贵阳地区健康体检人群珠蛋白生成障碍性贫血的筛查及基因型分析*

曾强武，刘　琼，严雪梅，王　琨，张望明，聂　映△

(贵阳中医学院第一附属医院：1.检验科；2.妇科，贵阳 550001)

珠蛋白生成障碍性贫血是由于珠蛋白基因突变而导致的一种遗传性血红蛋白病，主要包括α-珠蛋白生成障碍性贫血和β-珠蛋白生成障碍性贫血[1]。珠蛋白生成障碍性贫血是人类最常见的遗传病之一，据估计全球约5%的人群有珠蛋白基因变异，且每年约有7万新生儿为珠蛋白生成障碍性贫血携带者[2-3]。在临床上，珠蛋白生成障碍性贫血轻者可表现为无症状，重者则可表现为致残或致死，给患者及其家庭带来极大痛苦。珠蛋白生成障碍性贫血高发于热带及亚热带地区，在我国南方地区尤其是广东、广西、云南、海南及贵州等省份发病率较高[4]。当前，还没有经济、有效的方法治疗珠蛋白生成障碍性贫血。因此，做好珠蛋白生成障碍性贫血的人群筛查具有重要的意义。然而，针对贵阳地区普通人群进行珠蛋白生成障碍性贫血携带率的调查并不多。本研究以到本院进行常规健康体检的人群作为研究对象，可最为真实地反映贵阳地区人群珠蛋白生成障碍性贫血的携带率和基因型，研究结果将丰富我们对贵州地区珠蛋白生成障碍性贫血的认识，有助于该病的防控。

1　资料与方法

1.1一般资料选取2014年5-8月的不连续45 d中在本院进行常规健康体检的人员共3 561例为研究对象，年龄1～86岁。

1.2方法

1.2.1血常规检查采用Sysmex XT-1800i全自动血常规分析仪进行血常规操作，当血常规结果为小红细胞低色素情况时，即平均红细胞体积(MCV)<80 fL和(或)平均红细胞血红蛋白量(MCH)<27 pg，定义为珠蛋白生成障碍性贫血疑似病例。

1.2.2珠蛋白生成障碍性贫血基因分析使用血液基因组DNA提取试剂盒[天根生化科技(北京)有限公司]提取珠蛋白生成障碍性贫血疑似病例血液标本基因组DNA。采用广东凯普生物科技股份有限公司生产的检测试剂盒，对珠蛋白生成障碍性贫血基因进行分析，其中，常见的3种缺失型α-珠蛋白生成障碍性贫血基因分析采用Gap-PCR方法检测：--SEA、-α3.7、-α4.2，非缺失型α-珠蛋白生成障碍性贫血基因和常见β-珠蛋白生成障碍性贫血基因突变采用RDB方法：αCS、αQS、αWS、Cap、CD41-42、CD17、IVS-Ⅱ-654、CD43、CD31、-28、-29、-30、-32、βE、CD71-72、CD14-15、CD27-28、IVS-Ⅰ-1、IVS-Ⅰ-5、Int。所有操作严格按照试剂说明书进行。

2　结　　果

2.1血常规筛查结果经血常规筛选后，从3 561例体检血液标本中筛选出珠蛋白生成障碍性贫血疑似病例196例，检出率为5.5%(196/3 561)，其中男76例、女120例，中位年龄40岁。

2.2珠蛋白生成障碍性贫血基因分析对196例珠蛋白生成障碍性贫血疑似病例进行基因型检测，检出131例珠蛋白生成障碍性贫血患者，检出率为66.84%(131/196)，携带率为3.68%(131/3 561)。

2.2.1α-珠蛋白生成障碍性贫血基因分析在131例珠蛋白生成障碍性贫血患者中，α-珠蛋白生成障碍性贫血患者为65例，人群携带率为1.83%(65/3 561)。各基因突变型及构成比、携带率见表1。从基因突变类型来看，检出比例最高的基因缺失类型为--SEA/αα，共47例，构成比为72.30%(47/65)，携带率为1.32%(47/3 561)；而检出比例最高的基因点突变类型为αCS/αα，共7例，构成比为4.62%(3/65)，携带率为0.20%(7/3 561)。从临床表型来看，检出2例基因型为--SEA/αα-α3.7的中间型珠蛋白生成障碍性贫血症患者，其余的为轻型或静止型，并无重型检出。

2.2.2β-珠蛋白生成障碍性贫血基因分析共检出β-珠蛋白生成障碍性贫血患者60例，携带率为1.68%(60/3 561)。各基因突变型及构成比、携带率见表2。其中，检出比例最高的基因类型为βCD41-42/βN，共25例，构成比为41.67%(25/60)，携带率为0.70%(25/3 561)；而βCD17/βN基因型检出比例次之，共20例，构成比为33.33%(20/60)，携带率为0.56%(20/3 561)。从临床表型来看，检测出的所有β-珠蛋白生成障碍性贫血患者均为轻型。

表1　　α-珠蛋白生成障碍性贫血基因检测结果

表2　　β-珠蛋白生成障碍性贫血基因检测结果

2.2.3αβ复合型珠蛋白生成障碍性贫血基因分析共检出αβ复合型珠蛋白生成障碍性贫血6例，携带率为0.17%。其中，检出--SEA/βCD17及-α3.7/βCD17各2例，αWS/βCD17及--SEA/ β-29各1例。见表3。

表3　　αβ复合型珠蛋白生成障碍性贫血基因检测结果

3　讨　　论

本研究通过对3 561例常规健康体检人员进行珠蛋白生成障碍性贫血筛查及基因突变分析，初步了解了贵阳地区体检人群珠蛋白生成障碍性贫血携带率及主要基因突变类型。首先，通过血常规检查，筛选出小红细胞低色素的珠蛋白生成障碍疑似病例196例，检出率为5.5%。进一步的珠蛋白生成障碍性贫血基因分析确诊131例珠蛋白生成障碍性贫血，检出率为66.84%，携带率为3.68%。其中，α-珠蛋白生成障碍性贫血检出65例，携带率为1.83%；β-珠蛋白生成障碍性贫血检出60例，携带率为1.68%；αβ复合型珠蛋白生成障碍性贫血检出6例，携带率为0.18%。以上结果表明，这一地区体检人群中α-珠蛋白生成障碍性贫血和β-珠蛋白生成障碍性贫血的携带率相当。

本研究中，α-珠蛋白生成障碍性贫血主要基因缺失类型为--SEA/αα，构成比为72.30%；其次是-α3.7/αα及-α4.2/α。在β-珠蛋白生成障碍性贫血检测中，βCD41-42/βN、βCD17/βN两种突变类型是最多的，构成比分别为41.67%、33.33%。以上发现的基因突变类型与已有报道一致[5-7]。此外，本研究还发现6例αβ复合型珠蛋白生成障碍性贫血，携带率为0.17%，主要是βCD17与--SEA、-α3.7的基因组合。

珠蛋白生成障碍性贫血分布及人群携带率存在明显的地域差异性和民族差异性，在我国珠蛋白生成障碍性贫血高发区的广东、广西和海南，携带率可高达20%，而在我国西南的四川、云南及重庆等地珠蛋白生成障碍性贫血携带率可达到6%左右[8]。贵州地处中国西南腹地，是一个汉、苗及布依等18个民族世居的省份，各民族婚配习俗等的差异导致了不同民族或地区人群的珠蛋白生成障碍性贫血携带率差异较大。如一项对贵州省黔南州都匀市1 700例布依族中学生进行的珠蛋白生成障碍性贫血调查表明，α-和β-珠蛋白生成障碍性贫血携带率分别为10.8%和7.0%[9]。而同样是对少数民族进行珠蛋白生成障碍性贫血调查的另一项研究发现，贵州省黔东南地区苗族和侗族儿童的珠蛋白生成障碍性贫血总检出率分别为7.25%和7.01%[10]。本研究以贵阳地区常规健康体检人群为研究对象，该群体不是以到医院看病为目的，故可最大限度地代表贵阳地区普通人群，因而针对其进行调查研究所得的结果也最贴近真实值。从本次研究结果来看，贵阳地区珠蛋白生成障碍性贫血携带率为3.68%，明显低于贵州少数民族地区，也较湖南长沙地区珠蛋白生成障碍性贫血携带率(4.54%)低[11]，但较四川成都地区珠蛋白生成障碍性贫血携带率(3.43%)略高[12]。

此外，在本项研究中从196例地中海疑似病例中筛选出131例珠蛋白生成障碍性贫血，而被排除在外的65例小红细胞低色素患者也需要临床检验人员去关注。因为如果其中的某些患者携带有罕见的基因突变类型，则会造成漏诊或错诊。

综上所述，本次对贵阳地区常规健康体检人群的珠蛋白生成障碍性贫血筛查和基因分析，研究结果可较为真实地反映这一地区珠蛋白生成障碍性贫血携带率和基因型，将为婚配、产前诊断及政策制订等提供有意义的参考。