938例血红蛋白电泳检测结果的分析及临床意义

田玉玲，雷力民（.广西中医药大学附属瑞康医院检验科，广西南宁 5300；2.广西中医药大学，广西南宁 53000）

珠蛋白生成障碍性贫血（下称地贫）是一组由于生成血红蛋白（Hb）的珠蛋白肽链的结构异常或合成肽链速率的改变，而引起血红蛋白功能异常所致的疾病，是世界上最常见和发病率最高的一种遗传性血红蛋白病。虽然地贫的基因诊断已被应用于临床，成为大医院诊断地贫的金标准，但是由于其操作复杂，设备要求高，费用昂贵等原因，还难于在基层常规使用，基层医院仍以血红蛋白电泳筛查为主。全自动琼脂糖凝胶电泳系统通过与健康人的血红蛋白图谱进行比较，可发现异常血红蛋白区带如：HbH，HbE，HbBart s，HbS，HbD和 HbC等异常血红蛋白。由于其分辨率高、扫描定量准确，地贫的检出率和准确度将大大提高，对地贫具有较高的诊断价值。本文就2010年1月至2011年12月本院938例门诊进行婚前检查及产前检查人员的血红蛋白电泳的结果进行分析，报道如下。

1 材料与方法

1.1 检测对象 2010年1月至2011年12月本院门诊进行婚前检查及产前检查人员938例，年龄在23岁至35岁之间，其中男136例，占14.5%；女802例，占85.5%。

1.2 仪器与方法

1.2.1 仪器与试剂 法国Sebia公司生产的Hydrasys全自动血红蛋白电泳仪，扫描仪为EPSON1640SU型，试剂为Sebia公司提供的配套试剂。

1.2.2 方法 采用乙二胺四乙酸二钾（EDTA－K2）抗凝血标本，用生理盐水洗涤3次，吸取10μL红细胞加入150μL的溶血素中摇匀，取10μL溶血液注入加样孔，由仪器自动点样、电泳、染色、脱色及烘干。通过自动扫描仪分析Hb各组分含量。

1.2.3 正常参考值[1]成人男女 HbA2为2.0%～3.5%，并且没有出现异常血红蛋白带。如HbA2≤2.0%，出现异常血红蛋白带（HbH、HbBart′s），判为α地贫表型阳性；如 HbA2＞3.5%或出现异常血红蛋白带（HbF＞2.0%），则判为β地贫表型阳性。轻型β－地贫HbA2 3.5%～8%，HbF正常或轻度增加（不超过5%）；中间型β－地贫 HbF 5%～30%；重型β－地贫HbF 30%～90%[2]。若出现其他异常血红蛋白区带则判为异常血红蛋白病。

2 结 果

938例血红蛋白电泳结果中检出246例异常Hb，检出率为26.22%，包括α地贫表型阳性共计35例，检出率3.73%，占血红蛋白病的14.6%，其中 HbA2≤2.0%，出现 HbH 的33例；检出HbA2正常，出现HbH的2例。β地贫表型阳性206例，检出率21.9%，占血红蛋白病的83.7%%，在 HbA2＞3.5%206例合并HbF＞2.0%71例。检出其他异常血红蛋白病5例，检出率0.53%，占血红蛋白病的2.03%，其中HbE组3例，HbG组1例，HbD组1例。见表1。

表1 246例血红蛋白病检出结果统计

3 讨 论

广西是地贫高发区，婚前、产前人群进行地贫检查、筛查显得尤为重要。地贫是一组由于控制血红蛋白肽链mRAN的量缺乏，使蛋白链合成部分受抑或完全抑制而引起的遗传性溶血性贫血，分为α－地贫和β－地贫。本组检出α－地贫35例HbH病，有贫血、肝脾肿大，应对婚前、产前人群及早作产前检查，可避免重型α地贫（Hbart′s胎儿水肿综合征）患儿的出生。α－地贫标准型和静止型患儿在出生后3～6个月HbBart′s区带消失，实际上，在出生半年后用电泳法检出的只有HbH病。HbH病表现为血红蛋白电泳中出现HbH区带或HbH＋Hb－Bart′s区带。

β－地贫是由于β链合成的减少表现为HbA2增高，轻型β地贫HbF有时增高，中间型和重型β地贫HbF明显增高。全自动电泳系统对HbA2的分辨清晰，区带集中；同时对HF的分辨率也大大提高，高于一般醋酸纤维薄膜电泳，对HbF含量的敏感性，可基本代替HF碱变性试验，使Hb分析更简便，快捷[3]。本组检出β－地贫206例，对其中13例重型β－地贫的家系成员进行电泳及β地贫基因分析，10例首证者为重型β地贫，另2例首证者为重型β地贫合并HbE，他们的父母双方的HbA2定量在3.5%～5.0%范围，因此，对于夫妇双方均有HbA2升高者，要注意其子代可能有25%为重型β地贫，及早产前诊断，以避免产出中、重型地贫患儿。

目前，地贫的实验室检查手段以血细胞分析、血红蛋白电泳和基因诊断为主。血细胞分析用于筛查，进一步进行血红蛋白电泳，结果异常者才进行基因诊断以便确诊，但分子生物学技术要求条件高方法烦琐，尚不能广泛应用于各级医院特别是基层医院。因此，血红蛋白电泳在地贫的筛查中起到非常重要的作用。根据相关的报道，血红蛋白电泳筛查出的α、β地贫与地贫基因诊断符合率：α地贫表型阳性符合率60.5%，β地贫表型阳性符合率80%，HbH病符合率100%[4]。可以有效地筛查出高危夫妇（夫妇是同型地贫者），同时还可筛查出各种异常血红蛋白，如 HbBart′s、HbH、HbE、HbJ、HbG、HbCS等。其他异常Hb虽然数量较少，但仍不可忽视。本组病例共检出5例异常Hb患者，包括有3例血红蛋白电泳呈现HbA2高值，居21.3%～29.2%之间。由于人类的δ基因表达有限，其HbA2值一般不超过6%～8%，因此，这3例阳性标本所测“HbA2”值应考虑为合并有HbE的量，进而推测这3例阳性标本疑属 HbE/β－地 贫[5]。HbE/β－地 贫 患 者 父 母 分 别 携 带 有HbE及β－地贫基因，临床上可无症状或仅有轻度贫血，做基因分析后明确其诊断。2例疑属HbG及HbD，其血红蛋白电泳各呈现一条异常区带，位于HbA和HbA2之间。它们均是由于珠蛋白基因发生点突变，β－珠蛋白链上某种氨基酸被另一氨基酸取代，使血红蛋白的性质和功能发生变化而引起的疾病。本组资料显示，地贫在我省检出率较高，938例受检者中即检出246例，检出率为26.16%。其中β－地贫检出率最高，为206例，检出率为21.9%，其次为α－地贫，35例，检出率为3.73%，其他异常血红蛋白病5例，占的0.53%。

综上所述，血红蛋白病，尤其是地贫是本地区常见的遗传性疾病，目前除干细胞移植外，尚无其他有效的根治方法。本文通过对938例样本的检测，证明了运用血红蛋白电泳是研究和分析异常血红蛋白的有效方法，是诊断血红蛋白分子病不可缺少的检测手段。琼脂糖凝胶血红蛋白电泳法是最为简便的电泳方法，适用于临床应用，是血红蛋白病及早检出的必备条件。血红蛋白电泳检测方法的普及是降低此类疾病发病率的重要措施。应普及市、县级基层医院血红蛋白电泳技术的应用，积极开展有关血红蛋白病的宣传教育和人群筛查，强化婚前检查和产前检查，对降低本地区血红蛋白病的发病率、提高人口素质、减轻社会、家庭的经济负担均有着极为重要的意义。

[1] 王小芳.全自动血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的应用价值[J] 齐齐哈尔医学院学报，2009，30（23）：2923－2924.

[2] 张之南，沈悌.血液病诊断及疗效标准[M].3版.北京：科学出版社，2007：8.

[3] 段山，李洪义，陈争，等.中国南方α－地中海贫血基因突变型研究[J].中国实验血液学杂志，2003，11（1）：54－60.

[4] 黎彩鹏，陈泳言.血红蛋白电泳检测数据的进一步统计分析[J].中国优生与遗传杂志，2007，5（15）：39－40.

[5] 马骄，李毅，谢渊，等.贵州省江口县土家族β－地中海贫血血液学筛查[J].贵阳医学院学报，2005，（30）2：114－115.