依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织NF-κB p65蛋白表达的影响

赵彬+王玉芳+陈桂华+张晋霞+李世英+刘玉玲+张玉芹+刘斌

[摘要] 目的 探讨依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织NF-κB p65蛋白表达的影响。 方法 108只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、脑出血组和依达拉奉治疗组，其中脑出血组和依达拉奉治疗组又分为3 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d 8个亚组，每组6只。采用大鼠尾动脉自体不凝血50 μL注入尾状核区建立脑出血模型。依达拉奉治疗组于模型制作成功后2 h开始腹腔内注射3 mg/kg依达拉奉，1次/d。免疫组化法检测NF-κB p65蛋白表达变化。 结果 与脑出血组相比，依达拉奉治疗组于出血后 6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d血肿周围组织NF-κB p65蛋白表达均减少（P < 0.05或P < 0.01）。 结论 依达拉奉对脑出血后血肿周围脑组织损伤有保护作用，可能与其抑制NF-κB p65蛋白表达有关。

[关键词] 脑出血；NF-κB p65蛋白；依达拉奉

[中图分类号] R743.34[文献标识码] A[文章编号] 1673-7210（2014）05（c）-0017-03

Effect of Edaravone on NF-κB p65 protein expression in perihematoma of rats with intracerebral hemorrhage

ZHAO Bin1 WANG Yufang2 CHEN Guihua2 ZHANG Jinxia2 LI Shiying2 LIU Yuling2 ZHANG Yuqin2 LIU Bin2

1.School Infirmary, Hebei United University, Hebei Province, Tangshan 063000, China; 2.The First Department of Neurology, the Affiliated Hospital of Hebei United University, Hebei Province, Tangshan 063000, China

[Abstract] Objective To investigate the effect of Edaravone on the NF-κB p65 protein expression in perihematoma of rats with intracerebral hemorrhage (ICH). Methods 108 healthy adult Wistar rats were randomly divided into normal group, sham group, ICH group, Edaravon treatment group. The ICH group and Edaravon treatment group were randomly divided into 3 h, 6 h, 12 h, 1 d, 2 d, 3 d, 5 d, 7 d subgroups respectively after ICH, each group had 6 rats. ICH models were prepared by injecting 50 μL of autogenous blood into the right caudate nucleus of rats. Edaravon treatment group after ICH 2 h were given 3 mg/kg Edaravon by intraperitoneal injection, 1 time/d. The expression of NF-κB p65 protein was observed by immunohistochemistry. Results Compared with ICH group, the expression of NF-κB p65 protein in Edaravone treatment group were weakened at 6 h, 12 h, 1 d, 2 d, 3 d, 5 d and 7 d after ICH (P < 0.05 or P < 0.01). Conclusion Edaravon has a protective effect on perihematoma brain tissues after ICH, it may be related to the inhibition of NF-κB p65 protein expression.

[Key words] Cerebral hemorrhage; NF-κB p65 protein; Edaravone

脑出血（intracerebral hemorrhage，ICH）是神经内科常见病、多发病，严重威胁人类的生命和健康。脑出血后影响患者存活，且致残率高，主要原因包括脑血肿对血肿周围神经组织的物理损伤以及血肿的占位效应，另外还与血肿周围神经组织的继发性损害有关[1]。脑出血后的继发性损害机制较复杂，许多病理生理机制参与其中。有研究表明，炎性反应在脑损伤的发展中具有重要作用[2]。核转录因子NF-κB（nuclear factor kappa-B）是一种具有多种调节作用的免疫反应蛋白，与机体的免疫应答、细胞的增生和凋亡及炎性反应等重要的病理生理过程密切相关，其中，NF-κB p65是重要的核转录因子，在脑出血后损伤中具有重要作用[3]。依达拉奉（Edaravone）是一种新型脑保护剂，可抑制脂质过氧化，清除自由基，从而抑制神经细胞的氧化损伤，具有抗细胞凋亡和神经保护作用[4]。研究表明，依达拉奉在治疗脑出血方面效果确切[5]。本研究通过制作脑出血大鼠模型，并给予依达拉奉药物治疗，观察依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织NF-κB p65蛋白表达的影响，进一步探讨依达拉奉对脑出血后脑组织损害的保护机制，为依达拉奉临床治疗脑出血提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康雄性Wistar大鼠108只，体重250～300 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号：Scxk（京）-2013-0001。

1.2 主要试剂

NF-κB p65多克隆抗体由北京中杉金桥生物技术有限公司提供。依达拉奉注射液由南京先声药业公司生产，批号：040181，规格10 mg/5 mL。

1.3 模型制作

按照李慧等[6]报道的方法制作脑出血大鼠模型。术前大鼠需禁食、水，腹腔注射100 g/L水合氯醛麻醉，然后俯卧位固定于立体定位仪上，消毒切皮暴露前囟后，以其中央为原点，取其后方1.4 mm，中线右侧旁3.2 mm处钻一小孔（直径为1 mm）至颅骨下硬膜，鼠尾消毒后断尾取自体血50 μL，用微量注射器沿钻孔方向垂直进针，深约5.6 mm，缓慢均速将自体血（50 μL）推注入脑，留针10 min后退出，并用医用骨蜡封闭骨孔，缝合头皮，加压包扎尾部。假手术组除不注射自体血外，余操作同上。模型成功的标准：①大鼠爬行时向左侧倾倒或按逆时针方向转圈；②提尾时大鼠左侧前肢内收屈曲。

1.4 分组及给药方法

实验动物随机分为正常组、假手术组、脑出血模型组（脑出血组）和依达拉奉治疗组，其中，脑出血组和依达拉奉治疗组根据动物处死时间分为3 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d和7 d共8个亚组，每组6只。依达拉奉治疗组于模型制作成功后2 h开始按3 mg/kg腹腔内注射依达拉奉，1次/d，用药到试验结束。假手术组和脑出血组腹腔内注射等量生理盐水。

1.5 标本制备

各组取相应时相点大鼠，以100 g/L水合氯醛（300 mg/kg）腹腔麻醉致死，仰卧固定于操作台上，切皮打开胸腔，暴露心脏，灌注针从心尖插入至左心室，并剪开右心耳，快速滴入37℃生理盐水液约300 mL，去除血污后滴入固定液（4℃多聚甲醛400 mL）。待鼠尾完全僵直，迅速断头后取出脑组织，于4%多聚甲醛溶液中固定12～24 h，进行脱水透明及石蜡包埋。冠状面连续切片（厚度约3 μm），用经多聚赖氨酸处理的载玻片捞片，晾干后置于60℃的烤箱中烘烤备用。

1.6 NF-κB p65蛋白检测

采用免疫组织化学法检测NF-κB p65蛋白的表达情况，操作步骤严格按试剂说明书进行。阳性标准：镜下观察，NF-κB p65因子染色呈棕黄色颗粒，位于胞浆内。取血肿周围脑组织不重叠的6个视野，于高倍镜下观察，用高清晰度彩色病理图像分析系统计数NF-κB p65的阳性细胞数，取其平均值。

1.7 统计学方法

以Excel数据库整理后用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

正常组和假手术组只见少量的NF-κB p65蛋白阳性细胞表达，由于数量极少，故未进行统计学分析。脑出血组在脑出血后3 h即有NF-κB p65阳性细胞表达，随着出血时间的延长阳性细胞表达逐渐增多，出血后12 h明显增多，出血后2 d表达达高峰，出血后3 d阳性细胞表达逐渐减少。依达拉奉治疗组于出血后3 h有NF-κB p65阳性细胞表达，出血后2 d表达最高，出血后3 d开始下降。与脑出血组相比，依达拉奉治疗组NF-κB p65蛋白阳性细胞在脑出血后3 h未见减少（P > 0.05），在脑出血后6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d及7 d时表达均明显减少，差异有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01）。见表1。

3 讨论

核因子NF-κB是从B细胞核提取物中发现的一种能与免疫球蛋白κ轻链基因的增强子κB序列特异结合的蛋白因子[7]，最为典型的NF-κB是由P50和P65（RelA）亚基组成，具有多种调节作用。通常情况下，NF-κB与抑制蛋白相结合以非活性形式存在于胞浆内，在细胞接受胞外氧自由基等刺激信号后，NF-κB可被激活而迅速由胞浆移向胞核，与相应DNA上的κB序列发生特异性结合，促进相关基因的转录，进而在细胞的增殖、分化、细胞凋亡的调节以及炎症的发生等方面发挥重要作用[8-9]。NF-κB在多种疾病的发生、发展过程中起着重要的作用。顾萍等[10]建立大鼠脑出血模型发现，NF-κB p65蛋白阳性细胞于术后6 h开始增多，48 h达高峰，持续到96 h仍有较多表达，与细胞凋亡呈正相关。本研究实验结果显示，大鼠脑出血后3 h血肿周围脑组织即有少量NF-κ B p65蛋白阳性表达，在术后6 h增多，2 d达高峰，3 d后逐渐下降。同时，本研究观察到NF-κB p65蛋白阳性细胞主要表达于细胞凋亡较重的区域。本研究结果与顾萍等[10]的报道结果基本一致。说明NF-κB p65参与了脑出血后血肿周围脑组织细胞损伤的病理过程。

依达拉奉是一亲脂性基团，其相对分子量为174.20，在体内以阴离子形式存在，可转移一个电子给自由基而产生依达拉奉基团，切断脂质过氧化反应链，对神经细胞具有保护作用[11]。依达拉奉是目前临床试验证明唯一有效的自由基清除剂，在包括脑血管疾病、颅脑外伤等在内的中枢神经系统疾病中发挥重要的神经保护作用[12-13]。依达拉奉可抑制脑出血后血肿周围神经细胞凋亡，对脑出血后脑组织起到神经保护作用[14-15]。本研究通过对脑出血大鼠进行依达拉奉干预，结果表明，依达拉奉治疗组NF-κB p65蛋白阳性表达在脑出血后6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d及7 d均明显减少。提示依达拉奉可通过抑制NF-κB p65蛋白的表达，对脑出血后脑组织损伤有保护作用。

[参考文献]

[1]张云，刘斌.脑出血后继发性脑损伤的细胞凋亡机制研究进展[J].中国康复医学杂志，2007，22（12）：1130-1133.

[2]Hou J，Manaenko A，Hakon J，et al. Liraglutide，a long acting GLP 1 mimetic， and it smet abolite attenuate inflammation after in tracerebral hem orrhage [J]. J Cereb Blood Flow Metab，2012，32（12）：2201 .

[3]杨德刚，陈应柱，吴碧华，等.抑肽酶对大鼠脑出血血肿周围组织核转录因子表达的影响[J].临床神经病学杂志，2008，21（4）：287-289.

[4]Shimon A，Tatsushi K，Chikako N，et al. Anti-apoptotic and neuroprotective effects of edaravone following transient focal ischemia in rats [J]. Eur J Pharmacol，2005，516（2）：125-130.

[5]韦道祥，桑道乾，吴国林，等.依达拉奉治疗急性脑出血的疗效观察[J].中华全科医学，2009，7（4）：345-346.

[6]李慧，娄季宇，杨霄鹏. 实验性脑出血动物模型[J].中国实用神经疾病杂志，2007，10（2）：152-153.

[7]Sen R，Baltimore D. Multiple nuclear factors interact with the immunoglobulin enhancer sequences [J]. Cell，1986，46（5）：705-716.

[8]宋祖军，王少波，王琦，等.NF-κB的研究进展[J].世界急危重病医学杂志，2007，4（1）：1693-1696.

[9]于明，包晓群.依达拉奉对Aβ25-35 诱导分化PC12细胞NF-κB p65基因表达的影响[J].中国老年学杂志，2008， 28（22）：2199-2201.

[10]顾萍，张勇，丁新生，等.尼莫同对脑出血大树血肿周围核转录因子-κB表达的影响[J].南京医科大学学报：自然科学版，2006，26（3）：153-155.

[11]Masahiro B，Tetsuya M，Hideki K，et al. The radical scavenger edaravone prevents oxidative neurotoxicity induced by peroxynitrite and activated microglia [J]. Neuropharm，2005，4（3）：283-290.

[12]Liu XY，Yao LL，Chen YJ，et al. Survivin is involved in the anti-apoptotic effect of edaravone in PC12 cells [J]. Mol Cell Biochem，2009，327（1/2）：21-28.

[13]Itoh T，Satou T，Nishida S，et al. Edaravone protects against apoptotic neuronal cell death and improves cerebral function after traumatic brain injury in rats[J]. Neurochem Res，2010，35（2）：348-355．

[14]刘斌，赵紫烨，李建民，等.依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织细胞凋亡及P38M-APK蛋白表达的影响[J].中国药房，2010，21（13）：1173-1175.

[15]赵彬，刘斌，张玉芹.依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织Caspase-3和Pdcd-5蛋白表达的影响[J].天津医药，2012，40（5）：483-485.

（收稿日期：2014-03-12本文编辑：程铭）

[基金项目] 河北省唐山市科学技术研究与发展计划课题(编号10150204A-24)。

[通讯作者] 刘斌（1964.9-），男，硕士，主任医师；研究方向：脑血管病基础与临床。

1.4 分组及给药方法

实验动物随机分为正常组、假手术组、脑出血模型组（脑出血组）和依达拉奉治疗组，其中，脑出血组和依达拉奉治疗组根据动物处死时间分为3 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d和7 d共8个亚组，每组6只。依达拉奉治疗组于模型制作成功后2 h开始按3 mg/kg腹腔内注射依达拉奉，1次/d，用药到试验结束。假手术组和脑出血组腹腔内注射等量生理盐水。

1.5 标本制备

各组取相应时相点大鼠，以100 g/L水合氯醛（300 mg/kg）腹腔麻醉致死，仰卧固定于操作台上，切皮打开胸腔，暴露心脏，灌注针从心尖插入至左心室，并剪开右心耳，快速滴入37℃生理盐水液约300 mL，去除血污后滴入固定液（4℃多聚甲醛400 mL）。待鼠尾完全僵直，迅速断头后取出脑组织，于4%多聚甲醛溶液中固定12～24 h，进行脱水透明及石蜡包埋。冠状面连续切片（厚度约3 μm），用经多聚赖氨酸处理的载玻片捞片，晾干后置于60℃的烤箱中烘烤备用。

1.6 NF-κB p65蛋白检测

采用免疫组织化学法检测NF-κB p65蛋白的表达情况，操作步骤严格按试剂说明书进行。阳性标准：镜下观察，NF-κB p65因子染色呈棕黄色颗粒，位于胞浆内。取血肿周围脑组织不重叠的6个视野，于高倍镜下观察，用高清晰度彩色病理图像分析系统计数NF-κB p65的阳性细胞数，取其平均值。

1.7 统计学方法

以Excel数据库整理后用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

正常组和假手术组只见少量的NF-κB p65蛋白阳性细胞表达，由于数量极少，故未进行统计学分析。脑出血组在脑出血后3 h即有NF-κB p65阳性细胞表达，随着出血时间的延长阳性细胞表达逐渐增多，出血后12 h明显增多，出血后2 d表达达高峰，出血后3 d阳性细胞表达逐渐减少。依达拉奉治疗组于出血后3 h有NF-κB p65阳性细胞表达，出血后2 d表达最高，出血后3 d开始下降。与脑出血组相比，依达拉奉治疗组NF-κB p65蛋白阳性细胞在脑出血后3 h未见减少（P > 0.05），在脑出血后6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d及7 d时表达均明显减少，差异有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01）。见表1。

3 讨论

核因子NF-κB是从B细胞核提取物中发现的一种能与免疫球蛋白κ轻链基因的增强子κB序列特异结合的蛋白因子[7]，最为典型的NF-κB是由P50和P65（RelA）亚基组成，具有多种调节作用。通常情况下，NF-κB与抑制蛋白相结合以非活性形式存在于胞浆内，在细胞接受胞外氧自由基等刺激信号后，NF-κB可被激活而迅速由胞浆移向胞核，与相应DNA上的κB序列发生特异性结合，促进相关基因的转录，进而在细胞的增殖、分化、细胞凋亡的调节以及炎症的发生等方面发挥重要作用[8-9]。NF-κB在多种疾病的发生、发展过程中起着重要的作用。顾萍等[10]建立大鼠脑出血模型发现，NF-κB p65蛋白阳性细胞于术后6 h开始增多，48 h达高峰，持续到96 h仍有较多表达，与细胞凋亡呈正相关。本研究实验结果显示，大鼠脑出血后3 h血肿周围脑组织即有少量NF-κ B p65蛋白阳性表达，在术后6 h增多，2 d达高峰，3 d后逐渐下降。同时，本研究观察到NF-κB p65蛋白阳性细胞主要表达于细胞凋亡较重的区域。本研究结果与顾萍等[10]的报道结果基本一致。说明NF-κB p65参与了脑出血后血肿周围脑组织细胞损伤的病理过程。

依达拉奉是一亲脂性基团，其相对分子量为174.20，在体内以阴离子形式存在，可转移一个电子给自由基而产生依达拉奉基团，切断脂质过氧化反应链，对神经细胞具有保护作用[11]。依达拉奉是目前临床试验证明唯一有效的自由基清除剂，在包括脑血管疾病、颅脑外伤等在内的中枢神经系统疾病中发挥重要的神经保护作用[12-13]。依达拉奉可抑制脑出血后血肿周围神经细胞凋亡，对脑出血后脑组织起到神经保护作用[14-15]。本研究通过对脑出血大鼠进行依达拉奉干预，结果表明，依达拉奉治疗组NF-κB p65蛋白阳性表达在脑出血后6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d及7 d均明显减少。提示依达拉奉可通过抑制NF-κB p65蛋白的表达，对脑出血后脑组织损伤有保护作用。

[参考文献]

[1]张云，刘斌.脑出血后继发性脑损伤的细胞凋亡机制研究进展[J].中国康复医学杂志，2007，22（12）：1130-1133.

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[3]杨德刚，陈应柱，吴碧华，等.抑肽酶对大鼠脑出血血肿周围组织核转录因子表达的影响[J].临床神经病学杂志，2008，21（4）：287-289.

[4]Shimon A，Tatsushi K，Chikako N，et al. Anti-apoptotic and neuroprotective effects of edaravone following transient focal ischemia in rats [J]. Eur J Pharmacol，2005，516（2）：125-130.

[5]韦道祥，桑道乾，吴国林，等.依达拉奉治疗急性脑出血的疗效观察[J].中华全科医学，2009，7（4）：345-346.

[6]李慧，娄季宇，杨霄鹏. 实验性脑出血动物模型[J].中国实用神经疾病杂志，2007，10（2）：152-153.

[7]Sen R，Baltimore D. Multiple nuclear factors interact with the immunoglobulin enhancer sequences [J]. Cell，1986，46（5）：705-716.

[8]宋祖军，王少波，王琦，等.NF-κB的研究进展[J].世界急危重病医学杂志，2007，4（1）：1693-1696.

[9]于明，包晓群.依达拉奉对Aβ25-35 诱导分化PC12细胞NF-κB p65基因表达的影响[J].中国老年学杂志，2008， 28（22）：2199-2201.

[10]顾萍，张勇，丁新生，等.尼莫同对脑出血大树血肿周围核转录因子-κB表达的影响[J].南京医科大学学报：自然科学版，2006，26（3）：153-155.

[11]Masahiro B，Tetsuya M，Hideki K，et al. The radical scavenger edaravone prevents oxidative neurotoxicity induced by peroxynitrite and activated microglia [J]. Neuropharm，2005，4（3）：283-290.

[12]Liu XY，Yao LL，Chen YJ，et al. Survivin is involved in the anti-apoptotic effect of edaravone in PC12 cells [J]. Mol Cell Biochem，2009，327（1/2）：21-28.

[13]Itoh T，Satou T，Nishida S，et al. Edaravone protects against apoptotic neuronal cell death and improves cerebral function after traumatic brain injury in rats[J]. Neurochem Res，2010，35（2）：348-355．

[14]刘斌，赵紫烨，李建民，等.依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织细胞凋亡及P38M-APK蛋白表达的影响[J].中国药房，2010，21（13）：1173-1175.

[15]赵彬，刘斌，张玉芹.依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织Caspase-3和Pdcd-5蛋白表达的影响[J].天津医药，2012，40（5）：483-485.

（收稿日期：2014-03-12本文编辑：程铭）

[基金项目] 河北省唐山市科学技术研究与发展计划课题(编号10150204A-24)。

[通讯作者] 刘斌（1964.9-），男，硕士，主任医师；研究方向：脑血管病基础与临床。

1.4 分组及给药方法

实验动物随机分为正常组、假手术组、脑出血模型组（脑出血组）和依达拉奉治疗组，其中，脑出血组和依达拉奉治疗组根据动物处死时间分为3 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d和7 d共8个亚组，每组6只。依达拉奉治疗组于模型制作成功后2 h开始按3 mg/kg腹腔内注射依达拉奉，1次/d，用药到试验结束。假手术组和脑出血组腹腔内注射等量生理盐水。

1.5 标本制备

各组取相应时相点大鼠，以100 g/L水合氯醛（300 mg/kg）腹腔麻醉致死，仰卧固定于操作台上，切皮打开胸腔，暴露心脏，灌注针从心尖插入至左心室，并剪开右心耳，快速滴入37℃生理盐水液约300 mL，去除血污后滴入固定液（4℃多聚甲醛400 mL）。待鼠尾完全僵直，迅速断头后取出脑组织，于4%多聚甲醛溶液中固定12～24 h，进行脱水透明及石蜡包埋。冠状面连续切片（厚度约3 μm），用经多聚赖氨酸处理的载玻片捞片，晾干后置于60℃的烤箱中烘烤备用。

1.6 NF-κB p65蛋白检测

采用免疫组织化学法检测NF-κB p65蛋白的表达情况，操作步骤严格按试剂说明书进行。阳性标准：镜下观察，NF-κB p65因子染色呈棕黄色颗粒，位于胞浆内。取血肿周围脑组织不重叠的6个视野，于高倍镜下观察，用高清晰度彩色病理图像分析系统计数NF-κB p65的阳性细胞数，取其平均值。

1.7 统计学方法

以Excel数据库整理后用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

正常组和假手术组只见少量的NF-κB p65蛋白阳性细胞表达，由于数量极少，故未进行统计学分析。脑出血组在脑出血后3 h即有NF-κB p65阳性细胞表达，随着出血时间的延长阳性细胞表达逐渐增多，出血后12 h明显增多，出血后2 d表达达高峰，出血后3 d阳性细胞表达逐渐减少。依达拉奉治疗组于出血后3 h有NF-κB p65阳性细胞表达，出血后2 d表达最高，出血后3 d开始下降。与脑出血组相比，依达拉奉治疗组NF-κB p65蛋白阳性细胞在脑出血后3 h未见减少（P > 0.05），在脑出血后6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d及7 d时表达均明显减少，差异有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01）。见表1。

3 讨论

核因子NF-κB是从B细胞核提取物中发现的一种能与免疫球蛋白κ轻链基因的增强子κB序列特异结合的蛋白因子[7]，最为典型的NF-κB是由P50和P65（RelA）亚基组成，具有多种调节作用。通常情况下，NF-κB与抑制蛋白相结合以非活性形式存在于胞浆内，在细胞接受胞外氧自由基等刺激信号后，NF-κB可被激活而迅速由胞浆移向胞核，与相应DNA上的κB序列发生特异性结合，促进相关基因的转录，进而在细胞的增殖、分化、细胞凋亡的调节以及炎症的发生等方面发挥重要作用[8-9]。NF-κB在多种疾病的发生、发展过程中起着重要的作用。顾萍等[10]建立大鼠脑出血模型发现，NF-κB p65蛋白阳性细胞于术后6 h开始增多，48 h达高峰，持续到96 h仍有较多表达，与细胞凋亡呈正相关。本研究实验结果显示，大鼠脑出血后3 h血肿周围脑组织即有少量NF-κ B p65蛋白阳性表达，在术后6 h增多，2 d达高峰，3 d后逐渐下降。同时，本研究观察到NF-κB p65蛋白阳性细胞主要表达于细胞凋亡较重的区域。本研究结果与顾萍等[10]的报道结果基本一致。说明NF-κB p65参与了脑出血后血肿周围脑组织细胞损伤的病理过程。

依达拉奉是一亲脂性基团，其相对分子量为174.20，在体内以阴离子形式存在，可转移一个电子给自由基而产生依达拉奉基团，切断脂质过氧化反应链，对神经细胞具有保护作用[11]。依达拉奉是目前临床试验证明唯一有效的自由基清除剂，在包括脑血管疾病、颅脑外伤等在内的中枢神经系统疾病中发挥重要的神经保护作用[12-13]。依达拉奉可抑制脑出血后血肿周围神经细胞凋亡，对脑出血后脑组织起到神经保护作用[14-15]。本研究通过对脑出血大鼠进行依达拉奉干预，结果表明，依达拉奉治疗组NF-κB p65蛋白阳性表达在脑出血后6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d及7 d均明显减少。提示依达拉奉可通过抑制NF-κB p65蛋白的表达，对脑出血后脑组织损伤有保护作用。

[参考文献]

[1]张云，刘斌.脑出血后继发性脑损伤的细胞凋亡机制研究进展[J].中国康复医学杂志，2007，22（12）：1130-1133.

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（收稿日期：2014-03-12本文编辑：程铭）

[基金项目] 河北省唐山市科学技术研究与发展计划课题(编号10150204A-24)。

[通讯作者] 刘斌（1964.9-），男，硕士，主任医师；研究方向：脑血管病基础与临床。