气相色谱法同时测定盐酸坦洛新原料药中4种有机溶剂残留量

徐丽

（河南省驻马店市食品药品检验所，河南 驻马店 463000）

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气相色谱法同时测定盐酸坦洛新原料药中4种有机溶剂残留量

徐丽

（河南省驻马店市食品药品检验所，河南 驻马店 463000）

目的 建立盐酸坦洛新原料药中有机溶剂（甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷）残留量的测定方法。方法 采用毛细管气相色谱法。色谱柱为 DB－FFAP毛细管气相色谱柱（30 m×0．53 mm，3．0 μm），载气为氮气，氢火焰离子化检测器；程序升温，40℃保持6 min，后以30℃ ／min的速率升温至200℃，保持5 min；进样口温度200℃，检测器温度250℃，分流比为20∶1。结果 4种有机溶剂完全分离，甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷质量浓度分别在13．50～270．00，11．56～231．20，9．57～191．32，1．36～27．20 μg／mL范围内与峰面积比线性关系良好，加样回收试验结果理想。结论 所建立的检测方法灵敏度和准确度均达到有机溶剂残留量的检测要求，适用于坦洛新原料药中有机溶剂残留量的检测。

盐酸坦洛新；原料药；有机溶剂；残留量；气相色谱法

盐酸坦洛新（tamsulosin hydrochloride）是新型抗前列腺增生药物，属于α－肾上腺素受体阻滞剂[1－3]，临床主要用于治疗前列腺肥大引起的排尿障碍及良性前列腺增生[4－6]。本品原料药在合成过程中用到了多种有机溶剂[6－10]，其中甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷是2015年版《中国药典(四部)》规定需要检查的有机溶剂[11]，人用药品注册技术要求国际协调会（ICH）亦明确其有限度规定[12－13]。但关于同时对盐酸坦洛新原料药中 4种溶剂残留量的测定，目前尚未见文献报道[14－15]。气相色谱法是采用气体为流动相（载气）流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法，是一种高效能、选择性好、灵敏度高的仪器分析方法，在石油化工、医药卫生、环境监测、生物化学等领域都得到了广泛应用，目前在药品检测中应用最为广泛[11]。根据我国新药审批中对有机残留量的要求，为了有效地控制药品质量保障用药安全，本研究中采用气相色谱法建立了同时测定盐酸坦洛新原料药中上述4种有机溶剂残留量的方法。现报道如下。

1 仪器与试剂

1．1 仪器

Agilent GC－7890A型气相色谱仪（美国Agilent公司）；BS124S型电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）。

1．2 试剂及样品

甲醇、乙醇、乙腈为色谱纯（进口试剂，美国TEDIA公司）；二氯甲烷、二甲基甲酰胺为分析纯（天津市科密欧化学试剂有限公司）；盐酸坦洛新原料药（驻马店天方药厂，批号分别为20160701，20160702，20160703）。

2 方法与结果

2．1 色谱条件

色谱柱：DB－FFAP毛细管气相色谱柱（30 m× 0．53 mm，3．0 μm，美国Agilent公司）；检测器：氢火焰离子化检测器；载气：氮气；进样口温度：200℃；柱流速：1．0 mL／min；分流比：20∶1；柱温：40℃保持6 min，然后以30℃ ／min的速率升至200℃，保持5 min；检测器温度：250℃；进样量1．0 μL。

2．2 溶液制备

分别称取甲醇150 mg、乙醇100 mg、乙腈100 mg、二氯甲烷15 mg，精密称定，置500 mL容量瓶中，加二甲基甲酰胺溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备溶液。精密量取对照品贮备溶液5．0 mL，置10 mL容量瓶中，加二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀即得对照品溶液。称取样品1．0 g，精密称定，置10 mL容量瓶中，加二甲基甲酰胺适量使溶解，并用二甲基甲酰胺稀释至刻度，作为供试品溶液。取空白溶剂适量，作为阴性对照品溶液。

2．3 方法学考察

系统适用性及专属性试验：取按2．2项下方法配制的对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液，依法进样，气相色谱图见图1。可见，理论板数以甲醇计均不低于10 000，4种有机溶剂间分离度均大于3．0，拖尾因子符合要求，其他杂质不干扰4种有机溶剂测定。

线性关系考察：精密量取对照品贮备溶液 0．5，1．0，2．0，4．0，8．0，10．0 mL，分别置10 mL容量瓶中，再加二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀。依法进样，以各待测残留溶剂的峰面积比为纵坐标（Y）、质量浓度（μg／mL）为横坐标（X）进行线性回归。结果见表1。

精密度试验：取同一供试品溶液，连续进样8次，测定峰面积。结果甲醇、乙醇、乙腈和二氯甲烷峰面积的RSD分别为 1．91%，1．83%，1．64%，2．02%（n＝8），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于配制后0，2，4，8，12，24，48，72 h时依法进样测定。结果甲醇、乙醇、乙腈和二氯甲烷峰面积的 RSD分别为2．28%，1．97%，1．92%，2．58%（n＝8），表明供试品溶液在72 h内稳定。

图1 气相色谱图

表1 线性关系考察及定量限、检出限试验结果

重复性试验：按照2．2项下方法配制6份供试品溶液和1份对照品溶液，在拟订的色谱条件下进样测定。结果样品中甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷平均百分含量分别为0．005 6%，0．007 8%，0．008 5%，0．002 3%，RSD分别为1．89%，2．19%，2．21%，2．80%（n＝6），表明方法重复性良好。

加样回收试验：取盐酸坦洛新原料药1．0 g，精密称定，共9份，分别置10 mL容量瓶中，各加入适量二甲基甲酰胺使其溶解，按照各溶剂检查限度的80%，100%，120%，依次精密量取对照品贮备溶液4．0，5．0，6．0 mL各3份，分别加入9份样品中，加二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀。另再配制供试品溶液1份，作为空白溶液。在拟订的检测条件下进样测定，按外标法以峰面积计算。结果甲醇、乙醇、乙腈和二氯甲烷的回收率 RSD在1．24%～1．78%范围内，表明方法回收率良好。详见表2。

定量限和检出限试验：称取，甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷适量，精密称定，加二甲基甲酰胺稀释配制成系列不同质量浓度溶液，分别依法进样分析。当 S／N＝10±1时和当 S／N＝3±1时，定量限和检出限见表1。

2．4 样品检测

按照2．2项下方法分别配制3批供试品溶液和对照品溶液1份，在拟订的检测条件下进样分析，记录色谱图。计算样品中有机溶剂残留百分含量。结果见表3，各有机溶剂残留量均符合《中国药典》及ICH的限度规定。

表2 加样回收试验结果（n＝9）

表3 3批盐酸坦洛新原料药中4种有机溶剂残留检测结果（%）

3 讨论

3．1 限度的规定

甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷均为ICH规定必须限制使用的第二类毒性试剂，限度分别为 0．300 0%，0．500 0%，0．004 1% 和 0．060 0%[13]。《中国药典》2015年版对此四种有机溶剂残留量的规定与ICH一致[11]。因此，选择甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷的限度分别为0．300 0%，0．500 0%，0．004 1%，0．060 0%作为盐酸坦洛新原料药的有机残留限度。

3．2 溶剂的选择

盐酸坦洛新易溶于二甲基甲酰胺，且二甲基甲酰胺的沸点较高、出峰时间比较晚，不干扰各待测组分的分离，有利于各组分的检测，故选二甲基甲酰胺作为溶剂。

3．3 色谱柱的选择

分别考察了非极性柱DB－1柱（30 m×0．53 mm，3．0 μm）、中等极性柱 DB－1701柱（30 m×0．53 mm，3．0 μm）和极性柱 DB－FFAP柱（30 m×0．53 mm，3．0 μm）对4种有机溶剂的分离情况。结果表明，DB－1柱不能完全分离盐酸坦洛新中残留的有机溶剂；DB－1701柱对乙醇和乙腈的分离度达不到要求；DB－FFAP柱对测定的4种有机溶剂分离度明显较好，各待测物色谱峰与相邻色谱峰的分离度均大于3．0，符合2015年版《中国药典》的要求。故选用极性较强的DB－FFAP毛细管气相色谱柱作为测定用色谱柱。

3．4 柱温及分流比的选择

本研究中所测定的4种残留溶剂的沸点差异较大，故采用升温程序进行测定。考察了4种程序升温条件，最终确定为2．1项下条件为最佳程序升温条件，分离时间较短，且分离度良好。同时考察了分流比对测定的影响，分别试验了分流比为20∶1，15∶1，10∶1，1∶1的色谱行为，确定最佳分流比为20∶1。

3．5 样品的检测

在测定盐酸坦洛新中有机溶剂的残留量时，盐酸坦洛新的沸点较高，会残留于色谱柱中，故以程序升温设定最终温度为200℃，且保持5 min，使柱子冲洗干净，以免残留在色谱柱中的盐酸坦洛新对测定的目标峰造成干扰。

3．6 方法评价

本研究中建立了同时测定盐酸坦洛新原料药中甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷的气相色谱法，通过优化气相色谱条件，建立的检测方法准确、灵敏、专属，故可作为盐酸坦洛新原料药中有机溶剂残留的检测方法。

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Simultaneous Determination of 4 Kinds of Residual Organic Solvents in Tamsulosin Hydrochloride Raw M edicine by Gas Chromatography

Xu Li
（Institute for Food and Drug Control of Zhumadian，Zhumadian，Henan，China 463000）

Objective To establish a method ofdetermining 4 kinds ofresidualorganic solvents（methanol，ethanol，acetonitrile，dichloromethane）in tamsulosin hydrochloride raw medicine．M ethods Capillary gas chromatography was adopted，the column was DBFFAP capillary gas chromatography column（30 m×0．53 mm，3．0 μm），the carrier gas was nitrogen with hydrogen flame ionization detector．The temperature was programmed to be 40℃ for 6 min，and then programmed to be 200℃ at 30℃ ／min to maintain for 5 min．The inlet temperature was 200℃，the detector temperature was 250℃，and the split ratio was 20∶1．Results The 4 kinds of organic solvents were separated completely，The mass concentrations of methanol，ethanol，acetonitrile and dichloromethane were linear in the range of13．50－270．00，11．56－231．20，9．57－191．32，1．36－27．20 μg／mL．The results ofrecovery testwere good．Conclusion The sensitivity and accuracy of the method can meet the requirement of organic solvent residue．It is suitable for the determination of residual organic solvents in tamsulosin hydrochloride raw medicine．

tamsulosin hydrochloride；pharmaceutical raw materials；organic solvent；residual quantity；gas chromatography

R917；R927．11

A

1006－4931(2017)14－0010－04

2017－03－15；

2017－04－07)

10．3969／j．issn．1006－4931．2017．14．004

徐丽（1981－），女，硕士研究生，主管药师，研究方向为药物分析、药品检验及检验技术和方法，（电子信箱）xuli0986＠163．com。