囊胚培养在辅助生殖技术治疗周期中应用价值研究*

刘 芳 包俊华 金 锐 白 刚 唐大伟

(银川市妇幼保健院生殖中心，宁夏回族自治区 银川 750001)



囊胚培养在辅助生殖技术治疗周期中应用价值研究*

刘 芳 包俊华 金 锐 白 刚 唐大伟

(银川市妇幼保健院生殖中心，宁夏回族自治区 银川 750001)

目的 探究囊胚培养在辅助生殖技术治疗周期中的应用价值。方法 选取我中心2015年6月至2016年5月常规IVF/ICSI-ET周期D3(第3天)胚胎进行回顾性分析，将D3卵裂期胚胎培养至囊胚，比较不同评分和卵裂球数胚胎的囊胚形成情况，并对妊娠结局进行预测。结果 与其他组相比，评分3分以上且D3为6～9个细胞的胚胎的优质囊胚形成率最高，达35.7%，差异显著(P<0.05)；无囊胚形成者临床妊娠率和胚胎种植率分别为15.2%、6.8%，有囊胚形成者为36.4%、41.9%，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 囊胚培养能够淘汰不良胚胎，筛选出具有发育潜力的优质胚胎，可间接预测妊娠结局，是选择胚胎质量的有效方式。

囊胚培养；辅助生殖技术；应用价值

随着生殖技术的不断发展，目前临床多将辅助生殖技术作为治疗不孕不育的主要手段。大多生殖中心所采用的形态学评分对于胚胎的生命力和质量并不能完全表达，同时对于囊胚的质量也无法进行准确的预测[1]。为此，本研究旨在探讨囊胚培养在辅助生殖技术治疗周期中的应用价值，从而为临床提供参考，现报告示下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我中心2015年6月至2016年5月常规IVF/ICSI-ET周期D3胚胎进行回顾性分析，包括：(1)2PN来源的发育正常的胚胎；(2)评分较低或卵裂期发育延缓的胚胎；(3)受精异常的胚胎，包括1PN ( 单个原核)、 0PN(无原核) 胚胎。所有患者均与我中心签署知情同意书，D3天移植、冷冻后剩余胚胎行囊胚培养，将优质囊胚冷冻保存。若有胚胎发育较为迟缓，可继续培养至D4。

1.2 方法 根据卵裂球数目、形态以及胞浆碎片多少等参数将D3卵裂期胚胎分为4个等级，Ⅳ级(4分)：卵裂球大小均匀，胞质均匀透亮，透明带完整，胚胎无碎片或有少量(≤5%)碎片；Ⅲ级(3分)：卵裂球大小稍不均匀，碎片≤20%，透明带完整；Ⅱ级(2分)：卵裂球大小不均，20%<碎片<50%，透明带完整；Ⅰ级(1分)：卵裂球大小严重不均或无明显卵裂球存在，观察到大量无核碎片，碎片≥50%。(1)将入选胚胎随机进行培养：将发育迟缓(3分以上4～5个细胞)的培养至D4，如胚胎评分≥3分且继续分裂则冷冻保存，评分较低或停止发育则丢弃。(2)将剩余胚胎行囊胚培养，如形成优质囊胚则冷冻保存，否则丢弃。并培养异常受精的胚胎。

1.3 观察指标 比较不同评分和卵裂球数胚胎的囊胚形成情况，并对妊娠结局进行预测。

参考梁鑫等[2]报道的方法，将囊胚分为6级:1级，囊胚腔体积<1/2囊胚总体积，为早期囊胚；2级，囊胚腔体积>1/2囊胚总体积；3级，囊胚腔将囊胚完全占据为完全扩张型；4级，囊胚腔体积较早期囊胚明显增大为扩张型，且透明带变薄；5级，与透明带破裂口处囊胚正在孵出，为正在孵化的囊胚；6级，于透明带中完全脱出，为孵化出的囊胚。3～6级囊胚需对TE(滋养外胚层细胞)和ICM(内细胞)进行评分。TE评分：A级，细胞分布于囊胚周围，数目较多；B级，上皮细胞松散，细胞数目较少；C级，细胞数目极少。ICM 评分：A级，细胞结合紧密，数目多；B级，细胞数目少、结合松散；C级，细胞数目极少。优质囊胚：TE和ICM评分均高于B级，且分级>3级的囊胚。

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.0软件进行数据处理，计数资料用百分比表示，采用χ2检验，P≤0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 2PN胚胎评分、卵裂球数和囊胚形成的关系 各组囊胚形成率相比，无明显差异(P>0.05)，但评分≥3分6～9细胞的优质囊胚形成率明显高于其他各组，差异有统计学意义(P<0.05)，其他组间对比，无明显差异(P>0.05)。见表1。

表1 囊胚形成和胚胎质量关系 n(%)

2.2 囊胚形成对妊娠结局的预测 进行囊胚培养的138例患者中，有囊胚形成的43例，占31.2%，本研究选取有评分≥3分，D3为6～9个细胞，2PN的优质胚胎者的囊胚形成情况预测患者妊娠结局。无囊胚形成者临床妊娠率和胚胎种植率分别为15.2%、6.8%，有囊胚形成者为36.4%(12/33)、41.9%(31/74)，差异有统计学意义(χ2分别为3.882，24.814，P<0.05)。

3 讨 论

临床研究显示[3-4]，D3胚胎质量与囊胚质量、囊胚形成率有关。孙迎利等[5]的研究表明，囊胚的形成与胚胎卵裂速率密切相关，D3细胞数为7～9个的囊胚形成率为41.9%，而>9或<7的胚胎，其囊胚形成率会明显下降。王雅琴等[6]经研究同样得出质量较差的胚胎很难发育成优质囊胚，而D3卵裂球数≥7个的优质胚胎则有更大的几率发育成优质囊胚。本研究显示，D3卵裂球数为6～9个的囊胚形成率为51.7%，与其他各组相比虽无明显差异，但其优质囊胚形成率为35.7%，明显高于其他组，与上述结论相一致。并且部分质量相对较差的胚胎也有可能形成囊胚，这与王珊珊等[7]研究结果相一致。提示为提高一次取卵周期的可用胚胎率，可将质量较差的胚胎继续培养至D5或D6，若有可用囊胚形成，则进行冷冻保存。此外，D3胚胎评分对于胚胎的发育潜力无法进行完全的预测，部分有发育潜力的胚胎很有可能被丢弃。采用囊胚培养可筛选出具有发育潜力的胚胎，在保证该周期内有胚胎移植的情况下，将不良胚胎淘汰，能够有效减少移植次数与液氮罐资源的占用，更容易被患者接受。同时本研究显示，评分≥3分、D3为6～9个细胞、2PN的优质胚胎有囊胚形成的患者，其妊娠率为36.4%，明显高于无囊胚形成者的15.2%，差异显著(P<0.05)，说明囊胚形成有利于提高患者妊娠率，能够较好的预测妊娠结局。而有囊胚形成但未妊娠者，可对其黄体期支持、子宫内膜容受性等因素进行分析，找出妊娠失败的关键原因，改进下一周的治疗方案，从而提升妊娠率。

综上所述，囊胚培养能够有效将质量较差的胚胎淘汰，同时将优质胚胎筛选出，有利于提高患者一次取卵周期的受孕率，缓解患者的负面情绪，减轻经济负担，是一种有效选择胚胎质量的方式。

[1] 唐永梅，韦继红，姚春玲，等.非优质胚胎行囊胚培养337例分析[J].中国妇幼保健，2013，28(35):5853-5854.

[2] 梁鑫，单旭东，漆著，等.囊胚培养及废弃胚胎临床研究[J].中国妇幼保健，2015，30(34):6103-6106.

[3] 黄志辉，余敏，伍琼芳，等.囊胚培养的相关因素分析[J].江西医药，2013，48(4):305-308.

[4] 张雪瑞.囊胚培养与囊胚移植的临床应用效果研究[J].中国现代药物应用，2016，10(6):85-86.

[5] 孙迎利，杨丽娟，刘淑娟，等.囊胚培养技术的改良及临床应用[J].现代诊断与治疗，2015，26(19):4423-4424.

[6] 王雅琴，杨菁，徐望明，等.低等级胚胎囊胚培养及冻融周期移植后临床结局分析[J].生殖医学杂志，2015，24(3):220-224.

[7] 王珊珊，招霞，倪晓蓓，等.卵裂方式对胚胎发育潜能的影响[J].中国性科学，2015，24(11):94-97.

The study on application values of blastocyst culture in assisted reproductive technology treatment cycle

LIU Fang BAO Jun-hua JIN Rui BAI Gang TANG Da-wei

(The Maternal and Child Health Hospital of Yinchuan City,Yinchuan 750001,China)

Objective: To investigate the application values of blastocyst culture in assisted reproductive technology treatment cycle. Methods: The selected embryos of normal TVF/ICSI cycle of D3 (the third day) cultured in our center from June 2015 to May 2016 were retrospectively analyzed, and embryos in D3 cleavage stages were cultured to blastocysts. Different scores and the blastocysts formations of number of embryo blastomere were Compared. Meanwhile, the pregnancy outcomes were forecasted. Results: Compared with other groups, the formation rate of high-quality blastocysts with scores above 3 points and D3 for 6～9 cells was the highest, which was ups to 35.7%, and there was statistical significance (P<0.05); The clinical pregnancy rate and implantation rate of those without blastocyst formations were 15.2% and 6.8% respectively, and those with balstocyst formations were 36.4% and 41.9% respectively, and there was statistical significance (P<0.05). Conclusion: Blastocyst culture is able to weed out bad embryos, screen out high-quality embryos with developmental potentiality and indirectly forecast pregnancy outcomes, which is the effective way of selecting embryo quality.

blastocyst culture; assisted reproductive technology; application values

刘芳(1980—)，女，主治医师，硕士，主要从事生殖医学工作。

R717

A

1004-7115(2016)11-1233-02

10.3969/j.issn.1004-7115.2016.11.010

2016-06-08)