光释光法检测牛黄清心丸（局方）60Co-γ辐照情况

聂黎行，张 烨，王 赵，金红宇，戴 忠，张 毅，马双成

（1. 中国食品药品检定研究院，北京 100050；2. 鄂尔多斯市食品药品医疗器械检验研究中心，内蒙古 鄂尔多斯 017000；3. 重庆市食品药品检验所，重庆 401121）

辐照杀菌技术是指将物品置于适宜放射源辐射的γ射线或适宜的电子加速器发生的电子束中进行电离辐射而达到杀灭微生物的方法。60Co-γ射线辐照灭菌技术作为最常用的辐照灭菌技术，具有穿透力强、处理成本低、能耗少、杀菌效果彻底迅速、辐照剂量可任意调节、操作简便、便于连续工作等优点，在农业、食品、医药等领域均有良好的应用[1-4]。卫生部发布的《60Co辐照中药杀菌剂量标准》（内部试行）的通知（卫药发第[1997]号）规定，中药辐照杀菌时最大吸收剂量应不大于下列数值：散剂3 kGy，片剂3 kGy，丸剂5 kGy，中药原料粉6 kGy。允许辐照中药材品种l98种，中成药70种。该标准还规定：凡“通知”中未规定的中药，原则上不允许辐照，若要辐照，则需向卫生部药品检验所报批。但实际调研结果表明，目前很多药厂将辐射杀菌作为卫生学不符合规定的补救措施，不考虑产品的安全性，随意扩大辐照范围，任意加大辐照剂量、重复辐照、操作混乱的现象大量存在[5-7]。

牛黄清心丸（局方）由牛黄、当归、川芎、甘草、山药、黄芩、炒苦杏仁、大豆黄卷、大枣、炒白术、茯苓、桔梗、防风、柴胡、阿胶、干姜、白芍、人参、六神曲（炒）、肉桂、麦冬、白蔹、蒲黄（炒）、人工麝香、冰片、水牛角浓缩粉、羚羊角、朱砂、雄黄等29味中药材粉碎配研制成，具有清心化痰，镇惊祛风的功效，用于风痰阻窍所致的头晕目眩、痰涎壅盛、神志混乱、言语不清及惊风抽搐、癫痫[8]。该品种并非卫药发第[1997]号通知规定的允许辐照的品种，但处方中含热敏性、挥发性成分，且为全原粉入药的丸剂，若采用湿热杀菌工艺，最终产品中有效成分可能变化较大。为控制本品微生物限度，厂家可能采用60Co-γ射线辐照灭菌。目前有关中成药辐照前后化学成分变化的研究方兴未艾[9-12]，但针对其辐照情况检测的文献鲜见报道。本文参照欧盟标准（EN）13751：2002[13]，采用光释光法建立了牛黄清心丸（局方）60Co-γ辐照情况的检测方法，以期为该药品的质量控制和安全用药提供参考。

1 材料

1.1 仪器

SURRC PPSL辐照食品筛查系统购于英国苏格兰大学，随机附有直径50 mm 的带盖培养皿（Bibby Sterilin Ltd. Stone Staffs，英国），辣椒粉阴性参照物（Mc CoRMick Ltd.，批号：SP12723，英国）、辣椒粉阳性参照物（经8.7 kGy剂量辐射，Mc CoRMick Ltd.，批号：SP12723，英国）。数据统计通过SPSS 16.0软件完成。

1.2 药品与试剂

9个厂家生产的牛黄清心丸（局方）38批次，均为2014年国家药品监督抽验样品。未经辐照的牛黄、当归、川芎、甘草、山药、黄芩、炒苦杏仁、大豆黄卷、大枣、炒白术、茯苓、桔梗、防风、柴胡、阿胶、干姜、白芍、人参、六神曲（炒）、肉桂、麦冬、白蔹、蒲黄（炒）、人工麝香、冰片、水牛角浓缩粉、羚羊角、朱砂、雄黄等原料药材由被抽样企业提供。

2 方法与结果

2.1 实验原理[14]

中药中大部分含有或携带矿物质（无机物、硅酸盐等），当受到电离辐射（辐照）时，这些矿物质能通过束缚在结构、空隙或杂质中的载体而储存能量。当受到激发光刺激时，储存的能量以光子的形式释放。光刺激后检测到的发光量，以光子计数率（PSL）表示。光释光法即是根据释放光子数的多少筛查样品是否经过电离辐射。欧盟标准（EN）13751：2002[13]规定：在采用光释光法进行样品筛查时，设定两个PSL值阈值，低阈值T1=700，高阈值T2=5000。信号若低于低阈值表明样品未经过辐照；大部分受过辐照的样品产生很强的高于高阈值水平的信号；信号介于两个阈值之间的中间值时，表明需进一步检测，或用其他方法验证。

2.2 测定参数设置和仪器校正

测量时间：60 s。分别测定暗计数、空容器、辣椒粉阴性参照物、辣椒粉阳性参照物的PSL值。暗计数应小于50，空容器和阴性参照物光子计数应小于700，阳性参照物光子计数应大于5000，以保证仪器状态正常。

表1 样品PSL值测定结果（n=3）

2.3 专属性试验

取未经辐照的原料药材，按牛黄清心丸（局方）的处方比例，制得阴性对照样品，平铺于皮氏培养皿中，测得其PSL值仅为558，低于判定低阈值，表明处方中原料药材本身对制剂辐照检测无干扰。

2.4 样品测定

取本品大蜜丸1丸，压扁；或取水丸，研细，取约2.0 g，平铺于皮氏皿中，依法测定。每份样品平行制备3份供试品，测定各自PSL值并计算平均值，结果见表1。38批次样品PSL值在282 14～272 412之间，远大于判定高阈值5000，可初步推测所有被测样品均经过不同程度的60Co-γ辐照灭菌处理。对所有样品PSL测定值进行频数分析（见图1），结果表明，大多数样品PSL值约90 000，近似正态分布，个别样品PSL值大于250 000。由图2可见，G、H、I企业样品的PSL值明显高于其他企业样品，不排除上述企业采用高剂量辐照或多次辐照的可能性。

图1 样品PSL测定值频数分布图

图2 不同生产企业样品PSL值箱式比较图

3 讨论

光释光法具有仪器简单、便携，样品无需前处理，测定快速、廉价的优点，但不能准确检测样品的辐照吸收剂量，需要加大力度，研究适合中药的辐照情况定量检测方法。

辐照灭菌可在常温下消毒灭菌，不破坏易挥发成分及热敏性物质，具有价廉、节能等优势。但为追逐商业利润随意扩大辐照范围，任意加大辐照剂量、重复辐照，可能导致药品化学成分发生变化，产生安全隐患。另一方面，部分企业将辐射灭菌视为卫生学指标“过关”的最终方法，忽视净选、清洗、炮制等生产过程的质量控制，甚至可能冒险使用霉变、劣质药材投料，从而导致药品质量安全风险大幅度提高。

鉴于目前中药生产企业使用60Co-γ辐照灭菌的无序状况，建议加强辐照对药品安全性和有效性的影响研究，权衡利弊，完善相应的法规和药品质量标准，加大监管力度，避免由于滥用辐照而对患者带来潜在的危险。