SOCS1在妊娠期肝内胆汁淤积症母胎界面的表达及意义

李明月，程华，谢凤姣，罗蒲花

（湖南省邵阳市第一人民医院，湖南 邵阳422000）

SOCS1在妊娠期肝内胆汁淤积症母胎界面的表达及意义

李明月，程华，谢凤姣，罗蒲花

（湖南省邵阳市第一人民医院，湖南 邵阳422000）

目的 探讨细胞因子信号传导负调控因子1（SOCS1）在妊娠期肝内胆汁淤积症 （ICP）母胎界面的表达以及意义。方法 采用ELISA的方法检测18例ICP孕妇 （ICP组）与20例晚孕孕妇 （对照组）的胎盘组织匀浆IL-4和TNF-α浓度，采用免疫组化法测定两组胎盘组织中SOCS1的定位与表达水平。结果 ①SOCS1主要表达于滋养细胞。②ICP组SOCS1阳性细胞率显著低于对照组，差异有统计学意义 （P＜0.01）。③ICP组的IL-4表达水平为 （1.08±0.15）ng／L，显著低于对照组的 （1.56± 0.32）ng／L，差异有统计学意义 （P＜0.01）；ICP组的TNF-α表达水平为 （18.37±1.68）ng／L，显著高于对照组的 （10.59± 1.63）ng／L，差异有统计学意义 （P＜0.01）。④ICP组的TNF-α／IL-4比值为17.01±2.06，显著高于对照组的6.78±0.54，差异有统计学意义 （P＜0.01）。结论 SOCS1表达水平明显降低，可能参与了ICP的发病，这可能与Th1／Th2比例失衡有关。

妊娠期肝内胆汁淤积症；胎盘；SOCS1；TNF-α；IL-4

妊娠期肝内胆汁淤积症 （ICP）是一种妊娠期特有的并发症，以妊娠期出现皮肤瘙痒为特点，可导致早产、死胎、死产等，但病因尚不明确，免疫因素是倍受关注的病因之一。ICP患者母胎界面的Th1／Th2细胞因子平衡由正常妊娠的Th2优势向Th1方向偏移，细胞免疫功能显著增强，导致胚胎组织被母体排斥。这种 “Th1漂移”成为妊娠免疫耐受的研究热点。细胞因子信号传导负调控因子1（SOCS1）是一种对细胞因子信号通路具有负反馈调节作用的蛋白分子，可调控Th1／Th2细胞平衡向Th2偏移［1］，SOCS1缺乏可使母体对胎儿发生免疫排斥，导致妊娠失败和妊娠并发症发生。SOCS1在ICP发病机制中的作用目前未见相关报道。本研究通过检测SOCS1在胎盘组织的表达及测定胎盘组织匀浆IL－4、TNF－α表达水平，从母胎界面探讨SOCS1在ICP免疫学发病机制中的可能作用，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年1月至2016年6月在我院分娩的单胎产妇38例作为研究对象，其中ICP患者18例 （ICP组），正常晚孕20例 （对照组）。两组孕妇均为择期剖宫产，对照组剖宫产指征为疤痕子宫、胎位异常。两组孕妇的孕周、孕龄等一般资料比较差异无统计学意义 （P＞0.05），具有可比性。

1.2 ICP诊断 ①临床表现：孕晚期出现皮肤瘙痒等不适症状；②肝功能异常：血清总胆汁酸>10 μmol／L，大多数ICP的转氨酶轻度至中度升高；部分患者胆红素增高，很少超过85.5 μmol／L；③病理检查：ICP患者肝组织活检见毛细胆管胆汁淤积、胆栓形成；④分娩后瘙痒症状消失，肝功能恢复正常。

1.3 方法 标本采集与处理：胎盘娩出后立即剪取组织两块，其中一块放入10%甲醛中固定，另一块用生理盐水按重量 ∶体积＝1∶2.5稀释，匀浆机中匀浆，提取上清夜。标本的检测方法均按照试剂盒提供的步骤进行。

1.4 结果判断 结果用计算机图像分析系统进行定位、定量，SOCS1染色的阳性细胞为胞质内出现棕褐色或棕黄色颗粒。

1.5 统计学方法 采用SPSS 11.0统计软件包进行分析，多个独立样本均数的比较采用单因素方差分析F检验，计量资料以x ±s表示，比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 SOCS1在胎盘上的定位 SOCS1主要表达于滋养细胞胞浆内，见图1、图2。

图1 ICP胎盘组织SOCS1蛋白免疫组化染色，呈阴性反应

图2 正常胎盘组织SOCS1蛋白免疫组化染色，呈阳性反应

2.2 两组SOCS1阳性细胞率比较 ICP组的SOCS1阳性细胞率显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）。见表1。

表1 两组SOCS1阳性细胞率比较 （±s）

表1 两组SOCS1阳性细胞率比较 （±s）

组别 例数 阳性细胞率（%） t值 P值ICP组 18 0.24±0.61 3.606 0.001对照组 20 0.76±0.05

2.3 两组IL-4、TNF-α表达水平比较 ICP组的IL－4水平显著低于对照组，TNF－α及TNF－α／IL－4均高于ICP组，差异均有统计学意义 （P＜0.01）。见表2。

表2 两组TNF-α及IL-4水平比较 （±s）

表2 两组TNF-α及IL-4水平比较 （±s）

注：与对照组比较，*P＜0.01。

TNF－α IL－4 TNF－α／IL－4组别 例数 （ng／L） （ng／L）ICP组对照组18 20 18.37±1.68* 1.08±0.15* 17.01±2.06*10.59±1.63 1.56±0.32 6.78±0.54

3 讨论

3.1 SOCS1的免疫调节机制 SOCS1是由细胞因子诱导产生的负调控蛋白，通过抑制细胞因子信号转导调节机体对细胞因子的过度刺激，SOCS1与Th1／Th2平衡调节有关。过敏性紫癜患者的Th1／Th2失衡，表明SOCS1可能参与了Th1／Th2失衡的调节［2］。另有研究［3］表明，脐血内皮细胞凋亡与SOCS1在内皮细胞中的表达抑制有关。因此，高SOCS1表达使Th往Th2方向分化。

3.2 SOCS1在ICP免疫调节中的作用 妊娠是个半同种移植过程，母胎界面的局部免疫会直接地影响妊娠结局。Th1型细胞因子对胎盘组织有害，而Th2型细胞因子对胚胎具有保护作用，从而使多数妊娠获得成功［4］，正常妊娠是一种 “Th2”现象［5］。ICP被认为是这种免疫调节的失败［6］，IL－4是重要的Th2型细胞因子，TNF－α是最主要的Th1型细胞因子，IL－4和TNF－α在母胎界面的Th平衡中发挥重要作用。本研究结果显示，ICP胎盘匀浆的IL－4表达水平低于对照组，TNF－α高于对照组，差异均具有统计学意义 （P＜0.01），存在Th1／Th2比例失衡，与相关报道［7］一致。可见，ICP母胎界面局部，存在“Th1漂移”。

先兆流产患者胎盘表达SOCS1低于正常早孕者，人早孕母胎界面高表达SOCS1［8］，同时，足月分娩前绒毛、绒毛膜见SOCS1等蛋白表达，分娩后SOCS1等蛋白消失，提示SOCS1蛋白可能与妊娠的维持有关。本研究测定SOCS1在ICP及正常晚孕胎盘组织的表达，ICP组SOCS1的表达低于对照组 （P＜0.01），因此推测，由于SOCS1减少，SOCS1对Th1的抑制减弱，导致Th向Th1偏移，从而使胚胎遭受免疫攻击、被母体排斥。因此认为SOCS1表达水平可能与ICP密切相关。

本研究探讨了SOCS1在ICP免疫学发病机制中的作用，认为SOCS1表达的降低可能是ICP的发病原因之一，其机制可能与Th1／Th2细胞因子失衡有关。是否可以通过补充SOCS1达到治疗ICP的目的值得进一步研究。

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（责任编辑：何华）

Expression and Significance of SOCS1 in Placenta of Intrahepatic Cholestasis during Pregnancy

LI Mingyue,CHENG Hua,XIE Fengjiao,LUO Puhua(Shaoyang First People's Hospital,Shaoyang 422000,China)

ObjectiveTo explore the expression and significance of suppressor of cytokine singnaling-1(SOCS1)in the placenta of intrahepatic cholestasis during pregnancy(ICP).MethodsThe samples were obtained from 18 cases of ICP pregnant women(ICP group) and 20 cases of normal later pregnant women(control group),and the levels of IL-4 and TNF-α of placenta homogenate were detected by ELISA.The expression level and localization of SOCS1 in the placenta were examined by immunohistochemical method.Results①The SOCS1 was mainly expressed in the chorion cells.②The SOCS1 positive cell rate of ICP group was significantly lower than that of control group,with statistical difference(P＜0.01).③The expression level of IL-4 of ICP group was(1.08±0.15)ng/L,significantly lower than (1.56±0.32)ng/L of control group,with statistical difference(P＜0.01).The TNF-α level of ICP group was(18.37±1.68)ng/L, significantly higher than(10.59±1.63)ng/L of control group,with statistical difference(P＜0.01).④The ratio of TNF-α/IL-4 of ICP group was 17.01±2.06,significantly higher than 6.78±0.54 of control group,with statistical difference(P＜0.01).ConclusionsThe expression level of SOCS1 significantly decreases,which means that SOCS1 probably plays a role in the pathogenesis of ICP and is relative with the disequilibrium of Th1/Th2.

Intrahepatic cholestasis during pregnancy;Placenta;SOCS1;TNF-α;IL-4

R714.2

A

10.3969/j.issn.1674-4659.2017.01.0035

2016－09－08

2016-11-30

李明月 （1977－），湖南邵阳人，硕士研究生学历，副主任医师，研究方向：围产医学。