昆明香菇反季节栽培的主要病原真菌及其发生特点*

汪威，田云霞，武绍启，许庆坤

（1.昆明市农业科学研究院食用菌中心，云南昆明650034；2.云南万盛食用菌种植有限公司，云南昆明655200）

〈产业论坛〉

昆明香菇反季节栽培的主要病原真菌及其发生特点*

汪威1，田云霞1，武绍启1，许庆坤2

（1.昆明市农业科学研究院食用菌中心，云南昆明650034；2.云南万盛食用菌种植有限公司，云南昆明655200）

通过对昆明地区几个香菇反季节栽培种植区采集病原真菌样本，分离、纯化鉴定出木霉属（Trichoderma）、青霉属（Penicillium）、拟青霉属（Paecilomyces）、镰孢属（Fusarium）、轮枝霉属（Verticillium）、毛霉属（Mucor）共6个属，其中木霉属分离频次最高（61.90%）；香菇反季节栽培出菇期病原真菌的种类最多，而培菌后期最少。木霉属是主要病原真菌，培菌前期、培菌后期和出菇期发生率分别为0.33%、2.20%和14.36%，拟青霉属真菌污染仅在培菌前期发现，发生率为0.25%。

香菇；反季节；病原真菌

香菇（Lentinus edodes）的春栽夏菇模式即反季节栽培模式，实现了香菇的周年化生产［1］。每年全国夏季高温导致优质鲜香菇货源紧缺，市场需求大。而昆明夏无酷暑，气候潮湿。这种气候优势有利于香菇栽培，但同时也易导致病原真菌大量发生，造成香菇生产减产甚至绝收。因此，分离、纯化和鉴定香菇栽培的主要病原真菌，研究其发生特点，可为香菇反季节栽培中主要真菌性病害综合防治提供依据。

1　材料与方法

1.1样本采集

2015年1月～2015年8月，在昆明市农业科技示范园（团结）和云南万盛食用菌种植公司香菇种植示范区采集样本，按培菌前期（从接完种到菌丝长满）、培菌后期（从菌丝长满到菌棒转色完成）和出菇期3个阶段分别统计，共采集样本212份，用无菌塑料袋装好，带回实验室进行下一步分离和鉴定。

1.2病原真菌的分离纯化

将所采集的被真菌污染的培养料样品，在无菌条件下取一小块置于PDA平板上，在25℃下培养至长出菌落，然后挑取菌落边缘的菌丝进行纯化，或在产孢后挑取孢子进行单孢分离，将纯化好的菌株接种在PDA斜面上培养1周，然后置于4℃冰箱中保存备用［2］。

1.3病原真菌的鉴定

用插片培养法观察真菌形态。将纯化好的真菌接种在PDA平板中间，边缘以45°角插上3片盖玻片，25℃下培养至菌丝长满盖玻片且刚开始产孢，擦去背对中心的那面的菌丝后，置于滴有无菌水载玻片上，再加盖玻片镜检。参考有关文献［3-5］将各真菌鉴定到属。

2　结果与分析

香菇反季节栽培中污染真菌的种类及分离频率见表1。

表1　香菇反季节栽培中污染真菌种类及分离频率Tab.1The species and isolated frequency of pathogenic fungi during Lentinus edodes anti-season cultivation

表1结果表明，共获得木霉属（Trichoderma）、青霉属（Penicillium）、拟青霉属（Paecilomyces）、镰孢属（Fusarium）、轮枝霉属（Verticillium）、毛霉属（Mucor）共6个属的香菇病原真菌，显微结构见图1，此外有少量未鉴定的真菌属。木霉属真菌是香菇反季节栽培的主要病原真菌，分离频次达到61.90%；其次是青霉属和镰刀菌属真菌，分别是12.09%和8.42%。

图1中1～6依次为木霉属（Trichoderma）、青霉属（Penicillium）、拟青霉属（Paecilomyces）、镰孢属（Fusarium）、轮枝霉属（Verticillium）、毛霉属（Mucor）真菌放大400倍显微结构。

图1　病原真菌显微结构Fig.1Microscopic structure of pathogenic fungi

香菇反季节栽培培菌前期、培菌后期和出菇期病原真菌的种类和发生率各不相同，见图2。

由图2可见，出菇期发生病原真菌的种类最多，而发菌后期病原真菌种类最少；木霉属真菌是最主要的污染真菌，在培菌前期、培菌后期和出菇期发生率大幅增加，分别为0.33%、2.20%和14.36%；青霉属真菌发生率在发菌前期和后期差别不大，分别为0.12%和0.11%，而在出菇期发生率达到3.10%；拟青霉属真菌污染仅在培菌前期发现，发生率为0.25%。

3　讨论

昆明夏天正是真菌最适宜生长时期，香菇反季节栽培种分离得到的病原真菌种类与徐耀波、卢东升等人报道［2，6］的基本一致，但拟青霉属真菌未见报道，可能是栽培基质污染。

边银丙等［7］认为食用菌菌丝病害分为菌丝体侵染性病害与竞争性病害。侵染性病害是由于菌丝体受到病原物侵染；竞争性病害是由于培养基质存在其它微生物污染，与食用菌菌丝体拮抗反应，从而阻碍菌丝体正常生长。因此，培菌前期菌丝体未长满菌棒，主要发生菌丝体竞争性病害，其它2个时期菌丝已长满，主要发生菌丝体侵染性病害。培菌前期、培菌后期和出菇期病木霉菌发生率大幅增加，可能是香菇菌丝体生长环境逐步开放，降低了木霉菌侵入难度；另外持续高温条件下香菇菌棒生理活性下降，对木霉菌失去抗性［8］所致。

图2　香菇反季节栽培不同时期各病原真菌的发生率比较Fig.2Comparison of pathogenic fungi incidence during Lentinus edodes anti-season cultivation

［1］张金霞，黄晨阳.无公害食用菌安全生产手册［M］.北京：中国农业出版社，2008.

［2］徐耀波，文成敬.平菇和香菇袋料栽培中污染真菌的研究［J］.中国食用菌，2004，23（2）：45-47.

［3］Paul M Kirk，Paul F Cannon.Dictionary of the fungi（10th edition）［M］.CABI Publishing：2008.

［4］魏景超.真菌鉴定手册［M］.上海：上海科学技术出版社，1979.

［5］董伟.蔬菜病虫害诊断与防治彩色图谱［M］.北京：中国农业科学技术出版社，2012.

［6］卢东升，王金平.食用菌污染真菌的调查研究［J］.信阳师范学院学报：自然科学版，2007，20（4）：447-451.

［7］边银丙.食用菌菌丝体侵染性病害与竞争性病害研究进展［J］.食用菌学报，2013，20（2）：1-7.

［8］曹现涛.香菇菌棒腐烂病相关木霉鉴定与发生规律初步研究［D］.武汉：华中农业大学，2015.

Pathogenic Fungi and Main Features of Occurrence During Lentinus edodes anti-season Cultivation in Kunming

WANG Wei1，TIAN Yun-xia1，WU Shao-qi1，XU Qing-kun2
（1.Kunming Academy of Agricultural Sciences，Kunming 650034，China；2.Yunnan Wansheng Mushroom Cultivation Ltd.，Kunming 655200，China）

Absract：The pathogenic fungi samples from several growing farm of anti-season Lentinus edodes were collected isolated and purified，and a total of 6 genus were identified，such as Trichoderma，Penicillium，Paecilomyces，Fusarium，Verticillium，Mucor. The isolated frequency of Trichoderma was highest（61.90%）.The most pathogenic fungi species appeared in fruiting season cultivation，and it occur rarely in late cultivation season.Trichoderma is a major pathogenic fungi，and the occurrence rate in pre cultivation season，late cultivation season and fruiting were 0.33%，2.20%and 14.36%respectively.Paecilomyces fungus contamination was found only in the pre cultivation season，and the occurrence rate was 0.25%.

Lentinus edodes；anti-season；pathogenic fungi

S646.1

A

1003-8310（2016）03-0068-03

10.13629/j.cnki.53-1054.2016.03.015

昆明特色经济作物新品种选育及栽培技术推广应用（2130106）；昆明科技局重大项目（2015-2-N-01573）。

汪威（1980-），男，硕士，农艺师，主要从事食用菌产业化开发与技术推广研究。E-mail：10524354@qq.com

2016-03-03