GP73、AFP 异质体联合检测在原发性肝癌早期诊断中的应用进展

周亮++王世明

[摘要] 原发性肝癌已成为五大恶性肿瘤之一，是导致肿瘤患者死亡的第三大因素。在我国，原发性肝癌更是极为常见的恶性肿瘤之一，死亡率较高，仅次于胃癌、食管癌。一直以来，原发性肝癌诊断是临床上的重点、难点，最近几年，临床上对原发性肝癌的研究取得了显著的进步，治疗方法已从单一外科治疗发展到外科治疗为主、局部治疗为辅、多学科的综合治疗，因此早期发现原发性肝癌对提高临床治疗有效率具有极其重要的作用，尤其是新技术、新方法的出现，明显改善了原发性肝癌的临床诊断和治疗效果，极大地提高了我国原发性肝癌患者的生存率及生活质量。

[关键词] 原发性肝癌；早期诊断；GP73；AFP异质体；发展历程

[中图分类号] R735.7 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2015）02（a）-0015-03

Application progress of joint detection of GP73，AFP corpora heterogenium in early diagnosis of primary liver cancer

ZHOU Liang WANG Shi-ming

Department of General Surgery，The First Clinical Medical College of Shanxi Medical University，Taiyuan 030001，China

[Abstract] Primary liver cancer （PHC） has become one of the five malignant tumors，is the third major factor leading to the death of patients with cancer.In China，PHC is one of the extremely common malignant tumors with a higher mortality rate，and the mortality rate is next only to gastric cancer，esophageal cancer.All the time since，the diagnosis of PHC is the focus and difficulty in clinical medicine，in recent years，the clinical research on PHC has made significant progress，the treatment method has been developed from the single surgical treatment to the multi-disciplinary comprehensive treatment of surgical treatment mainly，local treatment auxiliarily，therefore early detection of PHC has extremely important role for improving the effective rate of clinical treatment，especially the emergence of new technologies and new methods significantly improve the clinical diagnosis and treatment of PHC，which greatly improve the survival rate and quality of life in patients with PHC in China.

[Key words] Primary liver cancer；Early diagnosis；GP73；AFP corpora heterogenium；Development history

源自肝细胞和肝内胆管上皮细胞的恶性肿瘤被称为原发性肝癌[1]（以下简称肝癌），以肝细胞癌和肝内胆管细胞癌最为常见，其中肝细胞癌所占比例高达90%以上，因此通常情况下，肝癌指的就是肝细胞癌。在我国，乙肝病毒感染是引发肝癌的主要病因，丙肝病毒感染及长时期饮酒为次要病因[2]，肝癌起病隐匿，发展却很迅速，当患者被确诊为肝癌时多已经转移或发生远处转移，生存期较短[3]，因此早期诊断肝癌对治疗肝癌及确保患者长期生存具有至关重要的作用[4]。甲胎蛋白（alpha fetal protein，AFP）被认为是目前诊断肝癌和预后的首选标志物，其诊断肝癌的灵敏度为50%～60%[5]，将有一部分被漏诊，所以，就目前提高对肝癌的早期诊断率的高尔基体蛋白73（GP73）联合AFP检测进行综述[6]。

1 早期诊断

GP73是一种跨膜糖蛋白，正常人体肝组织中GP73主要由胆管上皮细胞表达，而肝细胞基本不表达或表达很少[7]。国外研究表明，高尔基体蛋白在肝癌中的表达有不同机制，在急性起病和慢性肝脏疾病中的表达机制不同[8]。虽然该蛋白对肝癌疾病的病因确诊没有帮助，但是该蛋白可以作为该疾病早期诊断的标志物。BLock等发现肝癌患者血清学中高尔基体蛋白含量显著增高，而在另一项研究中也表明该蛋白的灵敏度、特异度都高于AFP，而且很多肝癌患者中AFP表达呈阴性，但有60%人群中GP73显著升高，从而说明高尔基体蛋白在肝癌患者血清中增高，且其对肝癌的早期诊断优于AFP[9]。随着蛋白组学技术的进一步发展，GP73的异质体岩藻糖基化的GP73（fucose-studded GP73）被提出。在一项包括90名患者的研究中，GP73诊断肝癌的灵敏度和特异度分别为64%、89%，而GP73的异质体灵敏度和特异度则分别高达90%、95%，因此，Cassandra提出GP73及其异质体是肝癌可靠的肿瘤标志物。有理由认为，GP73可能成为更好地诊断肝癌尤其是早期肝癌的血清标志物。这项研究是目前世界上最大宗的病例研究，包括不同种族和国家的肝炎、肝硬化、肝癌、肝脏其他恶性肿瘤和肝脏良性肿瘤以及其他器官系统的恶性肿瘤等诸多病例，结果显示，GP73是诊断肝癌最有价值的肿瘤标志物，GP73联合AFP检测可以提高对PHC的早期诊断率，可作为肝癌患者术后监测复发的指标[10]，因此GP73联合AFP可能成为诊断肝癌的重要血清标志物[11]。

AFP异质体是一种糖蛋白，正常情况下，这种蛋白主要来自胚胎的肝细胞，胎儿出生后约两周AFP从血液中消失，因此正常人血清中AFP的含量尚不到20 μg/L[12]，它的相对分子量约为68×103，近年来有关研究表明，许多肝癌患者中AFP的表达特异性低[13]，不足以早期对肝癌进行诊断，但是AFP异质体有助于对肝癌的早期诊断。AFP异质体能早于影像占位前1年在患者体内升高。AFP异质体有助于检测肝癌预后[14]，近年来发现肝癌产生的AFP和其他情况下所产生的AFP具有不同的生化特性，这是因为肝癌细胞内催化合成糖蛋白中糖链的酶的组成和活性有了变化，结果使AFP的糖链结构发生变化，肝癌产生的AFP能够和小扁豆凝集素结合，而其他情况产生的AFP不能和小扁豆凝集素结合。这种由肝癌细胞产生的能和小扁豆凝集素结合的AFP叫AFP异质体[15]。在需要鉴别AFP升高的来源时，可检测AFP异质体，如AFP异质体超过AFP总量的25%时提示系肝癌引起的AFP升高，如<25%提示系其他情况引起的AFP升高。调查结果显示，AFP水平阳性率大约为55%，约30%的肝癌患者都会漏诊，因此AFP检测具有一定的局限性，无法成为早期肝癌诊断的最理想方法[16]。成人中，AFP可以在大约75%的肝癌患者血清中升高，在其他肠胃管肿瘤（胰腺癌或肺癌）及肝硬化等患者亦可出现不同程度的升高。当肝细胞发生癌变时，又恢复了产生这种蛋白质的功能，而且随着病情恶化其在血清中的含量会急剧增加，AFP就成了早期诊断PHC的一个特异性临床指标，然而大量的临床却发现，部分肝硬化患者会长期出现AFP达到上千ng/ml，但多年都没有肝癌的迹象；同时发现约20%的晚期肝癌患者，直至病故前，AFP仍不超过10 ng/ml，故肝硬化、慢性肝炎患者、家族中有肝癌患者的人应半年检测1次，且对于AFP阴性的患者应联合多种肝癌的早期诊断标志物进行检查，以提高对早期肝癌的诊断率。

GP73联合AFP异质体检测对肝癌的早期诊断有重要的价值[17]。肝癌组织中GP73蛋白及mRNA表达均显著高于对应的癌旁组织及正常肝组织，其表达水平与肿瘤大小、血管侵犯及肿瘤分化等代表肿瘤侵袭力的指标相关，与患者总体生存预后无关。基于肝癌组织中GP73的高表达，我们推测未来针对GP73表达调控的研究将为肝癌提供新的治疗靶点[18]，并为了解其与肝癌的生长、侵袭及复发的潜在相关性，阐明GP73在肝癌发生、发展中的作用机制及其与肝癌的因果关系打下基础。目前，肝癌的显像诊断已形成三大体系，即超声显像、CT扫描、磁共振成像。这些现象诊断技术能够明确肿瘤的大小、位置、病灶性质及浸润程度等，具有较高的准确性，被广泛应用于肝脏肿瘤的诊断中，但是，在肝癌的早期诊断中，GP73、AFP异质体等的出现确实提高了肝癌的早期诊断率[19]，大大提高了患者的手术治愈率，改善了患者的预后。此外，两者作为血清学肿瘤标志物，在肝癌的早期诊断中联合检测，同实时超声造影技术，成为诊断肝癌的最具价值的检查技术之一。近两年，CT扫描和磁共振成像多期动态扫描的应用，使小肝癌的诊断率明显提高。CT增强扫描中，尤其是病灶的动脉期，检出灵敏度为93%[20]，综合多时相薄层扫描灵敏度为96%，而动态高场强磁共振能更准确、实时、动态地显示肝脏局部病灶的强化表现，其灵敏度、特异度均高于增强CT扫描，灵敏度为98%，特异度为91%[21]，尤其在直径<1 cm的病灶中，其检出率高达90%以上，但是，影像检查对于中、晚期肝癌的诊断准确率较高，在肝癌早期诊断中，尤其是亚临床肝癌的诊断还是比较困难的，因此对早期肝癌的误诊率相对较高，同时影像设备价格较高，对于中小型医院难以推广，因此对于早期肝癌的诊断方法还需继续探索。其次，临床上发现了很多有效的生物标志物，例如异常凝血酶原、AFP异质体、GP73等[22]，其中GP73为肝癌早期诊断的理想血清标志物，其灵敏度及特异度均高于AFP；相关调查显示，联合检测AFP、血清铁蛋白能够显著提高肝癌早期诊断率，同时降低了漏诊率，肝癌阳性检出率可达95%以上，多种标志物联合使用在诊断AFP阴性肝癌患者时起到互补的作用[23]。特别是异常凝血酶原在肝癌诊断中的特异性，目前已被日本、韩国等国家认可。值得注意的是，不是每一种标志物都具有一定的局限性，不可能使用一种标志物就可以诊断所有的肝癌患者，需要经过研究证实后方可广泛使用[24]。

2 结语

早期诊断肝癌依然是肝癌诊断中的研究重点，由于肝癌的发病因素较多、阶段较多，使其在不同的阶段、不同机体的表现也不尽相同，因此临床上一直以筛选和优化肿瘤检测组合为努力方向[25]。提高人群小肝癌的筛选率是提高肝癌预后的主要途径，而早期发现肝癌病变则是早期诊断的最理想途径。GP73、AFP异质体的联合检测可提高对肝癌的早期诊断率，但是从实验室到临床还有很多路要走，更需要对这些标志物进行广泛深入的实验室研究和临床对照试验来确立其功能[26]。

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（收稿日期：2014-10-21 本文编辑：许俊琴）