西黄胶囊联合CIK细胞治疗晚期鼻咽癌临床研究

任 庆，熊锐华，何玉婵，诸葛金科，陆东兰，蒋小月

(桂林医学院第二附属医院，广西 桂林 541199)

近年来，受到生活环境、生活方式以及社会老龄化等因素影响，我国疾病模式也在不断变化，最新统计学资料显示，目前恶性肿瘤已超越脑血管疾病占据死亡原因首位，可达到总死亡人数的25%，远超过世界平均水平[1]。鼻咽癌是临床多发的头颈部恶性肿瘤之一，在我国分布具有显著的种族或地域差异，其中在广西等地区发病率较高，以40岁以上人群最为多见,且鼻咽部解剖位置相对较深，因此早期无典型、突出症状表现，确诊时70%左右已达到Ⅲ期或Ⅳ期，错过了最佳治疗时间[2]。对于晚期鼻咽癌患者来说，局部放疗联合铂类为基础的化疗是其治疗的基本方法，但患者5年生存率仍仅维持在50%左右，主要是因为恶性肿瘤患者机体内缺少有效的细胞免疫监视[3]，即使局部区域能够得到良好控制，仍会发生远处转移现象，另外化疗不良反应较多，影响患者生活质量，因此如何有效缓解患者病情发展，提高机体免疫力、改善生活质量、延长患者生存期一直是努力研究探索的方向。2016年1—12月我院将西黄胶囊联合细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)过继免疫疗法应用于晚期鼻咽癌患者的治疗中，取得较为满意疗效，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择我院上述时期收治60例晚期(转移性)鼻咽癌患者，其中男36例，女24例；年龄35～76岁，中位年龄61.9岁。纳入标准：①有明确的病理学诊断[4]；②既往曾接受标准放射治疗，CT扫描有可测量病灶；③预计生存期≥6个月；④卡氏评分(Karnofsky,KPS)≥70分；⑤血常规，肝、肾功能及心电图检查大致正常；⑥患者均对治疗知情同意，并签署知情同意书，自愿参与研究。排除标准：①精神异常者；②实验室检查发现凝血功能异常者；③哺乳期或孕期女性；④不能口服药物患者。通过余数分组法将患者随机分为2组：观察组30例，男19例，女11例；年龄36～74岁，中位年龄60.8岁。对照组30例，男17例，女13例；年龄35～76岁，中位年龄62.2岁。所有病例均记录真实的联络方式，以便随访。本研究经我院伦理委员会审查通过。

1.2治疗方法

1.2.1对照组 患者采取吉西他滨联合顺铂方案治疗：吉西他滨(江苏豪森药业有限公司，国药准字H20030104)1 000 mg/m2于治疗第1天和第8天静脉滴注；顺铂(齐鲁制药有限公司，国药准字H37021358)80 mg/m2于治疗第1天静脉滴注。每4周为1个周期，连续治疗4个周期。

1.2.2观察组 患者采用西黄胶囊联合CIK细胞治疗：西黄胶囊(陕西爱民制药有限责任公司，国药准字Z61020121)口服，8粒/次,于早晚饭后温水送服，连续用药21 d后停止服用1周为1个疗程，连续给药4个疗程。应用异体外周血淋巴细胞分离液50 mL，分离并收集所有患者外周血单个核细胞，经PBS对收集细胞进行3次洗涤，随后将细胞悬浮于RPMI 1640完全培养液中，密度维持在2×106个/mL，加入干扰素-γ 1 000 IU/mL，在5%CO2体积分数以及37 ℃环境下培养24 h，之后再加入白细胞介素-2(IL-2)1 000 IU/mL以及抗CD3单克隆抗体100 ng/mL继续进行培养，间隔2～3 d分瓶1次，同时继续补加IL-2和完全培养液，14 d后进行检测，确认无污染后经离心、洗涤以及重悬浮后收集CIK细胞，制备成100 mL CIK细胞悬液，保证细胞存活率>95%；不含细菌、病毒等外源性因子；不含血清蛋白、抗生素等其他添加成分。CIK细胞培养完成后静脉回输给患者，输注数量为1×109个，1次/d，每4周连续应用10 d为1个周期，连续治疗4个周期。

1.3观察指标 ①近期疗效：于治疗前、治疗结束后行CT检查，并进行比较以评价疗效，1个月后复查确认疗效。近期疗效评价参照 “实体瘤疗效评价标准(RECIST)”[5]，分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、疾病稳定(SD)、疾病进展(PD)，客观缓解率(ORR)即CR+PR的例数占所有病例的百分率。②免疫功能：采用流式细胞仪检测患者治疗前后CD3+、CD4+、CD8+、CD16+CD56+。③生活质量：应用SF-36量表对2组患者治疗前后生理健康及心理健康状况进行评分，以评估患者生活质量。④不良反应：观察所有患者治疗期间出现的不良反应。⑤生存率：所有患者治疗结束后定期随访，统计2组中位无进展生存时间(PFS，患者从首次用药至疾病进展或任何原因死亡的时间)、2年生存率。

2 结 果

2.1近期疗效比较 对照组近期治疗总缓解率明显高于观察组(P<0.05)。见表1。

表1 2组晚期鼻咽癌患者治疗4个周期后近期疗效比较 例(%)

2.2免疫指标比较 观察组患者治疗后各项免疫指标均显著高于治疗前及对照组治疗后(P均<0.05)，而对照组患者治疗后各项免疫指标均明显降低(P均<0.05)。见表2。

表2 2组晚期鼻咽癌患者T淋巴细胞亚群变化

2.3生活质量比较 治疗前2组患者心理健康及生理健康评分比较差异均无统计学意义(P均>0.05)，治疗后对照组各评分较治疗前无明显变化甚至有下降趋势(P均>0.05)，观察组各指标评分则明显高于治疗前及对照组(P均<0.05)。见表3。

表3 2组晚期鼻咽癌患者治疗前后生活质量评分比较分)

2.4不良反应发生情况比较 观察组治疗期间出现恶心呕吐1例，经过症处理后缓解；对照组发生恶心呕吐11例，骨髓抑制7例，腹泻3例，皮疹2例。

2.5生存率比较 所有患者均进行电话随访，随访率100%，随访资料完整。观察组患者中位PFS为6.6个月，2年生存率为86.7%；对照组患者PFS为6.8个月，2年生存率为93.3%。经log-rank检验，差异无统计学意义(P=0.651)。见表4及图1。

图1 2组晚期鼻咽癌患者PFS比较

表4 2组晚期鼻咽癌患者治疗后各时间段生存率比较 例(%)

3 讨 论

鼻咽癌特指发生于鼻咽顶部及其侧壁部位的恶性肿瘤，在我国南方地区较为多发，且具有高病死率，位居恶性肿瘤死亡第13位[6]。鼻咽癌的发展和机体免疫功能下降密切相关，以T细胞亚群各细胞因子异常改变为主要表现，其中CD3+细胞是机体内十分重要的免疫细胞，其水平变化能有效反映细胞免疫状态，CD4+与CD8+是相对成熟的T细胞亚群，CD4+/CD8+动态平衡是维持机体免疫系统稳定的重要核心，其比值降低时说明机体免疫力下降，这也是病情恶化的重要标志[7]。正常状况下，机体内的T细胞亚群能够维持相对稳定的平衡状态，当免疫功能下降时，恶性肿瘤细胞增长加快，而肿瘤的进行性浸润生长又会进一步对免疫功能产生抑制，形成恶性循环[8]。对于晚期鼻咽癌患者来说，以铂类为基础的化疗是临床采用的普遍治疗方案，但接受化疗治疗的鼻咽癌患者会在很长一段时间内发生细胞免疫功能障碍，化疗药物在消灭肿瘤细胞的同时也有很大概率引起肿瘤细胞的远处转移，同时大多患者对化疗治疗存在一定的恐惧心理，或是患者体质虚弱，不能耐受治疗，这都有很大概率使得治疗失败。故如何采取有效措施，达到增效减毒作用一直是学者们关注的热点[9]。西黄胶囊、CIK细胞均具有抑瘤效果，同时还可提高机体免疫力，在此基础上，两者联合治疗这一新策略被提出并得到应用。

近年来肿瘤的生物治疗在临床中得到巨大发展及广泛应用，过继免疫现已成为抗肿瘤生物治疗的热点，CIK细胞作为过继免疫治疗的主要细胞，自首次应用以来就显现出显著的抗瘤活性，迅速成为抗肿瘤生物过继免疫治疗首选[10]。CIK细胞是一种杀瘤效应细胞，是将人外周血单个核细胞通过CD3Mcb、IL-2等多种细胞因子诱导在体外培养获得的异质性细胞，研究发现其有效效应细胞成分对肿瘤细胞有明显毒性作用，能有效表达CD3(T淋巴细胞细胞因子)膜蛋白分子，发挥抗瘤活性[11]。CIK细胞在正常机体外周血中仅有1%～5%，而目前通过体外培养能在极短时间内使其快速增殖，获得足够数量效应细胞，这其中CD3能达到20%，为CIK细胞应用奠定良好储备基础[12]。CIK细胞对多种肿瘤细胞杀伤作用明显，但正常骨髓造血前体细胞则无明显毒性，不会对骨髓细胞增殖产生影响，同时在清除较为微小的余留病灶甚至是防治远处转移方面均有独特优势[13]。

西黄胶囊属于由古方西黄丸演化而来的纯中药制剂，主要由牛黄、没药、麝香以及乳香等配制而成。其中牛黄清热解毒、豁痰开窍作用显著；麝香则可开窍避秽、活血散结，同时兼具防腐作用；乳香和没药均有舒筋活血、消肿止痛以及消腐生肌功效，历来皆为治疗痈疡常用药物。方中诸药配伍相互作用，可有效发挥清热解毒、止痛化瘀、消肿散结功效，同时在发挥药效过程中不伤阴，不伤正，不败气，使机体病灶得以消除。现代药理研究发现，牛黄可诱导肿瘤细胞凋亡，麝香抑瘤作用显著，乳香提取物在一定浓度时能够对细胞株增殖产生抑制，同时还能对血管内皮生长因子的表达进行调节，没药有效成分对多种肿瘤细胞增殖均可产生抑制[14]。除上述作用外，西黄胶囊还能增强机体免疫功能，作用机制主要是西黄胶囊能活化巨噬细胞，对T淋巴细胞亚群进行调节，同时能够诱导IL-2等生成，增强T淋巴细胞本身具有的杀伤活性，适用于多种恶性肿瘤的治疗[15]。

本次研究结果显示，对照组近期治疗总缓解率明显高于观察组；但治疗后对照组CD3+、CD4+、CD16+CD56+均呈现不同程度的下降，机体免疫功能抑制，而观察组各项免疫指标在治疗后则明显升高，提示机体免疫功能显著增强；治疗后对照组心理健康及生理健康评分较治疗前无明显变化，甚至有下降趋势，观察组各指标评分则明显升高，且明显高于对照组； 治疗后6个月、1年、2年时2组患者生存率比较差异无统计学意义。说明将西黄胶囊联合CIK细胞用于晚期鼻咽癌患者虽近期客观缓解率较低，但病情稳定，且免疫功能状态明显改善，生活质量提高，不良反应较少，而近期生存率与吉西他滨联合顺铂化疗相似。

综上所述，西黄胶囊与CIK细胞两者在抗肿瘤治疗方面具有颇多相似之处，可发挥协同增效作用，二者联合用药可提高晚期鼻咽癌患者的细胞免疫功能，改善生活质量，且不良反应少，具有一定的临床使用价值，值得进一步深入研究。

利益冲突：所有作者均声明不存在利益冲突。