不稳定型心绞痛患者血清亲环素A的水平及临床意义

蔡连锁　刘长江　张岳雯　宁佳



·论著·

不稳定型心绞痛患者血清亲环素A的水平及临床意义

蔡连锁刘长江张岳雯宁佳

目的探讨不稳定型心绞痛患者血清亲环素A(CypA)、白介素-6(IL-6)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平变化间的关系及临床意义。 方法选取冠心病心绞痛患者82例，包括稳定型心绞痛(SAP)40例，不稳定型心绞痛(UAP)42例；同时取无血管病变的30例健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清CypA、IL-6、MMP-9的水平，并对结果进行分析。 结果冠心病组血清CypA含量为(8.68±3.29)ng/ml、IL-6为(17.35±3.57)ng/L、MMP-9为(44.96±11.25)ng/ml；对照组3个指标的含量依次为(3.51±0.57)ng/ml、(6.16±1.87)ng/L、(26.87±5.21)ng/ml。冠心病组患者血清CypA、IL-6、MMP-9水平与对照组比较显著增高(P<0.05)。UAP组血清CypA、IL-6、MMP-9水平分别为(13.45±4.51)ng/ml、(21.37±5.86)ng/L、(63.22±10.31)ng/ml；SAP组3个指标的含量分别为(5.62±1.09)ng/ml、(12.12±2.14)ng/L、(30.43±7.24)ng/ml。UAP组血清CypA、IL-6、MMP-9水平与SAP组和对照组比较均显著增高(P<0.05)；SAP组血清IL-6水平与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。 通过相关性分析UAP患者血清CypA水平与IL-6、MMP-9水平均呈正相关性(r=0.361、0.428，P<0.05)。结论不稳定型心绞痛患者血清CypA升高，其可能参与了不稳定型心绞痛的发生发展，且冠脉粥样斑块的不稳定性可能是CypA与IL-6、MMP-9协同作用相关。

不稳定心绞痛；亲环素A；白介素-6；基质金属蛋白酶-9

不稳定型心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)属于急性冠脉综合征冠心病类型，主要是由于冠脉不稳定的粥样斑块破裂出血，导致动脉管腔闭塞或狭窄，而出现急性心肌缺血的临床表现。目前认为，UAP的发生和进展与炎性反应关系密切，因而确定新炎性因子、明确其作用机制有重要意义。亲环素A(Cyclophilin A,CypA)是一种广泛存在且高度保守的蛋白质，可促进内皮细胞黏附分子的表达及增加炎性细胞的趋化活性，研究发现其与动脉粥样硬化的发生和发展密切相关[1，2]。白介素细胞-6(IL-6)是炎性反应的调节者，在血管损伤和急性心肌缺血中起主要作用；基质金属蛋白酶-9(MMP-9)可破坏粥样硬化斑块的稳定性，促进斑块破裂[3]。本研究通过检测冠心病患者血清CypA、IL-6、MMP-9水平及其相关性，以探讨CypA在UAP患者中的临床意义。

1　资料与方法

1.1一般资料选取2013年11月至2014年4月我院住院且经冠状动脉造影检查确诊为冠心病的患者82例为CHD组，男49例，女33例；平均年龄(61.7±11.2)岁；其中包括稳定型心绞痛(SAP)40例为SAP组，男23例，女17例；平均年龄(59.8±11.6)岁；合并高血压病14例, 脑血管病7 例，糖尿病9例；UAP患者42例为UAP组，男26例，女16例；平均年龄(61.6±11.7)岁；合并高血压病15例，脑血管病9例，糖尿病11 例。选取同期30例健康体检者为对照组，男31例，女19例；年龄49～80岁，平均年龄(61.2±10.5)岁；经询问病史、体格检查、心电图及其他实验室检查无异常。3组患者间年龄、性别比、吸烟史、饮酒史及血脂、血糖、高血压等并发疾病情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2诊断冠心病心绞痛患者诊断标准[4]：经冠脉造影确诊，左主干、左前降支、左回旋支或右冠状动脉至少一支心外膜下冠状动脉管腔直径狭窄超过50%。心电图检查符合：心绞痛发作时心电图出现缺血性变化；静息时心电图出现明显缺血变化；运动试验时心电图出现明显缺血变化。

1.3排除标准既往有心肌梗死病史、冠状动脉介入治疗病史、外周血管疾病、慢性心力衰竭、肾脏及肝脏疾病、血液病、甲状腺疾病、恶性肿瘤、自身免疫性疾病以及近期发热、感染性疾病、血栓、结缔组织性疾病等病史。

1.4标本采集及检测方法所有受试对象于清晨空腹采集肘静脉血4 ml注入一次性真空洁净玻璃管内，静置1 h左右后，以3 000 r/min离心10 min分离血清，取上清液，置于-20℃冰箱待测。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清CypA、IL-6、MMP-9；试剂盒为美国R&D公司产品，按照试剂盒说明步骤进行操作。

2　结果

2.1CHD组与对照组血清CypA、IL-6、MMP-9水平比较CHD组血清CypA含量为(8.68±3.29)ng/ml、IL-6为(17.35±3.57)ng/L、MMP-9为(44.96±11.25)ng/ml；对照组3个指标含量依次为(3.51±0.57)ng/ml、(6.16±1.87)ng/L、(26.87±5.21)ng/ml。CHD组血清CypA、IL-6、MMP-9水平与对照组比较，CHD组患者血清CypA、IL-6、MMP-9水平明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

组别CypA(ng/ml)IL-6(ng/L)MMP-9(ng/ml)对照组(n=30)3.51±0.576.16±1.8726.87±5.21CHD组(n=82)8.68±3.29*17.35±3.57*44.96±11.25*

注:与对照组比较，*P<0.05

2.2UAP组和SAP组与对照组血清CypA、IL-6、MMP-9水平比较UAP组血清CypA、IL-6、MMP-9水平分别为(13.45±4.51)ng/ml、(21.37±5.86)ng/L、(63.22±10.31)ng/ml；SAP组3个指标的含量分别为(5.62±1.09)ng/ml、(12.12±2.14)ng/L、(30.43±7.24)ng/ml。UAP组血清CypA、IL-6、MMP-9水平较SAP组及对照组血清水平明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)；SAP组血清IL-6水平与较对照组比较明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。SAP组血清CypA、MMP-9水平较对照组升高，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

组别CypA(ng/ml)IL-6(ng/L)MMP-9(ng/ml)对照组(n=30)3.51±0.576.16±1.8726.87±5.21UAP组(n=42)13.45±4.51*#21.37±5.86*#63.22±10.31*#SAP组(n=40)5.62±1.0912.12±2.14*30.43±7.24

注:与对照组比较，*P<0.05；与SAP组比较，#P<0.05

2.3UAP组和SAP组患者血清CypA、IL-6、MMP-9相关性分析UAP组患者血清CypA与IL-6、MMP-9水平经Pearson相关分析，呈正相关性(r=0.361、0.428,P<0.05)，但SAP组患者血清CypA与IL-6、MMP-9水平经相关性分析，均无相关性(r=0.042、0.117，P>0.05)。

3　讨论

UAP是常见的冠心病类型，主要是由冠状动脉粥样硬化所致，其有较高病死率。由于UAP的发病率、死亡率在我国均不断上升，近年来关于UAP的发病机制、病情评估及治疗途径选择已成为研究的热点。关于UAP的发病机制，一直以来认为脂质斑块沉积于血管壁是致病的主要因素，因此治疗一直在降脂、增加斑块稳定性方面进行研究。但目前治疗结果并不能令人满意。因此，学者们认为其他机制在UAP的发生进展中发挥了重要作用。近期炎性反应在冠心病中的作用越来越受到关注，对炎性因子等标志物的研究也已成为研究热点。动脉粥样硬化的病理特征是血管壁的慢性炎性过程，使血管内皮细胞表达黏附分子，大量炎性细胞进入内皮层下，导致内皮细胞活化，从而使血小板聚集，在斑块形成过程和破裂中发挥主要作用[5，6]。寻找新的血清标志物进行UAP病情分析、预后评价、治疗效果评估具有重要意义，本研究在这一领域进行了探讨。

CypA属于亲环素家族成员之一，又被称为分泌氧化应激诱导因子，可被单核细胞巨噬细胞、血管平滑肌细胞、血管内皮细胞分泌到细胞外发挥重要生物学功能。研究发现其可以刺激血管平滑肌细胞迁移，促使内皮细胞黏附分子的表达，导致炎性细胞的趋化活性增加[7]，在动脉粥样硬化、血管重构等病理生理中起关键作用。因此认为CypA在血管炎性反应过程中对促进炎性反应的进展发挥了重要作用，可能与冠心病的发生进展有关。 Satoh等[8]研究发现在动脉粥样硬化的进程中，CypA表达水平明显增加，其斑块中的产生大量的CypA，其坏死核心中死亡的细胞是CypA的主要的来源。CypA诱导单核细胞释放IL-6，通过激活单核细胞参与动脉粥样硬化进展，还可通过调节泡沫细胞的细胞黏附、侵袭和MMP-9的表达，这些粥样斑块不稳定性显著相关[9]。本研究显示，冠心病患者较对照组血清CypA水平明显增高，SAP患者较对照组血清CypA水平增高，但差异无统计学意义(P>0.05)，而UAP患者较对照组血清CypA水平增高，差异有统计学意义(P<0.05)，表明随着冠心病心绞痛的严重程度不断增加，而CypA血清水平明显增高，提示CypA与UAP关系密切，CypA水平升高可能会导致其他炎性因子水平变化，从而使血管炎性反应加重，引起相关疾病发生。

IL-6为前炎性细胞因子，在炎性反应、血管损伤、急性心肌缺血中起重要作用。IL-6可导致心肌损伤及功能障碍，在心血管疾病病理生理过程中发挥关键作用；IL-6可以促使单核细胞进入血管内皮下参与斑块形成，导致冠状动脉血栓形成[10]。Sadeghi等[11]研究发现UAP患者血清IL-6水平明显升高，表明IL-6在UAP的发生、发展有关，研究还发现IL-6表达水平与冠心病的发生、发展及疾病的预后密切相关[12，13]。Wang等[14]研究认为IL-6是粥样硬化斑块中的标记物，与动脉粥样斑块形成及破裂的发生密切相关，UAP血清中的IL-6表达水平显著升高，IL-6的表达水平越高其斑块的稳定性越差。本研究发现SAP血清IL-6水平与对照组比较明显升高，而UAP血清IL-6水平较SAP明显增高，亦表明IL-6的表达水平越高其斑块的稳定性越差。

本研究发现MMP-9是基质金属蛋白酶家族中的一员，亦称明胶酶，对细胞外基质具有降解作用，可以分解粥样斑块基底膜和纤维帽的血管内皮基底膜Ⅳ型胶原，破坏其结构，从而导致斑块的稳定性降低，加速斑块破裂。MMP-9降解破坏血管内皮完整性，同时又为炎性细胞浸润迁移提供条件，使炎性细胞向斑块中聚集增加，导致动脉粥样硬化斑块[15]。Mishra等[16]研究表明，冠心病患者外周血中MMP-9水平与正常对照水平明显增高。本研究发现SAP血清MMP-9水平较对照组升高，但差异无统计学意义(P>0.05)，而UAP血清MMP-9水平较SAP明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)，表明MMP-9的表达粥样斑块的稳定性具有相关性。

CypA促使单核细胞分泌炎性因子，诱导单核细胞迁移，袁伟等[17]通过对人类单核细胞系THP-1细胞体外培养研究发现，CypA可以促使单核细胞分泌IL-6，明显增强MMP-9的活性。本研究通过相关性分析进一步发现，UAP患者血清CypA水平与IL-6、MMP-9水平均具有正相关性，表明CypA可能通过促使IL-6、MMP-9的分泌，使粥样斑块不稳定，导致UAP的发生。但本研究也发现，在SAP组患者中血清CypA与IL-6、MMP-9无明显相关性，这一结果提示CypA在不同类型的心绞痛发病中可能发挥不同作用，具体情况尚待深入研究。

综上所述，UAP患者血清CypA明显升高，表明CypA参与其发生、发展，并且可能通过与IL-6、MMP-9协同作用导致粥样斑块稳定性差，因此CypA血清水平可能有助于UAP患者的病情判断及评估。

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10.3969/j.issn.1002-7386.2016.19.024

063600河北省乐亭县医院内二科(蔡连锁、刘长江、张岳雯),药剂科(宁佳)

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2016-01-20)