儿骨强颗粒治疗佝偻病大鼠的实验研究※

罗轩红 陈小丽 涂小玲 陈 文

（1江西省南昌市东湖区妇幼保健所药剂科，南昌330008；2江西中医药高等专科学校药学系，抚州334000）

儿骨强颗粒治疗佝偻病大鼠的实验研究※

罗轩红1陈小丽1涂小玲1陈 文2

（1江西省南昌市东湖区妇幼保健所药剂科，南昌330008；2江西中医药高等专科学校药学系，抚州334000）

目的观察儿骨强颗粒对大鼠佝偻病的治疗作用。方法以暗室和饲喂维生素D缺乏饲料复制大鼠佝偻病模型。给予儿骨强颗粒治疗一个月，检测佝偻病大鼠血钙、血磷和血碱性磷酸酶，骨干、灰重，骨钙及观察骨组织病理学变化。结果儿骨强颗粒治疗组大鼠较模型组血钙明显升高，血磷、血碱性磷酸酶下降（P＜0.05，P＜0.01），骨干重、灰重增加，骨钙升高，骨组织切片观察接近正常对照组。结论儿骨强颗粒对佝偻病有明显治疗效果。

佝偻病；儿骨强颗粒；血钙；血磷；中成药疗法

儿骨强颗粒系本课题组参考传统经典方剂和临床经验方，结合现代中药药理研究成果，自行设计组方研制的儿童佝偻病制剂。儿骨强颗粒以中医“肾主骨”理论为指导，以滋补肝肾，益髓健骨、健脾益气中药熟地黄，山萸肉、山药、茯苓、黄芪配合天然补钙中药煅牡蛎粉和富含维生素D的鸡蛋黄粉等药，发挥中药补肾健骨益精生髓作用的优势，先天后天兼顾，标本兼治。本实验观察了儿骨强颗粒对大鼠佝偻病的治疗作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物SD雄性幼年清洁级大鼠60只，21 d龄断奶，体重（45±3）g，购自南昌大学医学院实验动物中心。

1.2 药品及试剂儿骨强颗粒，为本课题组自行研制，处方药物组成为熟地黄，山药、山萸肉、茯苓、黄芪、煅牡蛎粉、鸡蛋黄粉、维生素D、葡萄糖酸钙等。龙牡壮骨颗粒武汉健民药业集团股份有限公司产品，批号：20140601。

1.3 维生素D缺乏配方饲料玉米粉76%、麦麸20%、碳酸钙3%、含碘盐1%、赖氨酸0.5%以及各种B族维生素。

1.4 仪器AS9862乙炔火焰原子吸收光谱仪，北京普析通用仪器有限公司；752型紫外分光光度计，上海光学仪器一厂。

1.5 方法

1.5.1 佝偻病模型制备SD雄性幼年清洁级大鼠60只，21 d龄断奶，体重（45±3）g，随机分为正常对照组10只和实验组50只。正常对照组常规饲养。实验组置暗室喂养，喂以缺维生素D饲料。连续30 d制成佝偻病大鼠模型［1］。

1.5.2 治疗方法将成模的50只实验组大鼠随机分为模型组，儿骨强颗粒高、中、低剂量组、龙牡壮骨颗粒组，每组10只，各给药组分别灌胃给予相应剂量的药物，模型组灌胃等体积蒸馏水。除10只正常对照组大鼠常规饲养外，其余各组大鼠继续置暗室喂养，喂以缺维生素D饲料。治疗1个月后将动物处死。检测各项指标。

1.5.3 指标测定

1.5.3.1 血清钙、磷、碱性磷酸酶（AKP）实验结束时以3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉动物，颈动脉取血，分离血清，用EDTA滴定法检测血清钙（Ca），抗坏血酸还原法检测血清磷（P），磷酸对硝基苯基质动力学法检测血清碱性磷酸酶AKP）。

1.5.3.2 股骨干重、灰重及骨钙含量取大鼠左侧股骨用氯仿、甲醇（2∶1）混合液脱脂后，置于120℃烘箱中干燥6 h，称其干重；然后置于马福炉中800℃灰化6 h，称其灰重；将灰粉溶于6N盐酸中，原子吸收光度法测定骨钙含量。

1.5.3.3 骨组织病理学检查取右胫骨用10%福尔马林固定10%EDTA脱钙石蜡包埋HE染色切片，进行组织病理学观察。

1.5.4 数据处理数据以（x±s）表示，经方差分析进行统计学处理。

2 结果

2.1 大鼠血清钙、磷、碱性磷酸酶（AKP）含量的测定结果见表1。

表1 大鼠血清钙、磷、碱性磷酸酶含量（±s）

表1 大鼠血清钙、磷、碱性磷酸酶含量（±s）

注：与正常组比较**P＜0.01；与模型组比较#P＜0.05；##＜P＜0.01

血碱性磷酸酶（U/L）正常对照组1.89±0.14 175.6±11.5组别剂量（g/kg）只数10血钙（mmol/L）3.22±0.26血磷（mmol/L）10 2.31±0.19**龙牡壮骨颗粒6.0 10 2.89±0.16#2.12±0.15##188.3±15.8##模型组2.85±0.18**282.3±19.6**儿骨强颗粒12.0 10 3.12±0.17##1.93±0.16##179.4±16.8##6.0 10 2.98±0.11##1.97±0.11##178.5±14.2##3.0 10 2.92±0.12##2.32±0.12#189.5±17.3##

表1可见，与正常组相比模型组血钙含量明显降低、血磷和血碱性磷酸酶含量明显升高（P＜0．01），与模型组相比较，儿骨强颗粒各剂量组大鼠血钙显著升高（P＜0．01）、血磷和血碱性磷酸酶含量显著降低（P＜0．05，P＜0．01）。

2.2 大鼠股骨干重、灰重及骨钙含量的测定结果见表2

表2 大鼠股骨干重、灰重及骨钙含量（±s）

表2 大鼠股骨干重、灰重及骨钙含量（±s）

注：与正常组比较**P＜0.01；与模型组比较#P＜0.05；##＜P＜0.01

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表2结果显示，与正常组比较，佝偻病模型组大鼠股骨干重、灰重及骨钙含量显著降低（P＜0．O1）；与模型组比较，儿骨强颗粒各剂量组大鼠股骨干重、灰重及骨钙显著增高（P＜0．05，P＜0．01）。

2.3 骨组织病理切片观察结果正常对照组骺板厚度均匀，骨化线整齐，增生层肥大软骨细胞柱排列整齐。模型组骨骺端钙化障碍而形成大量软骨细胞增殖和骨样组织堆积，骨密度稀疏，骺板厚薄不一，骨化线不规则，儿骨强颗粒各剂量组镜下所见与正常对照组相似，软骨细胞的增殖及骨密度均接近正常对照组。

3 讨论

佝偻病是一种常见的小儿疾病，特征为钙、磷代谢失调和骨骼改变，为我国重点防治的四大婴幼儿疾病之一［2］。

从实验结果可知，儿骨强颗粒对大鼠佝偻病有良好治疗作用。儿骨强颗粒由熟地黄，山药、山萸肉、茯苓、黄芪、煅牡蛎粉等药物组成。其组方思路按照中医关于肾主骨的理论，从滋补肝肾入手［3］。方中熟地黄，山萸肉滋补肝肾，益精填髓以培固先天之本。煅牡蛎富含天然活性钙质，鸡蛋黄粉富含天然维生素D。黄芪、山药益气健脾以促进钙和维生素D的吸收。诸药配伍，标本兼治，实验证明该制剂治疗佝偻病获得良好效果。

［1］缪朝玉，朱铨英，唐惠兰，等.佝偻病大鼠和小鼠模型［J］.中国药理学通报，1996，12（3）：280-282.

［2］汪翼.儿科学［M］.5版.北京：人民卫生出版社，2004：44．

［3］叶维建，范定怀，郑玉涛.滋补肝肾中药预防和治疗大鼠佝偻病的实验研究［J］.济宁医学院学报，2004，27（3）：72-73.

Ex perim entalStudy of Erguqiang Granu lar in the Treatm en t o f Rickets Rats

LUOXuanhong1，CHENXiaoli1，TU Xiaoling1，CHENWen2
（1.Department of Pharmacy，TheMaternaland Child CareServiceCentre of Donghu District，Nanchang330008，China；2.School of Pharmacy，JiangxiCollege of TraditionalChineseMedicine，Fuzhou344000，China）

Objective To investigate the therapeutic effect of Erguqiang granular in the treatment of rickets rats.M ethods The experimental ricketsmodel ratswere induced by feeding vitamin D deficiency diet in darkroom.The rickets ratswere intervened with Erguqiang granular for 30 days.The blood calcium，serium inorganic phosphorus and serum alkaline phosphatase of rats were checked.The diaphysis，ash weight and histopathologic changes of bone were observed.Results The blood calcium of the treatment groups increased markedly，and serium inorganic phosphorus and serum alkaline phosphatase decreased markedly than those of themodel group（P＜0．05，P＜0.01）.The diaphysis，ash weight and bone calcium of the treatment group increased，and the bony tissue pathological section of the treatment groups were close to normal control group.Conclusion Erguqiang granular in the treatment of ricketshad obviously therapeutic effect.

rickets；Erguqiang granular；blood calcium；serium inorganic phosphorus；therapy of traditional Chinese medicine patent prescription

10.3969/j.issn.1672-2779.2015.11.074

1672-2779（2015）-11-0146-02

：张文娟本文校对：徐红

2015-04-17）

江西省南昌市指导性科技计划项目（No：洪科发计字［2013］210号）