滥用抗生素与肝癌发生发展的相关性研究

吴延诲 梁慧芳

【摘 要】 目的 探討滥用抗生素导致的肠道菌群失调与肝细胞癌发生的相关性。方法 60例肝癌患者根据有无滥用抗生素分为两组，再结合其临床病理参数进行比较。结果 滥用抗生素组较规范用药组在肿瘤大小和T分期上均有明显不同。结论 滥用以抑制革兰氏阳性菌为主的抗生素可能与肝细胞癌发生有关。

【关键词】 原发性肝癌；滥用抗生素；TL受体；革兰氏阴性菌

【中图分类号】 R735.7 【文献标识码】 A

肝细胞癌（HCC），因为对放化疗不敏感，及对人体新陈代谢的影响，一直位于世界致死率最高癌症前列[1]。而对肝癌预防的研究进展缓慢。中国滥用抗生素普遍，造成肠道菌群失调，引起各种并发症。研究发现肠道细菌的移位以及失调引起TL受体变化，可引发肝癌。对肝癌发生前抗生素使用情况与发病后临床病理参数分析，结合肠道细菌定性定量检查结果，验证两者相关性。

1 材料和方法

1.1 研究对象 收集同济医院2006年1月到2012年6月经CT及B超确诊的60例肝癌患者。男性32例，女性28例，依据UICC和AJCC联合分类标准分类。

1.2 方法 资料采集：对患者发病前既往用药史进行采集，分两组，标准是每年服用抗生素总时间超过60天或连续应用超过2周，在此基础上出现腹泻、便秘症状者。结合病理学参数分析。菌群定性分析：主要对革兰氏阴性杆菌、阳性菌及真菌进行研究。采集患者粪便行厌氧、需氧菌检查。用其结肠材料涂片检查白色念珠菌。定量检查：粪质均质培养后计算细菌数。HB8643 革兰氏阴性菌选择性培养基，HB7035 PEA琼脂培养基针对革兰氏阳性菌，沙氏葡萄糖琼脂培养基针对真菌分别培养。放入37度恒温箱，置于摇床250转/分钟摇动。培养48小时候在倒置显微镜下计数。

1.3 统计学方法 计数资料X2检验进行比较，计量资料以Two-way Anova检验比较。使用SPSS16.0软件分析，P<0.05有意义。

2 结果

2.1 发病前滥用抗生素 患者较对照组在肿瘤分期及肿瘤大小上有差异滥用抗生素史的患者肿瘤大小、T分期均较对照组有明显统计学差异（表1）。抑制革兰氏阳性菌为主抗生素的患者与抑制革兰氏阴性菌的患者间也有明显差异（表2）。

2.2 滥用抗生素患者肠道细菌分布与所用抗生素相互对应粪检以革兰氏阴性细菌为主患者（均为明显阳性）以用抗革兰氏阳性菌抗生素为主，反之也如此。两组之间有明显对应关系（表3）。

2.3 继续行定量分析发现细菌菌落数与所用药物相对应滥用抗革兰氏阳性菌抗生素患者的革兰氏阴性菌的菌落计数明显高于革兰氏阳性菌及真菌。另一组患者细菌定量结果也有相同趋势。

3 讨论

肝癌发生发展是一个涉及多通路、多因素、多步骤的过程，作为人体炎症反应通路重要因子的TL受体[2]，进一步把炎症与肿瘤联系在一起。

近期研究发现[3]，TL受体敲除的小鼠在肝癌诱导剂CCL4的作用下所生长的肿瘤大小和数量均与未敲除小鼠有区别，TL受体[4]也通过影响IFN-a，IFN-c，IL-12 和TNF-a等促炎因子表达起重要作用。TL受体主要在肿瘤形成前最后4个月发生作用。

通过研究，我们发现滥用抗生素导致菌群失调，可能也通过TL受体产生作用。滥用抗生素组患者肝癌在肿瘤大小和TNM分期上均与对照组有明显差异（P<0.05）。通过进一步研究，长期服用以抑制革兰氏阳性菌为主抗生素的患者肿瘤大小和T分期与对比组患者有明显不同（P<0.05）。定量（图1）研究患者肠道菌群表达谱，革兰氏阴性菌菌落数与肿瘤大小和T分期正相关。由此认为滥用抗生素通过TL受体引起肝癌发生。革兰氏阴性菌更易引发癌症，可能是内毒素通过TL受体，造成肝脏炎症反应引发肝硬化的同时引起肝癌发生。除了与内毒素入血有关外，还有可能通过NFkB移位影响细胞生物学特性。其具体机制，待进一步研究。

虽然样本量较少，受实验技术和条件影响，研究还不够充分和深入。但这是国内首次报道滥用抗生素与肝癌发生的相关性，部分解释了无乙肝史肝癌患者发病的原因。

参考文献

[1] P.A.Farazi，R.A.DePinho，HePatocellular carcinoma Pathogenesis：from genes to environment.Nature reviews[J].Cancer，2006，6（2006）：674-687.

[2] Alderton，G.K.（2012）.Inflammation：“The gut takes a toll on liver cancer.”[J].Nat Rev Cancer，2012，12（6）：379.

[3] Crane MJ，Gaddi PJ，Salazar-Mather TP.UNC93B1 Mediates Innate Inflammation and Antiviral Defense in the Liver during Acute Murine Cytomegalovirus Infection[J].PLoS One，2012，7（6）：39161.