乳腺癌组织中ER、PR、C-erbB-2、Ki-67的表达、分子分型及预后分析

曾达通

（玉林市红十字会医院病理科，广西玉林 537006）

乳腺癌起源于乳腺实质细胞，特别是终末导管上皮细胞，是女性最常见的恶性肿瘤之一。近些年临床分子生物学快速发展，有部分学者通过开展病理组织免疫指标相关研究发现，病理分子标志物与乳腺癌患者治疗与预后存在一定相关性[1]。孕激素受体（PR）与雌激素受体（ER）均属于一种特定功能性蛋白，在乳腺癌细胞生长与分化等方面起到一定调节作用。增殖细胞核抗原（Ki-67）属于反映肿瘤细胞增殖活性的一种蛋白，半衰期较短且退出细胞周期后可迅速降解；有研究指出，肿瘤细胞内人表皮生长因子受体（C-erbB-2）若被激活则能够使肿瘤呈现转化活性状态[2]。本研究旨在探讨乳腺癌组织中ER、PR、C-erbB-2、Ki-67的表达、分子分型及预后，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取玉林市红十字会医院2019年1月至12月收治的182例新发乳腺癌患者，进行前瞻性研究，患者年龄31～78岁，平均（54.52±4.65）岁。根据《2013年St Gallen乳腺癌会议国际专家共识荟萃》[3]进行分子分组，Luminal A型34例、Luminal B型（HER2阴 性）64例、Luminal B型（HER2阳 性）41例、Erb-B2过表达型23例、三阴型20例。本研究经院内医学伦理委员会批准，患者或家属对本研究知情同意。纳入标准：符合《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范（2017年版）》[4]中的相关诊断标准者；患者均为2019年新发病例，符合乳腺癌临床诊断标准且经过活检或手术后病理检查证实；患者在做病理检查（免疫组化）前均未接受抗肿瘤治疗（化疗或放疗）。排除标准：纳入前已接受抗肿瘤治疗者；未做免疫组化者。

1.2 方法 病理诊断：所有癌细胞样本均源于本组乳腺癌患者活检或手术截取，制作切片，采用显微镜（型号：IS-3000，奥林巴斯）对切片进行观察以判断肿瘤病理分型。免疫组化检测：在切片内加入梯度酒精实施脱腊水化、抗原修复，室温下使用3%过氧化氢进行5～10 min孵育，阻断过氧化物酶活性，经过蒸馏水冲洗再置于PBS内进行5 min浸泡，随后使用山羊血清封闭，加一抗，置于生化培养箱内（37 ℃）孵育2 h；PBS浸泡冲洗3次后，选择DAB进行显色，苏木精复染，蒸馏水再冲洗后，进行脱水、复染及封片等操作。阳性对照选择已知阳性的肿瘤标本作为参照对象，阴性对照选择已知阴性的正常乳腺导管或小叶组织。

1.3 判定标准 PR、ER、Ki-67主要位于肿瘤细胞核内，阳性表达时细胞核存在棕黄色颗粒，任意5个高倍镜视野下，平均阳性细胞比例：计数或评估100个以上细胞，＜10%浸润性癌细胞核染色为阴性，10%～25%为弱阳性，26%～50%为中度阳性，＞50%为强阳性；C-erbB-2主要定位于肿瘤细胞膜，阳性表达时可见细胞膜存在棕黄色颗粒，根据细胞膜或细胞质是否着色判断阴阳性，阴性不着色，弱阳性为着色弱强度且不连续，中度阳性为着色中强度且部分不连续，强阳性为强着色且着色连续不间断[5]。

1.4 观察指标 ①比较各免疫组化指标在乳腺癌组织中的表达情况。总阳性率=（强阳性+中度阳性+弱阳性）例数/总例数×100%。②观察比较各免疫组化指标的病理特征。③分析ER、PR、C-erbB-2、Ki-67表达的相关性。④比较不同分型淋巴结转移与脉管瘤栓发生情况。

1.5 统计学分析 采用SPSS 20.0统计软件分析数据，计数资料以[例(%)]表示，行χ2检验；ER、PR、C-erbB-2、Ki-67 表达的相关性采用Pearson分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 乳腺癌组织免疫组化指标阳性率 PR表达总阳性率为82.97%，ER表达总阳性率为76.37%，C-erbB-2表达总阳性率为35.16%，Ki-67表达总阳性率为77.47%，C-erbB-2表达总阳性率均低于PR、ER、Ki-67表达总阳性率，各免疫组化指标阳性率经比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表1、图1-4。

2.2 各免疫组化指标的临床病理特征 50～78岁ER阳性例数占比高于31～49岁，Ⅳ期PR、ER阳性例数占比均低于Ⅰ期，Ⅳ期C-erbB-2、Ki-67阳性例数占比均高于Ⅰ期，有淋巴结转移C-erbB-2阳性例数占比高于无淋巴结转移，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2。

2.3 相关性Pearson分析显示，ER与年龄呈正相关（r=0.578，P＜0.05）；C-erbB-2、Ki-67与临床病理分期呈正相关（r=0.824、0.816，均P＜0.05）；PR、ER与临床病理分期呈负相关（r=-0.379、-0.423，均P＜0.05）；C-erbB-2与淋巴结发生转移发生呈正相关（r=0.859，P＜0.05）。

图1 PR阳性表达（×100）

图2 ER阳性表达（×100）

图3 C-erbB-2阳性表达（×100）

图4 Ki-67阳性表达（×100）

2.4 不同分型淋巴结转移与脉管瘤栓发生情况 Luminal A型、三阴型的淋巴结转移率与脉管瘤栓发生率均低于HER2过表达型，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表3。

3 讨论

乳腺癌的发病人数逐年上升，且发病年龄趋于年轻化。乳腺癌在发病早期治愈率较高，因此对乳腺癌的早期诊断至关重要，可根据早期诊断结果制定针对性的治疗方案，可有效提高患者的生存率，防止病情复发。对乳腺癌患者机体ER、PR表达水平的测定并了解这类免疫指标的功能状态，在评估患者内分泌治疗成效与预后方面具有重要意义[6]。研究指出，ER水平与总生存（OS）、无病生存（DFS）、无复发生存（RFS）、5年生存率、治疗失败时间（TTF）、内分泌治疗反应与复发时间呈正相关；PR水平与OS、TTF、内分泌治疗反应与复发时间呈正相关[7]。

乳腺癌的发病与患者体内雌激素、孕激素水平相关，乳腺组织中的ER、PR的表达情况，可反映患者机体内分泌状态，ER、PR阳性患者给予适当的内分泌治疗，可减少肿瘤细胞转移和复发的可能性[8]。本研究结果显示，ER、PR表达与临床病理分期呈负相关，ER与PR均呈阳性的Luminal A型患者淋巴结转移与脉管瘤栓发生率较低，提示PR、ER阳性率越高，患者预后越佳。Ki-67可作为评估肿瘤细胞活性的重要指标；一般Ki-67表达偏高者，其复发风险也较高，患者总生存期相对较短。当C-erbB-2水平呈现过表达时，肿瘤细胞具有旺盛的增殖力，且侵袭力变强，癌组织快速增殖，有利于对周围组织进行侵袭并向远端发生转移[9-10]。本研究结果显示，C-erbB-2、Ki-67表达与临床病理分期呈正相关，Ki-67低表达多为病情较轻的Luminal A型患者，而Ki-67高表达、C-erbB-2阳性多为病情严重的Luminal B型与HER2过表达型患者，出现了更高的淋巴结转移率和脉管瘤栓发生率，三阴型患者淋巴结转移率合脉管瘤栓发生率较低，表明Ki-67与C-erbB-2阳性表达率越高，乳腺癌组织侵袭力越强，其与患者预后效果呈负相关。

表1 各免疫组化指标在乳腺癌组织中表达情况[例(%)]

表2 各免疫组化指标的病理特征[例(%)]

表3 不同分型淋巴结转移与脉管瘤栓情况[例(%)]

综上，乳腺癌患者ER、PR阳性率较高的Luminal A型和三阴型患者预后良好，Ki-67阳性率高、Luminal B型与HER2过表达型患者预后较差。