血液和精液中艾滋病病毒量评估抗病毒阻断后病毒变化的临床价值

崔楠君，刘英涛，梁琪

(登封市人民医院感染科，河南 登封452470)

艾滋病即获得性免疫缺陷综合征(Acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)，是因后天感染艾滋病病毒即人免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus，HIV)造成患者免疫系统紊乱甚至瘫痪的一种传染性疾病，该病与患者本身基因遗传没有很大关系[1]。AIDS主要是通过一些外界因素进行传播，常见的传播方式有母婴传播、血液传播及性传播，性传播是最常见的传播方式[2]。艾滋病病毒是破坏免疫系统的罪魁祸首，患者免疫系统被破坏后，会出现一些机会性感染，严重的会发展为恶性肿瘤[3]。常见的机会性感染源有细菌、病毒、原虫、真菌等，造成患者呼吸系统、消化系统、中枢神经系统、眼部、淋巴、口腔等发生病变[3]。常见的恶性肿瘤有恶性淋巴癌、卡波氏肉瘤、子宫癌、宫颈癌等，目前艾滋病主要有HIV1和HIV2这两种类型，全球流行的主要是HIV1，HIV2主要在西非[4]。无论是HIV1还是HIV2，抗病毒治疗是治疗艾滋病最根本的方法，HAART最常用[5]。CD4+T淋巴细胞与人体免疫功能有关，HIV RNA与病毒量有关[6]。本文通过探究抗HIV病毒治疗AIDS，HIV阻断后患者血液和精液中HIV病毒量来评估艾滋病的病毒变化，确定其临床价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018年3月至2020年6月本院收治的AIDS患者160例，其中男87例，女73例，年龄24～45岁，平均(33.18±3.45)岁。纳入标准：(1)符合《中国艾滋病诊疗指南(2018版)》中对AIDS的诊断标准[7]：①流行病学史：不安全性生活史、静脉注射毒品史、输入未经抗HIV抗体检测的血液或血液制品、HIV抗体阳性者所生子女或职业暴露史等；②临床表现：出现咽喉痛、恶心呕吐、盗汗、腹部及神经疼痛等综合病症；③实验室检查：经确认实验室实验，须得到HIV抗体结果呈阳性，以上①②主要是起筛选作用，必须满足③才可确诊AIDS[5]；(2)均行HAART治疗；(3)参与患者均知情，并亲自签署知情同意书。排除标准：(1)有其他传染病史者；(2)合并器官功能障碍者；(3)精神障碍者。研究经医学伦理委员会审批通过。

1.2 方法

所有患者均持续进行三联抗病毒药物HAART治疗[8]。替诺福韦[葛兰素史克(天津)有限公司，国药准字H20153090]：300mg/(次·d)；齐多夫定(江西汇仁药业有限公司，国药准字H20070097)：250mg/(次·d)，2次/d；硫酸阿扎那韦胶囊(Bristol-Myers Squibb Company，批准文号H20110493)：400mg/(次·d)。每6月对患者进行回访，测量不同时间段的CD4+T淋巴细胞及HIV RNA病毒载量水平。

患者血液和精液中CD4+T淋巴细胞及HIV RNA病毒载量水平测定[9]：分别于治疗前及治疗6月、12月、18月、24月采集患者血液和精液标本，静置约5h后分离出需要测定的血浆及精浆，存于-70℃冰箱中备用。使用流式细胞仪(BD，型号Accuri C6)进行CD4+T淋巴细胞计数，使用荧光探针法PCR技术测定HIV RNA病毒载量水平，采用核酸提取仪(东北制药集团股份有限公司，型号DYSW-AUTO48)提取核酸样本，采用Roche荧光定量PCR仪(东北制药集团股份有限公司，型号LightCycler®480)测定HIV RNA病毒载量。

比较治疗前及治疗6月、12月、18月、24月患者血液和精液中CD4+T淋巴细胞及HIV RNA病毒载量水平的变化。

1.3 定期回访

分别于患者治疗6月、12月、18月、24月测定其血清及精液中的CD4+T淋巴细胞及HIV RNA病毒载量水平的变化并详细记录。每次回访时询问并解答患者遇到的问题，使患者放心接受治疗。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 不同时间段血液和精液中CD4+ T淋巴细胞含量

治疗前，患者血液和精液CD4+T淋巴细胞含量最低，血液中CD4+T淋巴细胞含量多于精液中(P<0.05)，治疗6月血液中CD4+T淋巴细胞含量较治疗前升高至最低均含量以上，精液中CD4+T淋巴细胞含量较治疗前上升(P<0.05)，但大多数患者精液中CD4+T淋巴细胞含量仍在最低均含量以下，12月、18月血液及精液中CD4+T淋巴细胞含量均升高至最低均含量以上，血液中CD4+T淋巴细胞含量多于精液中CD4+T淋巴细胞含量(P<0.05)。24月时，患者血液及精液中CD4+T淋巴细胞含量出现降低的现象，但均高于200个/μL(P<0.05)。见表1。CD4+T淋巴细胞最低均含量为：200个/μL。

表1 不同时间段血液和精液中CD4+ T淋巴细胞含量比较个/μL)

2.2 不同时间段血液和精液中HIV RNA病毒载量比较

治疗前，患者血液和精液中HIV RNA病毒载量最高，血液中HIV RNA病毒载量少于精液中HIV RNA病毒载量(P<0.05)，治疗6月血液中HIV RNA病毒载量较治疗前降低至最低水平线以下，精液中HIV RNA病毒载量较治疗前降低，但大多数患者精液中HIV RNA病毒载量仍在最低检测水平线以上，12月、18月血液中HIV RNA病毒载量为0，精液中HIV RNA病毒载量大多数已在最低线以下，至24月，大多数患者血液及精液中均检测到HIV RNA病毒，血液中HIV RNA病毒载量少于精液中HIV RNA病毒载量(P<0.05)。见表2。HIV RNA病毒检测最低载量水平线：HIV RNA<50拷贝/mL。

表2 不同时间段血液和精液中HIV RNA病毒载量比较较拷贝/mL)

2.3 血液和精液中CD4+ T淋巴细胞与HIV RNA病毒载量水平的相关性

血液和精液中CD4+T淋巴细胞水平变化与HIV RNA病毒载量水平的变化均呈负相关(r=-0.196，P=0.027；r=-0.210，P=0.018)，CD4+T淋巴细胞水平越高，HIV RNA病毒载量水平越低；反之亦然。

3 讨论

艾滋病是一种潜伏期较长的全球性慢性疾病，95%存在于一些发展较缓慢的中低收入国家或家庭，非洲是高发区[10-11]。AIDS可通过直接接触黏膜组织的生殖器、口腔、伤口、肛门等或带有病毒的血液、精液、阴道分泌物、乳汁等传播。HIV能够特异性接触免疫系统细胞，损害免疫系统中辅助性的T淋巴细胞及其他多种免疫系统细胞，最终导致免疫系统瘫痪，使患者抵抗外界不良因素的能力严重降低甚至完全丧失[12]。机体易发各种疾病，且不是单纯一种，呈现综合征并发状，严重会发展成为恶性肿瘤。该疾病主要有3个较明显的时期，按照顺序依次是急性期、无症状期和艾滋病期。急性期一般在2～4周就能检测出HIV，被确诊为AIDS，有些患者会出现咽喉痛、恶心呕吐、盗汗、腹部及神经疼痛等症状，有些患者无症状[13]。无症状期患者无任何发病症状，其潜伏期很长，一般是6～8年，该时期的长短与病毒数量、类别、患者本身身体状况等多种因素有关[14]。CD4+T淋巴细胞参与人体免疫系统的调节与稳定，其含量能够反映患者免疫能力的高低，HIV RNA病毒载量能够反映患者体内HIV病毒量的多少，从而评估AIDS患者病情严重性及临床治疗效果。AIDS治疗主要是抗病毒治疗，通过有效抑制HIV复制，减少HIV RNA病毒载量，重建并保护正常免疫功能，使CD4+T淋巴细胞含量上升，提升整体免疫力，降低综合征的发生率，从而降低患者病死率、减少AIDS传播量、提高其生活质量[15]。

本文结果显示，治疗前，患者血清及精液中CD4+T淋巴细胞含量最低，HIV RNA病毒载量最高，治疗6月、12月、18月患者血液和精液中CD4+T淋巴细胞含量逐渐增加，HIV RNA病毒载量逐渐降低，24月患者血液及精液中的CD4+T淋巴细胞水平较之前18月时有所降低，血液及精液中的HIV RNA病毒载量水平较之前18月时有所上升，可能是因为替诺福韦、齐多夫定作为核苷类逆转录酶抑制剂，能够在受病毒感染的细胞内被细胞胸苷激酶磷酸化为三磷酸，三磷酸齐多夫定能选择性抑制HIV逆转酶，导致HIV链合成终止从而阻止HIV复制。而硫酸阿扎那韦胶囊是一种蛋白酶抑制剂，具有高度选择性，能够抑制HIV病毒Gag和Gag-Pol多聚蛋白的加工过程，阻断HIV成熟病毒的形成[16]。24月时数据出现回升的趋势，可能是与抗病毒药物的耐药性增加有关[17]。该三联药物能够有效阻止HIV形成，降低HIV RNA病毒载量，提升患者体内CD4+T淋巴细胞含量，恢复正常免疫功能。本文结果显示，血液中CD4+T淋巴细胞含量多于精液中CD4+T淋巴细胞含量，血液中HIV RNA病毒载量少于精液中HIV RNA病毒载量，可能是因为有些患者感染起始的原因不同，有些是通过血液，有些是性行为，有些是母乳等，导致HIV开始进行裂解复制的起始位点不同，所以其HIV RNA病毒载量也就不同，最后导致患者该处的CD4+T淋巴细胞含量不同，还有可能是因为抗病毒药物对于精液的穿透性弱于血液，抗病毒药物发挥作用较少，导致遗留在精液中的HIV RNA病毒载量多于血液中[18]。

综上所述，在AIDS临床诊断和抗病毒治疗中，CD4+T淋巴细胞含量与HIV RNA病毒载量可作为判定AIDS患者病情严重程度和抗病毒治疗效果评价的指标。但是当血液中测不到HIV RNA病毒时，精液中依然能够检测到。临床诊断和治疗AIDS时，为确保诊断及治疗的准确性和及时性，应对患者进行严格的综合检测。