FNA及BRAFV600E基因突变检测甲状腺乳头状癌的价值分析

廖鹏娟

（惠州市中心人民医院 病理科，广东 惠州 516001）

0 引言

甲状腺乳头状癌（Papillary Thyroid Cancer，PTC）是临床上较为常见的一种恶性程度较低的甲状腺癌，以颈部无痛性肿块为主要临床表现，好发于儿童及40岁以下的女性，其发生发展多受激素、遗传、环境等因素的影响[1]。该疾病具有恶性程度低、生长缓慢以及预后良好的特点，因此合理有效的诊断于患者意义重大。病理活检为诊断该疾病的金标准，但其创伤较大故不宜作为首选。超声引导下细针穿刺细胞学检查（Fine-Needle Aspiration，FNA）是一种近乎无创的检查方式，成为现阶段临床诊断该疾病的主要模式，即便如此仍会有漏诊、误诊的发生[2]。BRAFV600E基因突变检测是一类较为新颖的检测途径，但此检查方式在PTC的诊断中仍需进一步进行探讨[3]。本研究旨在探讨FNA及BRAFV600E基因突变检测PTC的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料。经患者及家属同意并签署知情同意书，选取惠州市中心人民医院2019年10月至2020年12月200例疑似甲状腺乳头状癌患者，所有患者均接受超声引导下FNA和BRAFV600E基因突变检测。男98例，女102例；年龄26～70岁，平均（42.36±13.71）岁；结节大小0.8～2.5 cm，平均（1.65±0.21）cm。纳入标准：均可行超声引导下FNA、BRAFV600E检测者；初发甲状腺结节。排除标准：合并精神类疾病，不予配合者；言语表达不清者；甲状腺相关检查指标异常者；资料不全，且无法确认者等。本研究已由院内医学伦理委员会审核通过。

1.2 方法

1.2.1 超声引导下FNA检测：运用超声诊断仪（PHILIPS Sparq），探头为L5-12 MHz。穿刺前检查是否存在穿刺禁忌证，置患者于仰卧位，充分暴露颈前区，彩色多普勒超声扫描甲状腺区域选定拟穿刺部位，以23 G×50 mm针尖穿刺可疑结节内，重复提插穿刺10～15次，取得样本后并将所得样本送病理科进行细胞学检查。

1.2.2 BRAFV600E基因突变检测：试剂盒（厦门艾德生物医药，国械注准20143401824，规格：24测试/盒）。首先将冻存于于-20℃中的标本取出，解冻并离心，将细胞标本溶入GA缓冲液，加入蛋白酶混匀，于70℃环境下静置10 min，加入无水乙醇充分混匀，离心去除水珠，将溶液加入吸附柱，离心后加入GD缓冲液，再加入Pw漂洗液，离心倒掉废液后加入TE缓冲液洗脱，静置约5 min后离心收集溶液；扩增序列获得突变信号或内控信号Ct值，判断是否存在基因突变，Ct值＜30为突变阳性，Ct值≥30为无突变）。

1.3 观察指标和评价标准。以手术病理结果作为诊断的金标准，分析超声引导下FNA、BRAFV600E检测单独与联合诊断对PTC的诊断价值，

1.4 统计学分析。数据录入SPSS 22.0软件中分析，计数资料用[n（%）]表示，采用配对χ²检验，计量资料用（）表示，采用配对t检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同检查方式的诊断结果。超声引导下FNA显示阳性和阴性分别为156和44例；BRAFV600E检测显示阳性和阴性分别为158和42例；两种方式联合检测阳性和阴性分别为181和19例，见表1。

表1 不同检查方式的诊断结果比较

2.2 不同检查方式的诊断效能。超声引导下FNA检测和BRAFV600E基因检测单独检测灵敏度、特异度、准确率均较联合检测低（P＜0.05），见表2。

表2 不同检查方式的诊断效能对比[n（%）]

3 讨论

PTC属于恶性肿瘤的一种，其生长较为缓慢，且大多数预后良好，病灶可经腺内淋巴管自原发部位扩散至腺体的其他部位和颈部淋巴结，且近年来发病率呈现逐年增加的趋势[4]。超声引导下FNA是以往临床上常用的检查方式，其在诊断甲状腺结节方面较为可靠，但仍然存在40%的误诊率，对后期治疗造成不良影响[5]。

BRAFV600E突变检测与肿瘤的不良临床及病理表现关系密切，且BRAFV600E突变仅存在于甲状腺恶性结节中，而良性结节中并未发现该基因的存在，同时该基因的突变可导致氨基酸结构发生变化，活化蛋白激酶信号通路，促使细胞发生异常性分化与增殖[6-7]。

以手术病理结果检查为金标准，灵敏度、特异度、准确率可以检测该检查方式的诊断价值及可靠的理论依据。本研究结果显示超声引导下FNA显示阳性和阴性分别为156和44例，BRAFV600E检测显示阳性和阴性分别为158和42例，两种方式联合检测阳性和阴性分别为181和19例；超声引导下FNA检测和BRAFV600E基因检测单独检测灵敏度、特异度、准确率均较联合检测低（P＜0.05），这提示FNA及BRAFV600E基因突变检测均可检测PTC且联合检测对PTC的诊断价值更高，进而可降低漏诊率与误诊率，为后续的治疗提供了可靠的影像学及分子学依据。分析其原因可能与FNA及BRAFV600E基因突变检测具有操作简便、降低手术伤害等优势，且BRAFV600E检测可有效鉴别甲状腺疾病类型，同时还利用实时荧光定量PCR法扩增序列，获得突变信号，提高了检出的灵敏度和特异度，进而提高了准确率[8]。

综上所述，超声引导下FNA和BRAFV600E基因突变检测均可检出PTC，但联合检测诊断价值更高。