不良孕产史及不孕不育夫妇115例外周血异常染色体核型分析

介情情

河南省三门峡市中心医院(472000)

染色体异常为导致不良孕产史、不孕不育、出生缺陷的重要遗传因素，外表正常但携带异常染色体是引起其子代流产和死胎，导致新生儿死亡、先天性畸形重要因素[1]。引起染色体异常的机制：一方面可能是细胞分裂后期的染色体不分离或有丝分裂中各因素导致染色体出现断裂、缺失甚至错误连接；另一方面是遗传于表型正常的倒位/易位型携带者的亲代[2]。予以染色体检查可对不良孕产史及不孕不育患者进行优生优育指导。本文主要分析本院病例资料，探讨外周血异常染色体核型检出与不良孕产史、不孕不育的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2015年7月—2020年12月在本院行遗传咨询的不良孕产史及不孕不育夫妇585对(1170例)，年龄20～43岁，其中男585例，平均年龄30.5岁；女585例，平均年龄29.7岁。就诊原因为不良孕产史、不孕不育史。均在入院时仔细询问患者不良孕产家族史、放射性物质接触史、服用药物等，排除解剖异常因素。本研究经本院伦理委员会审批，患者签署知情同意书。

1.2 染色体核型分析

应用外周血染色体核型制备方法进行分析。常规抽取其静脉血2 ml，应用肝素抗凝，在无菌条件下接种5 ml至含有2%植物凝集素(PHA)的外周血淋巴细胞培养基，轻轻摇匀后，置37℃ CO2恒温培养箱培养68～72 h，终止培养前2 h滴加秋水仙素处理，经枸橼酸钠低渗处理后，应用甲醇、冰醋酸固定，滴片，胰酶消化分带，Giemsa染色显带。对每例标本计数20～30个分裂相，分析其中3～5个核型，选取1～2个摄影存档。若有染色体异常则计数100个分裂象并加倍核型分析数目。依据《人类细胞遗传学国际命名体制》[3]进行染色体核型描述与诊断。

1.3 统计处理

采用SPSS23.0对获得数据进行统计学处理。计数资料应用(%)表示，以χ2检验。以P<0.05为差异有显著性。

2 结果

2.1 异常染色体核型检出情况

585对(1170例)夫妇中，共检出异常染色体核型115例，检出率9.8%；115例异常染色体核型中，包括常染色体异常93例(80.9%)，数目异常26例(22.6%)，结构异常67例(58.3%)，包括臂间倒位27例(23.5%)、易位23例(20.0%)、罗伯逊易位17例(14.8%)，倒位中9号倒位、7号倒位、6号倒位、1号倒位分别21例、3例、2例、1例；性染色体异常22例(19.1%)，其中染色体数目异常、染色体结构异常、性反转分别15例、6例、1例。见表1。

表1 异常染色体核型类型分析

异常类型核型例数异常类型核型例数46,XX,inv(7)(p12q11.2)145,XY,der(13;14)(q10;q10)246,XX,inv(9)(p11q12)1145,XY,der(21;22)(q10;q10)146,XY,inv(9)(p11q12)345,XY,der(14;22)(q10;q10)246,XY,inv(9)(p11q13)545,XX,der(15;15)(q10;q10)146,XY,inv(6)(p23q15),21pss245,XX,der(21;21)(q10;q10)146,XX,inv(1)(p11q12)145,XY,der(15;21)(q10;q10)1 易位2345,XX,der(21;22)(q10;q10)146,XX,t(4;15)(q13;q11)1性染色体异常2246,XY,t(2;5)(q35;q13)2 染色体数目异常1546,XY,t(1;10)(q23;p11.2)147,XXY746,XY,t(2;18)(q31;q21)147,XYY546,XY,t(7;11)(q32;q13)145,X146,XX,t(3;10)(p13;q24)147,XXX,t(8;11)(q13;q23)146,XX,t(8;18)(p11;q21)347,XXX146,XY,t(5;18)(q13;q21)1 染色体结构异常646,XX,t(8;11)(q13;q23)146,X,del(Xp)[19]/45,X[11]246,XX,t(1;10)(q23;p11.2)246,X,del(X)(p11)246,XX,t(2;9)(q34;q11.3)146,XY,del(Y)(q11.23)146,XX,t(1;4)(q45;q27)146,X,del(X)(q26qter)146,XX,t(5;12)(q35.4;q23.5)1 性反转46,XY146,XY,t(2;11)(q21;p15)1

2.2 不同性别患者染色体异常核型检出情况

染色体异常核型检出率男性(9.6%，56/585)与女性(10.1%，59/585)无差异(χ2=0.087，P>0.05)；男性性染色体数目异常占比高于女性，常染色体数目异常及结构异常(倒位、易位、罗伯逊易位)、性染色体结构异常、性反转占比低于女性(P<0.05)。见表2。

表2 不同性别患者染色体异常核型检出比较[例(%)]

2.3 染色体异常核型患者的临床表现

染色体核型异常者临床表现多为习惯性流产或胚胎停育(45例，39.1%)、胎儿染色体异常(18例，15.7%)、死胎与死产(16例，13.9%)、畸胎史(10例，8.7%)、产先天性疾病患儿(8例，7.0%)、无精子(10例，10.4%)、少精子与弱精子(6例，5.2%)。

3 讨论

不良妊娠史包括反复流产、畸形胎儿、死胎、既往有染色体异常胎儿妊娠史与畸形儿出生史等[4-5]。既往有不良妊娠史或不孕不育的夫妇再妊娠时心理压力大、精神易紧张，且再次妊娠时是否发生不良妊娠结局和既往有流产史、妊娠次数多等有密切关系[6]。染色体是遗传物质携带者，染色体异常是导致不孕不育及不良孕产史的重要因素[7-8]。对不孕不育及不良孕产史的夫妇进行外周血染色体检查十分必要。

染色体核型异常检出率在各地区报道各异。刘晓光等[9]报道，河北省保定市某医院3348例不孕不育患者中，异常核型检出率为2.09%；程启航等[10]报道浙江某地区342例不良孕产史及不孕不育患者染色体异常核型检出率为9.06%；董国法等[11]报道，广州地区1273例不良孕产史者染色体异常核型检出率为10.37%；张素华等[12]报道扬州地区5292例不良孕产史人群染色体核型异常检出率为5.56%；其他地区报道的染色体核型异常检出率为7.14%[13]、7.1%[14]。本次检测染色体核型异常率为9.8%，差异之处可能与地域、环境因素、饮食习惯等不同有关。

刘晓飞等[15]报道，豫西地区1261对(2522例)不良孕产史夫妇中染色体核型异常176例，染色体多态性占50.0%，易位型占27.3%，性染色体数目异常占14.2%，倒位型占6.8%，标记染色体占异常核型1.7%；孟倩等[16]报道，58例核型异常的不孕及不良孕产史夫妇中，染色体异常主要包括平衡易位、臂间倒位、多态性等。本次115例异常染色体核型中常染色体异常占80.9%，性染色体异常占19.1%，表明在不良孕产史及不孕不育夫妇中染色体核型异常以常染色体异常为主。

亲代染色体异常改变可影响生育能力，或引起子代染色体易位及缺失，导致流产、胎停育、死胎等不良孕产史。易位为不良孕产史及不孕不育夫妇较常见的染色体结构异常。本次易位占异常染色体核型的20.0%，其中平衡易位发生率高。平衡易位使遗传物质平衡受破坏，最终导致流产或死胎、畸形[17]。臂间倒位时，亲代杂合子于减数分裂时配对、交换机会增加，重复及缺失部分更短，导致子代胚胎存活度更高，其中1、6、7、9号染色体缢痕染色质区是容易发生自发、诱发断裂部位，其数目增加或减少均可对染色体的次缢痕区着丝粒-动粒复合体形态变化、正常功能发挥产生影响，可产生非正倍体，尤其是9号染色体的臂间倒位最常见，一般认为其是染色体多态性的表现，该病无遗传效应[19]。本次检出的臂间倒位占异常染色体核型的23.5%，且以9号染色体臂间倒位为主(77.8%)，与一项天津地区[18]的报道结果相近。罗伯逊易位为平衡易位的特殊形式，本次检出罗伯逊易位占14.9%。

染色体数目异常涉及的基因数量较大，常导致胚胎停止发育或造成不良孕产史。本次检出的常染色体中数目异常26例，以47,XXY型为主，47,XXY即Klineferter综合征，也称为先天性睾丸发育不良或XXY综合征，其机制为患儿父亲或母亲生殖细胞减数分裂时X染色体不分离或受精卵有丝分裂不分离所致[18]。性别决定的关键是与卵子结合的精子类型(X或Y型)[19]，性染色体异常主要包括染色体数目异常、染色体结构异常、性反转，其中染色体数目异常涉及的基因数量较大常导致胚胎停止发育或造成不良孕产史，而结构异常指染色体或染色单体经断裂-重换或互换机制，产生的染色体畸变及染色单体畸变；性反转综合征则是性别发育异常性遗传疾病[20]。本次染色体数目异常、染色体结构异常、性反转分别15例、6例、1例，其中染色体数目异常占多数。

欧阳鲁平等[21]发现，3025对不良孕产史夫妇中，染色体异常检出率男性(12.8%)与女性(14.8%)无差异；而樊卫民等[22]发现，在107例染色体异常核型的不孕不育患者中，男性性染色体数目异常率高于女性，女性多见低比例嵌合。本次染色体异常核型检出率男性与女性未见差异，在异常核型构成中男性的性染色体数目异常占比高于女性。考虑是因为男性生殖细胞形成时可产生携带有平衡易位的精子，但正常精子需经过选择，而女性卵子数量有限，故女性染色体异常检出率要高于男性，染色体异常数目发生率更高。

孕早期胚胎停育为近年来不良妊娠的最主要表现，夫妻双方的染色体核型异常为导致不良妊娠的重要原因。本次发现，染色体核型异常者临床表现多为习惯性流产或胚胎停育、胎儿染色体异常、死胎与死产、畸胎史、产先天性疾病患儿、无精子、少精子与弱精子，与张月等[23]及刘惠玲等[24]报道结果相近，因而染色体异常为引发不孕不育、妊娠胎儿丢失、智力低下、不良孕产史等疾病的主要原因，也是孕前优生遗传咨询的主要问题，开展孕前优生遗传咨询及检查，联合染色体筛查与产前诊断，可防止染色体病患儿的出生。

综上所述，本次1170例不良孕产史及不孕不育夫妇中，染色体异常核型检出率为9.8%，其中常染色体异常较常见，尤其是数目异常及臂间倒位、易位、罗伯逊易位；有助于对不孕不育夫妇开展染色体核型分析及遗传咨询。