AIHA患者血型血清学特征及输注悬浮红细胞疗效分析

邸艳辉 管行 寇立舵 白薇 王新华

自身免疫性溶血性贫血（autoimmune hemolytic anemia，AIHA）是指由于自身红细胞膜分子构象改变、免疫系统功能异常或某些遗传因素等，产生自身抗体和（或）补体结合在红细胞膜上，通过抗原抗体反应导致红细胞破坏加速而引起的溶血性贫血。AIHA可根据抗体作用于红细胞膜所需的最适温度，分为温抗体型和冷抗体型。给予有效的红细胞输注治疗可以在短时间内迅速改善AIHA患者临床贫血症状，是目前临床上抢救重症AIHA患者的重要措施之一[1]。本研究分析悬浮红细胞输注对AIHA患者治疗效果及血型血清学特征及安全性，为临床更好治疗AIHA提供研究依据。

材料与方法

1 病例资料 选取我院2014年1月～2019年12月期间住院治疗AIHA患者56例，其中8例患者采用药物治疗，为A组，年龄26～72岁，平均（48.9±8.2）岁；18例患者采用输注洗涤红细胞治疗，为B组，年龄28～79岁，平均（48.2±8.9）岁；30例患者采用输注悬浮红细胞治疗，为C组，年龄18～83岁，平均（47.5±9.1）岁。所有患者经诊断均符合AIHA临床诊断标准[1]。3组患者性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

2 仪器与试剂 抗-A、抗-B血型定型试剂（批号：102182和204178）、RhD血型定型试剂（批号：517187）、ABO血型反定型细胞试剂（批号：115396C），均由美国Immucor公司提供；微柱凝胶抗人球蛋白卡（批号：20139.01.1）、低离子液（批号：20013.01）、专用孵育器（型号：DG THERM）、专用卡式离心机（型号：GRIFOLS DG SPIN），均由西班牙Diagnostic Grifols公司提供；红细胞抗体筛查试剂（批号：8000451206）由荷兰Sanquin Reagents B.V.公司提供；直接抗人球蛋白试验分型卡（批号：202003001）由江阴力博医药生物技术公司提供；RBC、Hb、Ret检测由迈瑞BC6900仪器提供，采用红细胞阻抗法；TBIL检测由贝克曼AU5811仪器提供，采用重氮比浊法；各种试剂均在有效期之内。

3 检测方法 血型鉴定和直接抗人球蛋白试验，应用全自动血型分析仪和配套试剂检测血型；将患者红细胞压积稀释1%红细胞悬液，分别加50 μL到直接抗人球蛋白卡中，离心后看结果；将1%抗体筛查细胞（仪器操作）各50 μL分别加入微柱凝胶抗人球蛋白卡中，再将患者血浆25 μL依次加入，同时加自身对照，孵育15 min，离心后观察结果。

4 评价指标

4.1 DAT分型与溶血严重程度的相关性：在DAT分型的同时检测患者红细胞、血红蛋白和网织红细胞作为溶血程度的参数。

4.2 DAT凝集强度与贫血程度的关系：通过检测DAT凝集强度和Hb水平，分析其与溶血和贫血的关系。

4.3 DAT凝集强度与输血疗效的关系：对自身抗体和DAT凝集强度为W+～4+患者均选取与患者ABO同型悬浮红细胞或O型洗涤红细胞进行输注。观察治疗前后的数值指标，判断输注疗效。①有效：输注后，患者血红蛋白水平较输注前增量至少为5（g/L）×60/患者体重（Kg）；②部分有效：输注后，患者血红蛋白水平较输注前明显上升，但增量不足5（g/L）×60/患者体重（Kg）；③无效：输注后，患者血红蛋白水平较输注前无明显上升甚至下降。总有效率＝（有效+部分有效）例数/总例数×100%[2]。

4.4 红细胞输注：①对有自身抗体的患者，选取ABO同型悬浮红细胞或O型洗涤红细胞。②对有同种抗体+自身抗体的患者，选取没有同种抗体对应抗原的ABO同型悬浮红细胞或O型洗涤红细胞。均用Liss/Coombs卡式做交叉配血，相合后输注，如不相合用经典IAT法做交叉配血，相合后输注。

5 统计学处理 采用SPSS 20.0软件进行统计分析，计量资料以（）表示，采用t检验。计数资料以百分率（%）表示，采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 56例患者血型血清学特征分布、DAT分型与溶血程度的关系 单纯型（IgG、C3d）和复合型（IgG+C3d）的溶血参数相比，有显著性差异（P＜0.05），见表1。

表1 56例血型血清学特征分布、DAT分型与溶血程度的关系（）

表1 56例血型血清学特征分布、DAT分型与溶血程度的关系（）

注：*：P＜0.05

2 56例患者DAT凝集强度与贫血程度的关系 56例患者通过检测DAT凝集强度与Hb水平，分析检测结果，自身抗体和DAT凝集强度为W+～1+患者，其Hb水平集中在60 g/L以上，自身抗体和DAT强度为1+～2+患者，其Hb水平集中在60 g/L以下，自身抗体和DAT强度为2+～3+患者，其Hb水平集中在50 g/L以下，自身抗体和DAT强度为3+～4+患者，其Hb水平集中在40 g/L以下。DAT为2+凝集强度和2+以上凝集强度与溶血及贫血严重程度有统计学差异（P＜0.05），见表2。

表2 56例患者DAT凝集强度与Hb水平的关系（）

表2 56例患者DAT凝集强度与Hb水平的关系（）

注：*：P＜0.05，DAT凝集强度越强溶血程度越严重，而贫血程度随之加重

3 治疗前后实验室指标变化比较 3组患者治疗1天后，Hb、RBC水平较治疗前明显升高，Ret、TBIL水平较治疗前明显降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。3组患者治疗前Hb、RBC、Ret、TBIL水平之间的差异无统计学意义（P＞0.05），3组患者治疗后1天Hb、RBC、Ret、TBIL水平之间的差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。

表3 3组患者治疗前后实验室指标变化比较（）

表3 3组患者治疗前后实验室指标变化比较（）

4 治疗后疗效比较 3组患者治疗后疗效的差异无统计学意义（P＞0.05），见表4。

表4 3组患者治疗后疗效比较

讨 论

国外资料显示AIHA的年发病率为（0.8～3.0/10万）[3，4]。自身免疫性溶血性贫血（AIHA）是由于体内B淋巴细胞功能异常亢进，产生过多的自身红细胞抗体和（或）补体吸附于红细胞表面，从而加速红细胞破坏而导致的一种较为常见的贫血[3]。临床和实验研究资料表明，自身免疫病的发生与病毒感染、恶性肿瘤、自身免疫疾病等相关，其可通过基因突变，改变红细胞膜抗原等刺激机体产生抗红细胞抗体，引起红细胞脆性增加而发生溶血[5]。本研究中AIHA患者多见于自身免疫性疾病、白血病、淋巴瘤、恶性肿瘤及感染性疾病，可分为温抗体型及冷抗体型[6]。AIHA以温抗体型最为多见，其抗体类型主要为IgG及C3，其作用于红细胞膜的最佳温度为37℃，红细胞被抗体吸附后，被单核-巨噬细胞系统识别吞噬，即发生血管外溶血[7]。冷抗体型在临床上可分为阵发性冷性血红蛋白尿（PCH）及冷凝集素综合征（CAS）[8]。本研究中，56例AIHA患者自身抗体类型以IgG型最多，其次为IgG+C3型及C3型，各种类型AIHA溶血和贫血严重程度与DAT分型和凝集强度有关。单纯型（IgG或C3d）和复合型（IgG+C3d）的溶血参数相比，有显著性差异（P＜0.05），且复合型溶血程度重于单纯型，与杨国元等[9]报道相符。56例患者DAT结果均为阳性（凝集强度W+～4+），自身抗体和DAT凝集强度与溶血和贫血呈正相关（P＜0.05），说明DAT凝集强度越高其溶血和贫血程度越严重。临床工作中也发现DAT阳性的非AIHA病例，此患者DAT阳性可能是由于非红细胞抗原特异性球蛋白非特异性黏附于红细胞表面，这种结合与抗原抗体结合不同，不会引起抗体免疫球蛋白构象的改变，没有补体参与，不会加速红细胞破坏，因此不会产生溶血[10]。

本文研究表明3组治疗前后比较Hb、RBC明显升高，Ret、TBIL明显降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）；3组治疗后比较，均能够有效缓解患者的临床症状，临床治疗效果明显改善，未发生溶血及输血不良反应，总有效率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

本研究结果显示，AIHA患者输注悬浮红细胞和洗涤红细胞都可提高机体Hb水平，有效缓解贫血和机体缺氧状况。但由于抗体阳性与自身免疫有关，常规输血容易引起红细胞脆性增加而发生溶血，从而发生输血不良反应。因此，建议临床以肾上腺皮质激素、免疫抑制剂、丙种球蛋白等药物治疗为主，对于贫血症状严重的患者，给予输血治疗可快速改善AIHA患者缺氧症状，但长期输注可导致更多自身抗体产生，应选择最小剂量的红细胞进行输注[11]。

由于洗涤红细胞存在制备时间长、保存期短、红细胞脆性大、库存少等特点。本研究显示，洗涤红细胞相对悬浮红细胞，并没有给AIHA患者提供更为理想的输注效果，过度使用洗涤红细胞反而会对供血机构造成较大负担[12]。经过临床观察，给予AIHA患者输注悬浮红细胞治疗效果显著，并且悬浮红细胞保存期长，库存充足，应用时很方便，能及时有效改善患者临床症状，并且安全可靠，具有很重要的临床意义。

综上所述，由于AIHA免疫血清学十分复杂，在临床输血中，对AIHA输血患者要严格掌握输血适应症，并以贫血的严重程度、发展速度及临床症状为主要依据。选择合适的输血方法对于抢救患者生命、改善其预后等均具有重要意义。本研究中，输注悬浮红细胞治疗AIHA的临床疗效十分确切，未出现输血不良反应，具有安全有效性，且快捷方便，值得在临床上广泛推广与运用。

利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突