地氯雷他定原料药中元素杂质的测定

李 龙，于军强，于秀丽，颜显辉，张丽娜，解春文*

（1. 山东达因海洋生物制药有限公司，山东 威海 264300；2. 荣成出入境检验检疫局，山东 威海 264300）

重金属杂质可诱导药物降解，并有潜在毒性，因此重金属杂质控制一直是药物研发过程中的重要问题。鉴于上述原因ICH（国际人用药品注册技术协调会）指导委员会于2009年批准Q3D元素杂质指导原则，并规定应在不晚于2017年12月ICH主要成员国在审评与申报中提供相应的元素杂质研究资料。我国作为新加入的ICH成员国，也应在2022年前实行上述指导原则。一般药品中元素杂质的潜在来源包括：合成过程中人为加入；或以杂质形式存在，如与生产设备相互作用或存在于药品组分中，且最终能被检测到[1-2]。

地氯雷他定是由先灵葆雅研制的三环长效型的第三代组胺拮抗剂，选择性作用于H1接受体。本品在2001年经欧洲药典管理局批准上市。本品为氯雷他定的活性代谢物，可通过选择性地拮抗外周H1受体，快速缓解季节性过敏性鼻炎的相关症状；还用于缓解慢性特发性荨麻疹相关症状如瘙痒，并可减少荨麻疹的数量及大小[3-6]。

本实验按照ICH Q3D元素杂质指导原则要求，建立了使用ICP-MS（电感耦合等离子体质谱）测定地氯雷他定中多元素杂质的方法，并探讨了对各元素杂质的控制方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器

7700型电感耦合等离子体质谱仪（安捷伦）；分析天平（梅特勒）；MARS 20微波消解仪（CEM公司）。

1.2 试药

地氯雷他定原料（批号：170801、170802、170803）（山东达因海洋生物制药股份有限公司）；多元素标准溶液（铝，砷，硼，钡，铍，铋，镉，钴，铬，铜，铁，钙，锂，镁，锰，镍，铅，锑，锡，锶，钛，铊，钒，锌）（唯一标识：175056，国家有色金属及电子材料分析测试中心）；汞单元素标准溶液（唯一标识：158022-1，国家有色金属及电子材料分析测试中心）；硝酸为色谱级别；水为去离子水。

2 法与结果

2.1 仪器参数与样品测定

仪器参数见表1。

表1 金属离子含量测定ICP-MS实验参数

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品储备溶液 精密量取混合标准溶液与汞元素标准溶液适量，加入2 %盐酸水溶液溶解并稀释制成浓度为1 μg/ml混合溶液，作为元素杂质混合对照品母液。

2.2.2 对照品溶液 分别精密量取对照品母液10，100，200，500，1000 μl，置入100 ml量瓶，加入2 %盐酸水溶液稀释至刻度即为对照品溶液。

2.2.3 铅元素对照品溶液 分别精密量取对照品母液100，400，600，1200，2500 μl，置入50 ml量瓶，加入2 %盐酸水溶液稀释至刻度即为铅元素对照品溶液。

2.2.4 铅元素供试品溶液制备 精密称取样品0.5 g，置消解罐中，加入浓硝酸8 ml，进行消解，赶酸至近干，加2 %盐酸水溶液稀释制成50 mg/ml溶液，即为铅元素供试品溶液。

2.2.5 供试品溶液 精密量取铅元素供试品溶液1 ml，置10 ml量瓶，加2 %盐酸摇匀并稀释至刻度，即得。

2.3 方法学验证

参考美国药典<233＞[7]验证地氯雷他定元素杂质测定方法，验证结果如下。

2.3.1 线性与定量限 按“2.1”项下方法制备各浓度对照品标准溶液，以浓度为横坐标，以校正数值为纵坐标进行线性回归。结果表明标准曲线相关系数R2均大于0.99，钯、汞、镉、砷、钴、钒和镍在0～10 ppb范围内线性关系良好，铅在0～50 ppb范围内线性关系良好。取空白溶剂平行测定11次，计算定量限，均低于各元素相应限度。结果见表2。

表2 线性实验与定量限结果

2.3.2 回收率 取待测样品，加入浓度为50 μg/ml铅元素标准溶液0.25，0.5，0.75 ml，置入100 ml量瓶，加入2 %盐酸溶液定容至刻度，摇匀，作为铅元素供试品溶液；加入浓度为5 μg/ml多元素标准品溶液0.25，0.5，12 ml，置入100 ml量瓶，加入2 %盐酸溶液定容至刻度，摇匀，作为多元素供试品溶液。每个浓度各制备3份，按“2.1”项下方法处理，分别进样测定，计算各元素回收率。结果见表3。

表3 回收率试验结果

2.3.3 精密度 取待测样品，按“2.1”项下方法处理，平行制备6份，分别进样测定，计算各元素的精密度。结果见表4。

表4 精密度实验结果

2.4 测定结果

取3批厂家自制样品，按“2.1”项下方法处理，分别进样测定，计算待测样品中各元素的含量。结果见表5。

表5 待测品测定结果

3 分析与讨论

3.1 样品处理方法的选择

本品作为有机物，如未经处理进样，不仅会导致有机成分离子干扰元素杂质分子离子峰检出，严重会导致喷雾装置出口处堵塞，故对样品进行消解，以保证仪器正常运行，测定结果可靠。样品的消解方法主要包括敞口容器消解法、密闭容器消解法和微波消解法。微波消解法具有消耗溶剂少，消解速度快，且可有效减少易挥发金属的损失[8-9]，故选择微波消解法对样品进行消解。

3.2 供试品浓度的确定

ICP-MS推荐测试浓度为1～10 ppb[10-11]，但是铅元素在此范围内并线性较差，在提高供试品浓度后，铅元素线性关系得到改善。由于高浓度汞元素在ICP-MS中具有记忆效应对测定结果影响较大[12-13]且其他元素在高浓度范围内线性关系并不理想，因此选择使用低浓度测定其他元素含量，最后确定分别使用两种浓度测定样品中铅与其他元素含量。

3.3 元素杂质的确定

按照ICH Q3D元素杂质指导原则，对于常用的口服固体制剂需要对1类元素杂质铅、镉、砷；2A类元素杂质钴、钒、镍进行风险评估。同时地氯雷他定在合成过程中使用钯碳进行催化加氢[14-16]，而钯元素属于2B类元素杂质，按照ICH Q3D指导原则，应定量检测，并制定合理限度，因此在元素杂质研究中对铅、镉、砷、钴、钒、镍、钯进行了研究，并建立了合理的控制方法。