黄连解毒汤对动脉粥样硬化兔血脂水平及血清、斑块组织hs-CRP含量的影响

符春生，潘江慧 ，张古老，谢家和

（1.韶关市职业病防治医院康复科，广东 韶关 512026；2.赣南医学院第一附属医院心内科，江西 赣州341000；3.南昌大学研究生院医学部2010级，南昌330006）

冠状动脉粥样硬化心脏病已成为危害人类健康最重要疾病之一，其主要病因是动脉粥样硬化（AS）的形成。目前研究认为，AS形成的机制比较复杂，高脂血症是其发生的重要原因，慢性炎症贯穿其发展的全过程[1]。黄连解毒汤是中医解毒清热的名方，具有调脂﹑抗炎﹑抗免疫作用。本研究旨在探讨黄连解毒汤抗AS的作用及其机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1）动物：健康日本雄性大耳白兔24只，体质量（2.0±0.2）kg，年龄 6 个月左右，由赣州畜牧研究所提供。

2）药品与试剂：黄连、黄柏、黄芩、栀子购于赣州医药公司，胆固醇购于湖南衡阳同仁化工厂，蛋黄粉购于安徽合肥康德食品化工厂，猪油购于赣州市农贸市场。高敏C反应蛋白（hs－CRP）ELISA试剂盒购自上海天呈生物制品有限公司，羊抗兔IgG购于武汉博士德生物工程有限公司。

3）主要仪器：日本OLYMPUS公司生产的全自动生化分析仪。

1.2 实验方法

1）黄连解毒汤的制备：将黄连、黄柏、黄芩、栀子以 3∶2∶2∶3 的比例煎煮，分 2 次煎煮，第 1 次 60min（并过滤），第2次30min（并过滤），合并2次滤液，浓缩至1 g·mL-1，保存4℃冰箱备用。

2）分组与造模：将24只大耳白兔在适应性喂养7 d后，按随机数字表法分为3组，即正常对照组、模型对照组、黄连解毒汤组，每组8只。正常对照组饲普通标准饲料，模型对照组、黄连解毒汤组先导管球囊损伤兔左侧颈总动脉并喂饲高脂饲料（15%蛋黄粉、5%猪油、1%胆固醇、80%基础饲），每日每只予100 g[1-2]；黄连解毒汤组同时每天灌胃黄连解毒汤液3mL·kg-1，而正常对照组、模型对照组给予等量生理水灌胃。

3）观察指标与检测方法：喂养12周后停药禁食12 h，耳缘静脉取血10mL，5mL用于做血脂检测，检测指标主要为 TC、TG、LDL-C、HDL-C；5 mL 用ELISA测定血清hs-CRP含量。同时用10%乌拉坦耳缘静脉注射麻醉，分离左颈总动脉斑块组织，采用免疫组织化学法测定组织hs-CRP含量，并肉眼观察颈动脉病理学改变情况。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 血脂水平检测结果

3组间血脂水平比较差异均有统计学意义（P<0.01）。模型对照组﹑黄连解毒汤组血脂水平均显著高于正常对照组（P<0.01），黄连解毒汤组血脂水平显著低于模型对照组（P<0.01）。 见表 1。

表 1 3 组血脂水平比较 ±s，c/（mmol·L-1）

表 1 3 组血脂水平比较 ±s，c/（mmol·L-1）

*P<0.01与正常对照组比较；△P<0.01与模型对照组比较。

组别 n TC TG LDL-C HDL-C正常对照组 8 1.72±0.86 1.16±0.56 1.06±0.50 0.46±0.21模型对照组 8 22.08±7.56* 5.67±1.78* 17.01±2.25* 3.12±1.20*黄连解毒汤组 8 8.26±1.89*△ 2.28±0.98*△ 4.05±0.91*△ 5.21±2.09*△

2.2 血清及斑块组织hs-CRP含量检测结果

3组间血清及斑块组织hs-CRP含量比较差异均有统计学意义（P<0.01）。模型对照组﹑黄连解毒汤组血清及斑块组织hs-CRP含量显著高于正常对照组（P<0.01），黄连解毒汤组血清及斑块组织hs-CRP含量显著低于模型对照组（P<0.01）。见表2。

表2 3组血清及斑块组织hs-CRP含量比较 ±s

表2 3组血清及斑块组织hs-CRP含量比较 ±s

*P<0.01与正常对照组比较；△P<0.01与模型对照组比较。

Hs-CRP含量血清 ρ∕(mg·L-1） 斑块组织∕%正常对照组 8 0.96±0.42 1.08±0.56模型对照组 8 21.91±5.02* 45.21±11.12*黄连解毒汤组 8 7.23±4.02*△ 20.06±5.06*△组别 n

2.3 颈动脉病理学改变情况

肉眼可见正常对照组内膜光滑，无斑块形成；模型对照组血管表面粗糙，内膜面散在不规则隆突斑块，颜色为瓷白色；黄连解毒汤组血管内膜隆突斑块减少，颜色浅黄。

3 讨论

目前认为多种机制参与冠状AS的发病，如脂质浸润、炎症反应、损伤应答等。高脂血症是其发生的重要原因，尤其是高LDL-C，它可以激活内皮细胞和单核细胞，并使单核细胞吞噬脂质形成泡沫细胞，导致斑块的形成[3]。同时A S的发生是一个非常复杂的过程，慢性炎症反应贯穿A S发生发展全过程。炎症会刺激单核细胞的迁移，平滑肌细胞的增殖，最终导致动脉粥样硬化的形成和发展[4-5]。hs-CRP作为一种急时相蛋白，不仅可以由肝脏产生，而且可以由AS血管壁中的巨噬细胞，平滑肌样细胞以及脂肪组织产生[6]。目前认为hs-CRP不仅是AS的标记物，而且是AS的一个独立危险因素[7]。hs-CRP水平能够有助于预测冠心病患者发生心肌梗死危险性以及其预后情况[8]。黄连解毒汤是中医清热解毒的名方。有报道称其有调脂、抗炎、抗免疫作用，降低动脉粥样硬化大鼠血sICAM-1，sVCAM-1水平，抑制炎症反应，延缓动脉粥样硬化发展[9]。相似的研究表明，黄连解毒汤能下调MCP-1/CCR2mRNA在主动脉的表达，减少局部炎症反应，进而减轻对血管的损害[10]。同样也有报道，黄连解毒汤有调脂功能，其高剂量能有效调节高脂血症大鼠血脂代谢，降低 TC、TG、LDL-C，升高 HDL-C，提高机体抗氧化能力，抑制动脉粥样硬化形成[11]。

本研究通过兔颈总动脉导管球囊损伤加高脂饮食建立兔AS模型，观察黄连解毒汤对AS兔的血脂及血清、斑块组织炎症的影响。结果表明，黄连解毒汤具有降低AS兔的血清总胆固醇、甘油三酯、低密度胆固醇，升高高密度胆固醇的作用；可以减轻血清及斑块组织的炎症反应，使血清及斑块组织中的hs-CRP水平表达下降，减少内膜面隆突斑块形成。综合上述，黄连解毒汤对高脂血症兔具有调脂，抑制炎症的进程，抗AS发展的作用。目前临床上主要用他汀类、贝特类降脂治疗冠心病；但这些药物长期服用有较多的不良反应；黄连解毒汤作为天然来源的中药材有多靶点抗AS且作用缓和、不良反应小等优势。因此，黄连解毒汤对防治高脂血症及其相关疾病具有良好的现实意义。

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