鸡胚
- 绵羊肺炎支原体不同分离株的致病性比较
[11]。SPF鸡胚常被用于细菌和病毒毒力检测,袁婷将不同毒力的Mo菌株接种鸡胚后,鸡胚致死率不相同[12]。因此,本试验将6株Mo与山羊气管上皮细胞(goat tracheal epithelial cell,GTEC)共孵育,通过IFA检测黏附力强弱,进一步将Mo接种鸡胚,检测和观察鸡胚致死率和病理变化,综合筛选出致病性强的菌株,为Mo人工感染模型建立和疫苗的研发提供基础资料。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌株和细胞 Mo分离株XJ15、XJ1
动物医学进展 2023年10期2023-10-24
- 我国主要流行的4种血清型禽腺病毒-I群感染SPF鸡的致病性比较研究
AdVs均可引起鸡胚发生明显损伤，如FAdV-2和 FAdV-11感染11日龄SPF鸡胚不发生死亡且剖检无明显病变，但也有报道FAdV-11具有较高的鸡胚致死率，FAdV-4和FAdV-8对鸡胚的致死率为100%。这也表明，同一血清型FAdVs不同毒株对SPF鸡胚的致病性并不完全一致。鉴于同一血清型FAdVs不同毒株对SPF鸡胚和鸡的致病性存在差异，且我国主要流行的血清型FAdV-4、-8a、-8b和-11的致病性未见详细研究报道，故本研究拟对这4种血清型
畜牧兽医学报 2022年5期2022-05-30
- 冷冻鸡肉中单核细胞增生李斯特菌2个分离株的毒力及毒力相关因素研究
果蝇和斑马鱼等。鸡胚已经被用来确定许多不同微生物的感染能力，包括细菌、真菌、寄生虫和病毒[5]。本文以2株冷冻鸡肉中分离的LM为研究对象，以鸡胚作为感染模型，对分离株的毒力及其相关致病因素的差异进行研究，以期为实验易感动物的扩展、食源性LM的致病机理奠定基础。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌株和实验动物 2株冷冻鸡肉来源的LM分离株，编号为LM873和LM925，无害李斯特菌(L.innocua)，均由石河子大学预防兽医学实验室保存；鸡胚由乌苏市鑫
动物医学进展 2022年3期2022-04-11
- 某鸡场死亡鸡胚中细菌的分离鉴定和药敏试验
6600）在导致鸡胚死亡的众多原因中，细菌是常见原因之一，国内外有不少因细菌感染而造成鸡胚大量死亡的实例。研究表明，部分禽病如传染性支气管炎、鸡伤寒、葡萄球菌病，这类禽病的病原菌或病毒传递给后代的主要途径是侵害种禽卵巢，造成严重的危害。部分禽病如大肠杆菌病传递给后代的途径有两种，一是通过蛋壳，二是通过蛋内。通过携带病原菌的粪便污染蛋壳，从而在孵化过程中造成不同程度的影响，另外可以引发一系列的禽类生殖器官方面的疾病，继而可通过蛋传递，造成大批禽胚的死亡[1]
中国畜禽种业 2021年12期2022-01-13
- 2014年至2020年佳木斯市流感病毒分离结果分析
，无特定病原体）鸡胚双腔进行病毒分离。1 材料与方法1.1 样本的采集 样本来自佳木斯市两家流感监测哨点医院（佳木斯市中心医院和佳木斯大学附属第一医院）。样本送到实验室后存放至4 ℃冰箱保存，如未及时检测存放于-70 ℃保存待用。核酸检测流感病毒阳性标本最好在24 h 内利用状态良好的MDCK 细胞或SPF 鸡胚进行病毒分离。1.2 实验材料 SPF 鸡胚和MDCK 细胞由黑龙江省疾病预防控制中心提供，TPCK 胰酶，DMEM 培养基（货号：AE29005
国际医药卫生导报 2021年24期2022-01-04
- 鸡胚接毒量对新城疫病毒LaSota 株增殖的探究
ta 株种毒接种鸡胚进行病毒增殖，收获鸡胚液作为制苗用抗原。疫苗的抗原含量越高，刺激机体产生的抗体越多，保护力也越强，因此，病毒抗原含量是保障疫苗质量的关键，另外鸡胚的抗原收获量影响着生产成本。此试验从鸡胚的接毒量入手，探索出了SPF 鸡胚生产NDV-LaSota 株抗原时，鸡胚适宜接毒量的量化指标，不但给实际生产提供了指导依据，而且所生产的病毒抗原含量和收获量均有了提高，保证了产品质量，而且降低了生产成本，有利于鸡新城疫病的防控工作。1 材料与方法1.1
兽医导刊 2021年21期2021-12-15
- 鸡胚模型在生物学研究中的应用进展
军，祁海臻，杜楠鸡胚模型在生物学研究中的应用进展袁若男1，于晓雪1,通信作者，李秀荣2，李留安1，潘鹏宇1，孟玉芳1，向军1，祁海臻1，杜楠1（1. 天津农学院 动物科学与动物医学学院 天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室，天津 300392；2. 巴彦淖尔市临河区农畜产品质量安全中心，内蒙古自治区 巴彦淖尔 015000）鸡胚离开母体独立发育，便于获得大量相同发育时期的胚胎进行批量操作，且在胚胎期操作对母体不造成伤害，是应用广泛的重要动物模型。通过查阅
天津农学院学报 2021年2期2021-12-13
- 中兽药复方对H9N2亚型禽流感病毒的抑制作用研究
染MDCK细胞和鸡胚模型，探讨研发的中兽药复方制剂对H9N2 AIV的抑制作用。结果显示，中兽药复方制剂具有良好的安全性，制剂原液和各个稀释度对鸡胚基本没有毒性，制剂原液（200 mg/mL）稀释102倍至2 mg/mL以下对体外培养的MDCK细胞基本无毒性;制剂原液（200 mg/mL）稀释104倍至0.02 mg/mL均能有效抑制H9N2 AIV在鸡胚中的增殖，稀释105倍至0.002 mg/mL仍然对H9N2 AIV在MDCK细胞上的复制具有良好的预
家禽科学 2021年9期2021-11-27
- 中药复方合剂抗甲型H1N1流感病毒活性的实验研究
前景。本实验通过鸡胚法观察了中药复方合剂3种给药方式对甲型流感病毒A/PR/8/34（H1N1）的抑制作用和对鸡胚的保护作用，以期为临床用药和中药开发提供实验依据。1 材 料1.1 实验动物9日龄SPF级健康鸡胚193枚，质量（52±2）g，武汉中博生物股份有限公司提供，动物许可证号：SYXK（鄂）2016-0086，实验符合医学实验动物管理委员会的要求。1.2 药物与试剂 中药复方合剂：由板蓝根、黄芩、柴胡、知母、甘草、黄芪、金银花、鱼腥草等十二味中药组
中医药导报 2021年3期2021-11-22
- 鸡胚成纤维细胞永生化构建机制的验证
方法1.2.1 鸡胚成纤维细胞的分离培养取10 日龄左右鸡胚，用75%酒精消毒蛋壳，从气室端用镊子小心取出鸡胚，置于培养皿中，用眼科剪小心除去头、四肢和内脏部分，剩余胚体用PBS 清洗3 次，将洗净的胚体剪碎，并反复清洗3 次，收集剪碎的胚体，加入0.25% Trypsin 37℃水浴震荡消化30～40min，将消化液过100μm 滤网，收集滤液，300g 离心5min，弃上清，重悬沉淀，铺瓶。1.2.2 免疫荧光鉴定细胞玻片；固定；破膜封闭；一抗孵育，（
中国畜禽种业 2021年10期2021-11-10
- 1株鸭坦布苏病毒的分离鉴定及产蛋鸭发病模型的建立
织处理液在SPF鸡胚上连续传代，成功分离鉴定出1 株DTMUV，命名为DT⁃MUV-DF2 株。通过将DTMUV-DF2 株感染成年鸭建立动物感染模型，结果病毒感染1～3 d，有感染鸭血清中病毒分离率均为100%；病毒感染后卵泡出现变形、破裂或出血等变化，感染后5～10 d 卵巢病变率较高，8～10 d 病变率均为100%。对以上统计数据进行分析，最终确定了该病毒对产蛋鸭的发病模型。1 材料与方法1.1 鸡胚与试验动物6日龄SPF 鸡胚和8～10日龄SPF
养殖与饲料 2021年9期2021-09-17
- 重组禽流感病毒的鸡胚生产工艺控制要点
5113561 鸡胚的选取鸡胚生产重组禽流感病毒工艺最大的缺点是容易受鸡胚来源、质量及自身不稳定性的影响，造成疫苗批间质量差异显著。所以鸡胚的选取是重组禽流感病毒液生产的基石，对能否生产出高品质的重组禽流感病毒液有着至关重要的作用。选取优质的鸡胚则从种蛋的选取开始。鸡蛋主要是由蛋壳、蛋壳膜、气室、蛋白、蛋黄及胚珠等部分构成，受精后的种蛋经孵化后成为鸡胚。种蛋的选取要考虑种蛋的来源、大小和形状、蛋壳、清洁度、新鲜度、保存过的环境等因素。1.1 种蛋的来源要求
吉林畜牧兽医 2021年1期2021-04-16
- 2 株H7N9 亚型重组禽流感病毒的生物学特性和免疫原性研究
均来源于高度适应鸡胚的H1N1 亚型A/Puerto Rico/8/34 株（简称为H1N1/PR8）病毒。SPF 鸡胚和SPF 雏鸡由依托中国农业科学院哈尔滨兽医研究所的国家禽类实验动物资源库提供。白油、吐温由哈尔滨维科生物技术有限公司提供。所有涉及H7 亚型AIV 操作的试验均在生物安全三级实验室（ABSL-3）进行。1.2 重组AIV H7-Re1 株和H7-Re2 株鸡胚内增殖和遗传稳定性测定 取重组AIV H7-Re1 株及其HA基因供体株病毒（
中国预防兽医学报 2020年9期2020-11-10
- 使用泰万菌素治疗鸡胚中鸡滑液支原体的效果试验
5～7日龄SPF鸡胚感染MS后，使用50 MIC的泰万菌素作用5 d对MS的抑制率为70%[5]。本试验将MS感染15～16日龄鸡胚，并对感染后鸡胚注射泰万菌素，根据试验组和用药组鸡胚的健雏率及出壳雏鸡肺脏MS的感染情况，确定泰万菌素治疗鸡胚中MS的效果。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 SPF鸡胚 孵化至15日龄，购自梅里亚维通实验动物技术有限公司。1.1.2 毒株 MS标准株WVU1853，试验前复苏培养，并测定其变色单位(Color changi
中国兽医杂志 2020年5期2020-10-21
- 鸡胚营养组合物对衰老大鼠基因损伤修复的影响
摘要：目的：观察鸡胚营养组合物对衰老大鼠基因损伤修复的影响，探讨其延缓衰老的可能机制。方法：采用D半乳糖建立衰老SD大鼠动物模型，每日1次颈背部皮下注射 D半乳糖500mg/（kg·d），连续造模90天，对照组颈背部皮下注射等剂量的生理盐水注射液。从第1天起，鸡胚营养组合物组、鸡胚组、营养组合物组、蛋清组，分别以相应剂量对大鼠进行灌胃，每天1次，直至第90天，拉颈处死大鼠。取各组大鼠肝脏、骨髓和脑组织，采用RTPCR法檢测各组织修复基因的表达情况。结果：与
中国食物与营养 2020年1期2020-09-10
- 格利特消毒剂对高致病性禽流感病毒的抗病毒效力*
004株，培养于鸡胚尿囊腔中。将病毒以1∶20的比例稀释到浓度为5%的尿囊溶液中用作固体载荷。1.2 侵染性测定(侵染性的指示剂、介质、试剂和仪器)将病毒接种于孵化9 d～11 d的长龄鸡胚，以评估病毒的侵染能力。孵化9 d～11 d长龄鸡胚以无病原为特征，均由 Charles River 提供。鸡胚运达当天记为孵化的第0天，然后置于孵化器中孵化。孵化器温度保持在37 ℃左右，湿度为40%～70%。鸡胚每3 h借助自动旋转仪转动一次。使用前，所有鸡胚都进行
国外畜牧学(猪与禽) 2020年8期2020-09-02
- 上海地区猪流感病毒的分离与鉴定
种10日龄SPF鸡胚，尿囊腔接种0.2 mL/枚，每份样品接种3枚鸡胚，37 ℃培养72 h，弃去24 h内死亡的鸡胚，收集剩余未死或死亡鸡胚的尿囊液，并经SPF鸡胚盲传2代。1.2.3 病毒鉴定血凝素凝集试验：对收获的第一代细胞上清液、第二代和第三代鸡胚尿囊液进行血凝素凝集试验。第六项工作是课程评价。在课程评价时，须注意处理好过程与结果、个人与小组、规范与创新、阶段与整体几对关系。病毒电镜观察：将血凝阳性的第三代病毒尿囊液液经0.22 μm微孔滤膜过滤处
畜牧与兽医 2020年7期2020-07-13
- 鸡传染性支气管炎病毒M41株毒种鉴定
SPF鸡和SPF鸡胚SPF鸡和SPF鸡胚来自哈药集团生物疫苗有限公司SPF鸡场。1.4 毒种的复壮和传代将毒种作103倍稀释，接种10 日龄的SPF 鸡胚，每个胚尿囊腔接种0.1 mL。接种后将30 h前死亡的鸡胚剔除，收取30～48 h死胚和48 h活胚尿囊液，记为E0 代，低温保存备用。将M41 株毒种用SPF胚连续传12代，分别记作E1～E12。1.5 病毒含量（EID50）将E1、E5、E9和E12代次的毒种分别作10倍系列稀释，取10-4～10-
饲料博览 2020年3期2020-04-24
- 家禽胚蛋注射技术的应用研究(综述)——激素篇
酮和甲状腺素对肉鸡胚胎的影响、胚蛋注射促甲状腺激素释放激素(Thyrotropin Releasing Hormone，TRH)和促肾上腺皮质素释放激素(Corticotrophin Releasing Hormone，CRH)分别对火鸡和肉鸡的入孵种蛋胚胎的影响以及注射鸡生长激素(Growth Hormonem，GH)和胰岛素样生长因子1(type-1 Insulin-like Growth Factor，IGF-1)对初生雏鸡质量的影响进行了研究。根据
国外畜牧学(猪与禽) 2020年1期2020-03-06
- 通过评估未出雏的种蛋来评估孵化是否成功
词：种蛋;孵化;鸡胚中图分类号：S814.5 文献标志码：C 文章编号：1001-0769（2019）11-0046-04了解孵化设备的性能以及如何让它们更好地工作是迈向成功孵化的第一步，这方面的许多信息或资料都可以在孵化手册中找到。其次，了解胚胎学以及孵化设备如何促使胚胎正常生长能使孵化场生产出高质量的雏鸡。从其他成功的孵化场复制它们的成功经验可以产生积极的效果。此外，从孵化失败上获取的教训对孵化场的管理和改进也有极大的帮助。这些信息可以通过常规的胚胎诊
国外畜牧学·猪与禽 2019年11期2019-12-17
- 一株鸡毒支原体的致病性研究与药敏试验
化5日龄的SPF鸡胚进行了两种不同浓度毒株的攻毒试验，观察鸡胚的死亡及剖检情况，并将死亡鸡胚卵黄壁上的支原体回收，进行9种常用药物的敏感性试验。结果表明：接种不同浓度均出现死胚，高浓度组鸡胚死亡率高达100%，而低浓度组的鸡胚死亡率为70%，剖检气囊有纤维素渗出，气管、支气管栓塞现象；药敏试验表明：两种毒株已对恩诺沙星和大观霉素等药物敏感性降低，而对泰妙菌素和妙达安两种药物敏感性较高。说明毒株的致病力较强，对子代造成了孵化率降低、弱雏并伴呼吸道病变的影响，
山东畜牧兽医 2019年9期2019-09-20
- 鸡胚骨形成蛋白（BMPs）基因表达水平的发育性变化
BMPs）基因在鸡胚不同发育阶段的表达水平，为进一步研究BMPs基因的功能提供依据。【方法】选取AA肉鸡种蛋100枚进行孵化，分别于孵化期第1、2、3、4、5、6、9、12、15、18d（记为E1～E18）选取胚蛋6枚，E1～E6采集整胚，E12～E18分别采集大脑、心脏、肝脏和腿肌组织。采用定量PCR（qPCR）方法检测BMP2、BMP4和BMP7基因的表达丰度。【结果】BMP2基因在E1～E6中的表达水平呈现先上升后下降的趋势;BMP2在E4、E5和E
福建农业学报 2019年11期2019-09-10
- 鸡胚营养组合物对衰老大鼠干细胞增殖的影响
要：目的：研究鸡胚营养组合物对衰老大鼠干细胞增殖的影响，探讨其延缓衰老的可能机制。方法：选取SD大鼠，随机分为正常对照组、衰老模型组、鸡胚营养组合物组、鸡胚组、营养组合物组和蛋清组，分别给予相应处理，留取大鼠肝脏、肾脏、肠和脑组织，采用免疫组化法检测衰老大鼠各组织干细胞增殖情况。结果：鸡胚营养组合物处理衰老大鼠后，大鼠肝脏、肾脏、肠和脑组织干细胞标志物的表达量显著升高。结论：鸡胚营养组合物在一定程度上可以促进衰老大鼠的干细胞增殖，此可能为其延缓衰老的作用
中国食物与营养 2019年10期2019-09-10
- 山东省某地鹦鹉喙羽病病毒的全基因组序列及对SPF鸡胚的致病性探究
BFDV对SPF鸡胚的致病性如前所述，迄今为止，我们没有发现适合PBFDV繁殖的细胞或其他培养物。我们大胆地假设是否可以使用SPF鸡胚来复制病毒。取适量通过PCR鉴定阳性的羽毛囊置于ep管中充分剪至糊状，加入0.5 mL灭菌PBS混匀，置于-80 ℃冰箱反复冻融3次，然后在4℃下以8 000×g离心5 min，通过0.22 μm过滤器并接种到7日龄SPF鸡胚的卵黄膜(购自济南斯帕法斯公司)。将鸡胚置于37℃培养箱中。记录死亡时间，并在收集死胚的肝脏提取DN
野生动物学报 2019年3期2019-08-19
- 不同厂家胰酶制备鸡胚成纤维细胞对比试验
研究工作的发展，鸡胚成纤维细胞应用越来越广泛。因为鸡胚成纤维细胞来源方便，适应能力强，繁殖快，耐受性良好等特点，被广泛应用于生物制品领域，比如病毒培养、疫苗制备、各实验室的基础细胞等。因此鸡胚成纤维细胞培养工作越来越受到重视，采用不同厂家生产的胰酶对SPF鸡胚进行消化培养，通过活细胞计数和贴壁培养观察细胞的生长情况[2]。1 材 料1.1 试验材料及其他 鸡胚：9～11日龄SPF鸡胚购于济南斯帕斯家禽有限公司。主要器械：吸管、平皿、T25方瓶、眼科镊、眼科
福建畜牧兽医 2019年4期2019-08-01
- SPF鸡胚孵化前后的营养成分对比研究
司 山东 济南）鸡胚蛋是指经过孵化还没有变成小雏的受精蛋。其营养成分极高，食用后可以强身健体[1]，鸡胚蛋的蛋黄中含有丰富的卵黄蛋白，卵黄不仅是胚胎发育的重要能量来源，也是脂溶性维生素和抗体由种鸡传递给鸡胚的桥梁[2]。鸡胚蛋的蛋清里富含蛋白质和19种以上的氨基酸，还有钙、铁、锌、硒等盐类，还有丰富的维生素A、B1、B2、E等，还有生物体胚胎发育所必需的蛋白酶、淀粉酶、溶菌酶等酶类。所以自古以来就有很多人服用鸡胚来补充营养，增强自身抵抗力。不仅如此，毛蛋也
山东畜牧兽医 2019年6期2019-06-26
- H9亚型HP株禽流感病毒繁殖规律的探索
生产中利用SPF鸡胚培养病毒的成本高，而非免鸡胚的培养也能获取较纯的病毒，同时价格较低，故本研究用H9亚型HP株接种非免鸡胚，并对不同死亡时间段的尿囊液效价进行测定，以期探索该毒株在非免鸡胚中的繁殖规律，得出鸡胚的最佳培养时间和尿囊液收获时间，最大限度提高单位体积尿囊液中的病毒含量，为制备高效疫苗提供数据支持。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 病毒 禽流感病毒（H9亚型HP株）种毒代次F2，批号DZ20140306，由福州大北农生物技术有限公司提供。1
福建畜牧兽医 2019年1期2019-02-25
- I群禽腺病毒的分离鉴定与同源性分析
法1.1 病料、鸡胚及细胞株疑似FAdV-I感染的病死鸡病料（76份）：取自山东、吉林、黑龙江等地的病死鸡；SPF鸡胚：来自青岛康信孵化场；鸡肝癌细胞（LMH）（货号BNCC337930）：购自北纳创联生物技术有限公司。1.2 方法1.2.1 引物设计与合成 根据GenBank公布的Hexon基因序列（MG734665.1）设计FAdV-I特异性引物，送青岛华大基因研究所合成。序列如下：FAdV-I-F： GGTCGACCTATTTCGACATCAAG；F
中国动物检疫 2019年2期2019-02-22
- 鸡瘟毒清对鸡新城疫病毒的抑制作用
任何疫苗。1.3鸡胚11日龄SPF鸡胚36枚。1.4新城疫病毒新城疫病毒，对鸡胚的半数致死量（EIDso）为 10-7，测定致死鸡胚的平均时间（MDT）为0.5 h。1.5鸡瘟毒清体内抑毒实验将一日龄的鸡胚平均分成五组，给予不同的饲养环境，即分为正常饲养、攻毒不给药、双黄连散剂对照组 （1%添加于饲料）、鸡瘟毒清高剂量组（1.6%添加 于饲料）和鸡瘟毒清低剂量组（0.8%添加于饲 料）五组，进行对照实验，每组32只，且鸡的HI抗体效价均为0。在实验期间进行
农民致富之友 2018年21期2018-12-27
- 鸡胚分离不同型别流感病毒的敏感性分析
年来，由于我国对鸡胚分离不同型别流感病毒的敏感性研究较少，在多次全国流感病毒监测工作质量评估报告中指出，在全国多数的流感监测研究中心中仅有部分实验室进行鸡胚分离不同型别流感病毒的敏感性的研究，导致我国流感病毒问题难以解决，我国每年养鸡产业都将面临流感病毒的威胁。因此有关流感病毒分离的研究显得至关重要，同时鸡胚分离不同型别流感病毒的敏感性研究能够正确揭示不同型别流感病毒对鸡胚分离敏感度的差异，从而加深对不同型别流感病毒鸡胚分离的敏感性认识，对我国流感病毒监测
兽医导刊 2018年15期2018-03-22
- 金针菇废料和鸡胚在平菇高产优质栽培中的应用效果研究
和疫苗工厂产生的鸡胚废料，实现废料生物资源循环再利用，开展以废料为主要栽培原料的平菇栽培试验。结果表明，将金针菇废料、鸡胚废料应用于平菇栽培是可行的，以菌丝的长相、出菇的菇形、菇色、出菇时间、菇产量、出菇率等为依据，最终选择金针菇废料83%、鸡胚15%、石灰1%、石膏1%为最佳配方。关键词 金针菇废料；鸡胚；平菇；高产优质中图分类号 S646.1+4 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2018）22-0066-02平菇[Pleurotus os
现代农业科技 2018年22期2018-01-15
- 新城疫病毒在鸡胚成纤维细胞中的培养及纯化
0)新城疫病毒在鸡胚成纤维细胞中的培养及纯化张玉霞，袁小远，孟 凯，王友令(山东省农业科学院 家禽研究所，山东 济南 250100)利用鸡胚成纤维细胞对新城疫毒株GM0511株进行增殖培养和蚀斑法纯化，通过对最适细胞密度、病毒最佳接种浓度、覆盖琼脂糖浓度、蚀斑形成时间等条件进行优化摸索，最终获得产斑时间一致，蚀斑大小一致、出斑整齐的纯化新城疫毒株，并使原病毒血凝效价提高2个滴度，为后续实验奠定基础。新城疫病毒； 鸡胚成纤维细胞； 蚀斑纯化近年来，科研工作者
浙江农业科学 2017年12期2018-01-05
- 鸡胚成纤维细胞T7噬菌体文库的构建
：本试验旨在构建鸡胚成纤维细胞T7噬菌体文库。通过分子生物学方法，将鸡胚成纤维细胞cDNA片段连接于T7SeLect 10-1载体上，然后进行体外包装、原始文库的测定、扩增及滴度的测定、序列测定。实验结果显示，所构建的鸡胚成纤维细胞T7噬菌体原始文库的滴度为1.1×106pfu/mL，重组效率为60%，扩增后的鸡胚成纤维细胞T7噬菌体文库的滴度为1.8×1010 pfu/mL，鸡胚成纤维细胞T7噬菌体文库测序后经同源性比对，有9个噬菌斑的测序结果与鸡全基因
农家科技下旬刊 2016年8期2017-05-05
- 蓝莓花色苷对鸡胚成纤维细胞系生长的影响
)蓝莓花色苷对鸡胚成纤维细胞系生长的影响王丹1,2,3黄紫藤1,2,3,4马越1,2,3赵晓燕1,2,3,4(1.北京市农林科学院蔬菜研究中心，北京100097；2. 农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室，北京100097；3. 农业部都市农业(北方)重点实验室，北京100097；4；北京农学院食品科学与工程学院,北京102206)以花色苷含量为21.34%的蓝莓花色苷粉末为原料，采用MTT法、显微镜观察法，同时利用细胞计数仪测定细胞活率，3
食品与机械 2016年8期2016-09-28
- 鸭呼肠孤病毒人工感染SPF鸡胚的病理学研究
毒人工感染SPF鸡胚的病理学研究刘晓丽，刘 婷，刘 波，程国富，谷长勤，张万坡，胡薛英（华中农业大学动物医学院，武汉 430070）【目的】前人研究表明禽呼肠孤病毒可以经卵垂直传播，禽呼肠孤病毒能引起雏禽的病毒性关节炎、呼吸道和肠道疾病、肝炎、心肌炎、免疫抑制等。以实验室分离的鸭呼肠孤病毒HP080421株为研究对象，该毒株引起病变主要以鸭软脚为主要临床特征，病鸭肝脏和脾脏表面有大量的白色坏死灶、肾脏肿大、出血为主要病变特点。鸭呼肠孤病毒对鸡胚的致病性研究
中国农业科学 2016年14期2016-09-19
- 种蛋感染蜡状芽孢杆菌的分离鉴定及其药敏试验
，研究了19日龄鸡胚中细菌的存在情况及其耐药性。结果表明：经NCBI Blast比对确定分离的5个菌株均为蜡状芽孢杆菌，与GenBank上登录的蜡状芽孢杆菌KF150385、JX566534、KF475814菌株高度同源，同源性高达99.4%；5株分离菌株间也高度同源（99.9%）。药敏试验结果发现：5株蜡状芽孢杆菌对环丙沙星、麦迪霉素、丁胺卡那、红霉素、新霉素、卡那霉素、庆大霉素、诺氟沙星、氧氟沙星敏感，对多黏霉素B、复方新诺明、青霉素、氨苄西林、头孢氨
上海农业学报 2016年4期2016-09-13
- N-cadherin通过β-catenin调控鸡胚脊髓连合纤维向对侧的投射①
atenin调控鸡胚脊髓连合纤维向对侧的投射①杨慈清②李小英王聪睿②张必超李晗林俊堂③ (新乡医学院生命科学技术学院，新乡453003)［摘要］目的:阐明鸡胚发育过程中神经钙黏蛋白(N-cadherin)和β-连环蛋白(β-catenin)在脊髓连合纤维发育中的作用。方法:在鸡胚发育第3天(stage22)，将N-cadherin和β-catenin干扰载体通过活体电转基因技术导入脊髓，电转后继续培养3 d(stage29)，取材、固定、包埋和切片。分为N
中国免疫学杂志 2015年10期2015-12-24
- 鸡Vezf1基因RCAS干扰载体构建及鉴定
Vezf1基因在鸡胚早期发育过程中的作用，构建了针对鸡Vezf1基因的RCAS病毒RNA干扰载体，分别在鸡胚细胞和胚胎水平对Vezf1基因实施沉默，通过Real-time PCR和原位杂交法检测目的基因mRNA表达水平。结果表明，基于RCAS病毒的干扰载体可以在鸡胚成纤维细胞和活体鸡胚中成功沉默Vezf1基因的表达。此研究为利用鸡胚模型深入了解Vezf1基因在早期发育过程中的作用提供了素材。RCAS载体；RNAi；Vezf1；鸡胚Vezf1（Vascula
生物技术通报 2015年8期2015-10-25
- 雏番鸭病毒性肝炎病毒的分离与鉴定
分离病毒能够致死鸡胚，能被Ⅰ型鸭病毒性肝炎标准强毒高免血清特异性中和。分离毒株在鸡胚上传代培养，并测定ELD50分别为10-6.32/0.2m L、10-5.49/0.2m L；经动物回归试验，对1日龄雏番鸭的致死率分别为80%和70%，雏番鸭出现明显的角弓反张姿态，剖检可见肝脏出血斑、出血点，为鸭病毒性肝炎的典型症状，表明分离到的病毒为Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒（DHV-I）。鸭病毒性肝炎分离鉴定鸭病毒性肝炎是由鸭肝炎病毒 （Duck Hepatitis Vi
福建畜牧兽医 2015年1期2015-09-26
- 鸭病毒性肝炎活疫苗（CH60株）规模化生产工艺改进试验
为5000倍,将鸡胚死亡高峰期、最终死亡率、单胚平均收获单产、病毒含量ELD50进行对比分析,结果表明将病毒进行100倍稀释后,用11日龄鸡胚增值鸭病毒性肝炎弱毒(CH60株)与10日龄鸡胚相比死亡高峰期时间、最终死亡率、病毒含量ELD50、单胚平均收获单产等基本相同;将病毒进行5000倍稀释后,用11日龄鸡胚增值鸭病毒性肝炎弱毒(CH60株)与10日龄鸡胚相比死亡高峰期时间推迟12～24h,最终死亡率基本相同、单胚平均收获单产可提高30%左右、病毒含量E
兽医导刊 2015年6期2015-07-12
- 鸡胚消化器官组织学发育过程观察
30036）鸡胚消化器官组织学发育过程观察刘平1，孙林2 （1.江西农业工程职业学院，江西樟树331200；2.安徽农业大学动物科技学院，合肥230036）摘要：通过对孵化1～8日龄的鸡胚进行连续切片，HE染色，对鸡胚消化器官胃、肠、肝脏、胰腺进行组织学连续性观察，详细描述鸡胚消化器官组织发育过程。试验结果表明，在4日龄鸡胚消化器官胃、肝脏、胰腺均开始发育；在6日龄时腺胃和肌胃开始分化；至8日龄肝脏已有肝小管和肝小叶结构，腺胃壁开始出现腺管，未出现腺泡
饲料博览 2015年2期2015-05-12
- ATGL在后期鸡胚不同组织中的分布
技术,对18日龄鸡胚的15种组织进行研究,旨在为进一步研究该基因在禽类不同组织中的功能提供基础资料.1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 试验动物与取材 挑取蛋质重在65～70 g的Ross肉鸡受精蛋（河南大用鸡场）10枚,放入智能自动孵化器（山东德州孵化设备厂）中孵化.孵化条件：37.5±0.2℃,相对湿度（55±2）%.在孵化的第18胚龄（E18）,随机选取6只鸡胚,按每100 g体质量100 mg乌拉坦麻醉后,心脏取血处死,分别采集脾脏、腿肌、胸
河南科技学院学报(自然科学版) 2015年3期2015-05-09
- Ubc9对鸡胚神经嵴细胞发育的影响
究论文Ubc9对鸡胚神经嵴细胞发育的影响李明洋1，刘乙蒙3，刘 超1，李淑玲2，栾治东1*(辽宁医学院 基础医学院 1.发育生物学教研室；2.组胚教研室；3.生物化学教研室, 辽宁 锦州 121000)目的探索Ubc9和SUMO通路对鸡胚神经嵴细胞发育的影响。方法1)采集鸡胚，通过免疫荧光实验和原位杂交实验来检测SUMO结合酶Ubc9及神经嵴细胞标志基因的表达情况。2)设置对照组(非特异性吗啉代处理)和Ubc9-吗啉代组来处理各组8期鸡胚，随后通过原位杂交
基础医学与临床 2014年8期2014-11-28
- 乙型流感病毒在不同胚龄鸡胚中适宜孵育条件的研究
感病毒在不同胚龄鸡胚中适宜孵育条件的研究李孙华1，靳 亮2*(1.天津天士力研究院，300410，天津；2.江西省科学院微生物研究所，330029，南昌)为了找出乙型流感病毒毒株在不同胚龄鸡胚中适宜孵育条件，提升血凝滴度，从而为产业化生产人用3价流感疫苗提高产能，主要采用血凝法检定收获尿囊液，分析试验血凝滴度数据，得出结论：乙型流感病毒毒株接种于10 d胚龄鸡胚，其孵育温度为35 ℃，孵育时间72 h最理想；孵育温度和时间对乙型流感病毒的血凝滴度有影响，同
江西科学 2014年5期2014-09-08
- IBD毒株的卵黄培养方法研究
D毒株首次分离以鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)接种为首选，卵黄囊接种次之。本试验将经CAM驯化的鸡胚适应毒转卵黄囊(Yolk sac)驯化培养，培养结果显示卵黄囊接种的方法，CAM、胚体及尿囊液混合物中的病毒含量高于CAM接种方法的病毒含量，提示该接种方法可用于规模化培养。IBDV毒株 卵黄培养 病毒含量 产量鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)能在鸡胚上生长增殖，Hitchner[1]证明9～11日龄鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)是分离病毒最敏感的接种途径，感染的鸡胚通
山东畜牧兽医 2014年6期2014-05-06
- 鹅副粘病毒YF株的分离鉴定与生物学特性研究
和10日龄SPF鸡胚，由辽宁益康生物股份有限公司提供;非免疫鹅(HI≤1∶4)、鹅胚，由辽宁省畜牧科学研究院豁鹅原种场提供。1．1．2 NDV 标准抗原和血清、AI(H9、H5)血清由辽宁益康生物股份有限公司研发中心提供。1．1．3 康复鹅血清 由辽宁益康生物股份有限公司研发中心提供。1．2 方法1．2．1 病毒的分离 以无菌方法采取病死鹅的肝脏、脾脏、心血直接涂片，革兰氏染色后镜检。采集病死鹅的肝、脾、肺、脑组织进行研磨，加入双抗，将病料悬液4℃作用4
中国兽药杂志 2013年2期2013-10-09
- 2007年～2010年H9N2亚型禽流感病毒分离株对SPF鸡的致病特性研究
亚型禽流感病毒的鸡胚平均死亡时间（MDT），发现2008年下半年以来，部分H9N2病毒分离株的MDT显著地小于早期分离的毒株，数据说明这些毒株对SPF鸡胚的致病力更强。而这些毒株对SPF鸡的致病性是否增强，还不得而知，为了研究这些H9N2分离株对SPF鸡的致病特性，我们选择了MDT在60．5～96．3h之间的9株H9N2亚型病毒，测定了这些毒株的致病指数（IVPI），以及在SPF鸡体内的复制和排毒情况。试验结果表明，2008年以后分离的一部分H9N2亚型病
中国兽医杂志 2013年3期2013-09-23
- 浅析禽流感疫苗生产工艺及接种注意事项
取11日龄种蛋的鸡胚，把病毒“种”到鸡胚中，推入38℃温室内，保证鸡胚的正常发育，使毒株快速繁殖。收获:3 d后抽取鸡胚的羊水，把带有病毒的羊水放到灭活罐中。灭活:经过灭活工艺，把病毒中的感染性去掉。乳化:稀释、添加佐剂，制成疫苗成品。分装:疫苗成品，通过分装机分装入500 mL灭菌塑料瓶中。轧盖:通过轧盖机密封，分装成品。包装:把密封好的成品装入纸箱。2 禽流感疫苗接种时注意事项禽流感病毒感染家禽或健康状态异常的禽切忌使用本疫苗。该疫苗严禁冻结。若出现破
黑龙江动物繁殖 2013年6期2013-08-15
- I型鸭肝炎病毒在鸭胚成纤维细胞系中的增殖特性研究
能通过接种鸭胚或鸡胚来实现。一般而言，DHV-1经过若干代次的培养后，均可以在鸡胚或鸭胚中得到良好的增殖，并达到较高的病毒滴度，这有利于DHV-1强毒株的致弱以及研制DHV-1减毒疫苗。但在研究DHV-1的致病机理和分子生物学等方面，却有一定的局限性。研究表明，良好的细胞培养模型是开展病毒基础研究的良好平台，本研究在建立的鸭胚成纤维细胞(DEF-h)系的基础上，用DEF-h培养DHV-1，并研究其在细胞中的蛋白表达和增殖规律，为研究DHV-1的致病机理及研
中国预防兽医学报 2013年2期2013-05-21
- 一例鸡胚与幼雏大肠杆菌病的的诊治报告
57300）一例鸡胚与幼雏大肠杆菌病的的诊治报告孙建立（山东省东营市广饶县畜牧局 257300）禽大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌所引起的禽类不同类型疾病的总称。其主要包括心包炎、肝周炎、气囊炎、腹膜炎、滑膜炎、输卵管炎、脐炎、眼炎、慢性肿瘤样肉芽肿、败血症等。大肠杆菌病是一种条件性疾病，当家禽抵抗力降低时，如饲养管理不善，大肠杆菌就会侵害鸡体导致发病，并大量死亡。本病一年四季均可发生，但以春夏季节多发，肉仔鸡最易感。此外，病毒性疾病与其在发病上具有相互促进作用
山东畜牧兽医 2013年5期2013-04-07
- 鸡胚胎发育中的异常现象及产生原因
不可避免地会出现鸡胚胎死亡现象,无论是高孵化率鸡群,还是低孵化率鸡群。一般情况下,鸡的胚胎死亡在整个孵化期并不呈均匀分布,应明显存在两个胚胎死亡高峰。第一个鸡胚胎死亡高峰在2-4d胚龄期。正常情况下，这个时期的死亡数占孵化全期总死亡数的15%左右；第二个鸡胚胎死亡高峰在19-21d胚龄期，正常情况下，这个时候的死亡数占孵化全期总死亡数的50%左右。通常高孵化率鸡群鸡胚死亡主要发生在第二个死亡高峰期（19-21d胚龄），而低孵化率鸡群两个死亡高峰期中死亡数量
当代畜禽养殖业 2011年10期2011-08-15
- 一株新城疫病毒的分离鉴定
料。（1）SPF鸡胚及SPF鸡。9～11日龄SPF鸡胚和SPF鸡均购自北京梅里亚-维通实验动物技术有限公司。（2）标准阳性血清。ND标准阳性血清、禽流感（A1）H9、H5标准阳性血清，均购自中国农科院哈尔滨兽医研究所。2.方法。（1）病毒分离。无菌采集病死鸡气管、肾脏、脑，放入研钵中剪成小块，加入灭菌的PBS冲洗，洗去红细胞，反复2～3次。然后将病料加入研磨器中磨碎，加少量灭菌PBS液稀释，反复冻融3次后，5000转/分钟离心10分钟，取上清，用0.22微
中国畜牧业 2011年21期2011-06-21
- 鸡新城疫不同弱毒株毒力及免疫原性研究
，10日龄SPF鸡胚及30日龄SPF鸡青岛宝依特生物制药有限公司动物房提供。1.3 1%鸡红细胞悬液由青岛宝依特生物制药有限公司实验室配制。1.4 病毒繁殖 取NDV B等9株分别接种10日龄SPF鸡胚10枚，36～37℃孵育96 h，收获胚液并检测HA效价及EID50。1.5 毒力试验1.5.1 对鸡胚的毒力 按文献方法[8]将NDV B等9株新鲜胚毒分别用灭菌生理盐水作100倍稀释，尿囊腔内接种10日龄SPF鸡胚10个，每胚0.1 mL，置36～37℃
中国动物检疫 2011年5期2011-05-18
- 中药提取液对鸡传支病毒的效果研究
M41标准株感染鸡胚，观察其作用效果，为临床应用提供试验依据。1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 中药提取液 依据麻杏石甘散进行组方加减，得到三个中药组方。采用蒸馏法和水提醇沉法提取，并经10000r/min高速离心取上清液制得。1.1.2 种毒 鸡传染性支气管炎病毒（IBV-M41株），购自中国兽药监察所。1.1.3 实验鸡胚 9日龄SPF鸡胚，购自山东济南某家禽科技有限公司。1.1.4 试剂及仪器 试剂包括生理盐水、10 000IU/mL双抗等。
四川畜牧兽医 2011年6期2011-03-10
- 不同方法处理的金银花提取液在鸡胚内抗新城疫病毒作用
的金银花提取液在鸡胚内抗新城疫病毒作用研究,探讨3种中药澄清分离方法的优劣,为今后进行中药鸡胚抗病毒试验以及选择更合适的中药提取液的澄清分离方法提供科学的理论依据。1 材料与方法1.1 材料 10日龄鸡胚,购自哈尔滨远大孵化场;鸡新城疫病毒(M uk teswar I系),由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所惠赠,EID50为10-4.5;金银花,购自哈尔滨中药大市场;壳聚糖,购自上海展云化工厂。1.2 鸡红细胞悬液 参照《动物病毒学》[3]红细胞悬液的制备方
中国兽医杂志 2010年6期2010-11-22
- 鸡胚成纤维细胞原代培养及应用*
原代细胞培养中,鸡胚成纤维细胞(chicken embryofibrob last,CEF)得到普遍应用。CEF的培养是在一定的条件下,在体外模拟体内生理环境,使从体内取出的成纤维组织细胞生存、生长和传代,并维持原有组织细胞的结构和功能特性。早年的组织培养工作者,如Carrel等曾用鸡胚做过大量研究工作[1]。与其他细胞相比,CEF相对容易获得,而且增殖能力强,适应性强,具有良好的耐受性,性状比较稳定,不易发生转化[2]。正是具备以上的特点,使得其被广泛地
动物医学进展 2010年3期2010-08-15
- 鱼腥草提取液在鸡胚内抗新城疫病毒试验
本试验对鱼腥草在鸡胚内的抗新城疫病毒活性进行试验研究，为临床进一步研究开发防治新城疫中药提供科学的实验依据。1 材料和方法1.1 材料1.1.1 鸡胚10日龄鸡胚，购自哈尔滨市红星孵化场。1.1.2 病毒 鸡新城疫病毒（Mukteswar1系），由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供，经SPF鸡胚增殖，血凝效价28。1.1.3 鱼腥草（Houttuynia cordate Thunb.）购于哈尔滨药材市场。1.2 方法1.2.1 NDV对鸡胚半数感染量（EI
中兽医学杂志 2010年3期2010-06-07
- 金莲花醇提物体外抗甲型流感病毒作用研究
1]。本试验采用鸡胚培养流感病毒，并用鸡红血球凝集试验检测药物对病毒在鸡胚尿囊液中增殖的抑制作用[2-4]，研究了金莲花醇提物抗甲型流感病毒作用，报道如下。1 材料试验药物：受试药物金莲花醇提物（含生药0.4 g/mL）。阳性对照药物双黄连注射醇提物（哈尔滨药业集团中药二厂，600 mg/瓶，批号为02111220），棕色冻干粉剂，试验用药质量浓度为100 g/L；阳性对照药物病毒唑（华北秦皇岛制药有限公司），试验用药质量浓度为0.25 g/L。病毒：流感
中国药业 2010年1期2010-06-01
- “种”在鸡蛋里的甲流疫苗
流疫苗是“种”在鸡胚里培育出来的，也就是民间说的毛鸡蛋。新闻提示 世界卫生组织日前发出警告，全球可能遭到甲型H1N1流感“第二波”袭击。根据以往经验，秋冬是流感大流行的季节。接种疫苗已经成为预防甲型H1N1流感最后一道屏障。目前各国都在紧锣密鼓地生产疫苗—中国也不例外。什么是疫苗？疫苗就是病毒，不过这种病毒已经剔除致病能力。当人体接种疫苗时，免疫系统就会产生一定的保护物质。当人再次接触该类病毒时，人的免疫系统就会循着原有的记忆，制造更多的保护物质来阻止病毒
博客天下 2009年18期2009-09-15