功能性消化不良TRPV1表达和HP感染的关系及意义

王文光 黎云辉

功能性消化不良（FD）是一种最常见的胃肠道疾病，患病率高达30%，临床特征主要表现为上腹痛﹑上腹胀﹑早饱﹑嗳气﹑食欲不振﹑恶心﹑呕吐等，进食后胃底容受舒张发生障碍﹑胃窦十二指肠运动协调紊乱﹑内脏高敏等因素均与FD发病有关［1］。目前的研究认为30%～60%的FD患者存在幽门螺杆菌（HP）感染及由此引起的慢性活动性胃炎［2］。辣椒素受体1（TRPV1）是一种传输和调节疼痛的感受器，不仅在神经元上有表达，而且在胃肠道黏膜也有分布［3］。最新的研究结果显示，TRPV1的上调与FD患者内脏高敏感性有关［4］。本文探讨TRPV1分别在HP阳性和HP阴性FD患者的变化及临床意义，现报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 选择2013年8月至2017年4月浙江省绍兴市中医院消化内科收治的168例FD患者为观察对象，其中男79例，女89例；平均年龄（38.6±5.9）岁，平均病程（2.9±1.3）年。纳入标准：（1）FD诊断标准符合罗马III标准［5］。（2）经13C-尿素呼气试验两项检测为HP阳性和HP阴性。排除标准：（1）消化性溃疡﹑反流性食管炎或典型的肠易激综合征患者。（2）伴随全身性疾病，如糖尿病或任何恶性肿瘤。（3）严重抑郁症﹑精神病﹑饮食失调﹑甲状腺功能低下。（4）入组前半个月服用过非甾体抗炎药﹑抗凝血剂﹑质子泵抑制剂﹑抗菌药。（5）有胃部手术史。（6）妊娠期患者。168例FD患者中HP阳性患者90例，两组患者的性别构成比﹑平均年龄﹑平均病程﹑临床症状等一般资料差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究方案经本院伦理学会批准同意，患者均知情同意并签署知情同意书。同时选择同期在本院进行健康体检且13C-尿素呼气试验阴性者50例为对照组，入组者无呼吸﹑消化及循环系统疾病，无FD和胃溃疡症状，无近期服药史。对照组性别构成比和平均年龄与FD-（HP+）组和FD-（HP-）组差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 168例FD患者和对照组均在空腹12h后行电子胃镜检查，在内镜下取胃窦部和胃体部分别取0.3cm×0.3cm大小黏膜组织一块，生理盐水冲洗后立刻放入液氮中备用。采用实时荧光定量PCR检测胃窦部和胃体部黏膜组织中TRPV1基因mRNA的表达，具体过程如下：采用QIAquick RNA Extraction Kit（购自QIAGEN公司，德国）抽提黏膜组织的总RNA，用于cDNA第一链的合成（First Strand cDNA synthesis Kit，Takara公司，日本），合成的cDNA第一链放于-20℃冰箱保存备用。根据TRPV1基因序列，在Oligo7.5软件上设计TRPV1基因荧光定量PCR引物，引物序列为：TRPV1F：5'-GAGTTTCAGGCAGACACTGGAA-3'；TRPV1R ：5'-CTATCTCGAGCACTTGCCTCTCT-3'，以GAPDH作为参考基因，引物序列为 ：5'-CGACGTAGTCTCATCTGACTT-3'，5'-GTTGCAGTCGACATAATCGTTGA-3'。 采 用TransStart Green qPCR SuperMix 试剂盒（购于北京全式金有限公司）进行实时荧光定量PCR。在ABI7500分析软件上分析TRPV1基因及GAPDH基因的Ct值，采用2- Ct法计算TRPV1基因的mRNA水平，采用公式Ct= Ct（TRPV1基因）- Ct（GAPDH基因）。分别采集168例FD患者和对照组空腹静脉血，采用人胃动素检测试剂盒（Uscn Life Science Inc）检测胃动素水平；采用胃泌素检测试剂盒（购于上海信裕生物科技有限公司）检测胃泌素水平，采用生长抑素检测试剂盒检测生长抑素水平（Uscn Life Science Inc）。

1.3 统计学方法 采用SPSS19.0 统计软件。计量资料以（）表示，组间比较采用单因素方差分析，两组间的比较采用t检验，相关性采用pearson分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 TRPV1基因mRNA水平﹑胃动素﹑胃泌素和生长抑素比较 见表1。

表1 TRPV1基因mRNA水平、胃动素、胃泌素和生长抑素比较

2.2 TRPV1基因mRNA水平与胃动素﹑胃泌素和生长抑素相关性分析 TRPV1基因mRNA水平与胃动素及胃泌素均呈明显负相关，与生长抑素水平呈明显正相关，差异均具有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 TRPV1基因mRNA水平与胃动素、胃泌素和生长抑素相关性分析

3 讨论

在目前已被鉴定的20多个瞬时受体电位中TRPV1被认为是调节疼痛的一个重要的集中点，TRPV1是一种化学感受器，可由各种香料衍生的植物化学物质激活，也可由低PH（＜6）﹑热和血清素﹑缓激肽和三磷腺苷等炎症介质激活［6］。消化不良的患者常显示低痛阈，胃肠道的任何引起疼痛或传输疼痛的部分都可能增强FD。研究显示TRPV1的活化可导致人体消化道疼痛和痛觉过敏［6］。药理研究结果显示TRPV1在食管黏膜﹑胃窦G细胞和胃壁细胞中均有表达［7］，近期的研究结果表明FD患者TRPV1在食管下段﹑胃窦部﹑十二指肠部黏膜的表达均明显高于正常人［4］。本资料结果提示TRPV1在FD患者中呈高水平表达。内脏高敏性是FD发病的一个因素，有文献指出TRPV1受体的活化可引起扩血管物质降钙素基因相关肽和P物质等神经递质的释放，从而参与内脏高敏性的形成，所以FD患者TRPV1受体的表达水平增加可能与其内脏高敏感有关［4］。

HP是消化道疾病的主要致病菌，HP感染后可导致胃酸分泌增多，诱发胃部炎症反应，造成胃黏膜的破坏。HP感染被认为是FD的致病因素之一。本资料中对HP阳性和HP阴性FD患者中TRPV1的mRNA水平进行检测，结果显示TRPV1在HP阳性FD患者的表达水平高于HP阴性FD患者，提示HP感染可诱发其TRPV1基因表达的增加，通过上调TRPV1的表达促进FD的发生和发展。

FD的发病与胃动力障碍也存在密切的关系，胃动素﹑胃泌素和生长抑素水平的检测常作为FD治疗后临床疗效评价的客观指标之一，三者与FD的症状密切相关。本资料进一步分析TRPV1基因mRNA水平与这三者的相关性，结果显示TRPV1基因mRNA水平与胃动素及胃泌素均呈明显负相关，与生长抑素水平呈明显正相关，进一步提示TRPV1基因高表达与FD有关。

综上所述，TRPV1在FD患者中呈高水平表达，且HP感染可诱发FD患者TRPV1基因表达的增加，提示抗HP治疗对HP阳性的FD患者有益。

［1］ 张声生,李晓玲．功能性消化不良的中西医研究进展．首都医科大学学报,2015,36(4):649-653．

［2］ Suzuki H,Moayyedi P．Helicobacter pylori infection in functional dyspepsia．Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology, 2013,10(3): 168．

［3］ Liao M,Cao E,Julius D,et al．Structure of the TRPV1 ion channel determined by electron cryo-microscopy．Nature, 2013, 504(7478):107-12．

［4］ 史孝敏,彭燕．辣椒素受体1在功能性消化不良上消化道中的表达及其意义．胃肠病学,2016,21(7):414-418．

［5］ Tack J,Talley NJ．Functional dyspepsia--symptoms,definitions and validity of the Rome III criteria．Nature Reviews Gastroenterology& Hepatology,2013,10(3):134．

［6］ Fernandes ES,Fernandes MA,Keeble JE．The functions of TRPA1 and TRPV1: moving away from sensory nerves．British Journal of Pharmacology,2012,166(2):510．

［7］ 胡容,彭燕．辣椒素及TRPV1与功能性消化不良．中国中西医结合消化杂志,2015,23(4):295-298．