的体积与规定体积的偏差不超过1%，待溶出介质温度恒定于（37±0．5）℃，取 0．5 g微丸，分别投入溶出杯中，供试品表面不应有气泡，启动转速为100 r／min，2 h后在桨叶顶端至液面的中点、距溶出杯内壁不小于6 mm处吸取溶液约 1 mL，0．45 μm 滤膜过滤，自取样至滤过应在 30 s内完成，检测液体中没食子酸的含量，计算微丸在酸中的释放度。

缓冲液中释放度：将上述酸液中加入温度为（37±0．5）℃0．2mol／L磷酸钠溶液250 mL，继续运转 45 min，在桨叶顶端至液面的中点、距溶出杯内壁不小于6 mm处吸取溶液约1 mL，0．45 μm滤膜过滤，自取样至滤过应在30 s内完成，测定溶液中没食子酸的含量，计算微丸在缓冲液中的释放度。

依据2010年版《中国药典(二部)》附录中释放度测定法，Q取85%。包衣增重10%，15%，18%对药物的释放有明显的影响，药物在人工胃液中（pH＝1）的释放度随着包衣膜的增厚而减少，包衣增重为15%时已达2010年版《中国药典(二部)》中释放度小于10%的要求，包衣增重18%的控释效果更佳。结果见表1。

3 讨论

丙烯酸树脂是由丙烯酸和甲基丙烯酸及其酯，以一定比例共聚而成的一类高分子聚合物，为《美国药典／国家处方集》收载品种，具有安全、稳定、惰性、无刺激、成膜性能优良、各型号间相容性好等优点，国外已广泛应用于薄膜包衣、骨架制剂、微球及透皮等给药系统[4]。以柠檬酸三乙酯为增塑剂时，膜的机械性能和成膜性较好[5]。本试验使用的主要包衣材料为Eudragit®S100，增塑剂为柠檬酸三乙酯，滑石粉为抗黏剂，比例分别为76．9%，15．4%，7．7%，包衣增重达到15%和18%时，在盐酸缓冲液和磷酸盐缓冲液中的释放度均已满足《中国药典》结肠靶向的标准要求，配比合理。

结肠靶向给药的生理学基础之一是胃肠道逐渐递增的pH梯度，从胃到直肠pH不断增大，结肠约为7．4，小肠相对稳定的转运时间一般为(224±55)min。pH依赖释药系统主要通过用pH敏感材料进行包衣的方法来实现。作为理想的结肠靶向包衣材料，能耐受胃酸而不溶解，在回肠末端中性或弱碱性条件下溶解或蚀解[6]。本研究中制备的包衣增重15%和18%的靶向结肠宁颗粒，在 pH＝1的环境下 2 h，释放度仅为 9．67%和 6．50%，说明该包衣颗粒不易受胃酸和胃运动的影响。液体环境由pH＝1转为pH＝6．8后45 min，包衣增重15%和18%药物颗粒的累积释放量迅速达到98．80%和98．87%，差异不显著。达到《中国药典》释放度不低于 Q值（85%）的要求，说明该药物在磷酸盐缓冲液中得到充分的释放，能实现在结肠的靶向释放。

以Eudragit®S100、滑石粉和柠檬酸三乙酯为包衣材料，包衣增重15%以上，能制备出比较理想的结肠宁靶向微丸，且采用挤出滚圆再包衣技术，生产工艺过程简单，易于推广。

[1]王翠云，陈继红，夏 斌，等．结肠宁保留灌肠治疗溃疡性结肠炎的疗效评价[J]．现代中西医结合杂志，2011，20（16）：1 962-1 963．

[2]方建青．影响溃疡性结肠炎药物治疗遵医行为相关因素病例对照研究[J]．中国药业，2012，21（1）：62-63．

[3]陈 重．口服结肠靶向给药系统的研究现状[J]．中国药业，2002，11（2）：76-77．

[4]张立超，胡晋红，连佳芳，等．丙烯酸树脂在薄膜包衣中的应用[J]．中国医院药学杂志，2001，21（5）：301-302．

[5]张国松，封传华，江 魏，等．增塑剂及膜材比例对 Eudragit L100／S100游离膜机械性能和透湿性的影响[J]．药学学报，2011，46（9）：1 144-1 149．

[6]邓子华，邓虹珠．中药口服结肠靶向给药系统的研究进展[J]．现代中西药结合杂志，2007，16（8）：1 150-1 152．