40%叶菌唑·戊唑醇水乳剂的高效液相色谱分析方法研究

陆学云



40%叶菌唑·戊唑醇水乳剂的高效液相色谱分析方法研究

陆学云

(江苏粮满仓农化有限公司，江苏扬州 225247)

采用高效液相色谱法测定40%叶菌唑·戊唑醇水乳剂，使用C18色谱柱，以V(甲醇)︰V(水)=65︰35为流动相，在柱温25 ℃、波长222 nm、流量1.0 mL/min的色谱条件下进行分析。叶菌唑和戊唑醇的标准偏差分别为0.086和0.062，相对标准偏差分别为0.56%和0.25%，线性相关系数分别为0.999 9和0.999 8，平均回收率分别为99.6%和99.2%，方法达到了分析的要求。

叶菌唑；戊唑醇；高效液相色谱；分析

叶菌唑(metconazole)化学名称为：5-(4-氯苯基)-2,2-二甲基-1-(1-1,2,4-三唑-1-基甲基)环戊醇，是麦角甾醇生物合成中C-14脱甲基化酶抑制剂。叶菌唑是一种广谱内吸性杀菌剂，主要用于防治小麦壳针孢、穗镰刀菌、叶锈病、黄锈病、白粉病、颖枯病；大麦矮形锈病、白粉病、喙孢属；黑麦的喙孢属、叶锈病；燕麦冠锈病；小黑麦(小麦与黑麦杂交)叶锈病、壳针孢。该剂对壳针孢属和锈病活性优异，兼具优良的保护及治疗作用，既可茎叶处理又可作种子处理[1]。戊唑醇(tebuconazole)化学名称为：()-1-(4-氯苯基)-4,4-二甲基-3-(1-1,2,4三唑-1-基甲基)戊-3-醇，属于三唑类杀菌剂，为麦角甾醇生物合成抑制剂。该剂可用于禾谷类作物防治白粉病菌、柄锈菌属、喙孢属、核腔菌属和壳针孢属菌引起的病害[2]。

叶菌唑与戊唑醇复配对小麦条锈病、赤霉病有很好的防治效果。目前关于叶菌唑[3]和戊唑醇[4]原药及单剂的气相和液相色谱分析已见报道，而二者复配产品的分析方法尚未见公开报道。本文建立了在同一色谱条件下同柱分离定量测定叶菌唑与戊唑醇的方法。该方法操作简单、快速、准确，可为企业生产过程质量控制和质检机构质量检测提供参考。

1 试验部分

1.1 试剂和溶液

甲醇：色谱纯；水：二次蒸馏水；叶菌唑标样：已知质量分数≥99.0%；戊唑醇标样：已知质量分数≥98.0%。

1.2 仪器

高效液相色谱仪：岛津LC-20AT，具可变波长紫外检测器；色谱工作站；色谱柱：150 mm×3.9 mm (i.d.)不锈钢柱，内装Inertsil ODS-3、5 μm填充物；微量进样器：50 μL；过滤器：滤膜孔径约0.45m；超声波清洗器。

1.3 液相色谱操作条件

流动相：甲醇︰水= 65︰35 (体积比)；流量：1.0 mL/min；柱温：25 ℃；检测波长：222 nm；进样体积：25 μL；保留时间：叶菌唑约11 min；戊唑醇约8.8 min。

上述色谱操作条件系典型操作参数。实际操作时，可根据不同仪器的特点，对给定的操作参数作适当调整，以期获得最佳效果。典型的高效液相色谱图见图1。

图1 叶菌唑·戊唑醇标样(左图)和试样(右图)高效液相色谱图

1.4 测定步骤

1.4.1 标样溶液的配制

分别称取叶菌唑标样0.03 g和戊唑醇标样0.05 g (精确至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，加入约30 mL甲醇，在超声波水浴中振荡5 min，取出后降温至室温。用甲醇定容，用移液管准确移取5 mL该溶液于50 mL容量瓶中，用甲醇稀释并定容，备用。

1.4.2 试样溶液的配制

称取叶菌唑·戊唑醇试样0.2 g (准确至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，加入约30 mL甲醇，在超声波水浴中振荡5 min，取出后降温至室温。用甲醇定容，用移液管准确移取5 mL该溶液于50 mL容量瓶中，用甲醇定容，过滤后备用。

1.4.3 测定

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针标样溶液峰面积相对变化小于1.0%，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

1.4.4 计算

将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中叶菌唑(戊唑醇)的峰面积分别进行平均。试样中叶菌唑(戊唑醇)的质量分数1(%)按式(1)计算。

式中：1为试样叶菌唑(戊唑醇)的质量分数，数值以%表示；2为试样溶液中，叶菌唑(戊唑醇)峰面积的平均值；1为叶菌唑(戊唑醇)标样的质量，单位为克，g；为标样中的叶菌唑(戊唑醇)质量分数，数值以%表示；1为标样溶液中，叶菌唑(戊唑醇)峰面积的平均值；2为试样的质量，单位为克，g。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的选择

2.1.1 流动相的选择

通过对不同流动相的试验结果比较得出采用甲醇+水为流动相(65+35)，流量为1.0 mL/min的条件下，有效成分与杂质能获得较好的分离，峰形对称，保留时间适当。

2.1.2 波长的选择

在222 nm波长条件下，叶菌唑·戊唑醇有效成分有较好的吸收，而且试样杂质及试剂几乎没有响应，因此选择222 nm为检测波长。

2.1.3 色谱柱的选择

通过试验比较，选用色谱柱：150 mm×3.9 mm (i.d.)不锈钢柱，内装Inertsil ODS-3、5 μm填充物。使用该柱子检测，峰形对称，出峰时间适中，可以满足快速分析的需要。

2.2 分析方法的线性相关性测定

分别称取叶菌唑标准品0.05 g和戊唑醇标准品0.05 g (精确至0.000 2 g)置于25 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，充分摇匀。用移液管取1.0 mL上述溶液，置于另一个10 mL容量瓶中，用甲醇定容。再用移液管准确移取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL，于5个10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，充分摇匀。分别根据1.2液相色谱条件进行测定。以叶菌唑(戊唑醇)质量浓度为横坐标，峰面积值为纵坐标，测试方法的线性相关性，求得叶菌唑的线性方程式为=43 282+294.1，相关系数为0.999 9。求得戊唑醇的线性方程式为=38 884+53.4，相关系数为0.999 8。

2.3 分析方法的精密度测定

称取叶菌唑·戊唑醇40%水乳剂样品，进行5次平行测定。其结果经统计分析，该分析方法测定叶菌唑的标准偏差为0.086，变异系数为0.56%，戊唑醇的标准偏差为0.062，变异系数为0.25%(表1)。

表1 精密度试验测定数据

2.4 分析方法的准确度测定

采用标样添加法，在已知含量的试样中分别添加一定量的标样，在上述色谱条件下进行测定，测得叶菌唑的平均回收率为99.6%，戊唑醇的平均回收率为99.2%(表2)。

表2 样品回收率测定数据

图2 叶菌唑线性关系曲线图

图3 戊唑醇线性关系曲线图

3 结 论

综合上述测定结果可知，用本方法同时测定40%叶菌唑·戊唑醇水乳剂中叶菌唑、戊唑醇质量分数，其精密度和准确度较高，线性关系良好，具有简便、快速、准确及分离效果好，是一种可行的分析方法，可满足产品检验的要求。

[1] 刘长令. 国外农药品种手册(增补本)[M]. 沈阳: 全国农药工业信息站, 2000: 164－165.

[2] 朱良天. 精细化工产品手册(农药)[M]. 北京: 化学工业出版社, 2004: 280－281.

[3] 陈根良, 夏俊, 刘春杰, 等. 叶菌唑原药高效液相色谱分析方法研究[J]. 农药科学与管理, 2014, 35(9): 43－45.

[4] 薛维家, 戴永军, 孔斌. 戊唑醇的液相色谱分析方法[J]. 农药科学与管理, 2000(4): 11－11.

Analytical Method of Metconazole·Tebuconazole 40% EW by HPLC

LU Xueyun

(Jiangsu Liangmancang Agrochemical Co., Ltd., Yangzhou 225247, Jiangsu, China)

An analysis method of metconazol·tebuconazole 40% EW was developed by HPLC with C18column at 25 ℃ and UV detector at 222 nm. The mobile phase was methanol+water (volume ratio of 65︰35), and the flow rate was 1.0 mL/min.The results showed that the standard deviations of metconazole and tebuconazole were 0.086 and 0.062, the relative standard deviations were 0.56% and 0.25%, the linear correlation coefficients were 0.999 9 and 0.999 8, the average recoveries were 99.6% and 99.2%, respectively. The method met the requirements of analysis.

metconazole; tebuconazole; HPLC; analysis

10.16201/j.cnki.cn31-1827/tq.2018.02.12

TQ450.7

A

1009-6485(2018)02-0054-03

陆学云，男，江苏人，工程师。Tel: 0514-86645309，E-mail：xueyun1596@163.com。

2017-12-02。